色譜技術(shù)講座專業(yè)知識(shí)講座

氣相色譜（GC）氣質(zhì)聯(lián)用（GC/MS）液相色譜（LC）1不要忘了他220世紀(jì)70年代高效液相色譜出現(xiàn)1906色譜法發(fā)明20世紀(jì)50年代氣相色譜出現(xiàn)并廣泛使用氣相色譜20%液相色譜80%3分享ACCSI2010之“色譜發(fā)展論壇”未來幾年，色譜發(fā)展的熱點(diǎn)

便攜化專用化前處理技術(shù)多樣化多維色譜超高效色譜聯(lián)用技術(shù)色譜-質(zhì)譜

色譜-原子光譜快速液相PK常規(guī)液相

國(guó)產(chǎn)色譜的春天是否到來4氣相色譜

GC5氣相色譜儀組成氣源系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)6氣源系統(tǒng)1、氣源：鋼瓶／發(fā)生器鋼瓶氣體發(fā)生器優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)種類齊全價(jià)格較貴對(duì)安裝、環(huán)境無苛刻要求純度不高壓力穩(wěn)定安全措施操作方便注意后期維護(hù)純度較高（99.999%）安全7氣源選擇根據(jù)色譜柱類型選擇毛細(xì)管柱：建議選用鋼瓶氣填充柱：均可根據(jù)檢測(cè)器種類選擇氣體種類檢測(cè)器TCDFIDECDFPDNPDMS載氣H2或HeN2

N2N2N2H2或He燃?xì)釮2H2H2助燃?xì)饪諝饪諝饪諝?2、氣路控制系統(tǒng)（減壓閥、流量調(diào)節(jié)器）無污染無泄漏入氣口出氣口針閥波紋管彈簧手柄穩(wěn)壓閥9進(jìn)樣系統(tǒng)

作用：定量引入樣品；加熱氣化組成：進(jìn)樣器、進(jìn)樣口、汽化室1、進(jìn)樣器

氣體進(jìn)樣（六通閥）液體進(jìn)樣載氣載氣載氣載氣樣品氣樣品氣樣品氣樣品氣載氣載氣10手動(dòng)進(jìn)樣應(yīng)注意的問題

選用合適的注射器，用10ul進(jìn)樣器進(jìn)樣量不要小于1ul。

清洗進(jìn)樣針、避免樣品間互相干擾吸樣品時(shí)采用快推慢拉的技術(shù)取樣準(zhǔn)確，重現(xiàn)取樣后可用濾紙拭去針尖外面的殘留樣品，但要注意不要吸去針內(nèi)樣品。減少注射針尖歧視：注射速度快、每次進(jìn)樣速度盡量一致。112、進(jìn)樣口種類：填充柱進(jìn)樣口

毛細(xì)柱進(jìn)樣口涉及耗材：進(jìn)樣隔墊3、氣化室

(<350℃，死體積小，惰性）涉及耗材：襯管潔凈無破損的襯管是重現(xiàn)性和準(zhǔn)確定量的基本前提12襯管故障排除襯管污染常會(huì)引起譜圖不佳.故障癥狀包括:

峰形不佳

基線無規(guī)律

分辨率不佳

響應(yīng)不佳及時(shí)更換襯管或填充物13消除渦流擴(kuò)散、減小譜帶展寬分離系統(tǒng)14常用固定相與相應(yīng)色譜柱15一堆填充柱=3支毛細(xì)管柱

3支毛細(xì)管柱分析>90%以上的GC樣品1支弱極性(例：SE-30、SE-52、DB-1或DB-5)1支中等極性(例：OV-17、OV1701、DB-17或DB-624)1支強(qiáng)極性(例：PEG-20M、DB-Wax或HP-Innowax)另加：1支PLOT

