酶促反應的機制

關于酶促反應的機制第1頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1、趨近與定向效應(proximityandorientationeffect)鄰近效應(proximityeffect)：由于酶和底物分子之間的親和性，底物分子有向酶的活性中心靠近的趨勢，使底物在酶活性中心的有效濃度增加的效應。定向作用(orientationarrange)：當?shù)孜锵蛎富钚灾行目拷鼤r，會誘導酶分子構(gòu)象發(fā)生改變，使酶的催化基團與底物的反應基團之間的正確定向，酶促反應易于進行。第2頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第3頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第4頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三鄰近效應與定向效應對反應速度的影響：①使底物濃度在活性中心附近很高②酶對底物分子的電子軌道具有導向作用③酶使分子間反應轉(zhuǎn)變成分子內(nèi)反應④鄰近效應和定向效應對底物起固定作用第5頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三普通化學反應—隨機碰撞（受濃度、碰撞角度影響）相當于——社會上的自由戀愛；酶的活性中心—相當于“婚姻介紹所”；鄰近效應提高了酶的活性（“婚介”）中心底物的濃度（—非婚男女集中）；定向排列縮短了底物與催化基團間（“男女”）的距離；提高反應速度（成功率）108倍。第6頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2.酸--堿催化(acid-basecatalysis）酶活性中心廣義酸堿基團

廣義酸基團（質(zhì)子供體）廣義堿基團（質(zhì)子受體）pKCOOHCOONH3+NH2..NHNH2NH2+NHNHNH2..SHSO-OHNHNH+NHN3.96(Asp),4.32(Glu)10.8012.488.3310.116.00酸--堿催化：酶分子的一些功能基團，如His，Asp作為質(zhì)子的受體或供體，通過瞬時向底物提供質(zhì)子或從底物接受質(zhì)子以穩(wěn)定過渡態(tài)。第7頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三堿催化＋酸催化第8頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第9頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三影響酸堿催化反應速度的兩個因素⑴酸堿強度(pK值）：組氨酸咪唑基的解離常數(shù)為6，在pH6附近給出質(zhì)子和結(jié)合質(zhì)子能力相同，是最活潑的催化基團。⑵給出質(zhì)子或結(jié)合質(zhì)子的速度：咪唑基最快，半壽期小于10-10秒。第10頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三3.共價催化（covalentcatalysis）酶作為親核基團或親電基團，通過與底物形成過渡性的共價過渡產(chǎn)物，使反應活化能降低，加速反應。第11頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三－OH的親核催化(胰蛋白酶)第12頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三某些通過共價催化機制進行的酶反應酶共價中間絡合物參與共價中間絡合物形成的氨基酸殘基3-磷酸甘油醛脫氫酶?；?酶CysD-氨基酸氧化酶Schiff-堿Lys乙酰CoA?；D(zhuǎn)移酶酰基-酶CysGly咪基轉(zhuǎn)移酶咪基-酶His蔗糖磷酸化酶葡糖基-酶Cys轉(zhuǎn)醛醇酶Schiff-酶Lys胰蛋白酶?；?酶Ser木瓜蛋白酶?；?酶Ser堿性磷酸酯磷酰基-酶SerATP-檸檬酸解酶磷?；?酶Glu果糖二磷酸醛縮酶Schiff-堿Lys磷酸葡萄糖變位酶磷?；?酶Ser琥珀酰CoA合成酶磷?；?酶His第13頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三4.酶活性中心低介電性又表面效應(surfaceeffect)。酶活性中心的疏水區(qū)域?qū)λ肿拥呐懦?、排斥，在非極性環(huán)境中可顯著增高兩個帶電基團之間的靜電作用，有利于同底物的結(jié)合；同時，酶的催化基團被低介電環(huán)境所包圍，底物分子的敏感鍵和酶的催化基團之間就會有很大的反應力，有利于酶加速反應的。第14頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三結(jié)合區(qū)可避免水分子干擾在避開水分子的干擾下，分子間的離子鍵才容易產(chǎn)生。-+第15頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三疏水口袋肽鏈底物疏水性口袋第16頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第17頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三酶-底復合物形成時，酶分子構(gòu)象發(fā)生變化，底物分子也常常受到酶的作用而發(fā)生變化，甚至使底物分子發(fā)生扭曲變形，從而使底物分子某些鍵的鍵能減弱，產(chǎn)生鍵扭曲，有助于過度態(tài)的中間產(chǎn)物形成,從而降低了反應的活化能。誘導底物變形，扭曲，促進了化學鍵的斷裂。5.張力效應（straineffect）酶中某些基團可使底物分子的敏感鍵中某些基團的電子云密度變化，產(chǎn)生電子張力，降低了底物的活化能。底物與酶結(jié)合誘導酶的分子構(gòu)象變化，變化的酶分子又使底物分子的敏感鍵產(chǎn)生“張力”甚至“形變”，從而促使酶－底物中間產(chǎn)物進入過渡態(tài)。第18頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三+

