臨床病理學(xué)-性激素與腫瘤2-課件

性激素與腫瘤21ppt課件子宮內(nèi)膜癌（endometrialcarcinoma）是女性生殖道常見(jiàn)三大惡性腫瘤之一。好發(fā)年齡較子宮頸癌晚，平均年齡60歲左右。發(fā)病率近年來(lái)有增高趨勢(shì)，在我國(guó)也明顯上升。為激素依賴型疾病，與高雌激素水平有關(guān)。2ppt課件年齡分布絕經(jīng)后50-59歲婦女最多;60%絕經(jīng)后,30%絕經(jīng)前;高發(fā)年齡58歲，中間年齡61歲;40歲以下患者僅占2%–5%;25歲以下患者極少。3ppt課件子宮內(nèi)膜癌的高危因素常與雌激素水平相關(guān)疾病伴存：無(wú)排卵性功血、多囊卵巢綜合征、功能性卵巢腫瘤子宮體癌綜合征（內(nèi)膜癌的高危因素）肥胖、高血壓、糖尿病、未婚、不孕、少產(chǎn)、絕經(jīng)延遲有近親家族腫瘤史4ppt課件

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病的高危因素肥胖超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)體重的10%-20%↑2×超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)體重的21%-50%↑3×超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)體重的50%↑10×雌激素替代↑4.5口服避孕藥↓0.5糖尿病↑2.0三苯氧胺↑7.5晚絕經(jīng)↑2.4初潮早↑1.6~2.4

5ppt課件子宮內(nèi)膜癌的病理分型Ⅰ型為子宮內(nèi)膜樣的子宮內(nèi)膜癌，屬于激素依賴型，占子宮內(nèi)膜癌的80%，與雌激素持續(xù)刺激有關(guān)，多發(fā)生在子宮內(nèi)膜增生的基礎(chǔ)上，常在早期能夠得到確診。組織學(xué)類型以腺癌為主，分化好、肌層浸潤(rùn)淺，對(duì)孕激素敏感，預(yù)后較好，5年生存率約為70%。Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌有4個(gè)主要的基因變化,抑癌基因PTEN失活伴/不伴錯(cuò)配修復(fù)基因(主要是MLH1、MSH2、MSH6等)異常、癌基因KRAS突變和/(或)β-catenin激活。這些基因的異常可造成PI3K通路、MAPK通路、Wnt通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常及微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MI)等。6ppt課件Ⅱ型為非子宮內(nèi)膜樣的子宮內(nèi)膜癌，屬于非激素依賴型。此型少見(jiàn)，與雌激素水平關(guān)系不大，多發(fā)生在萎縮內(nèi)膜基礎(chǔ)上，好發(fā)于絕經(jīng)后婦女，確診時(shí)常常已是晚期。組織學(xué)類型以漿液性乳頭狀腺癌多見(jiàn)，分化差，肌層浸潤(rùn)深，早期即發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移，預(yù)后不良，5年治愈率在25%以下。Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌則以抑癌基因p53突變和癌基因HER2過(guò)度表達(dá)為主要的基因變化。7ppt課件長(zhǎng)期應(yīng)用外源性雌激素者子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的危險(xiǎn)性可增加4-8倍絕經(jīng)后單獨(dú)應(yīng)用雌激素替代治療(EstrogenReplacementTherapy,ERT)可增加子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的危險(xiǎn)性，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病與ERT的劑量及時(shí)間長(zhǎng)短密切相關(guān)。在單用雌激素18個(gè)月后,子宮內(nèi)膜增生的發(fā)生率近30%。與從來(lái)未用雌激素的婦女比較,應(yīng)用低效雌激素藥丸的婦女發(fā)生子宮內(nèi)膜癌的危險(xiǎn)性增加一倍。使用普通雌激素藥丸達(dá)5年或更長(zhǎng)時(shí)間,發(fā)生子宮內(nèi)膜細(xì)胞異常生長(zhǎng)的危險(xiǎn)性增加7倍,患子宮內(nèi)膜癌的危險(xiǎn)性增加2倍多。8ppt課件Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌中,有獨(dú)立生物學(xué)行為的KRAS和BRAF突變、PTEN突變、β-catenin的核內(nèi)表達(dá)均明顯高于Ⅱ型內(nèi)膜癌。在正常子宮內(nèi)膜的月經(jīng)周期中,bcl-2、IGF、VEGF等增殖期的表達(dá)明顯高于分泌期。證實(shí)這些基因和信號(hào)分子的雌激素依賴性。長(zhǎng)期單一的雌激素刺激是子宮內(nèi)膜樣腺癌的胞外刺激信號(hào)。雌激素直接或間接的調(diào)控基因和(或)信號(hào)分子,干預(yù)子宮內(nèi)膜腺上皮的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期和凋亡。9ppt課件雌激素信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制

