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文檔簡介

全自動血細(xì)胞分析SOP一,檢驗(yàn)?zāi)康募霸?,目的:用BC-3000Plus全自動血細(xì)胞分析儀,在臨床和實(shí)驗(yàn)室定量分析血液細(xì)胞,對人體的血液中三種有形成分(紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板)的19項(xiàng)參數(shù)和3個直方圖進(jìn)行分析。是人體血液的基本生理病理指標(biāo)之一。白細(xì)胞計數(shù) WBC淋巴細(xì)胞計數(shù)Lymph#中間細(xì)胞計數(shù)Mid#中性粒細(xì)胞計數(shù)Gran#淋巴細(xì)胞百分比Lymph%中間細(xì)胞百分比Mid%中性粒細(xì)胞百分比Gran%紅細(xì)胞計數(shù)RBC血紅蛋白 HGB平均紅細(xì)胞體積MCV平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量MCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度 MCHC紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)RDW-CV紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差 RDW-SD紅細(xì)胞壓積HCT血小板計數(shù)PLT平均血小板體積 MPV血小板分布寬度PDW血小板壓積PCT白細(xì)胞分布直方圖 WBCHistogram紅細(xì)胞分布直方圖RBCHistogram血小板分布直方圖 PLTHistogram對患者和健康人群來講,觀察有無各種原因引起的貧血,出血和失血,目前機(jī)體有無細(xì)菌及病毒感染,可篩查出各種血液病,如白血病,血小板減少性紫癜等。2,原理:電阻法測量的血樣先用稀釋液進(jìn)行指定比例的稀釋,用以測量WBC、RBC、PLT和HGB等參數(shù)。WBC、RBC計數(shù)池的稀釋標(biāo)本在負(fù)壓作用下,分別通過各自的計數(shù)微孔,流入管道,通過兩個光電傳感器,在這兩個光電傳感器之間的液量就是儀器分析計數(shù)的標(biāo)本量。 用阻抗法測量WBC、RBC和PLT的體積分布和數(shù)目。電極插在液體中計數(shù)微孔的兩邊,在計數(shù)微孔的兩邊周圍建立了一個電場環(huán)境,根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì),當(dāng)有細(xì)胞通過計數(shù)微孔時,將引起阻抗的變化,阻抗變化的大小與細(xì)胞體積成正比。WBC根據(jù)體積的大小,它有多種形態(tài),由于稀釋液、溶血劑和溶血時間的不同,WBC的體積大小會發(fā)生變化。在一定的程序控制下,顯示出WBC的三分類——淋巴細(xì)胞、中間細(xì)胞(嗜酸+嗜堿+單核)和中性粒細(xì)胞。被稀釋的血樣加入溶血劑后,紅細(xì)胞溶解,釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑結(jié)合形成復(fù)合物,用波長525nm的單色光在WBC計數(shù)池內(nèi)測定此化合物的透過光強(qiáng),用這個透過光強(qiáng)與空白狀態(tài)的透過光強(qiáng)相比較,得到血紅蛋白濃度(空白狀態(tài)是指WBC計數(shù)池中只有稀釋液的狀態(tài))。二,標(biāo)本1,標(biāo)本種類:末梢血為200-300微升,靜脈血2毫升。2,采集標(biāo)本容器及添加劑:容器:末梢血為一次性朔料試管,靜脈血為真空采血管。添加劑:不同實(shí)驗(yàn)使用不同的抗凝劑,不能互相代替。血常規(guī)用EDTA-k2抗凝。3,采集方法:毛細(xì)血管采集或靜脈穿刺采集。采集時間:患者隨到隨時采集。4,標(biāo)本運(yùn)送:標(biāo)本采集后,應(yīng)及時送檢。5,標(biāo)本接受:標(biāo)本的編號與化驗(yàn)單上的編號要一致,清楚,正確及完整。6,準(zhǔn)備與保存:室溫靜置10-15分鐘,充分混勻后上機(jī)檢測。血液常規(guī)標(biāo)本一般保存在室溫24小時。三,設(shè)備與試劑1,設(shè)備:BC-3000Plus全自動血細(xì)胞分析儀。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400522號。2,專用試劑:①稀釋液:M-30PD,等滲溶液,具有特定的電導(dǎo)值,為細(xì)胞計數(shù)提供穩(wěn)定的環(huán)境。作為人體血細(xì)胞計數(shù),體積測量以及白細(xì)胞分類計數(shù)時的稀釋液使用。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCl,Na2SO4,緩沖劑,抗菌劑。本品2-30℃保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30℃,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400276號。②沖洗液:M-30PR,不含蛋白酶和次氯酸鈉(NaCIO)等強(qiáng)蛋白清除劑的電解質(zhì)溶液,用于儀器的進(jìn)樣孔,閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCl,KCl,Na2SO4,緩沖劑,抗菌劑和表面活性劑。本品2-30℃保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30℃,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400303號。③無氰溶血劑:M-30PCFL,能溶解紅細(xì)胞,與血紅蛋白形成復(fù)合物。用于白細(xì)胞計數(shù),白細(xì)胞分群和血紅蛋白測定。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCl,KCl,Na2SO4,緩沖劑,抗菌劑和表面活性劑。