-+

-穩(wěn)定的底物通過電荷等相互作用，底物張力變形激活形成過渡態(tài)

-

-++第19頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第20頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三靠近羧肽酶催化中的電子云形變化定向極性專一性契合區(qū)H2+N＝C精氨酸C端確認區(qū)注意＋第21頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三6.金屬離子的催化作用第22頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三+/-+--/+7.多元催化(multielementcatalysis)第23頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三接受質(zhì)子：堿提供質(zhì)子：酸酶活性中心的某些基團可作為質(zhì)子的供體或受體，從而對底物進行酸堿催化如組氨酸的咪唑基,解離常數(shù)為6.0，在生理pH下酸堿形式均可存在，很活躍

酸堿催化可參與多種反應，如多肽的水解、酯類的水解、磷酸基的轉(zhuǎn)移第24頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三綜上所述：酶與底物結(jié)合時，由于酶的變形（誘導契合）或底物變形使二者相互適合，并依靠離子鍵、氫鍵、范德華力的作用和水的影響，結(jié)合成中間產(chǎn)物，在酶分子的非極性區(qū)域內(nèi)，由于酶與底物的鄰近、定向，使二者可以通過親核/親電催化、一般酸/堿催化或金屬離子催化方式進行多元催化，從而大大降低反應所需的活化能，使酶促反應迅速進行。如凝乳蛋白酶：Ser-195親核催化，His-57堿催化等。第25頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三A.酶與底物結(jié)合，形成米氏復合物（ES）B.形成四聯(lián)體過度態(tài)中間物四.酶催化機理實例—胰凝乳蛋白酶第26頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第27頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三E.形成包括水分子的四聯(lián)體過度中間物F.羰基產(chǎn)物形成，酶游離第28頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第29頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第30頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第31頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第四節(jié)、酶促反應動力學第32頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

底物濃度與酶促反應速度的影響酶濃度對酶促反應速度的影響pH對酶促反應速度的影響溫度對酶促反應速度的影響抑制劑對酶促反應速度的影響激活劑對酶促反應速度的影響本節(jié)需要解決的問題第33頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三酶促反應動力學主要研究酶催化的反應速度以及影響反應速度的各種因素。在探討各種因素對酶促反應速度的影響時，通常測定其初始速度來代表酶促反應速度，即底物轉(zhuǎn)化量<5%時的反應速度。產(chǎn)物0

