核酸類脂類藥物

核酸類脂類藥物第1頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月98%分布于細(xì)胞核，其余分布于核外如線粒體，葉綠體。主要分布于細(xì)胞質(zhì)（90%），剩余10%位于細(xì)胞核。(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脫氧核糖核酸

核糖核酸攜帶遺傳信息，決定細(xì)胞和個體的基因型(genotype)。參與細(xì)胞內(nèi)DNA遺傳信息的表達。某些病毒RNA也可作為遺傳信息的載體。核酸堿基戊糖核苷磷酸核苷酸第2頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月核酸類藥物是具有藥用價值的核酸、核苷酸、核苷以及堿基的統(tǒng)稱。除了天然存在的堿基、核苷、核苷酸外，它們的類似物、衍生物或這些類似物、衍生物的聚合物也屬于核酸藥物。第3頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月一、RNA的制備（一）材料的選擇與預(yù)處理制備RNA的材料要選擇含核酸量豐富的組織。RNA的含量和細(xì)胞的活躍程度有關(guān)，在蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中，其RNA的含量也相應(yīng)地較高。第二節(jié)核酸類藥物的一般制備方法組織勻漿沉淀物（DNA、蛋白質(zhì)等）上清液（RNA等）殘留物（DNA等）酸提取液（RNA）堿處理酸處理殘留物脂溶性物質(zhì)有機溶劑處理殘留物酸溶性小分子冷酸處理第4頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月1.酸處理法將經(jīng)酸和有機溶劑處理后的殘留物用1mol/L的過氯酸液于4℃下處理18h，從中抽提出RNA，沉淀部分再用0.5mol/L的過氯酸液70℃下處理20min提取DNA。此法的缺點是有些材料的DNA在冷過氯酸抽提時被少量提取，從而使RNA部分中混有少量的DNA。2.堿處理法將殘留物用1mol/L的NaOH溶液于37℃處理過夜，則RNA被堿解為堿溶性核苷酸，DNA不溶解。加入過氯酸或三氯乙酸使溶液酸化，至酸濃度為5%-10%,此時，RNA的分解產(chǎn)物溶解在上清液中，DNA等則被沉淀下來。此法的優(yōu)點是RNA和DNA分開得較為徹底，缺點是RNA中還含有其他含磷化合物，如磷肽，磷酸肌醇等。第5頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）提取與純化1.提?。?）乙醇沉淀法（2）去污劑處理法（3）酚法第6頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.純化（1）密度梯度離心法（2）柱色譜法（3）凝膠電泳法第7頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）含量測定定磷法（1）核酸樣品用硫酸消化，將有機磷轉(zhuǎn)化成無機磷；（2）制定定磷標(biāo)準(zhǔn)曲線；（3）測定回收率和樣品總磷量。H3PO4+12H2MoO4H3P(Mo3O10)4+12H2OH3P(Mo3O10)4Mo2O3?MoO3（鉬藍）鉬藍的最大吸光值在660nm處。Vit?C第8頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.定糖法

RNA中的戊核糖可在鹽酸的水解作用下游離出來，進一步形成糠醛，然后與地衣酚反應(yīng)，反應(yīng)物程鮮綠色，在670nm有最大吸收峰。第9頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、DNA的制備材料的選擇與處理2.提取與純化3.含量測定（1）定磷法同RNA（2）定糖法又稱二苯胺法，在酸性溶液中，將DNA與二苯胺共熱，形成藍色化合物，該化合物在595nm有最大吸收。當(dāng)DNA濃度在20-200ug/mL時，光吸收度與DNA濃度呈正比。第10頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月三、核苷酸、核苷及堿基的制備（一）制備方法1.直接提取法2.水解法（1）酶水解法（2）堿水解法（3）酸水解法3.化學(xué)合成法4.酶合成法5.微生物發(fā)酵法第11頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月光合磷酸化法制備ATP的工藝流程5′-AMP[溶解，混合]Na2HPO4，Tris，PMS肌激酶，ATP（引子）混合液反應(yīng)液ATP粗制品上清液濾液ATP成品ATP沉淀洗脫液（含ATP）吸附物流出液[光合]葉綠體pH3,1-1.5h[沉淀]三氯乙酸10℃以下[提取]乙醇10℃4-5h[干燥]乙醇，乙醚減壓