基因組效應(yīng)和非基因組效應(yīng)

人體內(nèi)雌激素有三種:雌二醇、雌三醇和雌酮雌二醇主要由卵巢分泌腎上腺皮質(zhì)分泌及其周圍組織轉(zhuǎn)化而來(lái)卵泡早期雌二醇為30-50pg/ml黃體期大約為100pg/ml卵泡晚期為250-300pg/ml大部分雌激素在血液中以結(jié)合的形式而存在:38%與性激素結(jié)合球蛋白(Sexhormonebindingglobulin,SHBG)結(jié)合60%與白蛋白結(jié)合2%-3%游離存在雌三醇和雌酮的含量相對(duì)較低10ppt課件

11ppt課件ER???的特點(diǎn)

12ppt課件4個(gè)功能區(qū):(l)氨基末端的轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)A/B:含有配體非依賴轉(zhuǎn)錄激活功能區(qū)(Activationfunction-1,AF-1),可通過(guò)與輔激活因子、轉(zhuǎn)錄因子以及其他轉(zhuǎn)錄因子的相互作用,介導(dǎo)信號(hào)向下游傳遞,進(jìn)而誘導(dǎo)應(yīng)答基因的轉(zhuǎn)錄;(2)C區(qū):又稱DNA結(jié)合區(qū)(DNAbindingdomain,DBD):該結(jié)合區(qū)含有一個(gè)雙鋅指結(jié)構(gòu),每個(gè)鋅原子與四個(gè)半膚氨酸殘基結(jié)合,在兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)協(xié)同作用下,ER-??66與DNA結(jié)合;(3)多變鉸鏈區(qū)D區(qū):該區(qū)允許受體彎曲、旋轉(zhuǎn)或構(gòu)象改變,形成二聚體,并與同向或反向重復(fù)反應(yīng)元件結(jié)合以發(fā)揮作用。此外,D區(qū)還包含有核定位信號(hào)(Nuclearlocalizationsignal,NLS),起著穩(wěn)定DBD的DNA結(jié)合作用;(4)E/F區(qū):又可分為共調(diào)節(jié)因子結(jié)合表面、二聚化區(qū)和配體依賴轉(zhuǎn)錄激活(Activationfunction-2,AF-2)等功能區(qū)。配體結(jié)合區(qū)決定著雌激素受體與特異性配基的結(jié)合,E/F區(qū)是雌激素藥物和轉(zhuǎn)錄激活發(fā)揮作用的必須組分。13ppt課件ER-??有三種剪切體,即ER-??66,ER-??46和ER-??36與ER-??66相比較,ER-??46缺乏氨基末端ER-??36缺失了轉(zhuǎn)錄激活域AF-1和AF-2,只保留了DNA結(jié)合區(qū)和一部分配體結(jié)合區(qū)；ER-??36梭基末端含有27個(gè)特異的氨基酸殘基,替代了ER-??66和ER-??46基因第7和第8個(gè)外顯子編碼的羧基末端138個(gè)氨基酸殘基14ppt課件ER-??的特點(diǎn)