時間初速度酶促反應速度逐漸降低第34頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

酶促反應可表現(xiàn)為三個層級反應。反應速度對于底物濃度的變化呈雙曲線，稱為米氏雙曲線。在底物足夠過量而其它條件固定的情況下，并且反應系統(tǒng)中不含有抑制酶活性的物質(zhì)及其他不利于酶發(fā)揮作用的因素時，酶促反應的速度和酶濃度成正比。一、底物濃度對酶促反應速度的影響第35頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（一）、底物對酶促反應的飽和現(xiàn)象：第36頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三反應級數(shù)第37頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三單底物、單產(chǎn)物反應；酶促反應速度一般在規(guī)定的反應條件下，用單位時間內(nèi)底物的消耗量和產(chǎn)物的生成量來表示；反應速度取其初速度，即底物的消耗量很?。ㄒ话阍?﹪以內(nèi)）時的反應速度；底物濃度遠遠大于酶濃度。研究前提在其他因素不變的情況下，底物濃度對反應速度的影響呈矩形雙曲線關系。（二）、曲線的基本含義第38頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1913年Michaelis和Menten提出反應速度與底物濃度定量關系的數(shù)學方程式。[S]：底物濃度V：不同[S]時的反應速度Vmax：最大反應速度(maximumvelocity)指酶完全被底物分子飽和時的反應速度。Ｋm：米氏常數(shù)(Michaelisconstant)

Vmax[S]Km+[S]V＝────（三）米氏方程（Michaelis-Mentenequation）第39頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三中間產(chǎn)物學說快速平衡理論1913年Michaelis和Meuten提出，當?shù)孜餄舛冗h遠大于酶濃度時，假定ES分解成產(chǎn)物的逆反應可忽略不計，因此在“快速平衡”理論的基礎上推倒出一個數(shù)學方程式，以表示底物濃度與酶反應速率之間的定量關系，稱為米氏方程。1.基礎第40頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三恒態(tài)法推導：

1925年Briggs和Haldame對米氏方程作了一次重要的修正，提出了恒態(tài)的概念。所謂恒態(tài)是指反應進行一定時間后，ES的生成速度和ES的分解速度相等，亦即ES的凈生成速度為零，此時ES的濃度不再改變，達到恒態(tài)，也稱穩(wěn)態(tài)。第41頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（1）S與E形成中間產(chǎn)物，且整個反應速度取決于ESP+E（2）反應在起始階段，逆反應可忽略，反應速度取決于V＝k3[ES]（3）[S]》[E]（4）反應體系處在穩(wěn)態(tài)（stablestate）：E與S迅速生成ES復合物，并達到平衡。2.前提第42頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三推導過程穩(wěn)態(tài)：是指ES的生成速度與分解速度相等，即[ES]恒定。K1([Et]－[ES])[S]＝K2[ES]+K3[ES]K2+K3＝Km

（米氏常數(shù)）K1令：則(2)變?yōu)?([Et]－[ES])[S]＝Km[ES](2)＝([Et]－[ES])[S]K2+K3[ES]K1整理得：第43頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三當?shù)孜餄舛群芨?，將酶的活性中心全部飽和時，即[Et]＝[ES]，反應達最大速度Vmax＝K3[ES]＝K3[Et](5)[ES]＝───[Et][S]Km+[S](3)整理得:將(5)代入(4)得米氏方程式：Vmax[S]Km+[S]V＝────將(3)代入(1)得K3[Et][S]Km+[S](4)V＝────第44頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三底物濃度對酶促反應速度的影響[S]vKmVm2v=（Vm/Km）[S]v=Vm=K2[E]V=Vmax[S]Km+[S]第45頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（三）Km和Vmax的意義：

1.當=Vmax／2時，Km=[S]。因此，Km等于酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度，單位是mol/L

。VmaxV[S]KmVmax/2Km＝[S]2＝Km+[S]

Vmax

Vmax[S]第46頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2.Km可以反映酶與底物親和力的大小當K2>K3時，1/Km可近似地表示酶對底物親和力的大小，1/Km愈大，Km愈小，達到最大反應速度一半時所需濃度就愈小，酶與底物的親和力就越大。E+S

