細(xì)胞融合單克隆抗體課件

動(dòng)物組織塊細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)（細(xì)胞貼壁；接觸抑制）傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞幼齡動(dòng)物的器官組織；動(dòng)物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞；分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。適宜條件動(dòng)物組織塊細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)（細(xì)胞貼壁；接觸抑制）傳代培養(yǎng)胰蛋110代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無(wú)限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)已改變遺傳物質(zhì)未改變動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官配置細(xì)胞懸液胰蛋白酶處理轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液稀釋分

瓶原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁、接觸抑制動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理：細(xì)胞增殖10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無(wú)限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)已改2體細(xì)胞核移植的過(guò)程體細(xì)胞核移植的過(guò)程3供體細(xì)胞（供核）細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞卵巢卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核去核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛體細(xì)胞核移植的過(guò)程共分成兩大階段：核移植和胚胎移植體細(xì)胞核移植的原理：動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性供體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞卵巢卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核去4學(xué)習(xí)目標(biāo)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備和應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)習(xí)目標(biāo)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體5白菜紫甘藍(lán)白菜-甘藍(lán)白菜紫甘藍(lán)白菜-甘藍(lán)6(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖7動(dòng)物細(xì)胞可以融合嗎？動(dòng)物細(xì)胞可以融合嗎？8A細(xì)胞B細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.概念：雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）：是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過(guò)程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞。A細(xì)胞B細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.概念：雜交細(xì)胞9正在融合的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞正在融合雞血細(xì)胞正在融合的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞正在融合雞血細(xì)胞102.動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程滅活病毒（常用仙臺(tái)病毒）、（聚乙二醇）PEG、電激等誘導(dǎo)的手段？2.動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程滅活病毒（常用仙臺(tái)病毒）、（聚乙二醇）P11思考討論：為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？

因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。

不滅活的話會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。思考討論：為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎12細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活病毒、PEG、電激等融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，形成兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞誘導(dǎo)的手段？融合后細(xì)胞的類型？AB雜交細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn)？三種AA、AB、BB含兩種生物的遺傳物質(zhì)原理？細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活病毒、PEG、電激等融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分133.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。最主要用途：利用雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。3.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的14主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）15抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。溫故知新二、單克隆抗體B淋巴細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）記憶B淋巴細(xì)胞分化能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞）。強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。溫故知新二、單克16抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？單克隆抗體！產(chǎn)量低、純度低、特異性差、靈敏度低?？贵w的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該17單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B淋巴細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗體。單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B淋巴細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所182.哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？3.有什么方法能使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢？1.B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)液中能否生長(zhǎng)增殖？（一）單克隆抗體的制備B淋巴細(xì)胞在體外不能無(wú)限增殖。腫瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合2.哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？3.有什么方法能使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)19科勒米爾斯坦榮獲1984年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)如果把一種B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，所得到的融合細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

科勒米爾斯坦榮獲1984年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)如果把一種B淋20單克隆抗體的制備過(guò)程單克隆抗體的制備過(guò)程21骨髓瘤細(xì)胞小鼠一篩選已免疫的B淋巴細(xì)胞（選擇性培養(yǎng)基）細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞注射抗原聚乙二醇、滅活的病毒、電激等BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）√既能產(chǎn)生抗體又能大量增殖二篩選二篩選：能產(chǎn)特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞（克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)）骨髓瘤細(xì)胞小鼠一篩選已免疫的B淋巴細(xì)胞（選擇性培養(yǎng)基）細(xì)胞22陽(yáng)性孔方法——抗原-抗體雜交法在單克隆抗體制備過(guò)程中，兩次篩選的原理和方法是不相同的。陽(yáng)性孔方法——抗原-抗體雜交法在單克隆抗體制備過(guò)程中，兩次篩23骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)已免疫的B淋巴細(xì)胞（選擇培養(yǎng)基）（克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)）細(xì)胞融合雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞注射抗原能產(chǎn)特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大、純度高腹水培養(yǎng)液體內(nèi)優(yōu)點(diǎn)：不需特定的培養(yǎng)基；不需嚴(yán)格外界環(huán)境條件骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)已免疫的24骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)已免疫的B淋巴細(xì)胞（選擇培養(yǎng)基）（克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)）細(xì)胞融合雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞注射抗原能產(chǎn)特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)已免疫的25制備單克隆抗體◆利用

