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文檔簡介
第四章酶分子的修飾與應(yīng)用第一節(jié)酶分子的主鏈修飾第二節(jié)酶的側(cè)鏈基團修飾第三節(jié)酶的組成單位置換修飾第四節(jié)金屬離子置換修飾第五節(jié)酶分子的物理修飾第六節(jié)酶分子修飾的應(yīng)用酶是具有完整的化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)的生物大分子。酶分子的結(jié)構(gòu)決定了酶的性質(zhì)和功能。當(dāng)酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變時,將會引起酶的性質(zhì)和功能的改變。正是酶分子的完整結(jié)構(gòu)賦予酶分子以生物催化功能,使酶具有催化效率高、專一性強和作用條件溫和的特點。但是在另一方面,也使酶的分子結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定性差、活性不夠高和可能具有抗原性等弱點使酶的應(yīng)用受到限制。為了克服酶的弱點,人們進行了酶分子修飾方面的研究。通過各種方法使酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變,從而改變酶的某些特性和功能的過程稱為酶分子修飾。意義:提高酶的活力;增強酶的穩(wěn)定性;降低或消除酶的抗原性。
第一節(jié)酶分子的主鏈修飾肽鏈?zhǔn)堑鞍酌傅闹麈?;核苷酸鏈?zhǔn)呛怂犷惷傅闹麈?。利用酶分子主鏈的切斷和連接,使酶分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變,從而改變酶的特性和功能的方法,稱為酶分子的主鏈修飾。意義:提高酶的活力;增強酶的穩(wěn)定性;降低或消除酶的抗原性;并可以知道酶活性中心在主鏈上的位置,從而了解主鏈的不同位置對酶的催化功能的貢獻等。一、主鏈的切斷修飾主鏈被切斷后,可能出現(xiàn)下列三種情況。(1)、若主鏈的斷裂引起酶活性中心的破壞,酶將喪失其催化功能,這種修飾主要用于探測酶活性中心的位置。(2)、若主鏈斷裂后,仍然可以維持酶活性中心的空間構(gòu)象,則酶的催化功能可以保持不變或損失不多,但是其抗原性等特性將發(fā)生改變。這將提高某些酶特別是藥用酶的使用價值。藥用酶大多數(shù)來自各種動物、植物或微生物,當(dāng)其進入體內(nèi)后,對于機體來說,酶是一種外源物質(zhì),在它的刺激下,體內(nèi)會運用某些機制對其進行排斥。除了酶分子的結(jié)構(gòu)特點以外,還由于酶是生物大分子,所以有些酶蛋白具有抗原性。酶蛋白的抗原性與其分子大小有關(guān),大分子的酶蛋白往往有較強的抗原性,而小分子的蛋白質(zhì)或肽段的抗原性較低或無抗原性。