k+1k-1k+2ESE+Pk-1+k+2k+1Km==Ks第47頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三3.可用于判斷反應級數(shù)當[S]<0.01Km時，反應為一級反應；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應；當0.01Km<[S]<100Km時，為混合級反應。V=Vmax[S]Km+[S]第48頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三4.Km是酶的特征性常數(shù)：在一定條件下，某種酶的Km值是恒定的，因而可以通過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。5.Km可用來判斷酶的天然底物：Km值最小者，即為該酶的最適底物。米氏常數(shù)Km=(k-1+k+2)/k+1在反應的起始階段，k+2<<k-1，Ｋm≈k-1／k+1≈１／Ｋ平≈Ｋ解離此時，Ｋm越大，說明Ｅ和Ｓ之間的親和力越小，ＥＳ復合物越不穩(wěn)定。當Ｋm越小時，說明Ｅ和Ｓ的親和力越大，ＥＳ復合物越穩(wěn)定，也越有利于反應。第49頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三6.可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，此時即為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。7.Vmax可用于計算酶的轉(zhuǎn)換數(shù)：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉(zhuǎn)換數(shù)，即單位時間內(nèi)每個酶分子催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的分子數(shù)。第50頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三某些酶的Km值酶底物Km(mmol/L)乳酸脫氫酶丙酮酸0.017己糖激酶D-葡萄糖0.05D-果糖1.5-半乳糖苷酶D-乳糖4.0碳酸酐酶H2CO39.0過氧化氫酶H2O225蔗糖酶蔗糖28糜蛋白酶甘氨酰酪氨酰甘氨酸108第51頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三3.Eadie-Hofstee作圖法Eadie-Hofstee方程式：v─

[S]v=KmVmax－.Vm-Km斜率=v─[S]0v2.漢斯作圖法(Hanes-WoolfPlot）林－貝氏方程式：v─[S]=──KmVmax[S]Vm─1＋.方程式兩邊同乘以[S]

v─1=──KmVmax[S]─1Vm─1＋.[S]-KmKmVm──1Vm斜率=v─[S]0雙倒數(shù)作圖法（doublereciprocalplot）又林－貝氏作圖法（Lineweaver-BurkEquation）經(jīng)變換Vmax[S]Km+[S]v=────v─1=──KmVmax[S]─1Vm─1＋.v─1[S]─10Km─1-─1VmKmVm─斜率=（四）Km和Vmax的測定第52頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三eg1.若要求反應速度到達Vmax的99%，其底物濃度應為：

99%=100%[S]/（Km+[S]）∴[S]=99Km

eg2.若要求反應速度達到Vmax的90%，其底物濃度應為：

90%=100%[S]/（Km+[S]）∴[S]=90Km第53頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三選底物濃度應考慮能否得到1/[S]的常數(shù)增量：[S]為1.01、1.11、1.25、1.42、1.66、2.0、2.5、3.33、5.0、10時，1/[S]為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0是常數(shù)增量。[S]為常數(shù)增量1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10時，1/[S]為0.1、0.111、0.125、0.5、1.0，是非常數(shù)增量，點多集中在1/v軸附近。第54頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三注意：

米氏方程只是反映了底物單分子時酶反應速度與底物濃度之間的定量關系，但這個方程不適應包括一種以上的底物和其他物質(zhì)的影響的酶反應。

可以根據(jù)這個方程推出各種復雜酶促反應的動力學方程。第55頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三k3[E][S]Km+[S]=k3[E](Vm=K3[E])v=v[E]o二、酶濃度對反應速度的影響當反應系統(tǒng)中底物的濃度足夠大時，反應速度與酶濃度成正比，即ν=k[E]。當[S][E]，米-曼方程式中Km可以忽略不計。第56頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2．V與[E]關系的幾點討論第57頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三一般來說，酶促反應速度隨溫度的增高而加快。但當溫度增加達到某一點后，由于酶蛋白的熱變性作用，反應速度迅速下降，直到完全失活。低溫時由于活化分子數(shù)目減少，反應速度降低，但溫度升高后，酶活性又可恢復。三、溫度對酶促反應速度的影響第58頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三最適溫度（optimumtempe-rature）：使酶促反應速度達到最大時的溫度，也即酶活性最高時的溫度。最適溫度因不同的酶而異，動物體內(nèi)的酶的最適溫度在37-400C左右。酶的最適溫度與實驗條件有關，它受到底物的種類、濃度;緩沖液的種類、濃度;酶的純度;反應的溫度、時間等的影響。因而它不是酶的特征性常數(shù)。第59頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三0102030405060℃2.01.51.00.5溫度對唾液淀粉酶活性的影響產(chǎn)物麥芽糖的毫克數(shù)第60頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三溫度對酶促反應速度的影響第61頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三低溫的作用:貯存生物制品、菌種等