產(chǎn)生特異性抗體的功能?！衾?/p>

無(wú)限增殖的特性?！衾?/p>

技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞?！衾?/p>

技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制備單克隆抗體◆利用產(chǎn)生特異性抗體的26雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠273.為何要進(jìn)行兩次篩選？4.如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。專一抗體檢驗(yàn)呈陽(yáng)性。第1次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。1.本過(guò)程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2.為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體3.為何要進(jìn)行兩次篩選？4.如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培28（1）作為診斷試劑——最廣泛用途

準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等疾?。ǘ﹩慰寺】贵w的應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛用途（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可29細(xì)胞融合單克隆抗體ppt課件30

用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體技術(shù)做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度高，在妊娠第8天就可以做出診斷，比原來(lái)的診斷方法提前了10天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對(duì)胎兒造成不利影響。該方法檢測(cè)的準(zhǔn)確率在90%以上。用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體技術(shù)做成的“早早孕31（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物主要用于治療癌癥治療，單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物主要用于治療癌癥治療，單克隆32“生物導(dǎo)彈”＝抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素單克隆抗體導(dǎo)向，藥物為彈頭利用單克隆抗體的特異性“生物導(dǎo)彈”＝抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或33兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法－－滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞－－雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備的優(yōu)勢(shì)本節(jié)小結(jié)重點(diǎn)兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)34比較動(dòng)、植物細(xì)胞雜交技術(shù)比較動(dòng)、植物細(xì)胞雜交技術(shù)35基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的仙臺(tái)病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞 () A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbbC趁熱打鐵基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的36【例1】能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是（）A.離心B.滅活的病毒C.電刺激D.振動(dòng)【例2】融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（）具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息B.能無(wú)限增殖C.可形成新個(gè)體D.培養(yǎng)過(guò)程會(huì)貼壁【例3】動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞

BB初試牛刀A【例1】能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是（）B37【例4】科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞【例5】單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的（）B淋巴細(xì)胞B．T淋巴細(xì)胞C．骨髓瘤細(xì)胞D．雜交瘤細(xì)胞A初試牛刀D【例4】科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，38【例6】用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是（）A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C．用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D．篩選雜交細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體B初試牛刀×【例6】用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤39謝謝謝謝40(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自小鼠體內(nèi)的

細(xì)胞，從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射_____________類物質(zhì)。（2）d過(guò)程是一個(gè)_____________過(guò)程，該過(guò)程的進(jìn)行常用_____________或_____________的誘導(dǎo)。(3)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成

種類型的C細(xì)胞，因此需用__________培養(yǎng)基篩選出D細(xì)胞用于培養(yǎng)，D細(xì)胞的名稱是

，其特點(diǎn)是_________________________________________。效應(yīng)B

抗原

細(xì)胞融合

聚乙二醇滅活的病毒

選擇性3既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體

雜交瘤細(xì)胞(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自小鼠體內(nèi)的41(4)在培養(yǎng)時(shí)通過(guò)________分裂方式大量繁殖。D細(xì)胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是（要求答5項(xiàng)）__________________________________。（5）單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點(diǎn)是_________________。特異性強(qiáng)、靈敏度高

有絲無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；充足的營(yíng)養(yǎng)；適宜的溫度和pH；適宜的氣體環(huán)境

(4)在培養(yǎng)時(shí)通過(guò)________分裂方式大量繁殖。D細(xì)胞體4215、（1）單克隆抗體是指

。（2）制備單克隆抗體的步驟：①將__________注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞，其中至少1個(gè)淋巴細(xì)胞帶有抗該抗原的抗體。②將步驟①獲得的B淋巴細(xì)胞與步驟②培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞在_________________的誘導(dǎo)下融合。③將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞，放在_______培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選。④這樣獲得的雜交瘤細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞_____________的能力，又具有________________的本領(lǐng)。⑤檢測(cè)和分離帶有抗X抗體的陽(yáng)性細(xì)胞，培養(yǎng)板中每孔放一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。⑥將陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行增殖，從而制備出大量抗該抗原的單克隆抗體。化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體

