植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-課件

植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)1PPT課件植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)1PPT課件試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)試驗(yàn)?zāi)康牧私鉁y(cè)定植物組織水勢(shì)的方法原理將植物放在已知水勢(shì)的一系列溶液中，如果組織的水勢(shì)與溶液的水勢(shì)不相等，則組織吸水或失水或維持平衡，引起溶液的濃度、密度、電導(dǎo)率等參數(shù)發(fā)生變化。然后根據(jù)這些變化情況確定植物組織的水勢(shì)。2PPT課件試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)試驗(yàn)?zāi)康牧私鉁y(cè)定植物組織水器材與試劑①實(shí)驗(yàn)儀器：試管，移液管，毛細(xì)滴管，打孔器，鑷子；②實(shí)驗(yàn)試劑：1.00mol.L-1蔗糖溶液，甲烯藍(lán)；③實(shí)驗(yàn)材料：玉米、菠菜或其它植物葉片。實(shí)驗(yàn)步驟①取8支試管，編號(hào)，配制0.1~0.8mol.L-1試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)3PPT課件器材與試劑試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)3PPT課件的溶液，加好塞子，作為對(duì)照組；②另取8支試管，對(duì)應(yīng)于對(duì)照組編號(hào)，然后從對(duì)照組的試管中分別取4ml溶液移入對(duì)應(yīng)編號(hào)的試驗(yàn)組試管中，加塞；③用打孔器在葉片上打孔，隨機(jī)取樣，向試驗(yàn)組的每一試管中放入20片，加塞，放置30分鐘，其間搖動(dòng)數(shù)次。到時(shí)間后，用大頭針沾取少許甲烯藍(lán)粉末加入每一試驗(yàn)試管。試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)4PPT課件的溶液，加好塞子，作為對(duì)照組；試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水④用8支毛細(xì)滴管從試驗(yàn)組的各管中依次吸取少許著色的液體少許，緩慢插入對(duì)照組相應(yīng)試管的中部，緩慢橫向放出一滴溶液，觀察藍(lán)色液滴的移動(dòng)方向。液滴向上運(yùn)動(dòng)——說(shuō)明？液滴向下運(yùn)動(dòng)——說(shuō)明？液滴靜止不動(dòng)——說(shuō)明？

——蔗糖溶液的密度大于純水的密度！試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)5PPT課件④用8支毛細(xì)滴管從試驗(yàn)組的各管中依次吸取試驗(yàn)一小液流法測(cè)定⑤計(jì)算葉片細(xì)胞的水勢(shì)Фcell=Фout=-icRT;其中：Фcell為植物細(xì)胞水勢(shì)；Фout為外界溶液滲透式；i為解離系數(shù)，蔗糖為1；c為液體濃度（mol.L-1）；R為摩爾氣體常數(shù)，0.083×105L.Pa/mol.KT絕對(duì)溫度值，=t℃+273試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)6PPT課件⑤計(jì)算葉片細(xì)胞的水勢(shì)試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)6PPT實(shí)驗(yàn)報(bào)告1、實(shí)驗(yàn)的結(jié)果；2、產(chǎn)生誤差的原因。試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)7PPT課件實(shí)驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)一小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)7PPT課件試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜y(cè)定未經(jīng)分離的葉綠素ab的方法與計(jì)算；實(shí)驗(yàn)原理葉綠素a和b分別在663nm和645nm處有吸收峰；