15ppt課件ER-??和ER-??在不同的組織中分布不同ER-??：子宮、卵巢、陰道、下丘腦、腎上腺和附睪ER-??：前列腺、睪丸、肺、骨組織、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)16ppt課件ER的基因組效應(yīng)ER的功能與其在細(xì)胞中的定位是極其相關(guān),主要定位在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核經(jīng)典雌激素途徑：在沒(méi)有配體(雌激素)存在的情況下,雌激素受體與熱休克蛋白(如:Hsp90,Hsp70和Hsp56)、P23和親免疫因子蛋白FKBP52形成復(fù)合物存在于細(xì)胞中,從而使雌激素受體處于一種非活性狀態(tài)。E2與ER的高親和性結(jié)合使E2從Hsp、P23和FKBP52復(fù)合物中脫離,同時(shí)ER發(fā)生二聚化,并轉(zhuǎn)位于細(xì)胞核內(nèi),在核內(nèi)二聚化的雌激素受體與靶基因啟動(dòng)子區(qū)域ERE結(jié)合形成E2-ERE復(fù)合物，E2-ERE復(fù)合物接下來(lái)激活靶基因調(diào)控區(qū)的增強(qiáng)子,導(dǎo)致靶基因轉(zhuǎn)錄。17ppt課件雌激素受體與ERE結(jié)合的同時(shí),還需要與輔助調(diào)節(jié)因子相互作用調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄。輔助因子通過(guò)其亮氨酸富集區(qū)與雌激素受體相互作用(如LXXLL,L亮氨酸,X其他氨基酸)目前發(fā)現(xiàn)雌激素受體有三十多種協(xié)同激活子,常見(jiàn)的有SRCs家族(Steroidreceptorco-activators)、組蛋白轉(zhuǎn)移酶類(HAT)(如:CBP/P300)、組蛋白轉(zhuǎn)甲基酶(HMT)(如:CARM1和PRMT1)和核小體更新復(fù)合物(如:SW1/SNF)18ppt課件在細(xì)胞核內(nèi),ER除了直接結(jié)合靶基因的ERE,還可以通過(guò)蛋白之間的相互作用形成復(fù)合物調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性,這些蛋白多是和基因結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子：E2與ER結(jié)合后再與Fos及Jun蛋白結(jié)合形成復(fù)合物,作用于靶基因的AF-1結(jié)合位點(diǎn),促進(jìn)ovalbumin(卵清蛋白)、IGF-1(胰島素樣生長(zhǎng)因子-1)、collagenase和cyclinD1等基因轉(zhuǎn)錄,但卻抑制膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶基因轉(zhuǎn)錄19ppt課件ER的AF-2激活域在ER和Fos及Jun的結(jié)合過(guò)程中發(fā)揮作用,同時(shí)AF-2還募集P160等協(xié)同激活子形成多蛋白復(fù)合物于靶基因啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合在富含GC堿基的啟動(dòng)子區(qū)域,ER-??通常和轉(zhuǎn)錄因子SP1相互作用調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄。ER和轉(zhuǎn)錄因子SP1的結(jié)合具有組織特異性和配體特異性,當(dāng)ER-??DNA結(jié)合區(qū)第二個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)的氨基酸殘基發(fā)生突變時(shí)ER就不能區(qū)分AP-1蛋白和STAT5。20ppt課件其他機(jī)制：雌激素受體還能與協(xié)同抑制因子結(jié)合,抑制靶基因轉(zhuǎn)錄常見(jiàn)的協(xié)同抑制因子主要包括核受體輔助抑制因子(Nuclearreceptorcorepressor,NCoR)和組蛋白脫乙?；?HDAC)21ppt課件雌激素的基因組效應(yīng)的主要特點(diǎn)(l)所需E2的濃度為nM級(jí);(2)在刺激數(shù)小時(shí)或數(shù)天后效應(yīng)才能明顯;(3)蛋白合成抑制劑和ER阻斷劑都可阻斷E2引起的此效應(yīng)。22ppt課件雌激素的基因組效應(yīng)模式所不能解釋的問(wèn)題:(1)目前已知有兩種受體,可單獨(dú)作用或形成共聚體。(2)一種雌激素在不同的靶器官中可顯示相反的生理作用。(3)一些共同調(diào)節(jié)因子參與轉(zhuǎn)錄激活的過(guò)程。