[去陽離子]732樹脂pH6→1→2[除熱源、沉淀]硅藻土、乙醇[去雜質(zhì)]蒸餾水、硅藻土[洗脫]NaCl溶液pH3.8[吸附]NaOH，717樹脂pH6.5-7第12頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月ATP的藥理作用與臨床應(yīng)用

在生物體內(nèi)，ATP廣泛參與各種生化過程，除參與核酸形成外，主要起著供應(yīng)能量和磷酸基團的作用。

ATP除了作為危重病人搶救的輔助藥物外，還可對慢性肝炎、肝硬化、腎炎、心肌炎、冠狀動脈硬化、進行性肌肉萎縮、再生障礙性貧血、腦血管意外后遺癥、中心性血管痙攣性視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、耳聾、耳鳴等有一定療效。第13頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第五章酶類藥物第14頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)概述

一、酶類藥物發(fā)展簡史

酶類藥物是直接用各種劑型的酶以改變體內(nèi)酶活力，或改變體內(nèi)某些生物活性物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的數(shù)量等，從而達到治療某些疾病的目的。1926年，Sumner將尿素酶結(jié)晶是藥用酶工業(yè)化的起點。1952年，Innerfield首次將結(jié)晶的胰蛋白酶用于治療血栓性靜脈炎，真正揭開了酶在醫(yī)療應(yīng)用的序幕。20世紀(jì)60年代后期，逐漸發(fā)展到從微生物發(fā)酵液中獲得大量的酶。70年代后，開始利用人的某些組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和基因工程手段來獲取有關(guān)的酶，使酶類藥物的應(yīng)用得到了迅速發(fā)展。第15頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月對酶類藥物的要求1.藥用酶應(yīng)在生理環(huán)境（pH中性）下具有最高活力和穩(wěn)定性。2.對其作用的底物具有較高的親和力。3.在血清中半衰期較長。4.要求純度高，特別是對注射用的酶類藥物純度要求更高。5.酶應(yīng)免疫源性較低或無免疫源性。第16頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、酶的分子組成及分類1.酶分子的組成①單體酶②寡聚酶③多酶復(fù)合體酶有機物分子金屬有機物金屬輔酶或輔基（非蛋白部分）酶蛋白復(fù)合蛋白質(zhì)單純蛋白質(zhì)（單體酶）第17頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.酶的分類分類名稱催化反應(yīng)的類型實例

1氧化還原酶電子轉(zhuǎn)移醇脫氫酶

2轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移功能基團己糖激酶

3水解酶水解反應(yīng)胰蛋白酶

4裂合酶鍵的斷裂丙酮脫羧酶

5異構(gòu)酶分子內(nèi)基團的轉(zhuǎn)移順丁烯二酸異構(gòu)酶

6連接酶或合成酶鍵形成與水解偶聯(lián)丙酮羧化酶表6-1酶的國際分類第18頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月三、酶類藥物的臨床應(yīng)用1.消化酶類2.抗炎、黏痰溶解酶3.與纖維蛋白溶解作用有關(guān)的酶類4.抗腫瘤的酶類5.其它生理活性酶6.復(fù)合酶第19頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