若采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ姑阜肿拥碾逆溤谔囟ǖ奈稽c斷裂,其分子質(zhì)量減少,就可以在基本保持酶活力的同時使酶的抗原性降低或消失,這種修飾方法又稱為肽鏈有限水解修飾。例如木瓜蛋白酶用亮氨酸氨肽酶進行有限水解,除去其肽鏈的三分之二,該酶的活力基本保持,其抗原性性卻大大降低;又如,酵母的烯醇化酶經(jīng)肽鏈有限水解,除去由150個氨基酸殘基組成的肽段后,酶活力仍然可以保持,抗原性卻顯著降低。③若主鏈的斷裂有利于酶活性中心的形成,則可使酶分子顯示其催化功能或使酶活力提高。有些生物體可以通過生物合成得到不顯示酶催化活性的酶原,這些酶原分子經(jīng)過適當(dāng)?shù)男揎?,可以轉(zhuǎn)化為具有催化活性的酶。例如,胰蛋白酶原本來沒有催化活性,當(dāng)受到胰蛋白酶或腸激酶的修飾作用,從N_端除去一個六肽(Val—Asp—Asp—Asp—Asp—Lys)后,就顯示胰蛋白酶的催化功能,某些RNA分子原本也不具有催化活性,經(jīng)過適當(dāng)?shù)男揎椬饔?,在適當(dāng)位置去除一部分核苷酸殘基以后,可以顯示酶的催化活性,成為一種核酸類酶。有些酶原來活性較低,通過酶分子主鏈修飾可以顯著提高酶的催化活性.例如,天冬氨酸酶通過胰蛋白酶修飾,從其羧基末端切除10個氨基酸殘基的肽段,可以使天冬氨酸酶的活力提高5倍左右。二、主鏈的連接修飾將兩種或兩種以上的酶通過主鏈連接在一起,形成一個酶分子具有兩種或多種催化活性的修飾方法稱為酶的主鏈連接修飾。在一個酶分子上具有兩種或多種催化活性的酶稱為多酶融合體。第二勿節(jié)信酶煮的側(cè)歸鏈基舅團修跌飾采用鋒一定證的方把法(潛一般控為化牲學(xué)法半)使繞酶的宗側(cè)鏈撞基團居發(fā)生軍改變枯,從陸而改氧變酶錢分子倆的特席性和錢功能報的修萄飾方叛法稱胖為側(cè)絡(luò)鏈基考團修濫飾。意義(1孔)、肥通過珍酶分君子側(cè)叔鏈基匹團修飼飾,異可以莊研究壯各種蓬基團院在酶醬分子蠻中的父作用乓及其灑對酶衫的結(jié)梨構(gòu)、暴特性屆和功簡能的伶影響學(xué),并欺可以床用于叉研究眾酶的匆活性幅中心庭的必蔑須基碼團。違如果尤某基王團修畢飾后丸不引壤起酶逗活力腥的顯辱著變骨化,陶則可鍛以認辨為此?;鶊F傅屬于酷非必書須基烏團。凡(2泥)、訓(xùn)通過辯酶分旬子側(cè)樸鏈基天團修帝飾,右可以及測定報某一饑種基侄團在燙酶分熊子中技的數(shù)掠量,跑例如五,采飛用三姿硝基錄苯磺亞酸測打定氨曾基的券數(shù)量根;用卸對汞噴苯甲哲酸測觀定巰吩基的岡數(shù)量寄;用胞碳二膽亞胺麗測定蘆羧基搖的數(shù)騰量;絲式用四怎唑重蜘氮鹽恥測定課咪唑怎基的皮數(shù)量衛(wèi)等。(3問)、抓酶分懶子側(cè)蠻鏈基麗團修扎飾,瞎在酶譜工程催方面基可以希提高巧酶的皆活力譜、增彎加酶巨的穩(wěn)勞定性娛、降河低酶彩的抗麗原性漢,并秀且可刻以引隆起酶陰催化檔特性漿和催腦化功匪能的副改變節(jié),以狼提高均酶的答使用醬價值鉛。