基本組織及血涂片制作

基本組織及血涂片制作第1頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗一基本組織觀察及血涂片制作第2頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

顯微鏡，單層扁平上皮、甲狀腺、小腸、氣管、膀胱、食管、骨骼肌、心肌、脊髓、大腦皮質(zhì)、小腦皮質(zhì)、坐骨神經(jīng)、人頭皮、環(huán)層小體切片，結(jié)締組織鋪片，骨磨片，運動神經(jīng)元涂片，運動終板壓片。載玻片,鑷子,手套,解剖盤,小鼠，瑞氏染液、緩沖液?！灸康摹?/p>

掌握四種基本組織的結(jié)構(gòu)特點。【器具】第3頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

一、每小組取1只小鼠，摘眼球取血，每位同學滴1滴于載玻片右端。二、取第2只載玻片，斜置于第1只載玻片上的血滴左緣，待血充盈于兩片夾角處，向左推動第2只載玻片。三、在晾干的血片區(qū)滴加瑞氏染液為血細胞著色，2-3min后，滴加約1.5倍的緩沖液，靜置10-15min，清水緩慢洗去染液，鏡檢。【血涂片制作】第4頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

一、單層扁平上皮

有腸系膜鋪片銀染色和切片HE染色兩種裝片。銀染色片上細胞呈多邊形，邊界鋸齒狀，清晰可見，由于硝酸銀感光沉淀為黑色。

HE染色片上可見上皮細胞核為扁平狀，染成藍紫色，胞質(zhì)著紅色，細胞邊界不清。

【基本組織觀察】第5頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第6頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第7頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月二、單層立方上皮

以甲狀腺濾泡為例觀察該結(jié)構(gòu)，甲狀腺濾泡壁細胞即為單層立方上皮細胞。

HE染色片上可見細胞核呈圓形或近圓形，排成一列，著藍紫色，胞質(zhì)著紅色，細胞界限不清。細胞游離面和基底面清晰可見。第8頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第9頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月三、單層柱狀上皮

以小腸為例觀察該結(jié)構(gòu)，小腸絨毛粘膜上皮細胞即為單層柱狀上皮細胞。

HE染色片上可見細胞核呈長橢圓形，染成藍紫色，位于細胞基底部，排成一列，染成藍紫色，胞質(zhì)染成紅色，細胞界限不清。細胞游離面和基底面清晰可見。柱狀細胞間散在有杯形細胞，杯形細胞上端的胞質(zhì)內(nèi)有粘液分泌顆粒，在切片上呈卵圓形空泡狀結(jié)構(gòu)。第10頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第11頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月四、假復層纖毛柱狀上皮

以氣管為例觀察該結(jié)構(gòu)，氣管腔面粘膜上皮即為假復層纖毛柱狀上皮。細胞排列緊密，界限不清，其間夾有透亮的杯形細胞。胞核位置高低不等。依細胞的形狀、胞核位置分為四種細胞。

1．基細胞，細胞成錐體形，基部寬頂部窄，不能達到上皮游離面。胞核排列于整個上皮的下部。

2．梭形細胞，細胞的兩端尖細，中間略寬。其胞核排列于整個上皮的中部。

3．柱狀細胞，胞體抵達上皮游離面。細胞的游離面有微細而整齊的纖毛。胞核排列于整個上皮的上部。

4．杯形細胞，夾于柱狀細胞之間，游離面無纖毛。胞核排列于整個上皮的中部。第12頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月返回第13頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月五、變移上皮兔膀胱切片（H－E染色）觀察。（一）肉眼觀察先辨別朝向膀胱腔的粘膜層。（二）低倍鏡觀察從粘膜層表面尋找上皮，可看到上皮細胞排列層次較多，表層細胞較大，深層細胞較小。（三）高倍鏡觀察基層細胞最小，呈近似立方形，排列較密。中層細胞呈多角形或倒置的梨形。表層細胞較大，為較闊的方形，游離面略呈弧形，靠游離面的胞質(zhì)著色深，有的細胞可見雙核。第14頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第15頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月六、復層扁平上皮人或貓食管切片（H－E染色）觀察。（一）肉眼觀察先辨別朝向食管腔的粘膜層。（二）低倍鏡觀察管壁粘膜的最內(nèi)面著色較深的一層即復層扁平上皮，可見由數(shù)層至十幾層細胞組成，有的地方較厚，有的地方較薄，所以基底面呈波浪狀。（三）高倍鏡觀察和結(jié)締組織交接的最深的一層細胞呈低柱狀，細胞排列緊密，胞核橢圓形，染色深，位于細胞基底部。中層為幾層多角形細胞。接近表面的細胞漸變?yōu)楸馄綘罴毎?。?6頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第17頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