色譜柱（分析永久氣體和輕烴）四支色譜柱可分析幾乎所有GC樣品1630mx0.25mm,0.25μm色譜柱柱長(zhǎng)色譜柱內(nèi)徑鍵合相膜厚色譜柱柱長(zhǎng)：柱長(zhǎng)越長(zhǎng),保留越長(zhǎng),分離度越好,柱效越高色譜柱內(nèi)徑：內(nèi)徑越小,保留越小,分離度越好,柱效越高鍵合相膜厚：df待測(cè)物k<5時(shí)Rdf待測(cè)物k>5時(shí)R17如何選擇呢？“相似相溶原則”---即待測(cè)組份與固定相極性匹配原則2.通常用30m長(zhǎng)的色譜柱,盡量用合適長(zhǎng)度的色譜柱,色譜柱越長(zhǎng)意味著分析時(shí)間越長(zhǎng)和費(fèi)用越高3.首先考慮0.25mm或0.32mm內(nèi)徑的色譜柱,再根據(jù)樣品情況決定選用更粗或更細(xì)內(nèi)徑的色譜柱4.首先考慮0.25um膜厚,再根據(jù)樣品的揮發(fā)性選擇更厚或更薄的液膜18檢測(cè)組分的存在，并將組分的量定量地轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，加以放大。檢測(cè)系統(tǒng)通用型檢測(cè)器（UniversalDetector)熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）氫火焰檢測(cè)器（FID）

質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）選擇性檢測(cè)器電子捕獲（ECD）火焰光度檢測(cè)器（FPD）氮磷檢測(cè)器（NPD)1920需要注意的事項(xiàng)TCD

1、H2為最佳的載氣；

2、盡量避免對(duì)腐蝕性氣體的分析FID1、正確設(shè)置H2、空氣和尾吹氣的流量

H2與載氣（或載氣＋尾吹氣）的流速一般為1:1。

空氣一般為氫氣的10倍。

2、檢測(cè)器溫度應(yīng)比柱溫箱設(shè)定的最高溫度高30

C，且大于150

C以防止水凝結(jié)在檢測(cè)器上；

3、當(dāng)色譜柱拆下或不使用檢測(cè)器時(shí)，一點(diǎn)要關(guān)閉氫氣。以防止氫氣積累。21GC1100氣相色譜儀龐增義高級(jí)工程師總策劃、配以多年經(jīng)驗(yàn)的工程師全力打造。22可提供國(guó)內(nèi)最好的氣源可提供種類齊全的色譜柱可同時(shí)安裝兩套填充柱進(jìn)樣系統(tǒng)和一套分流/不分流毛細(xì)管進(jìn)樣系統(tǒng)?？赏瑫r(shí)接兩個(gè)FID檢測(cè)器和一個(gè)TCD熱導(dǎo)檢測(cè)器，另外還可以選擇NPD和FPD檢測(cè)器?？蓴U(kuò)展多種輔助進(jìn)樣器，兼容性強(qiáng)。GC1100氣相色譜儀性能特點(diǎn)裂解進(jìn)樣器頂空進(jìn)樣器熱解吸儀23良好的性價(jià)比

TCDS≥6000mv．ml/mg

FIDDt≤8×10-12g/sFPD

Dt≤8×10-11g/s（S）Dt≤8×10-13g/s（P）NPDDt≤5×10-13g/s（N）Dt≤5×10-14g/s（P）儀器穩(wěn)定、保護(hù)性好、故障率低。售后服務(wù)與技術(shù)支持GC1100氣相色譜儀性能特點(diǎn)24

該如何老化色譜柱？眾說紛紜,有人說不必老化,有人說必須過夜老化,有人認(rèn)為老化色譜柱時(shí)升溫速率必須較慢?究竟該如何老化？ 解答:

安裝色譜柱后,首先用至少3倍于平常工作流速的載氣吹色譜柱,然后將載氣流速調(diào)整到正常流速.開始從低溫迅速升溫到老化溫度,老化色譜柱。

老化溫度---在高于樣品分析終溫20度但不超過色譜柱的恒溫溫度上限的狀態(tài)下,恒溫2小時(shí)的方法快速老化一支新的毛細(xì)管色譜柱,色譜柱老化時(shí)的升溫速率沒有限制,可以使用最高升溫速率老化色譜柱.如果樣品分析的終溫一旦超過色譜柱恒溫溫度上限,必須在比首次老化溫度更高的溫度下重新老化色譜柱,但不能超過色譜柱的程序升溫上限.

