蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的測定

PAGE1 -PAGE2- -1-蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的測定摘要：蔬菜中的硝酸鹽和亞硝酸鹽是一種對人體有害的化學物質(zhì),其含量比其它植物都高,人體攝入它會引起多種疾病.本實驗采用分光光度發(fā)分別對拜城縣恰瑪古，柯坪縣恰瑪古，伊寧市恰瑪古，大白菜，黃蘿卜，黃瓜中亞硝酸鹽及硝酸鹽含量進行測定。結(jié)果表明：（1）亞硝酸鹽：六種蔬菜中亞硝酸鹽含量有明顯的差異，測定結(jié)果是：大白菜0.7919mg/g，黃蘿卜0.6930mg/g，黃瓜0.5763mg/g，拜城恰瑪古0.5528mg/g，伊寧恰瑪古1.1294mg/g，柯坪恰瑪古0.5174mg/g。（2）硝酸鹽：大白菜1.6098mg/g，黃蘿卜0.0598mg/g，黃瓜0.7421mg/g，拜城恰瑪古0.2608mg/g，伊寧恰瑪古2.5308mg/g，柯坪恰瑪古0.0317mg/g，蔬菜中亞硝酸鹽含量的回收率88.80%。關(guān)鍵詞：硝酸鹽；亞硝酸鹽；蔬菜；測定方法； 前言：蔬菜尤其是葉菜類蔬菜,是一種易于富集硝酸鹽的植物。人體攝入的硝酸鹽81.2％來自蔬菜[1]。硝酸鹽本身毒性不大,對人畜無直接的危害,但含量過高對人體可能造成危害,因為在微生物的作用下極易還原為亞硝酸鹽。亞硝酸鹽是一種有毒物質(zhì),可直接使動物中毒!造成亞鐵血紅蛋白癥,嚴重可致死亡[2]。亞硝酸鹽，一類無機化合物的總稱。主要指亞硝酸鈉.亞硝酸鈉為白色至淡黃色粉末或顆粒狀，味微咸，易溶于水。外觀及滋味都與食鹽相似，并在工業(yè)、建筑業(yè)中廣為使用，肉類制品中也允許作為發(fā)色劑限量使用。由亞硝酸鹽引起食物中毒的機率較高。食入0.3～0.5克的亞硝酸鹽即可引起中毒甚至死亡[3]。硝酸鹽,亞硝酸鹽廣泛存在于人類環(huán)境中,其對人類健康和生態(tài)環(huán)境的危害,日益受到人們的普遍關(guān)注。硝酸鹽在細菌的作用下可還原成亞硝酸鹽,使血液的載氧能力下降,從而導致高鐵血紅蛋白癥。聯(lián)合國世界衛(wèi)生組織和糧農(nóng)組織[4]早在1973年就制定了食品中硝酸鹽的限量標準,以ADI值為基礎(chǔ),提出蔬菜可食部分中硝酸鹽含量的衛(wèi)生標準為432mg/kg(鮮樣),亞硝酸鹽成人每人每日容許量為7.8mg。蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的高低已成為衡量蔬菜安全與否的一項重要指標,因此快速準確地測定蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽的含量極為重要[5]。亞硝酸鹽(NO2-)是氮循環(huán)的中間產(chǎn)物，不穩(wěn)定,廣泛存在于水體、土壤和各類食品中。根據(jù)水環(huán)境條件，可被氧化成硝酸鹽，也可被還原為氨。亞硝酸鹽可使人體正常的血紅蛋白（低鐵血紅蛋白）氧化成為高鐵血紅蛋白，發(fā)生高鐵血紅蛋白癥，失去血紅蛋白在人體內(nèi)輸送氧的能力，導致出現(xiàn)組織缺氧癥狀。另外，在人的腸胃中，亞硝酸鹽還可與仲胺類物質(zhì)反應(yīng)，生成具有致癌性的亞硝胺類物質(zhì)。因此，亞硝酸鹽成為水質(zhì)、食品等的重要監(jiān)測項目之一[6]。用分光光度法測定蔬菜中亞硝酸鹽含量時，為了消除蛋白質(zhì)對測定結(jié)果的干擾，往往通過沉淀的方法來去除蛋白質(zhì)[7]。在GB《中華人民共和國國家標準—食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定（GB/T5009.33—1996）中的格里斯試劑比色法》中，“樣品處理”的主要目的就是通過沉淀來去除蛋白質(zhì)，獲測定所需的澄清濾液[8]。