細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件

細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件1細(xì)胞工程是指應(yīng)用____________和_____________方法，通過___水平或______水平上的操作，按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的________或獲得________的一門綜合科學(xué)技術(shù)。根據(jù)操作對象的不同，分為___________和________細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞細(xì)胞器分子生物學(xué)遺傳物質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)品植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程細(xì)胞工程細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞細(xì)胞器分子生物學(xué)遺傳物質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)品植物細(xì)2細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件3若要快速的培育大量的君子蘭，可采用________

技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)若要快速的培育大量的君子蘭，可采植物組織培養(yǎng)技術(shù)4細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件5什么叫植物的組織培養(yǎng)？其原理是什么？判斷：1、由紫色糯性玉米種子培育出植株。2、用菊花的花瓣培育出菊花植株。一、植物的組織培養(yǎng)什么叫植物的組織培養(yǎng)？其原理是什么？判斷：一、植物的組織培養(yǎng)61、什么叫全能性？(what?)

為什么有全能性？（why?即全能性的原因是什么？）2、動物細(xì)胞有全能性嗎？所有的植物細(xì)胞都有全能性嗎？3、既然細(xì)胞有全能性，為什么在生物體內(nèi)，細(xì)胞并沒有表現(xiàn)出全能性呢？要怎樣才能表現(xiàn)出全能性呢？（how?即全能性表現(xiàn)的條件）4、所有細(xì)胞的全能性都一樣嗎？一、對全能性的理解：高等植物成熟的篩管？花粉呢？離體、一定的營養(yǎng)和激素、適宜的外界環(huán)境條件1、什么叫全能性？(what?)一、對全能性的理解：高等7全能性的高低排序_______________受精卵生殖細(xì)胞（如卵細(xì)胞，精子）體細(xì)胞細(xì)胞全能性的高低:______________受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞同樣是體細(xì)胞，分化程度越高，全能性越低。全能性的高低排序_______________細(xì)胞全能性的高8植物組織培養(yǎng)的過程是：離體的器官、組織或細(xì)胞A愈傷組織B根芽植株A、B分別表示______________。A和B階段主要進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是__________，B階段除了細(xì)胞分裂外，還進(jìn)行細(xì)胞的_______等。A階段要遮光，這樣做的目的是______________;B階段需要光照，原因是_________脫分化和再分化有絲分裂分化有利于誘導(dǎo)細(xì)胞的脫分化葉綠素的合成需要光，光合作用需要光什么叫愈傷組織？有何特點？脫分化和再分化的條件一樣嗎？整個組織培養(yǎng)過程有哪些注意事項？植物組織培養(yǎng)的過程是：離體的器官、組織或細(xì)胞A愈傷組織B根芽9組織培養(yǎng)時應(yīng)注意的事項：1、成功的關(guān)鍵是避免微生物的污染。所有實驗用具都必須嚴(yán)格滅菌，接種過程要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。2、離體的細(xì)胞、組織和器官稱為外植體，外植體一般選擇分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞。（為什么？）3、培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。配制的培養(yǎng)基中要有植物生長發(fā)育所需的全部營養(yǎng)，其中____________激素的用量比例對器官發(fā)生起決定作用。4、脫分化要避光，再分化要有光照。（為什么？）5、試管苗移栽到大田之前，還要進(jìn)行后期培養(yǎng)，形成植株后再移栽。練習(xí)連接1、3生長素和細(xì)胞分裂素組織培養(yǎng)時應(yīng)注意的事項：練習(xí)連接1、3生長素和細(xì)胞分裂素10指出其中的錯誤：1、花藥、胚不能作為組織培養(yǎng)的材料。2、組織培養(yǎng)時為保證營養(yǎng)供應(yīng)，應(yīng)加大蔗糖溶液的濃度。3、同一株綠色開花植物不同部位細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得愈傷組織的基因型相同。指出其中的錯誤：11細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件12應(yīng)用：1、微型繁殖（取材少，繁殖快，且能保持優(yōu)良品種的遺傳特性）2、培育脫毒苗（如何操作？為什么？脫毒苗與抗毒苗一樣嗎？）3、人工種子應(yīng)用：134、單倍體育種5、突變體的利用（為什么容易產(chǎn)生突變體？）6、獲得一些細(xì)胞產(chǎn)物也要用到組織培養(yǎng)技術(shù)，但屬于_____生殖。用植物組織培養(yǎng)獲得個體屬于有性生殖還是無性生殖？為什么？植物組織培養(yǎng)獲得個體的過程，可能發(fā)生的變異來源有_______?4、單倍體育種也要用到組織培養(yǎng)技術(shù)，但屬于_____生殖。用14二、植物體細(xì)胞雜交簡述其過程？有何意義？原理是什么？獲得雜種植株的過程屬于什么變異？二、植物體細(xì)胞雜交簡述其過程？有何意義？原理是什么？獲得雜種15根據(jù)圖示，分別用哪兩種方法獲得可育的白菜—甘藍(lán)？根據(jù)圖示，分別用哪兩種方法獲得可育的白菜—甘藍(lán)？16偶然在一雜志上，看到“眼鏡王蛇毒單克隆抗體”的制備這一標(biāo)題。當(dāng)你看到這一標(biāo)題時，能否根據(jù)我們所學(xué)知識，請你設(shè)計一過程，理論上我們可以如何獲得眼鏡王蛇毒單克隆抗體？（實驗動物為小鼠）偶然在一雜志上，看到“眼鏡王蛇毒單克隆抗體”的制備這一標(biāo)題。17三、單克隆抗體三、單克隆抗體18細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件19單克隆抗體的概念:單個_________,通過____形成細(xì)胞群,這樣的細(xì)胞群產(chǎn)生的___________________的抗體雜交瘤細(xì)胞克隆化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)單克隆抗體的優(yōu)點:___________________________________特異性強(qiáng),靈敏度高,可大量制備.