老化時(shí)間——可依據(jù)應(yīng)用分析的需要,并且取決于操作者可接受的流失程度.所需要的檢測(cè)限越低,色譜柱需要的老化時(shí)間就越長(zhǎng).極性和厚膜色譜柱流失較多和需要較徹底的老化.對(duì)于絕大多數(shù)應(yīng)用,2小時(shí)的老化時(shí)間已經(jīng)足夠.故障排除與維護(hù)---老化色譜柱切勿過夜老化色譜柱25 色譜柱低于使用溫度下限使用,色譜柱的性能表現(xiàn)會(huì)不理想,會(huì)得到饅頭峰與寬峰(例：柱效損失),但色譜柱并不會(huì)因此而受損.在高于色譜柱使用溫度下限的情況下使用,可獲得較好的色譜峰峰形. 色譜柱使用溫度上限的表達(dá)方式例如：325/3500C .注意色譜柱使用溫度下限和上限恒溫溫度上限可無限期在此溫度下使用程序升溫溫度上限不可長(zhǎng)期在此溫度下使用26注意色譜柱的日常維護(hù)玻璃填充柱不易經(jīng)常拆卸其他填充柱長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)，拆下來保存，請(qǐng)一定要將柱的兩端封住27 真正的色譜柱流失的來源只應(yīng)該是色譜柱.用戶所觀察到的流失實(shí)際上是到達(dá)檢測(cè)器的所有信號(hào)的總和,包含了以下來源：進(jìn)樣口隔墊,進(jìn)樣口和檢測(cè)器,但有可能將以上所有來源全都錯(cuò)誤的歸結(jié)為色譜柱流失. 判斷流失是否正常的最好方法是檢查檢測(cè)器.斷開,并取下色譜柱,用堵頭封住檢測(cè)器入口.打開檢測(cè)器,紀(jì)錄50度時(shí)的信號(hào)值.柱箱升溫到320度,記錄信號(hào)值.干凈的檢測(cè)器上FID信號(hào)將增加1至2個(gè)pA.如果信號(hào)增加值和超過2個(gè)pA,應(yīng)該立即考慮清洗檢測(cè)器,尾吹氣和氫氣管線. 一旦檢測(cè)器信號(hào)在320度落回到可接受的水平,考慮進(jìn)樣口的問題.如果目測(cè)進(jìn)樣口襯管,發(fā)現(xiàn)有明顯的污染,將進(jìn)樣口冷卻下來,拆開進(jìn)樣口,用溶劑擦洗進(jìn)樣口內(nèi)腔.更換新的襯管后,重新安裝上進(jìn)樣口,用一段“跳接管”(1至3米的未涂敷的熔融硅膠或不銹鋼色譜柱管)將進(jìn)樣口與檢測(cè)器直接相連.進(jìn)樣口升溫,柱箱升溫到320度.此時(shí)只接了檢測(cè)器時(shí)任何“流失”信號(hào)增加值均來源于儀器的前端例如：進(jìn)樣口隔墊,載氣氣路,在線調(diào)節(jié)器,閥或流速控制器. 用鋁箔將一個(gè)新的隔墊包起來,光滑面向下.如果從"跳接管"的信號(hào)過來的信號(hào)降低了,表明需要使用質(zhì)量更好的隔墊.如果信號(hào)仍然很高,載氣中可能有物質(zhì)沉積在管線,閥或調(diào)節(jié)器中,這些部件需要拆開清洗或更換.如何判斷是否是色譜柱流失？