(叉4)鋼、酶喂分子澆側(cè)鏈喚基團脹修飾誓,還臺可以種獲得晃自然客界原胳來不爪存在執(zhí)的新居酶種桿,例唉如,葬某些旦抗體黎酶和橋人工節(jié)改造升的核政酸類擁酶。酶有圖蛋白麥類酶足和核徒酸類爆酶。膛它們洽的側(cè)斤鏈基址團不倒同,評修飾質(zhì)方法現(xiàn)也有船所區(qū)因別。(1彈)蛋棗白類屑酶主團要由惠蛋白獎質(zhì)組義成,偵酶蛋屑白的邊側(cè)鏈猛基團棄是指仔組成援蛋白厚質(zhì)的址氨基賠酸殘眉基上常的功監(jiān)能團陷,主蓋要包錦括氨誦基、痛羧基那、巰卸基、誰胍基糾、酚廚基、晝咪唑稅基、燈吲哚捆基等智。這嫂些基染團可宗以形碗成各區(qū)種副門鍵,增對酶姥蛋白恢空間綢結(jié)構(gòu)寧的形杯成和少穩(wěn)定郵有重鞠要作在用。兇側(cè)鏈秒基團產(chǎn)一旦益改變?nèi)袑⒁鹈付鞍装慰臻g烈構(gòu)象歷的改歐變,兵從而辭改變耕酶的榨特性外和功庭能。酶蛋姓白側(cè)漁鏈基盞團修政飾可蔽以采聽用各摘種小卻分子滿修飾潑劑,長例如荒,氨題基修邁飾劑驗、羧躲基修武飾劑粒、巰炕基修愚飾劑蘿、胍宇基修存飾劑忌、酚責(zé)基修榨飾劑斥、咪堆唑基逗修飾壇劑、賽吲哚婦基修椅飾劑感等;嗚也可朵以采殘用具歸有雙柄功能著團的帽化合焦物,骨如戊彼二醛棉、己砌二胺池等進牧行分貓子內(nèi)孕交聯(lián)兼修飾恰;還袖可以皺采用緩各種堅大分秩子與余酶分芝子的嚼側(cè)鏈伍基團材形成席共價著鍵而豎進行愉大分祥子結(jié)代合修像飾。胖其中孟酶分辰子的汽側(cè)鏈鏟基團丙與水鑒不溶虛性的宿大分哀子結(jié)騙合的館,屬鴿于酶橡的結(jié)映合固絕定化爐方法測,將肉在本衛(wèi)書第凡五章勇闡述她。本蔬章主柿要介測紹各捐種小并分子量化合纏物、撕雙功最能團外化合蝦物和扭水溶勒性大澤分子針與酶飄分子統(tǒng)的側(cè)膨鏈基恒團相墓互作惜用的言修飾返方法駐。(2倍)核柳酸類拾酶主拿要由胖核糖辣核酸對(R寬NA再)組挖成。扇酶R無NA么的側(cè)冠鏈基舍團是悟指組桂成R粘NA粒的核蹦苷酸騾殘基睜上的艙功能括團。守RN巖A分偷子上炸的側(cè)泊鏈基殊團較緞少,凳主要桿是核刃糖2放‘-旦位置瓶上的紹羥基挑(2告‘-黑OH混)和乒嘌呤考、嘧嫁啶堿響基上早的氨逆基和椒羥基遇(酮挑基)帽。由茂于核太酸類嘩酶只暮有二曾十年士的歷垮史,因?qū)斯ニ犷惛傅尼攤?cè)鏈洲基團致修飾售研究輩較少警。然同而,忌其分門子上回的氨譯基和鉤羥基興(酮好基)既經(jīng)過敘修飾派后,啦也會拋引起尋核酸淹類酶特的結(jié)剛構(gòu)改乏變,筆從而纖引起津酶的哈特性足和功閱能的蹲改變詞。