低溫時由于活化分子數(shù)目減少，反應速度降低，但溫度升高后，酶活性又可恢復。臨床上的低溫麻醉減少組織細胞的代謝程度，使機體耐受手術(shù)時氧和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏

第62頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三觀察pH對酶促反應速度的影響，通常為一“鐘形”曲線，即pH過高或過低均可導致酶催化活性的下降。酶催化活性最高時溶液的pH值就稱為酶的最適pH(optimumpH)。四、pH對酶促反應速度的影響第63頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三5678

9

1011最適pH

RelativeActivity第64頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第65頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三人體內(nèi)大多數(shù)酶的最適pH在6.5～8.0之間。酶的最適pH不是酶的特征性常數(shù)，與酶的性質(zhì)、底物和緩沖體系有關。pH對酶促反應速度的影響，其原因主要是由于pH的改變導致了酶的催化基團以及底物分子的解離狀態(tài)改變或者導致了酶蛋白的變性。第66頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三一些酶的最適pH值酶最適pH胃蛋白酶1.8過氧化氫酶7.6胰蛋白酶7.7延胡索酸酶7.8核糖核酸酶7.8精氨酸酶9.8堿性磷酸酶

10.5第67頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三問題：（1）

Km越小，底物親和力越大（X）（2）

Ks越小，底物親和力越大（√）（3）

天然底物就是親和力最大的底物（X）（4）

天然底物就是Km值最小的底物（√）（5）底物親和力越大酶促反應速度越大（X）（6）對于不同的酶或同一種酶的不同底物，Km越小反應速度越大（X）第68頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三酶的抑制作用有些物質(zhì)能與酶分子上某些必須基團結(jié)合（作用),使酶的活性中心的化學性質(zhì)發(fā)生改變，導致酶活力下降或喪失。失活作用凡可使酶蛋白變性而引起酶活力喪失的作用。抑制劑凡是能降低酶促反應速度，但不引起酶分子變性失活的物質(zhì)統(tǒng)稱為酶的抑制劑(inhibitor)。五、抑制劑對反應速度的影響第69頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三酶的抑制與變性的區(qū)別：

抑制劑對酶的抑制作用有選擇性，而蛋白質(zhì)變性劑可使所有的酶變性失活。酶抑制劑一般都具有以下特點：一方面在化學結(jié)構(gòu)上與被抑制酶的底物分子或底物的過渡態(tài)相似。另一方面能夠與酶的活性中心以非共價鍵或共價的方式形成比較穩(wěn)定的復合體或結(jié)合物，而變性劑則作用方式較多。第70頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三(一)不可逆抑制（irreversibleinhibition）不可逆抑制：抑制劑與酶分子的必需基團共價結(jié)合,使酶喪失活性,不能采用透析超濾等物理方法除去抑制劑使酶恢復活性。[E][I]第71頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1、巰基酶抑制劑抑制劑：重金屬離子Ag+、Hg2+、砷劑等，以絲氨酸側(cè)鏈上的羥基為必需基團的酶巰基酶失活的酶分子第72頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三

