【公開課】土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)（課件）

探究·實踐土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)思考討論——選擇培養(yǎng)基配方的設計尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化學性質(zhì)相對穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)生中一種重要的氮肥。尿素施入土壤后，會被土壤中的某些細菌分解為NH3，NH3再轉(zhuǎn)化為NO3-、NH4+等被植物吸收。而這些細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成脲酶，脲酶催化尿素分解產(chǎn)生NH3，NH3可作為細菌生長的氮源。討論1．如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來，培養(yǎng)基的配方該如何設計？2．該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點和不同點？注：本課件設計思路取自劉永生老師課件討論1：如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來，培養(yǎng)基的配方該如何設計？

設計一種選擇培養(yǎng)基,用尿素作為唯一氮源,可以將分解尿素的細菌分離出來。討論2：該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點和不同點？這種培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基相比，只是用尿素作為唯一氮源，培養(yǎng)基的其他營養(yǎng)成分基本相同。培養(yǎng)基一培養(yǎng)基二1.從物理性質(zhì)來講，兩者屬于_____培養(yǎng)基，判斷依據(jù)是_______________；該類培養(yǎng)基的主要用途為_____________________。2.從目的用途上來講，

屬于選擇培養(yǎng)基，目的是為了獲得

。3.兩種培養(yǎng)基共有的培養(yǎng)基成分有：

。固體添加了凝固劑瓊脂分離、鑒定、計數(shù)、保存培養(yǎng)基二能分解尿素的微生物碳源、氮源、無機鹽、水思考：僅通過選擇培養(yǎng)基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的細菌嗎？提出問題土壤中含有能分解尿素的細菌，我們?nèi)绾畏蛛x它們？每克土壤樣品究竟含有多少這樣的細菌？基礎知識只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離處分解尿素的細菌。土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)探究·實踐土壤取樣細菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長，絕大多數(shù)分布在距地表3～8cm的土壤層。因此，取樣時，一般要鏟去表層土。你打算在什么樣的土壤中取樣？樣品稀釋測定土壤中細菌的數(shù)量，一般需要1×104、1×105和1×106倍稀釋進行平板培養(yǎng)。第一次做實驗適當放寬，以保證能選取菌落數(shù)為30～300之間的平板。接種涂布平板的方法進行接種。設置對照。培養(yǎng)30～37℃培養(yǎng)1～2d，每隔24h菌落計數(shù)一次，選擇菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果觀察相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物會表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。觀察你分離得到的菌落，記錄菌落特征（如形狀、大小和顏色等）設計實驗防止培養(yǎng)時間不足導致的菌落遺漏。土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)探究·實踐進一步實驗對分離的菌株進行生化鑒定。若取土樣5g，稀釋1×105倍，取0.1mL稀釋液涂布在三個平板上，培養(yǎng)后三個平板上的菌落數(shù)依次為46、47、54。求每克土樣中有多少分解尿素的細菌。解：三個平板上的菌落數(shù)平均值=（46＋47＋54）個/3=49個；1×105倍稀釋后稀釋液中的種群密度=49個÷0.1mL=490/mL；因為已經(jīng)高倍稀釋，所以稀釋液1mL≈1g，因此稀釋液中種群密度可記作490個/g；未稀釋前菌液的種群密度=490個/g×105=4.9×107個/g土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)探究·實踐到社會中去活菌計數(shù)廣泛應用于食品衛(wèi)生、水源污染度的檢驗和土壤含菌量的測定等方面。如果你感興趣，可以從下列項目中選做一個，并走訪相關部門或企業(yè)，了解它們是如何進行檢測的。1．空氣中微生物總數(shù)的檢測2．水中細菌總數(shù)的檢測3