表6-2酶類藥物一覽表第20頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第21頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)酶類藥物的一般制備方法酶制備過程的特點：一是某種酶在生物體內(nèi)含量甚少，且有分布部位特異性。二是酶可以通過測定其活力加以跟蹤。酶制備一般包括四個步驟：酶的原材料的選擇與處理；酶的提??；酶的純化；酶活力的測定和純度檢測。第22頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月一、酶的原材料選擇與預(yù)處理（一）原材料的選擇（1）了解目的酶在生物材料中的分布特點，選擇適宜的生物材料。（2）考慮生物在不同發(fā)育階段及營養(yǎng)狀況時，酶含量的差別及雜質(zhì)干擾的情況。（3）原料來源是否豐富，原料易得，原料產(chǎn)地較近。（4）提取步驟是否簡便易行。用植物組織作原料，要擇時采集并就地去除不用部分，將有用部分保鮮處理。第23頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）原材料的預(yù)處理1.機械法2.反復(fù)凍融法3.超聲波法4.酶解法5.丙酮粉法第24頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、酶的提取1.水溶液法常用稀鹽溶液或緩沖液提取，經(jīng)過預(yù)處理的原料，包括組織糜，勻漿，細(xì)胞顆粒，丙酮粉都可用水溶液抽提。水溶液的pH選擇對抽提具有影響，應(yīng)考慮的因素有：

①酶的穩(wěn)定性②酶的溶解性③酶與其他物質(zhì)結(jié)合的性質(zhì)選擇pH的總原則是，在酶穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，選擇偏離等電點的適當(dāng)?shù)膒H。第25頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.有機溶劑法某些結(jié)合酶，由于和脂質(zhì)結(jié)合牢固，需用有機溶劑除去脂質(zhì)，且不能使酶變性。常用有機溶劑是丁醇。丁醇性質(zhì)：親脂性強、兼具親水性、在脂與水分子間能起表面活性劑的橋梁作用。丁醇提取方法：均相法和兩相法3.表面活性劑法第26頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月三、酶的純化不同的酶，因性質(zhì)不同，其純化工藝可能有很大不同。評價一個純化工藝好壞，主要看兩個指標(biāo)：酶比活和總活力回收率。（一）雜質(zhì)的除去1.調(diào)pH和加熱沉淀法（胰核糖核酸酶，溶菌酶的提?。?.蛋白質(zhì)表面變性法（CAT用氯仿提取）3.選擇性變性法（細(xì)胞色素C可用三氯醋酸提?。?.降解或沉淀核苷酸法5.利用結(jié)合底物保護法除去雜蛋白（D-甲基苯甲酸為D-氨基酸氧化酶的保護劑）第27頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）脫鹽和濃縮1.脫鹽（1）透析（2）凝膠過濾2.濃縮（1）蒸發(fā)（2）超濾法（3）凝膠吸水法（4）冷凍干燥法第28頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酶的結(jié)晶酶的結(jié)晶是指酶分子通過次級鍵力，按規(guī)則且周期性排列的一種固體形式。1.鹽析法2.有機溶劑法3.透析平衡法4.等電點法第29頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月四、酶活力的測定與純度檢驗1.活力測定無論在酶的抽提純化過程中或是對酶的性質(zhì)進行研究過程中為了了解所選擇方法是否適宜，幾乎每一步驟前后都應(yīng)進行酶的活力測定，做出總活力和比活力的比較。2.純度檢測在酶的分離提純中，總活力用于計算某一抽提或純化步驟后酶的回收率（Y），而比活力則用于計算某一純化步驟的效果，即純度的提高（E），其關(guān)系如下：

Y=某步驟后的總活力/某步驟前的總活力

E=某步驟后的比活力/某步驟前的比活力第30頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月五、菠蘿蛋白酶