如果尺通過誘核苷勝酸置賠換修暑飾,互將核匙酸類僻酶的悼尿嘧跨啶置香換為肌胸腺完嘧啶芽;再吵通過鄙側(cè)鏈蹤蝶基團庫修飾符,把清核糖棗上的搖2’跑一O罰H脫扛去以淡后,泳RN策A就邀變成蕉了單貓鏈D瘡NA齡,有頑可能奪從中壟獲得共有催脂化活喇性的猾單鏈翼DN僅A,餅即脫什氧核鍵酸類裳酶(扁de米ox臨yr件ib承oz抓ym艘e,膏dr杜ib媽oz深ym云e)培。在氏生理健條件躲下D瞧NA跑比R吊NA嘴的穩(wěn)層定性銜高1白06倍;粱磷酸銹二酯柔鍵比簡肽鍵趙的抗位水解缸能力身高1春00旗倍。身所以琴脫氧躍核酸與類酶服的穩(wěn)澆定性職較高杠,具托有良豬好的模開發(fā)耍應(yīng)用身前景斑。閱讀紫:P芒12晃8-瀉13誤1涌了解茫幾種搬側(cè)鏈振修飾九、妥大分豆子結(jié)級合修弓飾采用撞水溶監(jiān)性大框分子棉與酶貪蛋白喂的側(cè)蹄鏈基孤團共魄價結(jié)愿合,品使酶語分子乞的空哪間構(gòu)苗象發(fā)檢生改畝變,汗從而健改變釣酶的棵特性徑與功廚能的莊方法畢稱為蘭大分柏子結(jié)拖合修霧飾。大分毫子結(jié)責(zé)合修登飾是姓目前域應(yīng)用張最廣安泛的死酶分異子修嘉飾方者法。勢采用貪的修跟飾劑味是水藥溶性縫大分恭子。銀例如千,聚償乙二赤醇鴨(P展EG楚)、增右旋哨糖酐丘、蔗哲糖聚內(nèi)合物香(F趕ic主ol蝕l)怎、葡硬聚糖子、環(huán)活狀糊營精、個肝素爛、羧挖甲基槐纖維漲素、拜聚氨只基酸身等。這些降水溶騎性大腸分子獄在使品用之肝前一嗚般需全要經(jīng)插過活壤化,椅然后分在一信定條萬件下宅與酶插分子抱的側(cè)購鏈基零團以嗓共價定鍵結(jié)選合,暈對酶油分子嗽進行夜修飾勻。1.正通過院修飾想提高寇酶活拔力酶的菊催化笨功能輩本質(zhì)本上是膊由其蔥特定株的空族間結(jié)草構(gòu),私特別嚷是由循其活賴性中蜂心的沉特定殲構(gòu)象懷所決抵定的自。水秋溶性們大分扛子與辛酶蛋慶白的暮側(cè)鏈馳基團憑通過臂共價漁鍵結(jié)券合后站,可晉使酶俘的空破間構(gòu)企象發(fā)喉生改島變,炭使酶敲活性顛中心毫更有頓利于朽與底劑物結(jié)蓋合,座并形釀成準(zhǔn)伶確的拆催化鞋部位盼,從漠而使裙酶活瓜力提恒高。2、睛通過捧修飾聚可以坑增強絲式酶的絲式穩(wěn)定雞性酶的卡穩(wěn)定夕性可么以用傲酶的雖半衰查期表堪示。飯酶的搶半衰沿期是踢指酶纏的活部力降鬧低到妹原來終活力做的一繼半時設(shè)所經(jīng)取過的巨時間銅。不朱同的課酶有革不同正的半疊衰期喂,相腳同的代酶在肢不同蒜的條資件下慮半衰愉期也撫不一寫樣。改半衰裝期短習(xí),則定穩(wěn)定肯性差炊。有炭些藥踩用酶尋在進削入體珠內(nèi)之扯后,頁往往矛穩(wěn)定百性差丙,半濱衰期為短。羅例如勤,超奮氧化稈物歧怪化酶誦(S僻OD誘)在過人體元血漿包中的岔半衰分期只驕有3搶0~坡60視mi騙n,多尿激截酶在理人體紙內(nèi)的調(diào)半衰唱期僅秀為2較~2奮0翅mi殊n。醒為此告,如逼何增族加酶冠的穩(wěn)蝦定性些、延緒長酶裹的半憐衰期削,是荒酶工喉程研飯究的研一個鵲重要蜘課題孟。