單克隆抗體的概念:雜交瘤細(xì)胞克隆化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)單克隆201、獲取B淋巴細(xì)胞之前，注射抗原的目的是什么？2、怎樣知道小鼠體內(nèi)已經(jīng)產(chǎn)生了相應(yīng)的B細(xì)胞？3、將小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合后，至少經(jīng)兩次篩選才得到所需的雜交瘤細(xì)胞。兩次篩選的目的是什么？最后得到的雜交瘤細(xì)胞具有什么特點？4、從哪里獲得單克隆抗體？1、獲取B淋巴細(xì)胞之前，注射抗原的目的是什么？21單克隆抗體制備的過程：將抗原注入小鼠體內(nèi),目的獲得_______________能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞(=__細(xì)胞)將鼠的骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合,在___________________上篩選出___________特定的選擇性培養(yǎng)基雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行____________________,經(jīng)多次篩選,獲得___________________________________克隆化培養(yǎng)和抗體檢測足夠數(shù)量能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞漿雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從___________或________中提取大量單克隆抗體.細(xì)胞培養(yǎng)液小鼠腹水單克隆抗體制備的過程：將抗原注入小鼠體內(nèi),目的獲得_____221、單克隆抗體制備的過程中,需要使用到的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段_________________________依據(jù)的原理分別是_____________________動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)2、制備單克隆抗體的原理是：___________________每種效應(yīng)B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體，瘤細(xì)胞能無限增殖3、應(yīng)用：什么叫生物導(dǎo)彈？如何制成？有什么優(yōu)點？其利用了單抗的什么特點？1、單克隆抗體制備的過程中,需要使用到的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段23四、動物細(xì)胞培養(yǎng)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？原理？2、概念辨析：細(xì)胞株與細(xì)胞系原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液相當(dāng)于生物體內(nèi)的什么液體？四、動物細(xì)胞培養(yǎng)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？原理？24細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件25動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊剪碎組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行傳代培養(yǎng).貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊剪碎組織用胰蛋白酶或膠原蛋白26細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件27傳代培養(yǎng)先用___________處理貼滿瓶壁的細(xì)胞，然后再分瓶培養(yǎng)；10代以內(nèi)的細(xì)胞保持正常的_________細(xì)胞傳到10—50代左右時，大多數(shù)細(xì)胞增殖會_________，以至于完全停止，最終___________；但少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)會發(fā)生改變，克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得__________。胰蛋白酶等二倍體核型逐漸緩慢衰老死亡不死性傳代培養(yǎng)胰蛋白酶等二倍體核型逐漸緩慢衰老死亡不死性282、目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10以內(nèi)的細(xì)胞，為什么？1、細(xì)胞株與細(xì)胞系區(qū)別？能保持正常的二倍體核型2、目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10以內(nèi)的細(xì)胞，為什29動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（模擬體內(nèi)內(nèi)環(huán)境）如何？與植物組織培養(yǎng)進(jìn)行比較動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（模擬體內(nèi)內(nèi)環(huán)境）如何？與植物組織培養(yǎng)進(jìn)行30（2011安徽卷）Ⅱ.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_______和_______之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_______和________。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以__________________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。胰蛋白（或膠原蛋白）啟動子終止子Taq酶對干擾素基因特異的DNA引物對擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長的附著面積（2011安徽卷）Ⅱ.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能31植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較:比較項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法結(jié)果生物膜流動性植物細(xì)胞的全能性生物膜的流動性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理,化學(xué)物理,化學(xué),滅活的病毒獲得雜種植株