(4)激素與受體復(fù)合物可與其他轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,而不是與ERE結(jié)合。(5)受體可不依賴激素而被激活。23ppt課件非基因組效應(yīng)E2可以在幾分鐘甚至幾秒鐘內(nèi)產(chǎn)生快速的生物學(xué)效應(yīng),即E2受體的非基因組效應(yīng)雌激素受體的非基因組效應(yīng)常常具有以下特點(diǎn):(l)反應(yīng)迅速,通常持續(xù)數(shù)秒至數(shù)分鐘;(2)通常對(duì)核內(nèi)雌激素受體阻斷劑不敏感;(3)對(duì)基因表達(dá)抑制劑不敏感;(4)能夠在無(wú)核內(nèi)雌激素受體或者無(wú)基因表達(dá)的細(xì)胞中發(fā)生24ppt課件非基因組效應(yīng)常常在較短的時(shí)間內(nèi)引發(fā)下游事件:(1)能短時(shí)間內(nèi)激活絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)通路;(2)E2和小牛血清蛋白(BSA)偶聯(lián)后不能通過(guò)細(xì)胞膜,但可發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng);(3)通過(guò)磷酸脂酶C(PLC),激活蛋白激酶C(PKC)并增加內(nèi)源性鈣離子;(4)不能被mRNA轉(zhuǎn)錄或蛋白合成抑制劑阻斷;(5)增強(qiáng)非受體酪氨酸激酶Src/Ras/磷酸肌醇3激酶(PI3K)信號(hào)通路活性;(6)使Src、Src同源性膠原蛋白和一些磷脂酶的蛋白表達(dá)水平增加25ppt課件膜雌激素受體(mER)1977年pietras和szego首次提出質(zhì)膜上有種能對(duì)17-p雌二醇起快速反應(yīng)的蛋白,由此提出了膜雌激素受體(mER)的新概念Todd等在研究垂體腫瘤細(xì)胞GH3/B6時(shí)發(fā)現(xiàn),用雌激素處理5分鐘內(nèi)就能釋放催乳素。認(rèn)為這種雌激素的非基因組效應(yīng),可能是由細(xì)胞膜上的激素受體介導(dǎo)的。通過(guò)使用多種能識(shí)別不同的核雌激素受體抗原決定簇的抗體進(jìn)行標(biāo)記染色,證明了在GH3/B6細(xì)胞上存在雌激素的膜受體Andrea等使用不含有去污劑的多聚甲醛和戊二醛固定細(xì)胞,以及活細(xì)胞的免疫熒光染色研究GH3/B6/F10細(xì)胞,同樣也發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞膜上存在ER-??蛋白26ppt課件ER-??通過(guò)與小窩蛋白相互作用定位在細(xì)胞膜上ER-??本身并不具有酶活性和磷酸酶活性ER-??沒(méi)有代表跨膜結(jié)構(gòu)的疏水段ER-??沒(méi)有能夠錨定在細(xì)胞膜上的豆蔻酰化或棕櫚?；Y(jié)構(gòu)膜小窩是細(xì)胞膜內(nèi)陷形成的小窩狀結(jié)構(gòu),直徑50-l00nm,參與細(xì)胞膜的多種生物學(xué)功能,如細(xì)胞內(nèi)吞、胞膜組裝和膜起始的信號(hào)傳導(dǎo)。小窩蛋白包含Caveolin-1、Caveolin-2和Caveolin-3三個(gè)成員,其中Caveolin-1、Caveolin-2可以與ER結(jié)合。27ppt課件類固醇類受體含有的F(X6)LL序列與Caveolin具有高度的同源性在ER的配體結(jié)合域也含有F(VCLKSI)序列,此序列中的絲氨酸能在棕櫚酰乙酰轉(zhuǎn)移酶的作用下棕櫚?；５鞍踪|(zhì)的棕櫚?；揎椏梢哉{(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性,介導(dǎo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位,參與蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)-脂質(zhì)的相互作用。28ppt課件棕櫚?；腅R-??66與Caveolin-1結(jié)合后,Caveolin-1把ER-??轉(zhuǎn)運(yùn)到胞膜的膜小窩,在膜小窩內(nèi)以Caveolin-1為支架,ER-??和生長(zhǎng)因子受體、表皮生長(zhǎng)因子受體、G蛋白、Src酪氨酸激酶、PI3激酶及其他的接頭蛋白組成一個(gè)龐大的多蛋白復(fù)合物,調(diào)節(jié)胞膜起始的信號(hào)通路ER-??46和Caveolin-1共定位于血管內(nèi)皮的細(xì)胞膜,調(diào)節(jié)一氧化氮合酶的信號(hào)通路29ppt課件1絲裂原活化蛋白激酶通路(MAPK)