SEHg+SCOONaCHSHCHSHCOONa

SHE+HgSHCOONaCHSCHSCOONa二巰基丁二酸鈉解毒方法：第73頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三2、羥基酶抑制羥基酶指有絲氨酸殘基側(cè)鏈上的羥基為必需基團的一類酶。抑制劑：有機磷殺蟲劑，如：敵百蟲、敵敵畏、對硫磷等。解毒------解磷定(PAM)絲氨酸酶第74頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三乙酰膽堿+H2O膽堿+乙酸膽堿酯酶有機磷殺蟲劑×膽堿能神經(jīng)興奮↑中毒（心跳變慢、瞳孔縮小、流涎、多汗、呼吸困難）第75頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三3.自殺底物(suicidesubstrate)底物在酶催化作用下所形成的反應中間物或最終產(chǎn)物，可以共價修飾酶活性部位的必需基團從而導致酶不可逆失活。第76頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（1）天然酶的自殺底物AckeeBlighiasapida植物——未成熟果實的假種皮中含有一種有毒的降糖氨酸（即甲叉環(huán)丙基丙氨酸）第77頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（2）治療用人工合成的酶自殺底物治療高血壓；癲癇；抗青霉素的菌株；在腫瘤治療上；治療震顛麻痹癥；痛風癥的自殺底物療法。第78頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三（二）可逆抑制作用：抑制劑以非共價鍵與酶分子可逆性結(jié)合造成酶活性的抑制，且可采用透析等簡單方法去除抑制劑而使酶活性完全恢復的抑制作用就是可逆抑制作用。[E][I]可逆抑制作用包括競爭性、反競爭性、和非競爭性抑制幾種類型。

第79頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三1.競爭性抑制（competitiveinhibition)：抑制劑與底物競爭與酶的同一活性中心結(jié)合，從而干擾了酶與底物的結(jié)合，使酶的催化活性降低第80頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三SSEEIIEE+P無I

有I

競爭性抑制的底物濃度曲線v競爭性抑制作用過程[S]第81頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三+IEIk+3酶的競爭性抑制反應模式k-3k+2E+SE+PESk+1k-1第82頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三競爭性抑制的動力學方程:v=Vmax[S]Km(1+[I]/Ki)+[S]1v=KmVmax(1+)+[I]Ki1[S]1Vmax競爭性抑制的的雙倒數(shù)圖形特征：[I]正常1v1[S]1Vmax-1Km(1+)[I]Ki-1Km第83頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三⑴競爭性抑制劑往往是酶的底物類似物或反應產(chǎn)物⑵抑制劑與酶的結(jié)合部位與底物與酶的結(jié)合部位相同⑶抑制劑濃度越大，則抑制作用越大；但增加底物濃度可使抑制程度減?、葎恿W參數(shù)：Km值增大，Vm值不變

競爭性抑制的特點：第84頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三競爭性抑制劑有：丙二酸、草酰乙酸等琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制第85頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三I：磺胺藥S：對氨基苯甲酸（PABA）磺胺類藥物的競爭性抑制——二氫葉酸合成酶磺胺藥與PABA相互競爭與FH2合成酶結(jié)合第86頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三第87頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三抑制劑既可以與游離酶結(jié)合，也可以與ES復合物結(jié)合，使酶的催化活性降低2.非競爭性抑制（non-competitiveinhibition）SSEEEE+PSESIIII第88頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三k-3k+3+IESIk+2E+PESE+Sk+1k-1k-3k+3+IEI+Sk+1k-1非競爭性抑制的圖形特征反應模式第89頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三非競爭性抑制的動力學方程:1v=KmVmax(1+

)+[I]Ki1[S]1Vmax（1+）[I]Ki非競爭性抑制的雙倒數(shù)圖形特征：1v正常[I]1[S]-1Km1Vmax(1+)[I]Ki第90頁，講稿共98頁，2023年5月2日，星期三⑴非競爭性抑制劑的化學結(jié)構(gòu)不一定與底物的分子結(jié)構(gòu)類似⑵底物和抑制劑分別獨立地與酶的不同部位相結(jié)合⑶抑制劑對酶與底物的結(jié)合無影響，故底物濃度的改變對抑制程度無影響⑷動力學參數(shù)：Km值不變，Vm值降低