可以屈與酶賠分子說結(jié)合霸的大謎分子早有水覽溶性冬和水背不溶咽性兩屬類。閘采用甚不溶抹于水息的大焦分子被與酶盤結(jié)合統(tǒng)制成悅固定噸化酶煉后,甩其穩(wěn)脂定性塑顯著水提高們(參壟看本繼書第倡五章亦)。幸采用害水溶剛性的僅大分率子與餅酶共西價結(jié)賽合進舊行酶紀分子武修飾患,可槐以在農(nóng)酶分祝子外醋圍形辨成保辦護層詳,起勞到保炎護酶勿的空膜間構(gòu)天象的廉作用唯,從歌而增半加酶您的穩(wěn)為定性地?,F(xiàn)以塔SO襖D為姐例說爐明如遼下。SO法D(比)催姐化超晶氧負賤離子獲(O2-)進征行氧爛化還謊原反在應(yīng),戶生成驅(qū)氧和轎過氧杏化氫衡。具受有抗壓氧化陸、抗陡輻射疲、抗事衰老梁的功賽效,釋但是雅其在率血漿亮中的仔半衰透期僅丟為6瞧~3增0m旋in卷,經(jīng)右過大供分子室修飾亮,其偷穩(wěn)定益性顯海著提塑高,幣半衰果期延叛長7廣0~剩35蕉0倍兄,見符下表劈燕。天然昂SO兆D與祥修飾污后S疑OD惕在人域血漿視中的傳半衰輪期酶半衰期相對穩(wěn)定性天然SOD6min1右旋糖酐-SOD7h70Ficoll(低分子量)-SOD14h140Ficoll(高分子量)-SOD24h240聚乙二醇-SOD35h350第三槍節(jié)縱酶期的組潔成單元位置腔換修節(jié)飾酶蛋曠白的薪組成鵲單位拌是什屯么?酶R倡NA左的組推成單叨位是鉛什么賊?酶蛋答白的躬基本所組成動單位霧是氨鉆基酸以,將道酶分述子肽薄鏈上弦的某厘一個陵氨基循酸換斧成另驕一個簽氨基吼酸的悠修飾燥方法炊,稱岡為氨凝基酸束置換把修飾非。酶R蜂NA殘的基吸本組尖成單其位是宴核苷階酸,飛將酶膏分子私核苷遭酸鏈狠上的偷某一久個核背苷酸愉換成欄另一泡個核鉗苷酸湖的修編飾方匙法,夜稱為跡核苷榨酸置青換修慘飾。一、協(xié)酶分外子組強成單啟位置法換修嫌飾的嚼作用1.棵通過洪修飾咳可以舞提高閘酶活衫力例如席,酪各氨酸氣—R弓NA飽合成酬酶可啦催化緒酪氨陽酸和設(shè)與其摘相對獄應(yīng)的娘tR幻玉NA維反應(yīng)弊生成澡酪氨緊酰-貨tR嗽NA妹,若賊將該計酶第麻51婆位的以蘇氨搖酸(瀉Th桌r5框1)翻由脯鮮氨酸急置換頓,修帆飾后固的酶擠對A撇TP千的親孩和性帶提高銜近1登00鄰倍,吸酶活溪力提嫩高2謙5倍歐。2.蕉通過累修飾桶可以飯增強英酶的做穩(wěn)定肅性例如團,T音4一做溶菌居酶分蜜子中針第3目位的地異亮峰氨酸果(I駐lu進3)俯置換修成半褲胱氨疊酸后弦,該芽半胱柱氨酸冠(C榨ys私3)憶可以逼與第畫97兩位的邀半胱軌氨酸揉(C弊ys浴97載)形誰成二服硫鍵除,修宿飾后秧的T詞4-蝦溶菌僻酶其酷活力民保持桶不變裝,但嫂該酶倘對熱勿的穩(wěn)周定性橫卻大私大提截高。3.盯通過覆修飾羅可以帝使酶培的專謊一性童發(fā)生陪改變例如同,采幸用化結(jié)學(xué)方塊法,才將枯嗎草桿筒菌蛋昏白酶茄活性公中心萌上的肆絲氨員酸置寸換成塊半胱裹氨酸臥后,錦酶對豆蛋白哄質(zhì)和匪多肽份的水丑解活斬性消愚失,星而出件現(xiàn)了臨催化既硝基棕苯酯劣等底仆物進得行水則解反宣應(yīng)的練活性龜。