樣品處理時所加的氫氧化鈉溶液，亞鐵氰化鉀，乙酸鋅溶液和水浴加熱的作用是使蛋白質(zhì)變性而易沉淀[9]。本文根據(jù)測定亞硝酸鹽的標準方法于540nm處測定生成的偶氮化合物的吸光度,從而建立了一種簡單、快速、靈敏度較高的測定痕量亞硝酸鹽的方法。1.1實驗部分1.1.1實驗原理弱堿性條件下,用飽和四硼酸鈉、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅沉淀除去蛋白質(zhì),氫氧化鋁懸浮液脫色,減壓抽濾;在酸性條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸酰胺起重氮化作用,再與萘乙二胺鹽酸鹽和對氨基苯磺酸反應(yīng),生成紫紅色偶氮染料,于波長540nm處測量蔬菜中亞硝酸鹽的含量。1.1.2儀器與試劑1.1.2.1實驗儀器：攪汁機;恒溫水浴鍋;722型分光光度計;電子天平;冰箱供試蔬菜為：大白菜，黃蘿卜，黃瓜，拜城恰瑪古，伊寧恰瑪古，柯坪恰瑪古。1.1.2.2實驗試劑主要試劑有10.6%亞鐵氰化鉀溶液；22%乙酸鋅溶液；飽和四硼酸鈉溶液；磺胺；萘乙二胺鹽酸鹽；鹽酸；鎘粒；氨緩沖溶液；活性碳；硝酸鉀；亞硝酸鈉標準使用液；1.1.3試劑的配制：從表2-1，圖2-1可以看出亞硝酸鹽標準液的最大吸收波長為540nm.最大吸收波長對應(yīng)的吸光度為0.121。亞硝酸鹽標準曲線的繪制：（表2-2）亞硝酸鹽標準溶液的濃度及吸光度濃度(μg/mL)00.20.40.60.81吸光度(A)00.0890.2010.3290.4510.584（圖2-2）亞硝酸鹽標準液的標準曲線亞硝酸鹽及硝酸鹽含量的測定（表2-3）不同蔬菜中亞硝酸鹽的含量(mg/g)吸光度濃度含量平均值相對平準偏差大白菜0.0510.11960.74720.79193.76%0.0570.12970.80780.0580.13140.8208黃蘿卜0.0430.10600.66050.69303.18%0.0460.11110.69240.0490.11620.7261黃瓜0.0320.08740.54420.57634.79%0.0390.09930.61760.0340.09080.5670拜城恰瑪古0.0340.09080.56710.55284.74%0.0350.09250.57780.0290.08230.5136伊寧恰瑪古0.0920.18901.17951.12942.96%0.0870.18051.12650.0830.17381.0822柯坪恰瑪古0.0280.08060.50360.0310.08570.53500.51742.26%0.0290.08230.5138（表2-4）不同蔬菜中硝酸鹽的含量(mg/g)總吸光度總濃度總含量硝酸鹽含量平均值相對平準偏差大白菜0.2170.40072.50361.75641.60987.29%0.1930.36002.24151.43380.2130.39392.46001.6391黃蘿卜0.0490.11620.72370.06330.05987.85%0.0510.11960.74520.05280.0550.12640.78960.0635黃瓜0.1080.21611.34540.80120.74216.09%0.1030.20761.29190.67430.1050.21101.31770.7508拜城恰瑪古0.0570.12970.81040.24330.26084.47%0.0610.13650.85280.27500.0540.12470.77760.2641伊寧恰瑪古0.3310.59373.70512.52552.53080.14%0.3270.58693.66222.53570.3230.58023.61332.5311柯坪恰瑪古0.0310.08570.53530.03170.03170.11%0.0340.09080.56670.03170.0320.08740.54550.0317亞硝酸鹽回收試驗：在蔬菜樣品中添加標準物質(zhì)后與樣品的制備，樣品含量測定步驟相同條件下做回收試驗。