Ca=12.7OD663-2.69OD645Cb=22.9OD645-4.68OD663器材與試劑1、實(shí)驗(yàn)儀器高級(jí)分光光度計(jì)，離心機(jī)，天平，剪刀、研缽，漏斗，移液管，20ml棕色容量瓶；8PPT課件試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜y(cè)定未經(jīng)分離的葉綠試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定2、實(shí)驗(yàn)試劑丙酮，碳酸鈣3、植物葉片：同一種植物的陰葉和陽(yáng)葉；實(shí)驗(yàn)步驟1、色素的提取取新鮮葉片0.5g，放入研缽，加入純丙酮5ml，少許碳酸鈣和石英砂，研磨成勻漿，再加入80%丙酮酸5ml，將勻漿移入離心管，并用適量80%丙酮清洗研缽。5000rpm離心5分鐘，取上清液用80%丙酮定容至20ml9PPT課件試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定2、實(shí)驗(yàn)試劑丙酮，碳酸鈣9P試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定2、測(cè)定光密度取上述色素提取液1ml，加80%丙酮溶液4ml，轉(zhuǎn)入比色杯中中，以80%丙酮為對(duì)照，分別測(cè)定663和645nm時(shí)的吸收值；3、計(jì)算實(shí)驗(yàn)報(bào)告1、比較陰陽(yáng)葉葉綠素ab的含量比值的差異。10PPT課件試驗(yàn)二葉綠素ab含量的測(cè)定2、測(cè)定光密度取上述色素實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理將植物對(duì)稱(chēng)葉片的一部分遮光或取下置于暗處，另一部分則進(jìn)行光合作用，過(guò)一定時(shí)間后，在這兩部分葉片的對(duì)應(yīng)部位去同等面積，分別烘干稱(chēng)重。開(kāi)始時(shí)視為相等，照光后葉片重量超過(guò)暗中的重量，超過(guò)部分即為光合產(chǎn)物的產(chǎn)量，并通過(guò)一定的計(jì)算可得到光合作用強(qiáng)度。11PPT課件實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理將植物對(duì)實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定器材與試劑1、儀器2、試劑三氯乙酸（10%）3、代表性植物葉片實(shí)驗(yàn)步驟1、選擇測(cè)定樣品選擇光照條件好、葉齡一致的葉片20片，編號(hào)。2、葉基部處理用5%三氯乙酸處理葉柄基部。12PPT課件實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定器材與試劑12PPT課實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定注意：可見(jiàn)灼傷，但葉片姿勢(shì)保持不變。3、剪取樣品基部處理完成之后，剪取樣品，同時(shí)準(zhǔn)確記錄取樣時(shí)間（精確到分鐘）；剪取時(shí)注意不要傷及主脈。樣品用濕紗布保存，置于4℃暗處保存。4、光和后取樣

4~5小時(shí)候，取樣，方法同上13PPT課件實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定注意：可見(jiàn)灼傷，但葉片實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定5、稱(chēng)重比較測(cè)定打孔器面積；每葉片打孔15片。分別置于不同的培養(yǎng)皿中。80℃烘干至恒重，稱(chēng)重。6、計(jì)算結(jié)果A=干重增加數(shù)（mg）/(葉面積*光照時(shí)數(shù))14PPT課件實(shí)驗(yàn)三改良半葉法植物光和強(qiáng)度測(cè)定5、稱(chēng)重比較14PPT實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度【實(shí)驗(yàn)原理】利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸過(guò)程中釋放的CO2，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，用草酸溶液滴定殘留的Ba(OH)2，從空白和樣品兩者消耗草酸溶液之差，計(jì)算出呼吸過(guò)程中釋放的CO2?！酒鞑呐c儀器】1.實(shí)驗(yàn)儀器廣口瓶，溫度計(jì)，酸式滴定管，干燥管，尼龍網(wǎng)制小籃。15PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度【實(shí)驗(yàn)原理】15PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度2.實(shí)驗(yàn)試劑①0.05mol.L-1Ba(OH)2；②0.1%麝香草酚酞酒精溶液；③1/44mol.L-1草酸溶液。重結(jié)晶草酸2.8652g，蒸餾水定容至1000ml。3.實(shí)驗(yàn)材料發(fā)芽的小麥種子或其它植物活體。16PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度2.實(shí)驗(yàn)試劑16PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度【實(shí)驗(yàn)步驟】1.實(shí)驗(yàn)裝置17PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度【實(shí)驗(yàn)步驟】17PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度2.稱(chēng)取萌發(fā)的小麥種子15.00g，裝于小籃內(nèi)，然后將小藍(lán)掛于廣口瓶?jī)?nèi)，同時(shí)加入25.0mlBa(OH)2溶液，立即塞緊瓶塞，并用融化的石蠟密封瓶口；每隔10分鐘，輕輕搖動(dòng)廣口瓶。注意：勿讓小籃侵入溶液中?。。。。?！18PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度2.稱(chēng)取萌發(fā)的小麥種子15.實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度3.1h后，小心打開(kāi)瓶塞，迅速取出小籃，加入2滴指示劑，立即重新塞緊瓶塞。然后拔出小橡皮塞，經(jīng)滴定管插入小孔中，用草酸滴定，直到藍(lán)綠色變成無(wú)色為止。記錄滴定所含用的草酸溶液的體積（ml）數(shù)。19PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度3.1h后，小心打開(kāi)瓶塞，迅實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度4.對(duì)照測(cè)定：材料為沸水煮死的種子，其余步驟同上；5.計(jì)算呼吸強(qiáng)度(CO2，mg/g.h)=(v1-v0)/{種子鮮重(g)×?xí)r間(h)}******本實(shí)驗(yàn)應(yīng)按照分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求，對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格操作，才能有實(shí)驗(yàn)結(jié)果！20PPT課件實(shí)驗(yàn)四小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度4.對(duì)照測(cè)定：材料為沸水煮死實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)原理】糖在濃硫酸作用下生成的糠醛或羥甲基糠醛與蒽酮反應(yīng)生成藍(lán)綠色糠醛衍生物，在一定范圍內(nèi)，顏色的深淺與糖的含量成正比，故可用于糖的定量測(cè)定。由于反應(yīng)液中的濃硫酸可以把多糖水解成單糖，因此，蒽酮法能測(cè)出溶液中全部可溶性碳水化合物總量。糖類(lèi)與蒽酮反應(yīng)生成的有色物質(zhì)在可見(jiàn)光區(qū)的吸收峰為620nm。21PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)原理】21PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備】（一）實(shí)驗(yàn)材料任何植物鮮樣或干樣。（二）試劑