28可用以下方法來檢查故障將GC恒溫于40-50度至少8小時(shí).不進(jìn)樣運(yùn)行空白程序分析(啟動(dòng)GC,但不進(jìn)樣),使用正常的溫度條件和儀器設(shè)置.保存第一張譜圖.立即重復(fù)上述空白程序,間隔最多不超過5分鐘.將第二張譜圖與第一張譜圖做對(duì)比.如果兩張譜圖上色譜峰均較少并且或基線漂移也小,則表明載氣和/或進(jìn)樣口相對(duì)比較干凈.如果第一張譜圖上有大量的色譜峰并且基線不穩(wěn),則表明污染部位位于毛細(xì)管色譜柱上游(例：進(jìn)樣口或載氣已被污染).如果兩張譜圖上噪音較高并且/或發(fā)生基線漂移,則表明檢測(cè)器或檢測(cè)器氣路已被污染.如果懷疑進(jìn)樣口或載氣被污染該如何檢查?29

系統(tǒng)污染導(dǎo)致大多數(shù)的鬼峰或交叉污染問題.

如果額外的鬼峰峰寬與樣品色譜峰相近(保留時(shí)間也相近),污染物最有可能是與樣品同時(shí)進(jìn)入色譜柱.額外組分的可能來源是進(jìn)樣器或樣品本身.溶劑,樣品瓶,瓶蓋和進(jìn)樣針中的雜質(zhì)也是可能的其他來源.分別進(jìn)樣分析樣品和空白溶劑可以找到污染物來源.如果鬼峰比樣品色譜峰寬許多,則早在樣品進(jìn)入色譜柱之前,污染物已經(jīng)存在于色譜柱中.上一次樣品運(yùn)行被中斷后,上述組份殘留在色譜柱中.在樣品運(yùn)行的后期流出色譜柱,且峰形較寬.有時(shí),多次進(jìn)樣疊加后形成多個(gè)鬼峰或以駝峰形式流出,并伴隨有基線漂移.升高終溫或延長(zhǎng)程序升溫時(shí)間可減少或消除鬼峰.另外,每次或幾次樣品分析后,進(jìn)行一次短時(shí)間的色譜柱烘烤可以消除色譜柱上的強(qiáng)保留化合物,避免導(dǎo)致不良后果.利用前面介紹的方法可判定是否是由于進(jìn)樣口被污染而導(dǎo)的交叉污染或鬼峰.判斷鬼峰或交叉污染的來源

30故障排除與維護(hù)---基線不穩(wěn)、噪音過大31故障排除與維護(hù)---色譜峰拖尾32故障排除與維護(hù)---峰分叉33故障排除與維護(hù)---色譜峰大小發(fā)生變化34故障排除與維護(hù)---保留時(shí)間變化35氣質(zhì)聯(lián)用

GC/MS36M6GC/MSMSMassSpectrometerGCGasChromatograph37集兩者優(yōu)點(diǎn)于一身色質(zhì)為何要聯(lián)用？色譜的作用：分離樣品各組分

利用組分在兩相間分配系數(shù)不同而進(jìn)行分離的技術(shù)。質(zhì)譜的作用：產(chǎn)生關(guān)于純組分的定性信息一桿特殊的稱：稱量離子的質(zhì)量（m/z）。利用帶電離子在電場(chǎng)或磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)行為不同進(jìn)行分離38兩者結(jié)合可以產(chǎn)生一個(gè)譜圖同時(shí)給出定性,定量信息3D39離子源質(zhì)量分析器檢測(cè)器GC工作站真空系統(tǒng)電子設(shè)備GC/MS的組成40GC載氣He：99.999%柱溫箱色譜柱（毛細(xì)管柱）進(jìn)樣：分流/不分流進(jìn)樣口檢測(cè)器41離子源——EI、CI什么是離子：帶電的原子或分子4243電子電離源EI（Electronionization）化學(xué)電離源CI（Chemicalionization）操作易，效率高，穩(wěn)定可靠，譜圖具有特征性、重現(xiàn)性好，可譜庫(kù)檢索碎片離子多、可提供豐富的結(jié)構(gòu)信息，但對(duì)有些不穩(wěn)定化合物得不到分子離子。需要反應(yīng)氣、不易控制質(zhì)譜不穩(wěn)定，重復(fù)性差，不能進(jìn)行譜庫(kù)檢索碎片少