MAPK(Mitogen-activatedproteinkinase)是細(xì)胞中關(guān)鍵的信號(hào)傳導(dǎo)蛋白,介導(dǎo)細(xì)胞因子、神經(jīng)遞質(zhì)、激素和各種應(yīng)激刺激。參與細(xì)胞的增殖、分化和凋亡,在細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮作用。MAPK/ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑最顯著的特點(diǎn)是三級(jí)酶促級(jí)聯(lián)反應(yīng):三個(gè)激酶構(gòu)成最小的功能模塊,被級(jí)聯(lián)激活。MAPK信號(hào)通路的三個(gè)激酶分別是:MAPKKK(Raf)、MAPKK(MEK)和MAPK(ERK)。ERK是一種Ser/Thr蛋白激酶,活化的MEK氨基端結(jié)合ERK,催化ERK亞功能區(qū)的酪氨酸和蘇氨酸磷酸化,從而導(dǎo)致ERK活化。研究發(fā)現(xiàn)MEK不僅是ERK的上游激活物還是ERK在胞漿中的支架,信號(hào)刺激后MEK激活ERK并將其轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi),磷酸化下游底物如Elk-1、SRC和CREB。30ppt課件ER活化MAPK/ERK的過(guò)程主要是與相關(guān)分子形成復(fù)合體,如PELP1/MNAR-ER-Src和ER-Shc-IGFR。進(jìn)而激活核內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄,調(diào)節(jié)多種生物學(xué)作用。在無(wú)雌激素存在時(shí),EGF和IGF可以通過(guò)自身的受體與膜雌激素受體相互作用也可以激活MAPK通路,提高核內(nèi)ER的轉(zhuǎn)錄活性。膜ER起始的MAPK信號(hào)通路既可以活化目的基因也可以抑制目的基因。31ppt課件2、磷脂酰肌醇3激酶(PI3-kinase)信號(hào)系統(tǒng)

32ppt課件研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌MCF-7細(xì)胞中PI3K調(diào)節(jié)亞基p85與ER-a66相互作用,以非基因組雌激素受體調(diào)節(jié)蛋白(Modulatorofnon-genomicactionofestrogenreceptor,MNAR)為支架,ER-a66、Src和p85組成復(fù)合物,調(diào)節(jié)雌激素對(duì)PI3/AKT通路的激活。過(guò)表達(dá)MNAR可增強(qiáng)雌激素誘導(dǎo)的PI3K活性RNAi降低MNAR表達(dá)時(shí),可導(dǎo)致雌激素誘導(dǎo)的PI3K活性顯著降低。33ppt課件3.蛋白激酶C(PKC)通路

蛋白激酶C(Protein

kinaseC，PKC)為存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)由鈣激活的磷脂依賴性絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。早期研究表明PKC能夠被促腫瘤劑佛波酯(TPA)激活,隨后的大量研