本品2-30℃保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30℃,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400274號。④E-Z清洗液(酶清洗液):M-30PE,含有蛋白水解酶的電解質(zhì)溶液,能有效地清除蛋白污漬,用于儀器的進(jìn)樣器,閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,NaCl,,緩沖劑,抗菌劑,表面活性劑,蛋白水解酶。本品2-30℃保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30℃,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400303號。⑤探頭清潔液:M-30PP,本品為含有次氯酸鈉的電解質(zhì)溶液,用于儀器的進(jìn)樣器,的清潔和沖洗。主要成份,NaOH,次氯酸鈉(NaCIO),表面活性劑。本品2-30℃保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30℃,有效期60天。常見急性失血和再生障礙性貧血),④正細(xì)胞不均一性貧血(MCV正常RDW↑,如早期缺鐵性貧血和急性溶血性貧血),⑤大細(xì)胞均一性貧血(MCV↑RDW正常,如慢性再障)。⑥大細(xì)胞不均一性貧血(MCV和RDW均↑,如巨幼細(xì)胞性貧血和惡性貧血)。8.白細(xì)胞計數(shù)(WBC):4.0-10.0×109/L增多:細(xì)菌性感染、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?、傳染性單核?xì)胞增多癥、白血病和應(yīng)激狀態(tài)(急性出血和大手術(shù))等增多(妊娠后期、月經(jīng)期、飯后、劇烈運(yùn)動后可有生理性增加)。減少:病毒感染、傷害及副傷寒、瘧疾、再生障礙性貧血、極嚴(yán)重感染、放射性輻照、腫瘤化療后和非白血性白血病等。9.白細(xì)胞分類(DC):正常參考值見下表檢測項(xiàng)目英文縮寫參考值中性粒細(xì)胞百分比NEUT%0.5-0.7淋巴細(xì)胞百分比LYMPH%0.2-0.4單核細(xì)胞百分比MONO%0.03-0.08嗜酸性粒細(xì)胞百分比EO%0.005-0.05嗜堿性粒細(xì)胞百分比BASO%0.000-0.005中性粒細(xì)胞絕對值NEUT#3.0-5.0×109/L淋巴細(xì)胞絕對值LYMPH#1.0-3.0×109/L單核細(xì)胞絕對值MONO#0.067-0.325×109/L嗜酸性粒細(xì)胞絕對值EO#0.02-0.05×109/L嗜堿性粒細(xì)胞絕對值BASO#0.005-0.05×109/L中性粒細(xì)胞:增多見于急性化膿性細(xì)菌感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后和尿毒癥等;其減少見于傷寒和副傷寒、瘧疾、粒細(xì)胞缺乏癥、放射性輻照和腫瘤化療。嗜酸性粒細(xì)胞增多見于過敏性疾病、寄生蟲病等;其減少見于傷寒和副傷寒等。嗜堿性粒細(xì)胞增多見于慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金氏病和鉛中毒等。淋巴細(xì)胞增多見于病毒感染,其減少見于免疫缺陷病。單核細(xì)胞增多見于某些細(xì)菌感染及單核細(xì)胞白血病等。10.血小板計數(shù)(PLT):100-350×109/L減少:造血功能障礙(如急生白血病和再生障礙性貧血等)、血小板破壞過多(如原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等)及消耗增加(如DIC、血栓性血小板減少性紫癜等)時。增多:急性大出血、急性溶血、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和慢性粒細(xì)胞性白血病等時11.血小板平均容積(MPV):9-17fl(1)血小板數(shù)低而MPV增高:骨髓自身正常,但外周血血小板破壞增多造成血小板降低的刺激后反應(yīng)性增生時,巨核細(xì)胞DNA倍體數(shù)及細(xì)胞大小都增加,MPV也增高。由于骨髓受抑制而造成血小板減少的病人在恢復(fù)初期MPV也升高,這主要因外周血血小板數(shù)減低應(yīng)激性地致使巨核細(xì)胞倍體數(shù)增加所致。(2)血小板數(shù)高、MPV正常:骨髓增生性疾病如血小板增多,紅細(xì)胞增多但MPV正常。(3)血小板數(shù)與MPV均下降:AIDS(艾滋病)病毒直接影響巨核細(xì)胞并導(dǎo)致血小板減少。大約2/3的病人血小板數(shù)降低,92%的病人MPV值下降,與骨髓受抑時的血小板狀態(tài)相似。患發(fā)育不良性貧血的病人積壓小板數(shù)通常都降低,其MPV值也低,但PDW升高。當(dāng)骨髓纖維化或被脈沖瘤細(xì)胞浸潤危及正常造血時,血小板數(shù)減少,隨即MPV值也降低。再生障礙性貧血,骨髓瘤或白血病化療后,敗血癥所致血小板沽少等骨髓受抑性疾病中,雖然仍可能有一些大血小板,但血小板的平均體積減小。(4)MPV值與血小板數(shù)都升高:反應(yīng)性血小板增多癥病人中,其MPV值升高,因血液的流失和本內(nèi)損傷造成的急性大失血都可使血小板值上升。(5)MPV值升高而血小板正常:慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓纖維化、脾切除均可周到MPV升高,慢性髓細(xì)胞性白血病和骨髓纖維化主要使骨髓增生異常,兩種疾病中,血小板體積經(jīng)常增大并大小不均。外周血涂片中可出現(xiàn)大血小板。半數(shù)α-型和β-型珠蛋白生成障礙性貧血的患者有4種明顯的血液學(xué)改變;血小板大小改變、紅細(xì)胞大小改變、肝珠蛋白改變和對瘧原蟲抵抗力改變。其MPV值增高而血小板數(shù)正常。12.血小板壓積(PCT):0.9-5.1%由血小板數(shù)量和體積兩個因素決定,通常主要受數(shù)量影響。增高見于血小板增多的各種原因,減少見于血小板減少的各種原因。13.血小板分布寬度(PDW):15-17

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