1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml）：準(zhǔn)確稱(chēng)取100mg分析純無(wú)水葡萄糖，溶于蒸餾水并定容至100ml，使用時(shí)再稀釋10倍（100μg/mL）。22PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備】22P實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖2．蒽酮試劑：稱(chēng)取1.0g蒽酮，溶于80%濃硫酸（將98%濃硫酸稀釋?zhuān)褲饬蛩峋従徏尤氲秸麴s水中）1000mL中，冷卻至室溫，貯于具塞棕色瓶?jī)?nèi)，冰箱保存，可使用2～3周。（三）儀器設(shè)備分光光度計(jì)，分析天平，恒溫水浴，試管，三角瓶，移液管（5、1、0.5ml），剪刀，瓷盤(pán)，玻棒，水浴鍋，電爐，漏斗，濾紙,鑷子。23PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖2．蒽酮試劑實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)步驟】

1樣品中可溶性糖的提取取新鮮植物葉片，摖凈表面污物，剪碎混勻，稱(chēng)取新鮮樣品0.5～1.0g（或干樣粉末5～100mg），放入大試管中，加入15ml蒸餾水，在沸水浴中煮沸20min（為什么？），取出冷卻，過(guò)濾入100ml容量瓶中，用蒸餾水沖洗殘?jiān)鼣?shù)次，定容至刻度。24PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)步驟】24PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作取6支大試管，從0~5分別編號(hào)，按下表加入各試劑。空白對(duì)照25PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作取6支大試實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖將各管快速搖動(dòng)混勻后，在沸水浴中煮10min，取出冷卻，在620nm波長(zhǎng)下，用空白調(diào)零測(cè)定光密度，以光密度為縱坐標(biāo)，含葡萄糖量（μg）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。26PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖將各管快速搖動(dòng)混勻后，在沸水浴中煮27PPT課件27PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖3.樣品測(cè)定取待測(cè)樣品提取液1.0ml加蒽酮試劑5ml，同以上操作顯色測(cè)定光密度。重復(fù)3次。28PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖3.樣品測(cè)定取實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖四、結(jié)果計(jì)算可溶性糖(μg/g)=(C×V1/V2)/W

式中：C——從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得葡萄糖量，μg。

V1——樣品提取液總體積，ml。

V2——顯色時(shí)取樣品液量，ml。

W——樣品重（g）。29PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖四、結(jié)果計(jì)算29PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】1、本法測(cè)定的可溶性糖包含哪些種類(lèi)？提高試驗(yàn)精確度要注意那些步驟？30PPT課件實(shí)驗(yàn)五蒽酮法測(cè)定可溶性糖【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】30PPT課件實(shí)驗(yàn)六丙二醛（MDA）的測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹渴煜y(cè)定MDA的常用方法；【實(shí)驗(yàn)原理】植物遭遇逆境，丙二醛含量升高；丙二醛與硫代巴比妥酸（TBA）在酸性和高溫條件下呈紅色，在532nm處有吸收峰；加入低濃度的Fe3+，增加450nm的糖吸收；提取液C糖/（mmol/L）=11.71OD450提取液C醛/（μmol/L）=6.45OD532-0.560OD450

TBA與可溶性糖同樣能反應(yīng)，在450nm處有吸收峰；31PPT課件實(shí)驗(yàn)六丙二醛（MDA）的測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹渴煜y(cè)定MDA的常實(shí)驗(yàn)六丙二醛（MDA）的測(cè)定實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟】MDA提?。喝∪~片1g，盡量剪碎，然后加入少量石英砂，2ml三氯乙酸（準(zhǔn)確）；研