是從菠蘿汁或加工菠蘿削下的廢皮中提取的一種蛋白水解酶，粗菠蘿水解酶是各種成分的混合物，除蛋白水解酶系外，還含有磷酸酯酶、過氧化物酶、纖維素酶、其它糖苷酶及非蛋白物質(zhì)。實驗證明，菠蘿蛋白酶具有消炎抗水腫作用，作用特點是能選擇性水解纖維蛋白，對與凝血有關(guān)的纖維蛋白原僅有微弱的作用，不影響正常血液的凝固。能分解肌纖維，可單獨或與胰蛋白酶制成合劑使用，消除各種單純性炎癥、水腫、血腫，促進抗生素和化療藥物的滲透和擴散。臨床適用于治療支氣管哮喘、急性肺炎、產(chǎn)后乳房充血、乳腺炎、產(chǎn)后血栓靜脈炎、視網(wǎng)膜炎等。試用于同抗生素配伍治療關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)周圍炎、蜂窩組織炎和小腿潰瘍等。第31頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）化學(xué)性質(zhì)和組成白色至淺棕黃色無定形粉末。略溶于水，水溶液無色至淡黃色，有時有乳白光，不溶于乙醇、氯仿和乙醚，為一種巰基酶。半胱氨酸能激活酶的活性，但受重金屬抑制。最適pH7.0，相對分子量33000。主要作用原理：使多肽類水解為低分子量的肽類。第32頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）生產(chǎn)工藝（白陶土吸附法）（吸附）白陶土10℃菠蘿蛋白酶成品濕菠蘿蛋白酶精制品澄清液粗制品（沉淀）HClpH4（溶解）自來水，NaOH洗脫液（鹽析、抽濾）HCl，（NH4）2SO4pH=4.5～5吸附物（洗脫）Na2CO3或NaOH（NH4）2SO4pH=6.5～7壓出液菠蘿皮（壓榨）苯甲酸鈉（干燥、粉碎）pH7～7.5第33頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）檢驗方法1.性狀富有菠蘿香氣，淺黃色或淺棕黃色粉末。2.蛋白酶水解活力測定（1）原理菠蘿蛋白酶在一定溫度與pH條件下，水解酪蛋白底物，然后加入三氯乙酸終止酶反應(yīng)，并沉淀除去未水解的蛋白，濾液對紫外光有吸收，用紫外分光光度計法測定，根據(jù)吸光度計算酶活力。（2）酶活力單位定義在測定條件下[pH7.0，（37+0.2℃）]，每分鐘水解酪蛋白釋放出的三氯乙酸可溶物在275nm的吸光度與1μg酪氨酸的吸光度相當(dāng)時，所需酶量為1U。第34頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）測定步驟

①適當(dāng)稀釋樣品后，精密量取樣品待測液1mL，置于具塞試管中，于，37℃預(yù)溫10min，迅速加入37℃預(yù)溫的酪蛋白溶液5mL，從開始加入起準(zhǔn)確反應(yīng)10min，加入三氯乙酸溶液5mL，混勻，保溫10min后過濾。②另量取1mL待測樣品液于37℃預(yù)溫10min，精密加入三氯乙酸溶液5mL，準(zhǔn)確反應(yīng)10min，加入酪蛋白溶液5mL，搖勻，保溫10min后過濾，濾液作為上述溶液的空白對照。用分光光度計在275nm的波長處測吸光度A。③以水做空白對照，在275nm的波長處測定50μg/mL酪氨酸吸光度A。第35頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（四）菠蘿蛋白酶在醫(yī)藥、保健品業(yè)的應(yīng)用

1、抑制腫瘤細(xì)胞的生長經(jīng)相關(guān)臨床研究觀察表明，菠蘿蛋白酶能抑制腫瘤細(xì)胞的生長。

2、對心血管疾病的防治菠蘿蛋白酶作為蛋白水解酶對心血管疾病的防治是有益的。它能抑制血小板聚集引起的心臟病發(fā)作和中風(fēng),緩解心絞痛癥狀,緩和動脈收縮,加速纖維蛋白原的分解。