再荒如,呆L-唉19輝I藍VS蕉的催逮化中裳心為予-G豬GA喘GG弦G一發(fā)系列馳,可赤以催第化底合物G幅Gc鞠cu含cu找AA非AA總AA繁與鳥頃苷酸愉(G祝)反塞應(yīng),濤生成協(xié)GG冬CC厘UC紫U和容GA催AA效AA膠A兩球種產(chǎn)躍物,技采用張定點降突變筑方法淹,使明活性兇中心幫上第惡2個舞鳥苷勢酸殘怒基置轉(zhuǎn)換成怒胞苷伙酸殘隊基(匯--移GC笑AG按GG鄉(xiāng)豐--淺),緣瑞置換角修飾膊后的狼酶對刺原底臟物無荒催化拔活性挽,而失呈現(xiàn)卸出對句底物揉GG摩CC惠UG濟UA森AA逢AA張A的淺催化德活性磨。第四詳節(jié)仆金耳屬離畜子置怨換修弄飾把酶么分子穩(wěn)中的依金屬刺離子故換成膨另一鐵種金甘屬離挖子,翅使酶蛋的功倒能和諸特性說發(fā)生像改變喝的修勾飾方劣法稱奶為金馬屬離思子置獨換修璃飾。通過鬼金屬子離子父置換陸修飾哈,可場以了唇解各病種金弊屬離皆子在啞酶催逝化過礙程中至的作斯用,方有利深于闡史明酶鋸的催像化作范用機后制,球并有逮可能礙提高腳酶活脂力,原增強妖酶的居穩(wěn)定恒性,油甚至秀改變南酶的殿某些冬動力瞇學(xué)性工質(zhì)。有些貝酶分怖子中暢含有趙金屬趕離子緒,而衫且往素往是舒酶活鐵性中宮心的慶組成蠟部分滑,對午酶催況化功僻能的攝發(fā)揮顛有重盒要作缺用。籍例如壩,a費-淀論粉酶致中的屆鈣離皺子(行Ca2+),慢谷氨受酸脫武氫酶蹦中的講鋅離尺子(賞Zn2+),停過氧職化氫恐酶分吃子中蔥的鐵役離子亮(F勢e2+),廢?;鶑R氨基凈酸酶賤分子獎中的央鋅離穩(wěn)子(傳Zn2+),軌超氧尿化物印歧化女酶分科子中獲的銅質(zhì)、鋅孩離子碎(C鞏u2+,Z衰n2+)等米。若從短酶分素子中戰(zhàn)除去被其所草含的快金屬驚離子殖,酶肺往往篩會喪冬失其鋼催化雀活性趴。如吳果重永新加掩入原面有的碎金屬蹦離子洗,酶晶的催判化活鈔性可克以恢則復(fù)或渣者部饑分恢效復(fù)。差若用堤另一近種金盟屬離嘩子進景行置大換,蟻則可稻使酶乘呈現(xiàn)德出不每同的尼特性籌。有悶的可四以使暮酶的雅活性話降低卷甚至仍喪失惠,有律的卻病可以趁使酶撫的活門力提間高或澡者增持加酶尾的穩(wěn)枯定性酒。金屬嗎離子個置換確修飾娘只適濟用于忙那些懇在分透子結(jié)愈構(gòu)中占本來骨含有推金屬城離子摘的酶凈。用侍于金是屬離浙子置河換修漠飾的柱金屬從離子跌,一倡般都登是二料價金凍屬離碑子。尼例如碼,鈣漠離子拆(C赤a2瘡+)貫,鎂母離子年(M敗g2話+)垂,錳胡離子后(M揀n2艱+)耍,鋅遠離子歸(Z抖n2蛛+)朵,鈷弊離子嘩(C辦o2瞧+)妨,銅頭離子撫(C傘u2魯+)傻,鐵墻離子賭(F敘e2墾+)莊等。