植物體內(nèi)游離脯氨酸的測定課件

植物體內(nèi)游離脯氨酸含量的測定實驗?zāi)康模褐参矬w內(nèi)脯氨酸含量在一定程度上反映了植株體內(nèi)的水分狀況，本次實驗?zāi)康氖橇私庵参矬w內(nèi)水分虧缺與脯氨酸積累的關(guān)系。植物體內(nèi)游離脯氨酸含量的測定實驗?zāi)康模?

植物在正常條件下，游離脯氨酸含量很低，但遇到干旱、低溫、鹽堿等逆境時，游離脯氨酸便會大量積累，并且積累指數(shù)與植物的抗逆性有關(guān)。因此，脯氨酸可作為植物抗逆性的一項生化指標(biāo)。植物在正常條件下，游離脯氨酸含量很低，但遇到干旱、低2原理

采用磺基水楊酸提取植物體內(nèi)的游離脯氨酸，不僅大大減小了其他氨基酸的干擾，快速簡便，而且不受樣品狀態(tài)（干或鮮樣）限制。在酸性條件下，脯氨酸與茚三酮反應(yīng)生成穩(wěn)定的紅色縮合物，用甲苯萃取后，此縮合物在波長520nm處有一最大吸收峰。脯氨酸濃度的高低在一定范圍內(nèi)與其消光度成正比。原理采用磺基水楊酸提取植物體內(nèi)的游離脯氨酸，不僅大大減3方法1．標(biāo)準(zhǔn)曲線制作表1各試管中試劑加入量管號0123456標(biāo)準(zhǔn)脯氨酸量(ml)H2O(ml)冰乙酸(ml)顯色液(ml)脯氨酸含量(μg)022300.21.82320.41.62340.81.22381.20.823121.60.423162.002320方法1．標(biāo)準(zhǔn)曲線制作表1各試管中試劑加入量管號4（1）取7支具塞刻度試管按表1加入各試劑?；靹蚝蠹硬Ａ蛉?，在沸水中加熱40min。（2）取出冷卻后向各管加入5ml甲苯充分振蕩，以萃取紅色物質(zhì)。靜置待分層后吸取甲苯層以“0”管為對照在波長520nm下比色。（3）以消光值為縱坐標(biāo)，脯氨酸含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求線性回歸方程。（1）取7支具塞刻度試管按表1加入各試劑?；靹蚝蠹硬Ａ蛉?，52．樣品測定（1）脯氨酸提取取不同處理的剪碎混勻小麥葉片0.2～0.5g（干樣根據(jù)水分含量酌減），分別置于大試管中，加入5ml3%磺基水楊酸溶液，管口加蓋玻璃球，于沸水浴中浸提10min。（2）取出試管待冷卻至室溫后，吸取上清液2ml，加2ml冰乙酸和3ml顯色液，于沸水浴中加熱40min，下一步操作按標(biāo)準(zhǔn)曲線制做方法進(jìn)行甲苯萃取和比色。2．樣品測定（1）脯氨酸提取取不同處理的剪碎混勻小麥葉片6脯氨酸（μg/gFW或DW）=（3）結(jié)果計算：從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出測定液中脯氨酸濃度，按下式計算樣品中脯氨酸含量的百分?jǐn)?shù)。式中C—提取液中脯氨酸濃度（μg），由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得；V—提取液總體積（ml）；a—測定時所吸取的體積（ml）；W—樣品重（g）。（3）結(jié)果計算：從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出測定液中脯氨酸濃度，按下式計7思考題

1.植物體內(nèi)游離脯氨酸測定有何意義？2.當(dāng)改變萃取劑