七、皮下疏松結(jié)締組織兔皮下疏松結(jié)締組織鋪片（H－E染色）觀察。

1.膠原纖維，染成粉紅色、較粗。

2.彈性纖維，染成深紅色、較細。

第18頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第19頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月八、軟骨兔氣管軟骨切片（H－E染色）觀察，氣管壁內(nèi)的藍紫色“C”字形結(jié)構(gòu)為透明軟骨，即氣管軟骨。（一）低倍鏡觀察在透明軟骨中可見染成藍紫色的基質(zhì)和位于陷窩內(nèi)的軟骨細胞。在軟骨中央部分的軟骨細胞較大，呈橢圓形或圓形。經(jīng)常2-4個成群存在。（二）高倍鏡觀察在H－E染色切片中看不到細胞間質(zhì)內(nèi)的膠原纖維?；|(zhì)染成藍紫色，在陷窩周圍的基質(zhì)染色較深。有的切片由于在制作過程中軟骨細胞脫落，使基質(zhì)中顯現(xiàn)出一個個白色空腔，即軟骨陷窩。有的切片由于在制片過程中使部分軟骨細胞有所收縮，所以在軟骨細胞周圍出現(xiàn)白色間隙，這也應是陷窩的一部分。第20頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第21頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

九、骨人骨磨片觀察。骨組織內(nèi)的軟組織（神經(jīng)、血管、淋巴管、結(jié)締組織）及細胞都已腐爛，僅留下空腔和管道。因光線折射關(guān)系，這些空腔和管道均呈現(xiàn)黑色，（一）低倍鏡觀察可見許多骨板呈多層同心圓排列的結(jié)構(gòu)，即骨單位。每個骨單位的中央有一個黑色、較大的圓形管道的橫斷面即為中央管，在此管周圍有許多成同心圓排列的骨單位骨板。（二）高倍鏡觀察骨板內(nèi)或骨板間有許多扁的卵圓形呈黑色的小腔隙即骨陷窩。骨陷窩向四周發(fā)出許多細小的黑色分支，即骨小管。第22頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第23頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第24頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十、骨骼肌貓骨骼肌縱、橫切片的觀察。（一）低倍鏡觀察找到縱切（肌纖維長條形）及橫切（肌纖維多邊形）的肌纖維。在肌纖維間有結(jié)締組織。（二）高倍鏡觀察

1．縱切面肌纖維長條形，外為肌膜，緊貼肌膜內(nèi)方，有許多染成藍紫色的卵圓形胞核。肌原纖維沿著肌纖維長軸排列，有明顯的橫紋，染色深的為A帶，染色淺的為I帶。