在離賊子置朵換修里飾過據(jù)程中羽,首暴先在世經(jīng)過遵分離昆純化壞的酶眠液中墻加入甩一定涼量的便金屬廢螯合俗劑,甚如乙破二胺吃四乙笨酸(噸ED扁TA幫)等清,使彼酶分襯子中偏的金延屬離棄子與福ED突TA設(shè)等形耽成螯施合物索。通害過透險析、膽超濾迅、分努子篩含層析貢等方秋法,鞠將E簽DT恨A-揀金屬健螯合柿物從爐酶液德中除得去。閘此時角,酶呢往往航成為鍋無活凳性狀艇態(tài)。惱然后頃用一智定量軋的另妙一種引金屬償離子哀加到扣酶液疊中,商酶蛋趟白與寨新加盲入的割金屬某離子比結(jié)合文,就帶可以搞得到愧經(jīng)過饑金屬市離子襲置換跳后的寨酶。1.街提高怒酶活煉力有些境酶通怒過金煩屬離飾子置通換修涌飾后執(zhí)可以染顯著繡提高搏酶活拋力。會例如命,a撐-淀誤粉酶仗分子遼中大馳多數(shù)括含有詞鈣離擾子,為有些獨則含訪有鎂種離子陪或鋅萬離子播等其行他離鄙子,殲所以藏一般映的a啟-淀闊粉酶邁是雜歸離子鹿型的愁。如廊果將戚其他井雜離緩子都青換成承鈣離落子,浪則可鋸以提粱高酶誓活力院并顯襯著增虛強酶山的穩(wěn)漏定性幕。結(jié)今晶的相鈣型煌a-士淀粉浩酶的名活力委比一賭般結(jié)債晶的李雜離菊子型丘a-動淀粉沿酶的夕活力貨提高拐3倍距以上監(jiān),而論且穩(wěn)纖定性陽大大提增加圈。故習(xí)此,托在a父-淀財粉酶頂?shù)陌l(fā)懲酵生灶產(chǎn)、皆保存尚和應(yīng)潮用過用程中倍,添游加一矮定量由的鈣送離子濤,有分利于桶提高論和穩(wěn)付定a捕-淀款粉酶便的活溜力。齊再如冬,將蹲鋅型泳蛋白慚酶的燙鋅離絮子除探去,忙然后懶加進洞鈣離再子,絲式置換炭成鈣最型蛋增白酶花,其廊酶活回力可責(zé)以提兔高2恰0%春~3途0%石。2.孟增強橫酶的膝穩(wěn)定根性有些服酶分晝子中寺的金屯屬離惡子被怨置換嶄以后援,其兵穩(wěn)定沾性顯繁著增蔬強。墻例如街,鐵飄型超麥氧化攏物歧昂化酶蜓(F德e-斤SO體D)芳分子依中的延鐵離瓦子被賀錳離荒子置茫換,羞成為掏錳型改超氧庸化物毫歧化藍酶(性Mn槳—S嫁OD遍)后垮,其亂對過等氧化祖氫的盈穩(wěn)定竊性顯日著增議強,墻對疊欠氮鈉飲(N剖aN悲3)悶的敏幼感性扔顯著壓降低勢。3.極改變草酶的描動力供學(xué)特抖性有些扯經(jīng)過就金屬紋離子項置換凝修飾宏的酶調(diào),其雜動力夾學(xué)性叔質(zhì)有幸所改乞變。污例如護,酰視基化敏氨基孔酸水無解酶楚的活巴性中片心含勒有鋅閃離子疲,用筋鈷離遮子置垮換后臟,其值催化僵N-調(diào)氯-愧乙酰址丙氨埋酸水膚解的推最適需pH廣值從輛8.叮5降除低為累7.莫0。肥同時胡該酶蠻對N輩-氯生-乙壺酰蛋贊氨酸滑的米故氏常福數(shù)K怠m增巴大,閥親和脖力降劇低。第五誘節(jié)浪酶案分子姨的物蹦理修壯飾通過綢各種逮物理宿方法猜使酶煉分子里的空詠間構(gòu)里象發(fā)寶生某醬些改葉變,系從而功改變皺酶的
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