3、用于燒傷脫痂菠蘿蛋白酶能選擇性地除皮,使新皮移植得以盡早進行。動物實驗證明,菠蘿蛋白酶對鄰近的正常皮膚無不良影響。局部使用抗生素不影響菠蘿蛋白酶的效果。

第36頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月4、消炎作用菠蘿蛋白酶在各種組織中能有效地治療炎癥和水腫(包括血栓靜脈炎、骨骼肌損傷、血腫、口腔炎、糖尿病人潰瘍及運動損傷)，菠蘿蛋白酶具有激活炎癥反應(yīng)的潛力。菠蘿蛋白酶還可治療腹瀉。5、增進藥物吸收將菠蘿蛋白酶與各種抗生素(如四環(huán)素,阿莫西林等)聯(lián)用,能提高其療效。相關(guān)研究表明,它能促進抗生素在感染部位的傳輸,從而減少抗生素的用藥量。據(jù)推斷,對于抗癌藥物,也有類似的作用。此外，菠蘿蛋白酶能促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。第37頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第七章多糖類藥物第一節(jié)糖類藥物概述按照含有糖基數(shù)目的不同分為:①單糖：葡萄糖、果糖、氨基葡萄糖等。②低聚糖：蔗糖、麥芽糖、乳糖等。③多糖：（糖類藥物研究的最多是多糖類藥物）多糖如右旋糖酐、甘露聚糖、香菇多糖、茯苓多糖等。還有一些糖類藥物是糖的衍生物，如6-磷酸葡萄糖，1，6-二磷酸果糖，磷酸肌醇等。第38頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月多糖的藥理作用（1）調(diào)節(jié)免疫功能。主要表現(xiàn)為影響抗體活性，促進淋巴細(xì)胞增殖，激活或提高吞噬細(xì)胞的功能。增強機體的抗炎、抗氧化和抗衰老作用。（2）抗感染作用，多糖可以提高機體組織細(xì)胞對細(xì)菌，原蟲，病毒和真菌感染的抵抗力。（3）促進細(xì)胞DNA，蛋白質(zhì)的合成，促進細(xì)胞的增殖、生長。第39頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）抗輻射損傷作用，抗射線的損傷，有抗氧化、防輻射作用。（5）抗腫瘤和抗凝血作用，肝素是天然抗凝劑。（6）降血脂和抗動脈粥樣硬化功能。硫酸軟骨素、小分子肝素、殼聚糖等具有降血脂、降血膽固醇，抗動脈粥樣硬化作用，用于防治冠心病和動脈硬化。第40頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月多糖結(jié)合型游離型脂多糖：與脂類結(jié)合在一起糖蛋白：與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起

多糖的相對分子量較大，有直鏈和支鏈兩種，多可溶于水，水溶液具有一定的黏度，能被酸、堿和酶水解成單糖或低聚糖。第41頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月多糖根據(jù)來源不同可分為：

(1)植物多糖：黃芪多糖，人參多糖。

(2)動物多糖：肝素，透明質(zhì)酸，硫酸軟骨素等。

(3)微生物多糖：香菇多糖，靈芝多糖。第42頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)糖類藥物的一般制備技術(shù)一、單糖、低聚糖及其衍生物的制備用水或在中性條件下以50％乙醇，也可以用82％乙醇，在70～78℃下回流提取。溶劑用量一般為材料的10倍，需多次提取。①植物材料磨碎經(jīng)乙醚或石油醚脫脂，拌加碳酸鈣，以50％乙醇溫浸，浸液合并，于40～45℃減壓濃縮至適當(dāng)體積，用中性醋酸鉛去雜蛋白及其他雜質(zhì)，鉛離子可通H2S除去，再濃縮至粘稠狀。②以甲醇或乙醇溫浸，去不溶物如無機鹽或殘留蛋白質(zhì)等。③醇液經(jīng)活性炭脫色、濃縮、冷卻、滴加乙醚，或置于硫酸干燥器中旋轉(zhuǎn)，析出結(jié)晶。單糖或小分子寡糖也可以在提取后，用吸附層析法或離子交換法進行純化。第43頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、多糖的分離與純化