2．橫切面肌纖維呈多邊形或不規(guī)則圓形，外有肌膜，卵圓形的胞核緊貼肌膜內(nèi)側(cè)。第25頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第26頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第27頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十一、心肌猴或狗心肌切片觀察。（一）低倍鏡觀察縱切面心肌纖維為有分支的帶狀，橫切面心肌纖維為不規(guī)則的圓形。（二）高倍鏡觀察在縱切面上，心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀。胞核卵圓形，位于纖維中央。把顯微鏡的虹彩光圈縮小，光線放暗一些，可見到心肌纖維的橫紋，但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見染色呈深藍色的梯形橫線，即為閏盤。肌纖維之間有結(jié)締組織及血管。在橫切面上，心肌纖維為不規(guī)則的圓形。有的有胞核，有的無胞核，這是由于切片切到或沒切到胞核的緣故。第28頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第29頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十二、尼氏體牛脊髓灰質(zhì)涂片（Nissl染色）觀察。因為是涂片，所以可以較完整地顯示出神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)。這種染色可以把胞核及尼氏體染成藍色。（一）低倍鏡觀察可見染成深藍色、具有多個突起的多極神經(jīng)元。（二）高倍鏡觀察在胞體內(nèi)有圓球形染色較淺的胞核，其中央有一染成深藍色的核仁。胞質(zhì)內(nèi)含有許多不規(guī)則的染成深藍色的小塊，即尼氏體。胞體周圍發(fā)出許多突起，這些突起大多為樹突，因為軸突只有一根，所以在涂片上有時很難看到。第30頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第31頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十三、神經(jīng)原纖維貓脊髓橫切片（Cajal銀染色）觀察。在這張切片上主要觀察神經(jīng)原纖維的形態(tài)。（一）低倍鏡觀察脊髓橫切面中央呈“H”形，染成棕黃色的部分為灰質(zhì)，灰質(zhì)較寬的一端為脊髓灰質(zhì)前角。在灰質(zhì)前角處可見大而呈多角形有突起的細胞，為多極神經(jīng)細胞。（三）高倍鏡觀察可以看到胞體和突起內(nèi)均有棕褐色細絲狀的結(jié)構(gòu)，此即神經(jīng)原纖維。它們在胞體內(nèi)排列成網(wǎng)狀，而在突起內(nèi)則平行排列。第32頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第33頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十四、小腦梨狀細胞標本的淺層是皮質(zhì)，在皮質(zhì)內(nèi)用低倍鏡觀察，梨狀神經(jīng)元的胞體大，似梨形或燒瓶狀。從胞體一端發(fā)出1－3個粗大的樹突，由此樹突再反復分支，形成扁柏樹枝狀。從胞體另一端可看到一條軸突，因切片關(guān)系所見到的軸突有長有短。第34頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第35頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十五、大腦錐體細胞標本的淺層是皮質(zhì)，在皮質(zhì)內(nèi)用低倍鏡觀察，錐體細胞的胞體形似圓錐，從其尖頂發(fā)出一條最粗的樹突為頂樹突，由頂樹突反復分支，逐漸變細。另外還有一些較細的樹突從胞體其他部位發(fā)出。若切片正切到軸突，則可見一條軸突從錐體細胞的底部發(fā)出。換用高倍鏡觀察樹突的分支，可見其表面有許多鼓槌狀小突起，為樹突棘。第36頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第37頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十六、有髓纖維

1．低倍鏡觀察可見神經(jīng)纖維一條一條較緊密地平行排列。

2．高倍鏡觀察在每條神經(jīng)纖維中央，見一條紫紅色的線條為軸突。軸突外圍包有髓鞘。髓鞘在制片過程中因類脂質(zhì)被溶解，因而只剩下紅色的蛋白質(zhì)網(wǎng)狀支架。在髓鞘之外很薄的膜為神經(jīng)膜。每條神經(jīng)纖維上相隔一定的距離，由于髓鞘中斷而形成的縮窄，即是郎飛結(jié)（ranviernode）。兩結(jié)之間的神經(jīng)膜含有一個染成藍紫色橢圓形的胞核，但在切片上不一定都能切到。第38頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第39頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十七、觸覺小體用低倍鏡觀察人皮膚切片（銀染色），了解觸覺小體的形態(tài)及分布。先找到皮膚的復層扁平上皮，上皮下面為結(jié)締組織，結(jié)締組織突向上皮形成許多乳頭，在乳頭處可找到卵圓形的觸覺小體。觸覺小體外包有很薄的結(jié)締組織被膜，其中含有橫列的扁平細胞，神經(jīng)纖維呈黑色，盤曲在觸覺小體內(nèi)。

第40頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第41頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第42頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月十八、環(huán)層小體取貓的腸系膜切片（H－E染色）用低倍鏡觀察，可以找到縱、橫切面的環(huán)層小體。在縱切面上可見環(huán)層小體呈卵圓形。若切面正切到小體的中心，則可見小體的中心為一條棍狀結(jié)構(gòu)（內(nèi)柱），其外周為多層呈同心圓排列的結(jié)締組織纖維層，各層之間夾有扁平結(jié)締組織細胞。在小體一端可見到一條有髓纖維，它在穿過結(jié)締組織纖維板層時失去髓鞘。所以，在內(nèi)柱中只看到被染為紅色的軸突。第43頁，課件共46頁，創(chuàng)作