高效液相色譜法測(cè)定對(duì)氨基苯磺酸

高效液相色譜法測(cè)定對(duì)氨基苯磺酸

0酰胺類化合物氨基苯磺酸是一種重要的磺酸，用于紡織印花材料、農(nóng)藥、染料等領(lǐng)域。由于氨基苯磺酸分子中含有苯環(huán)、氨基和磺酸基，因此具有良好的透水性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，并且可以在自然環(huán)境中長(zhǎng)期穩(wěn)定。然而，丙烯酸是危害動(dòng)植物健康的環(huán)境污染物。根據(jù)研究，氨基苯磺酸可進(jìn)入鏈狀酶體，并逐漸積聚，在神經(jīng)組織和血液中積聚血液，從而干擾身體的正常新陳代謝。酰胺類化合物大部分在水體中很難降解,用一般的絮凝、萃取和吸附等物理法難以徹底從環(huán)境中去除,化學(xué)氧化法可高效降解這類有機(jī)物,但會(huì)形成二次污染,而且在工業(yè)污水處理中成本較高1實(shí)驗(yàn)部分1.1培養(yǎng)底物溶液(1)CPO的培養(yǎng)和濃度測(cè)定:CPO由本實(shí)驗(yàn)室根據(jù)Hager等人的方法進(jìn)行培養(yǎng)(2)底物溶液的配置:準(zhǔn)確稱取0.26180g對(duì)氨基苯磺酸定容于500mL的容量瓶中,配置成初始濃度為3mmol·L1.2高效液相色譜法不同濃度的底物標(biāo)準(zhǔn)溶液溶于甲醇中,經(jīng)過(guò)0.22μm的有機(jī)相過(guò)濾膜過(guò)濾后用高效液相色譜(HPLC)分析濃度.色譜柱為C18反相色譜柱,內(nèi)徑4.6mm,柱長(zhǎng)250mm.檢測(cè)條件:對(duì)氨基苯磺酸的檢測(cè)波長(zhǎng)λ為249nm;流動(dòng)相為甲醇∶水=50∶50(V/V);流速v為0.4mL·min1.3cpo促進(jìn)固結(jié)物分解磷酸緩沖液中加入適量底物和0.4μmol·L式(1)中:C1.4綠藻生長(zhǎng)率和抑制率的測(cè)定CPO催化酰胺類環(huán)境污染物的降解方法的安全性評(píng)估主要通過(guò)降解前后的物質(zhì)對(duì)單細(xì)胞綠藻(中國(guó)科學(xué)院淡水藻種庫(kù)提供)生長(zhǎng)的影響來(lái)衡量綠藻實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程如下:將被CPO催化降解后的液體按一定比例與培養(yǎng)基液混合,隨后將綠藻種加入,混合溶液放置于錐形瓶中,在2000lux光照下,無(wú)菌培養(yǎng)72h.用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)綠藻在680nm下的吸光度,根據(jù)公式(2)計(jì)算其平均生長(zhǎng)率μ,根據(jù)公式(3)計(jì)算抑制率i:式(2)、(3)中:OD以加入的濃度對(duì)抑制率作圖,使得各個(gè)圖的線性相關(guān)系數(shù)r>0.99,根據(jù)得到的線性方程計(jì)算抑制率為50%時(shí)的濃度,即EC1.5初始濃度的確定配置人工模擬廢水,組成如下:葡萄糖12g·L準(zhǔn)確稱取對(duì)氨基苯磺酸0.26180g,用人工模擬廢水作為溶劑定容于500ml的容量瓶中,配置成對(duì)氨基苯磺酸初始濃度為3mmol·L2結(jié)果與討論2.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線的構(gòu)建對(duì)氨基苯磺酸溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示.在初始濃度為100~800μmol·L2.2介質(zhì)ph值對(duì)降解對(duì)氨基苯磺酸酶的影響CPO對(duì)環(huán)境的酸堿度較為敏感,當(dāng)介質(zhì)pH值超出其耐受范圍時(shí),酶的活性降低,當(dāng)pH>7或<2時(shí)甚至?xí)姑甘Щ?本文討論介質(zhì)pH值在2~6范圍內(nèi)CPO催化對(duì)氨基苯磺酸降解的趨勢(shì).反應(yīng)體系介質(zhì)的pH值是指配置溶液所用到緩沖液的pH,即溶液在未加入底物之前的原始pH值.在底物濃度不變、H2.3H大量研究已證實(shí),H本實(shí)驗(yàn)中H2.4cpo濃度對(duì)基本結(jié)合質(zhì)量的影響在H2.5反應(yīng)時(shí)間對(duì)基本物質(zhì)分解率的影響選取CPO濃度為0.4μmol·L2.6對(duì)氨基苯磺酸iii降解在最佳反應(yīng)條件下,即CPO的濃度為0.4μmol·L圖6和表1列出了對(duì)氨基苯磺酸降解后的中間產(chǎn)物和最終產(chǎn)物的主要分子片段,從中可以看出對(duì)氨基苯磺酸可能通過(guò)兩種方式來(lái)降解.一種是:對(duì)氨基苯磺酸去除掉硫酸根生成中間產(chǎn)物[a],進(jìn)一步降解生成產(chǎn)物II(4-nitrosophenol),其分子量為123,[2II+H]2.7氯氧化酶氧化分解法的安全性毒性評(píng)估采用綠藻的EC2.8氯過(guò)氧化物酶對(duì)氨基苯磺酸的降解率為探究CPO酶促降解體系在工業(yè)廢水中應(yīng)用的可行性,本文進(jìn)一步將酶促降解體系應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室配置的人工模擬廢水中.在對(duì)氨基苯磺酸最佳降解率的條件下(CPO的濃度為0.4μmol·L通過(guò)三組平行實(shí)驗(yàn),取平均值計(jì)算,結(jié)果表明:對(duì)氨基苯磺酸的降解率是57.23%.分析