有利于測(cè)定分子量產(chǎn)生準(zhǔn)分子離子（M+1）44CI譜EI譜譜圖比較45四極桿質(zhì)量分析器

四極桿質(zhì)量過濾器的穩(wěn)定性圖46圓桿

雙曲桿PK理想的選擇47預(yù)四極的作用

降低主四極桿污染，避免對(duì)四極桿清洗維護(hù)。加有隨掃描質(zhì)量變化的電壓，可改善邊緣場(chǎng)，提高離子入射效率，獲得更好的檢測(cè)靈敏度。48四極桿&離子阱離子阱的操作不易，對(duì)操作人員的要求很高離子阱沒有通用譜庫(kù)，實(shí)用性不強(qiáng)供應(yīng)商少、價(jià)格貴四極桿特性離子阱特性49檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)器電子倍增器小信號(hào)放大器（均自己研發(fā)）檢測(cè)系統(tǒng)50提供無碰撞的離子軌道，擁有足夠的平均自由程減少離子-分子反應(yīng)減少背景干擾、增加靈敏度增加分辨延長(zhǎng)燈絲壽命消除放電質(zhì)譜儀需要在高真空下工作（10-4-10-10Torr，視質(zhì)譜儀的不同種類而不同）四極桿質(zhì)譜：10-6-10-7

Torr

（10-4-10-5

Pa）為什么MS需要真空？真空系統(tǒng)51真空系統(tǒng)的組成前級(jí)真空泵（機(jī)械泵）使真空達(dá)到10-1~10-2Pa后級(jí)真空泵（渦輪分子泵或油擴(kuò)散泵）使真空達(dá)到質(zhì)譜分析要求真空計(jì)（真空規(guī)）

監(jiān)測(cè)系統(tǒng)真空度52GC/MS重要性能指標(biāo)氣相色譜性能要求進(jìn)樣系統(tǒng)：有較高的氣化溫度并能精確控制；精確控制載氣壓力和流量，自動(dòng)化。柱系統(tǒng)：柱溫箱有較寬的溫度范圍、控溫精度高；有一定的程序升溫階數(shù)，升降溫速率快。柱子柱效高、流失小。53質(zhì)量范圍分辨率靈敏度質(zhì)量穩(wěn)定性質(zhì)譜性能指標(biāo)掃描速度54定義為質(zhì)譜儀能檢測(cè)的最低和最高質(zhì)量，單位為u。質(zhì)量范圍主要與質(zhì)量分析器有關(guān)。是儀器檔次的標(biāo)志之一四級(jí)桿分析的質(zhì)量上線在1000左右。通常氣相色譜測(cè)定樣品為低沸點(diǎn)有機(jī)化合物，其相對(duì)分子質(zhì)量大多數(shù)小于500u，而JJF1164-2006臺(tái)式氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范中規(guī)定的質(zhì)量數(shù)不低于600u。故氣質(zhì)聯(lián)用儀器高端質(zhì)量數(shù)范圍對(duì)用戶來說差別不大。質(zhì)量范圍55指在一定條件下，一定時(shí)間內(nèi)質(zhì)量標(biāo)尺發(fā)生漂移的幅度，一般多以8h和12h內(nèi)某一質(zhì)量測(cè)定值的變化來表示。目前商品化儀器均以48h來度量關(guān)系到質(zhì)量測(cè)量的準(zhǔn)確度，會(huì)隨著儀器狀態(tài)和操作條件變化而變化，需要定期校正。質(zhì)量穩(wěn)定性56指質(zhì)譜分辨相鄰兩個(gè)離子質(zhì)量的能力。四極桿質(zhì)譜屬于低分辨儀器，一般能分開質(zhì)荷比相差1的兩個(gè)帶電離子，即通常所謂單位質(zhì)量分辨。取決于質(zhì)量分析器分辨率57指質(zhì)譜進(jìn)行質(zhì)量掃描的速度，定義為每秒鐘掃描的最大質(zhì)量數(shù)。主要取決于質(zhì)量分析器性能以及計(jì)算機(jī)的運(yùn)算速度、接口的信號(hào)轉(zhuǎn)換速率。單位是u/s掃描速度影響單位時(shí)間內(nèi)質(zhì)譜的數(shù)據(jù)采集數(shù)量。掃描速度慢，色譜峰形會(huì)因?yàn)椴蓸狱c(diǎn)數(shù)不夠而峰形變壞。從而降低定量的準(zhǔn)確性。掃描速度58通常儀器靈敏度有絕對(duì)靈敏度和相對(duì)靈敏度之分。通常儀器廠家所給指標(biāo)指相對(duì)靈敏度，用S/N表征。決定信噪比的因素：

