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文檔簡介
ABO新生兒溶血病血清學檢查
邵長峰韓樂樂
2012-10-22ABO新生兒溶血病血清學檢查1ABO新生兒溶血病
ABO新生兒溶血病血(HDN)是由于母嬰ABO血型不合,母體的IgG抗A或抗B經(jīng)過胎盤進入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細胞所引起。此病多見于O型母親所生A型或B型嬰兒,與O型母親血清中所含IgG抗A(B)抗體有關。新生兒溶血病血清學檢查主要是進行三項試驗:直抗試驗、游離試驗和釋放試驗。ABO新生兒溶血病ABO新生兒溶血病血(HD2試劑
抗人球蛋白血清
患兒5%紅細胞懸液
患兒血清
A型、B型、O型紅細胞懸液
酶處理A型、B型、O型試劑紅細胞懸液試劑抗人球蛋白血清3抗人球蛋白的原理抗人球蛋白的原理4一直接抗人球蛋白試驗本試驗用于檢測受檢者紅細胞上是否存在不完全抗體。1.取小試管2支,按下表標記及加樣 試劑被檢管陰性對照管
患兒5%紅細胞懸液1滴1滴
0.9%生理鹽水—1滴
抗球蛋白血清1滴—
2.混勻,3400rpm,離心15s,輕輕搖動,觀察結果。一直接抗人球蛋白試驗5二游離試驗
本試驗用于檢查新生兒血清中是否有游離的IgG型抗體1.取小試管3支,按下表標記及加樣
試劑
Ac管Bc管Oc管
患兒血清1滴1滴1滴A型試劑紅細胞懸液1滴B型試劑紅細胞懸液1滴O型試劑紅細胞懸液1滴2.混勻后37℃水浴30min,用生理鹽水洗滌3次,最后一次吸盡鹽水,然后向各管中加1滴抗球蛋白試劑,3400rpm/分,離心15s,輕輕搖動,觀察結果。二游離試驗本試驗用于檢查新生兒血清中是否有游離的6三釋放試驗
本試驗和直抗試驗相同,也是檢測新生兒紅細胞上的致敏的血型抗體,只是方法有所不同。釋放試驗首先利用特殊的方法將致敏在新生兒紅細胞上的抗體放散下來,然后再檢測放散液中的抗體。1、取洗滌后的壓積紅細胞,加等量鹽水。2、混勻后,置于56℃水浴中不停搖動7-10min。3、取出后立即高速離心,3000rpm/分2-3min,如果有可能,則使用預先加熱過的離心杯。4、離心后馬上吸出上清液置于小試管中再次離心3000rpm/分1min。取上清液分成3等份于3個小試管中,分別標記上“A”、“B”、“O”。按下表標記及加樣三釋放試驗本試驗和直抗試驗相同7試劑
A管B管O管酶處理A型紅細胞懸液1滴酶處理B型紅細胞懸液1滴酶處理O型紅細胞懸液1滴
5、混勻后37℃水浴30min,用生理鹽水洗滌3次,最后一次吸盡鹽水,然后向各管中加1滴抗人球蛋白試劑,3400rpm/分,離心15s,輕輕搖動,觀察結果。試劑8注意事項
[1]、離心后要輕搖觀察結果,搖動時不要使勁地甩試管,要輕搖或用手指輕彈。
[2]、加抗球蛋白之前要3次洗滌,最后一次在倒掉上清后不要再倒轉試管,而是直接置于吸水紙上吸盡鹽水。
[3]、熱放散時應嚴格注意溫度和時間,溫度過高,細胞易溶解,過低抗體
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