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文檔簡介
分泌澀柿單寧酶的微生物篩選及其酶特性的研究的任務書一、研究背景與意義澀柿單寧是柿子的主要有機酸,具有較強的收斂性,對人體具有一定的止瀉、止血、防齲和降血糖等功效。然而,柿子青果中含有大量的澀味物質,難以消化,極易引起腹瀉等消化不良癥狀。因此,如果能尋找到一種天然的酶制劑,能夠針對柿子中的澀味物質,將其分解為無味的物質,就能解決柿子青果的澀味問題,同時還能充分利用柿子的營養(yǎng)價值,從而達到保健和食品加工利用的目的。目前,對于柿子的澀味主要是通過加熟或者晾曬等方法去除,這種方法存在很多弊端,例如加熱或曬干后,會使柿子中的營養(yǎng)物質流失,同時,也會改變柿子原有的口感和香味。因此,尋找一種高效、環(huán)保、安全的澀柿單寧酶制劑,成為當前柿子加工和生產中的一項重要的研究課題。二、研究內容和方案本研究擬采用篩選微生物庫中的細菌、酵母和真菌等微生物,尋找到分泌澀柿單寧酶的菌株,并對其酶特性進行研究。具體研究內容和方案如下:1.構建微生物庫:采集不同環(huán)境的微生物樣本,分離、純化并保存,構建微生物庫。2.篩選澀柿單寧酶分泌微生物:將構建的微生物庫進行澀柿單寧酶分泌菌株篩選,采用高效澀柿單寧染料法進行篩選,減少假陽性和假陰性概率,最終選出高效分泌澀柿單寧酶的微生物。3.酶特性研究:對所篩選的澀柿單寧酶分泌微生物的酶特性進行研究,包括酶的最適溫度、最適pH、熱穩(wěn)定性、儲存穩(wěn)定性和親和力等方面的測試,以期得出酶的性質特點,并確定其最佳反應條件。4.酶的應用研究:利用所篩選出的澀柿單寧酶分泌微生物,研究在不同條件下對柿子青果中澀味物質的分解效果,同時也可進行在食品加工中的應用,檢測酶對柿子加工中的澀味問題的解決效果。三、研究方法1.構建微生物庫:采取分離純化、初篩鑒定、遴選優(yōu)良和保存儲存的策略。2.篩選澀柿單寧酶分泌微生物:采用高效澀柿單寧染料法進行篩選,進行篩選過程中在培養(yǎng)基中加入柿子果肉提取物用以誘導篩選微生物分泌澀柿單寧酶。對篩選到的菌株進行初步分離鑒定,并用柿子青果為底物進行澀味相關物質的分解實驗。3.酶特性研究:對所篩選出的澀柿單寧酶分泌微生物進行亮蛋白酶膠體電泳分析,測定最適溫度、最適pH、熱穩(wěn)定性、儲存穩(wěn)定性,以及親和力等因素。4.酶的應用研究:使用篩選到的澀柿單寧酶分泌微生物對柿子青果中的澀味相關物質進行分解實驗,觀察其分解效果。同時在食品加工過程中應用澀柿單寧酶,以解決澀味問題。四、研究時間安排本研究計劃時間為3年,具體安排如下:第一年:建立微生物庫,篩選澀柿單寧酶分泌微生物,初步酶特性研究。第二年:深入研究澀柿單寧酶分泌微生物的酶特性,優(yōu)化酶反應條件。第三年:進行澀柿單寧酶在食品加工中的應用研究,總結研究成果,完成論文撰寫及答辯。五、研究經費及設備本研究預計需要80萬元左右的經費,包括實驗
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