多糖可來自動物、植物和微生物，植物體內(nèi)含有水解多糖衍生物的酶，必須抑制或破壞酶的作用后，才能制取天然存在形式的多糖。提取多糖的材料必須新鮮或及時干燥保存，避免受高溫破壞．因此，速凍冷藏是保存材料的有效方法。提取所用溶劑根據(jù)多糖的溶解性質(zhì)而定。第44頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）多糖的提取提取多糖時，一般先需進行脫脂，以便多糖釋放。方法是將材料粉碎，用甲醇或1∶1乙醇-乙醚混合液，加熱攪拌1～3小時，也可用石油醚脫脂。第45頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月1、稀堿液提取用于難溶于冷水、熱水，可溶于稀堿液者。這一類多糖主要是不溶性膠類，如木糖醇、半乳聚糖等。用冷水浸潤材料后用0.5mol／LNaOH提取，提取液用鹽酸中和、濃縮后，加乙醇沉淀得多糖。如在稀堿中仍不易溶出者，可加入硼砂，對甘露聚糖、半乳聚糖等能形成硼酸絡(luò)合物的多糖，此法可得相當(dāng)純的物質(zhì)。第46頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2、溫?zé)崴崛∫兹苡跍厮㈦y溶于冷水和乙醇者。材料用冷水浸過，用熱水提取，必要時可加熱至80～90℃攪拌提取。提取液用正丁醇與氯仿混合液除去雜蛋白（或用三氯乙酸除雜蛋白），離心除去雜蛋白后的清液，透析后用乙醇沉淀得多糖。第47頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月3、粘多糖

因大部粘多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞中，因此需用酶解法或堿解法使糖-蛋白質(zhì)間的結(jié)合鍵斷裂，促使多糖釋放。（1）堿解法多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合的糖肽鍵對堿不穩(wěn)定，故可用堿解法使糖與蛋白質(zhì)分開。（2）酶解法蛋白酶水解法已逐步取代堿提取法而成為提取多糖的最常用方法。鑒于蛋白酶不能斷裂糖肽鍵及其附近的肽鍵，為除去長肽段，常與堿解法合用。常用的酶制劑有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和鏈霉菌蛋白酶及枯草桿菌蛋白酶。第48頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）多糖的純化1.乙醇沉淀法

乙醇沉淀法是制備粘多糖的最常用手段。乙醇的加入，改變了溶液的極性，導(dǎo)致糖溶解度下降。向溶液中加入一定濃度的鹽，如醋酸鈉，醋酸鉀、醋酸銨或氯化鈉有助于使粘多糖從溶液中析出，鹽的最終濃度5％即足夠。多次乙醇沉淀法脫鹽，也可以用超濾法或分子篩法（SephadexG-10或G-15）進行多糖脫鹽。沉淀物可用無水乙醇、丙酮、乙醚脫水，真空干燥即可得疏松粉末狀產(chǎn)品。第49頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.分級沉淀法

不同多糖在不同濃度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同濃度的有機溶劑分級沉淀分子大小不同的粘多糖。在Ca2+、Zn2+等二價金屬離子的存在下，采用乙醇分級分離粘多糖可以獲得最佳效果。第50頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月3.季胺鹽絡(luò)合法