靈敏度信號(hào)強(qiáng)度取決于：

1到達(dá)離子源中樣品的量

2離子化的效率

3離子從離子源通過透鏡和四極桿的傳輸效率噪音的來源：

1電信號(hào)的噪音。

2化學(xué)背景干擾，比如，進(jìn)樣口和離子源區(qū)域的污染、色譜柱的流動(dòng)相，真空腔體的機(jī)械部件等。

3樣品和樣品瓶以及進(jìn)樣針的污染。

4真空腔體內(nèi)機(jī)械部件的殘余氣體，以及機(jī)械部件本身的干擾。其他影響因素：掃描方式、掃描速度、檢測(cè)器增益、進(jìn)樣方式等59普析通用精品展示M6單四極桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀60靈活的配置標(biāo)配可選：M6-60A型/M6-210A型主要器件選材精良

GC：采用Agilent7890A；

MS：配備高性能中外合資前級(jí)機(jī)械泵；德國(guó)PFEIFFER磁懸浮小型渦輪分子泵抽速60L/s；磁懸浮小型渦輪分子泵抽速210L/s

自己設(shè)計(jì)、國(guó)外加工的高精度金屬四極桿；美國(guó)Detech電子倍增器人性化GC/MS工作站豐富的可選附件

Agilent7693A自動(dòng)進(jìn)樣器、氣體進(jìn)樣裝置、頂空進(jìn)樣器、熱解析儀等色譜消耗品（襯管、進(jìn)樣隔墊、密封墊、石墨壓環(huán)、色譜柱等）質(zhì)譜消耗品（燈絲、泵油等）

61卓越的性能GC部分：進(jìn)樣口：分流/不分流毛細(xì)管柱進(jìn)樣口最高使用溫度：400℃壓力設(shè)定范圍：0-150psi；在0.000到99.999psi范圍內(nèi)，精度為±0.001psi；在100.00到150.00psi范圍內(nèi)，精度為±

0.01psi；總流量設(shè)定范圍：0-200ml/minN2；0-1000ml/minHe色譜柱箱：操作溫度：室溫以上4℃~450℃溫度設(shè)定值分辨率：1℃最大升溫速率：120℃/min最長(zhǎng)運(yùn)行時(shí)間：999.99分鐘程序升溫:20階梯，21平臺(tái)，可梯度降溫。溫度穩(wěn)定性:室溫每變化1℃柱溫變化＜0.0l℃降溫：450℃~50℃，＜4分鐘62加熱區(qū)：不包括柱箱的獨(dú)立加熱區(qū)：6個(gè)（兩個(gè)進(jìn)樣口，兩個(gè)檢測(cè)器，以及兩個(gè)輔助加熱區(qū)）輔助加熱區(qū)最高使用溫度：400℃電子氣路控制：多路電子流量控制，通道用于進(jìn)樣口、檢測(cè)器或輔助氣路以0.lpsi的增量調(diào)節(jié)壓力（精度）大氣壓力傳感器補(bǔ)償高度或環(huán)境的變化程序升壓/升流：3階具有多種電子流量控制操作模式——恒流、恒壓、程序升流、程序升壓、脈沖壓力。自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)：