抗原

聚乙二醇選擇性

無(wú)限增殖

產(chǎn)生專一抗體15、（1）單克隆抗體是指43（3）大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種：①體外培養(yǎng)法，可獲得10μg/mL的抗體；②動(dòng)物體內(nèi)誘生法可獲得5~20mg/mL的抗體。你選擇的方法及原因是

。（4）用本法制備出的單克隆抗體仍具有局限性，因?yàn)樗怯眯∈蟮腳______細(xì)胞制備的，其化學(xué)本質(zhì)是___________，應(yīng)用于人體，會(huì)作為

產(chǎn)生

，解決這個(gè)問(wèn)題的方法是_____________________________。大量生產(chǎn)選①，小規(guī)模生產(chǎn)選②效應(yīng)B蛋白質(zhì)異物免疫反應(yīng)采用人的效應(yīng)B細(xì)胞制備（3）大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種：（4）用本法制備出4415、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：

（1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？

。原因是

______________________________________________。

（2）圖中②為

過(guò)程，常用

作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了_____________________

，因此不僅能分泌

___________，還有

本領(lǐng)。

不能

沒(méi)有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無(wú)法獲得產(chǎn)生專一抗體的B淋巴細(xì)胞

細(xì)胞融合

滅活病毒

雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)

特異性抗體

大量增殖制備單克隆抗體（3）該方案的目的是_________________________。15、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌45細(xì)胞融合單克隆抗體ppt課件46例題1：1975年，英國(guó)劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細(xì)胞（脾細(xì)胞）和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合起來(lái)，成為雜交瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能“融合”在一起，說(shuō)明細(xì)胞膜

。(2)單克隆抗體的準(zhǔn)確定義應(yīng)為()A．一類特殊抗體B．無(wú)性繁殖系C．單一抗體細(xì)胞的無(wú)性繁殖第產(chǎn)生的抗體D．單一抗體細(xì)胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體(3)雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是_______分裂，其遺傳性狀__________。(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動(dòng)追蹤抗原(病原體或癌變細(xì)胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”這是利用了_____________

。具有一定的流動(dòng)性C有絲不變抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)例題1：(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞47[例題2]（1）在用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)，將抗原注射到小鼠體內(nèi)，可獲得(多選)

（）A．T淋巴細(xì)胞B．效應(yīng)B淋巴細(xì)胞C．抗體D．記憶細(xì)胞（2）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是(多選)（）A．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B．融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體C．體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不能無(wú)限增殖D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯

BCD

ACD[例題2]BCDACD48已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答：（1）試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有

種融合細(xì)胞。（2）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說(shuō)原理。方法：

。原理：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞加入氨基嘌呤后,使D合成的途徑阻斷,所以僅D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞或彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,但雜種細(xì)胞則可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻49B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為_(kāi)_______過(guò)程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過(guò)程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無(wú)限增殖原代傳代50例3：B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到AC50下列過(guò)程與細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)關(guān)的是

（）A.檢測(cè)有毒物質(zhì)

B.生產(chǎn)單克隆抗體C.篩選抗癌藥物

D.雜交育種D下列過(guò)程與細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)關(guān)的是（）D51

2002年12月30日，

兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—黃花煙草和革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在“產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命?！疤栈槎Y”這兩場(chǎng)“太空婚禮”實(shí)質(zhì)是哪兩項(xiàng)細(xì)胞工程技術(shù)？植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2002年12月30日，兩場(chǎng)籌備了10年52細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合受精作用細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合受精作用532、誘導(dǎo)融合的因素生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)融合.(利用滅活仙臺(tái)病毒是動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的。這是由于病毒的磷脂外衣與動(dòng)物細(xì)胞的膜十分相似的緣故。病毒外殼上的某些糖蛋白可能還有促進(jìn)細(xì)胞融