粘多糖與一些陽離子表面活性劑如十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）和十六烷基氯化砒啶（CPC）等能形成季胺鹽絡(luò)合物。絡(luò)合物在低離子強度的水溶液中不溶解，在離子強度大時，絡(luò)合物可以解離、溶解、釋放。第51頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）多糖藥物的鑒定檢測方法1.定量測定（1）苯酚-硫酸法苯酚-硫酸試劑與游離的或寡糖、多糖中的戊糖、己糖、糖醛酸發(fā)生顯色反應(yīng)，己糖在490nm處有最大的吸收，戊糖和糖醛酸在480nm有最大吸收。吸收值與糖含量呈線性關(guān)系。（2）蒽酮-硫酸法糖類與濃硫酸脫水生成糠醛或其衍生物，可與蒽酮試劑縮合產(chǎn)生有色物質(zhì)，反應(yīng)后溶液呈藍綠色，于620nm處有最大吸收。（3）氨基己糖的比色測定先在鹽酸溶液中將氨基己糖經(jīng)堿性乙?；?，再與對二甲基苯甲酸發(fā)生呈色反應(yīng)，從而進行定量測定。第52頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.鑒別（1）測定糖基組成（2）高壓電泳法鑒定多糖均一性（3）超離心法鑒定多糖均一性（4）凝膠柱色譜法鑒定多糖均一性（5）分子量測定第53頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)香菇多糖一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)為白色粉末狀固體，對光和熱穩(wěn)定。溶于水和0.5mol/L的NaOH，不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑。第54頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、生產(chǎn)工藝1.常規(guī)提取法鮮香菇→搗碎→浸漬→過濾→濃縮→乙醇沉淀→乙醇、乙醚洗滌→干燥→成品2.復(fù)合酶提取法

香菇粉碎后浸漬，加入適量1.5%中性蛋白酶，其他條件參考傳統(tǒng)提取法。3.深層培養(yǎng)提取法

香菇發(fā)酵液由菌絲體和上清液兩部分組成。胞內(nèi)多糖含于菌絲體，胞外多糖含于上清液。因此多糖提取要分上清液和菌絲體兩部分來完成。其他條件參考傳統(tǒng)提取法。第55頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月三、質(zhì)量檢測1.試劑濃硫酸：分析純，95.5%苯酚：80g苯酚加20g水使之溶解，可置冰箱中長期貯存。6%苯酚：臨用前用80%苯酚配制。標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖、葡萄糖或標(biāo)準(zhǔn)香菇多糖。第56頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月2.方法（1）制作標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖20mg溶于500mL容量瓶中加水至刻度，分別吸取0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL、1.6mL及，1.8mL各用水補充至2.0mL，然后加入6%苯酚1.0mL以及濃硫酸5.0mL，靜止10min，搖勻，室溫放置20min。在490nm處測光密度，以2.0mL水按同樣顯色操作作為空白，橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度值，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）樣品含量測定。吸取1mL樣品，按上述步驟操作，測光密度，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計算多糖含量。第57頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第八章脂類藥物第一節(jié)概述

脂類物質(zhì)是廣泛存在于生物體中的脂肪及類似脂肪的、能夠被有機溶劑提取出來的化合物，由于分子中的碳?xì)浔壤驾^高，能夠溶解在乙醚、氯仿、苯等有機溶劑中，不溶于水。脂類化合物的這種性質(zhì)，稱之為脂溶性，利用這一性質(zhì)，將脂類物質(zhì)用有機溶劑從生物體中提取出來。實際上，脂類藥物往往是互溶在一起的，依據(jù)脂溶性這一共同特點歸為一大類成為脂類，而不是一個準(zhǔn)確的化學(xué)名詞。第58頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月脂類藥物是具有重要生理生化、藥理藥效作用的脂類物質(zhì)。大體可分為以下幾類：①膽汁酸類，如膽酸、脫氧膽酸。②不飽和脂肪酸類，如花生四烯酸、亞麻油酸等；③磷脂類，如：卵磷脂、腦磷脂；④固醇類，如：膽固醇、麥角固醇；⑤色素類，如：膽紅素、血紅素等；⑥其他，如鯊烯等。第59頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月一、脂類藥物的制備方法1.直接抽提法2.水解法3.化學(xué)合成4.生物合成法第60頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月二、脂類藥物的分離1.溶解度法2.吸附分離法3.超臨界流體萃取技術(shù)

待分離物質(zhì)提取溶劑（腦干提取液）丙酮乙醇乙醚膽固醇√××