16位7693A自動(dòng)進(jìn)樣器，可選配150位進(jìn)樣盤；自動(dòng)進(jìn)樣重復(fù)精度：＜1%進(jìn)樣量范圍：0.1~50ul進(jìn)樣量線性：≥99%卓越的性能63MS部分：氣質(zhì)接口:獨(dú)立控溫，100~350℃EI離子源:備有耐高溫長(zhǎng)效燈絲的高效電子轟擊源，采用完全惰性的材料制成離子化能量：10~100eV可調(diào)離子源溫度：獨(dú)立控溫，最高350°C，可調(diào)電子系統(tǒng)：高品質(zhì)的射頻電源，只需兩點(diǎn)即可完成全質(zhì)量范圍的質(zhì)量軸校正，保持全掃描模式下良好的線性。可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程控制和網(wǎng)絡(luò)化共享，極大方便操作。卓越的性能64指標(biāo)參數(shù):

質(zhì)量數(shù)范圍：1.5~1050u質(zhì)量準(zhǔn)確度：±0.1u質(zhì)量軸穩(wěn)定性:優(yōu)于±0.1u/48h分辨率：?jiǎn)挝毁|(zhì)量數(shù)分辨最大掃描速率：10,000u/s靈敏度（信噪比）：

全掃描（EI）：5pg八氟萘，信/噪比≥150︰1選擇離子檢測(cè)（EI）：500fg八氟萘，信/噪比≥150︰1

卓越的性能65日常維護(hù)硬件調(diào)諧

(每日)機(jī)械泵

(每

6個(gè)月)燈絲

(需要時(shí))檢漏

(需要時(shí)) GC檢漏真空檢漏

PFTBA(每

6個(gè)月)離子源(需要時(shí))66清洗離子源離子源污染后

:

重現(xiàn)性差

不能自動(dòng)調(diào)諧

調(diào)諧報(bào)告出現(xiàn)

靈敏度低

噪聲大

高質(zhì)量數(shù)強(qiáng)度降低

(M/Z512,614)

檢測(cè)器電壓增高67高效液相色譜

HPLC68數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)HPLC的系統(tǒng)組成數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)69輸液系統(tǒng)持續(xù)的液流平穩(wěn)的系統(tǒng)足夠的動(dòng)力高壓輸液泵7071并聯(lián)式雙柱塞泵串聯(lián)式雙柱塞泵雙柱塞泵72水/MeOH梯度鬼峰的出現(xiàn)溶劑：采用“HPLC”級(jí)及以上級(jí)別溶劑水的等級(jí)純化水蒸餾水去離子水流動(dòng)相的選擇73甲醇乙睛正己烷分析純級(jí)和HPLC級(jí)溶劑的吸光度比較圖溶劑等級(jí)74溶劑前處理過濾：0.45um或更小孔徑濾膜

目的：除去溶劑中的微小顆粒，避免堵塞色譜柱，尤其是使用無機(jī)鹽配制的緩沖液。過濾膜種類

水系過濾膜有機(jī)系過濾膜流動(dòng)相的過濾?75緩沖液的使用

使用前必須過濾使用后一定要進(jìn)行清洗，以免造成腐蝕、磨損、阻塞。具有在線清洗功能的儀器，使用該功能。

第二天接著用：用20%甲醇：80%水沖洗20-30分鐘隔幾天再用：用甲醇：水沖洗后，再用純甲醇沖洗易受到細(xì)菌和霉菌的影響不能直接用有機(jī)溶劑沖洗76溶劑前處理

脫氣

目的：除去流動(dòng)相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡

液相色譜流動(dòng)相脫氣使用較多的是離線超聲波振蕩脫氣、在線惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣。

流動(dòng)相的氣泡進(jìn)入液相泵會(huì)引起壓力的上下波動(dòng),打開排空閥處理.77

流動(dòng)相的配置？78流動(dòng)相的洗脫方式79等度洗脫輸液泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器單一或混合溶劑80梯度洗脫