（表2-5）：回收試驗結(jié)果試樣體積(ml)吸光度回收率%1樣品夜200.5052亞硝酸鹽標準液20.455120+20.88889.21%2標準液與樣品液20+20.88588.59%320+20.88588.59%2.2.2不同蔬菜之間亞硝酸鹽含量硝酸鹽含量的比較圖4.（圖2-3）各中蔬菜中亞硝酸鹽含量及硝酸鹽含量的比較從（圖2-3）可以看出，伊寧恰瑪古中亞硝酸鹽含量是最高1.1294(mg/g)，最低是柯坪恰瑪古0.5174(mg/g)。硝酸鹽含量之間差異也顯著伊寧恰瑪古中硝酸鹽含量是最高2.5308(mg/g)，最低是柯坪恰瑪古0.0317(mg/g)。3.討論3.1亞硝酸鹽含量結(jié)果討論采用分光光度法對蔬菜中亞硝酸鹽及硝酸鹽的含量進行測試分析，方法簡便，快速，準確，專一性好，試驗結(jié)果得到各地區(qū)之間含量存在著顯著性差異。蔬菜中的亞硝酸鹽，硝酸鹽主要來源是人類活動，如：農(nóng)藥，化肥，生活排污的會產(chǎn)生亞硝酸鹽及硝酸鹽的。土地污染最直接的危害是不利于植物生長，導致農(nóng)作物減產(chǎn)乃至絕收，嚴重污染的土地可能寸草不生。不僅如此，有毒物質(zhì)被植物吸收積累后，通過食物鏈又進入人體，并在人體內(nèi)富集，極有可能使人中毒。亞硝酸鹽對人、畜的危害：亞硝酸鹽是氮循環(huán)的中間產(chǎn)物，其性質(zhì)不穩(wěn)定，它是一種公認的致癌性污染，亞硝酸鹽可形成致癌物亞硝胺，危害人畜的生命健康。所以亞硝酸鹽超標會對食物鏈造成影響，影響人體健康。4.總結(jié)根據(jù)實驗測定的結(jié)果以及數(shù)據(jù)分析，能大致得出以下結(jié)論：（1）亞硝酸鹽：六種蔬菜中亞硝酸鹽含量有明顯的差異，測定結(jié)果是：大白菜0.7919mg/g，黃蘿卜0.6930mg/g，黃瓜0.5763mg/g，拜城恰瑪古0.5528mg/g，伊寧恰瑪古1.1294mg/g，柯坪恰瑪古0.5174mg/g。（2）硝酸鹽：大白菜1.6098mg/g，黃蘿卜0.0598mg/g，黃瓜0.7421mg/g，拜城恰瑪古0.2608mg/g，伊寧恰瑪古2.5308mg/g，柯坪恰瑪古0.0317mg/g，蔬菜中亞硝酸鹽含量的回收率88.80%。這些有助于我們更深一步的了解含亞硝酸鹽的蔬菜消費過多時造成的一些不良后果，亞硝酸鹽含量消費過多時，體內(nèi)又缺乏維生素C的情況下，有強烈的致癌作用，主要引起食管癌，胃癌，肝癌和大腸癌等。日常膳食中的亞硝酸鹽不會對人體造成危害，只有過量攝入才能有毒性作用。以上試驗結(jié)果更合理的提供蔬菜消費可靠實際的依據(jù)，這些還表明該方法操作簡便快速,靈敏度高,選擇性和重現(xiàn)性好,干擾少,是檢測水果中亞硝酸鹽的好方法。參考文獻：[1]趙慶芳,曾小英,丁蘭,等.東方百合組織培養(yǎng)和快速繁殖研究[J].西北師范大學學報(自然科學版),2003,39(1):66-68.[2]上海第一醫(yī)院，等.食品毒理.北京:人民出版社,1978.204-205.[3]黃彩海,楊麗絹,陳花果.紫外分光光度法同時測定水樣中硝酸鹽和亞硝酸鹽氮.中國環(huán)境監(jiān)測,1988,4(15):15.[4]王紅丹,線性回歸-紫外光度法同時測定NO3-和NO2-.化工環(huán)保,1987,7(5):302.[5]吳仲可,徐允梁,顧荷英.分光光度法