A泵進(jìn)樣器色譜柱柱溫箱檢測(cè)器B泵AB時(shí)間B

濃度81分析時(shí)間長(zhǎng)分離度差

MeOH/H2O=4/6MeOH/H2O=8/2等度洗脫8295%30%MeOH濃度梯度洗脫83混合器低壓梯度比例閥高壓梯度低壓梯度脫氣機(jī)高壓/低壓梯度系統(tǒng)84高壓/低壓梯度系統(tǒng)液相梯度中元的概念？高壓梯度系統(tǒng)梯度準(zhǔn)確度好不易產(chǎn)生氣泡系統(tǒng)復(fù)雜(需兩臺(tái)或三臺(tái)泵)低壓梯度系統(tǒng)系統(tǒng)簡(jiǎn)單需在線脫氣機(jī)存在時(shí)間滯后效應(yīng)85阻尼器阻尼器86壓力波動(dòng)實(shí)驗(yàn)壓力脈動(dòng)低于1％，為您提供更加平穩(wěn)的液流。87進(jìn)樣系統(tǒng)手動(dòng)進(jìn)樣自動(dòng)進(jìn)樣88

六通閥進(jìn)樣演示89靈活的進(jìn)樣方式：全定量部分定量攜帶進(jìn)樣全定量（更準(zhǔn)確）

部分定量（靈活，不需更換定量環(huán)）

攜帶進(jìn)樣（節(jié)省樣品使用量）

自動(dòng)進(jìn)樣器90超快的進(jìn)樣速度：進(jìn)樣時(shí)間僅17秒進(jìn)樣室控溫:帕爾帖冷卻，溫控范圍4℃～100℃超小的進(jìn)樣殘留：<0.05%洗針殘留0.05％未洗針殘留0.07％可編程的洗針模式,完全消除由強(qiáng)吸附物質(zhì)帶來的交叉污染自動(dòng)進(jìn)樣器91分離系統(tǒng)－色譜柱功能：組分分離目標(biāo)：分辨力強(qiáng)效率高92吸附劑－－－化學(xué)鍵和固定相色譜柱化學(xué)鍵合相色譜柱:

將不同的官能團(tuán)通過化學(xué)反應(yīng)鍵和到硅膠表面的游離羥基上，而形成化學(xué)鍵和固定相，進(jìn)而形成化學(xué)鍵和相色譜柱。反相:70%;C18,65%;C8,15%;苯基柱<5%,正相:20%;-NH2、-CN其它(手性柱,離子交換柱):10%反相色譜是目前應(yīng)用得最為廣泛的高效液相色譜方法。C18在反相色譜終應(yīng)用得最為廣泛。93硅膠的形狀和性質(zhì)94硅膠的化學(xué)反應(yīng)95C18的鍵合相96所有的C18都一樣嗎?官能團(tuán)的濃度是否封端97測(cè)試內(nèi)容As（2）/As（3）【標(biāo)志金屬雜質(zhì)，越靠近1越好】TF（9）/TF（8）【堿性化合物拖尾】柱效/米（萘）色譜柱10.821.3963766色譜柱20.711.7548053色譜柱30.851.8861126色譜柱41.271.6760713判斷色譜柱的質(zhì)量

1柱效2重復(fù)性3耐用性98重復(fù)性RSD<0.1%99耐用性破壞前破壞24小時(shí)后破壞條件：50℃，pH=10.5的30mM磷酸氫二鉀溶液-甲醇（90：10）24小時(shí)柱效僅降低3.5％100柱溫箱控制溫度，保證分析結(jié)果重現(xiàn)性升高溫度，降低了流動(dòng)相的黏度，降低柱壓，保證色譜系統(tǒng)的穩(wěn)定性101

升溫對(duì)于反相HPLC分離強(qiáng)疏水肽的影響(B27)流動(dòng)相:A:含0.05%三氟乙酸的水B:含0.05%三氟乙酸的乙腈2%B/min進(jìn)樣量:100μL(50μg的6M脲/5%乙酸)UV:210nm流速:1mL/min室溫液相色譜柱