中藥鑒定學(xué)課件-中藥安全性評(píng)價(jià)

中藥的安全性評(píng)價(jià)

中藥的安全性評(píng)價(jià)（safetyevalulation）就是利用毒理學(xué)和理化分析等方法，檢測(cè)中藥的毒性和有害物質(zhì)、評(píng)價(jià)其在臨床使用過(guò)程中的安全性。中藥的安全性評(píng)價(jià)是中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中不可缺少的組成部分，也是保證臨床用藥安全可靠的重要措施。據(jù)統(tǒng)計(jì)，自1915~1994年間的110種醫(yī)藥學(xué)期刊上關(guān)于中藥不良反應(yīng)的報(bào)道累計(jì)達(dá)6061例。這些不良反應(yīng)主要集中在肝、腎、肺、心以及內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等諸多方面。近期在國(guó)外發(fā)生的中藥不良反應(yīng)，如日本的小柴胡事件、歐洲的馬兜鈴事件、新加坡、馬來(lái)西亞的黃連事件等，更加深了人們對(duì)中藥安全性的擔(dān)憂。然而，中醫(yī)藥體系具有自身的特殊性，影響中藥安全性的因素也較為復(fù)雜，除劑量問(wèn)題外，還涉及到品種、炮制、配伍、煎服方法等諸多因素，而且可變因素多，檢測(cè)難度大。因此，如何科學(xué)正確地評(píng)價(jià)中藥的安全性給中藥研究者提出了更高的要求。因?yàn)樗汝P(guān)系到臨床的用藥安全，又關(guān)系到中醫(yī)藥事業(yè)的順利發(fā)展，是一項(xiàng)具有戰(zhàn)略意義的重大研究課題。第一節(jié)影響中藥安全性的物質(zhì)分類第一節(jié)影響中藥安全性的物質(zhì)分類一、內(nèi)源性具有毒副作用的物質(zhì)這些化學(xué)成分大多是生物體的次生代謝產(chǎn)物（secondarymetabolites），包括生物堿、萜類、揮發(fā)油類、酚類、醌類、內(nèi)酯類、苷類等。這些成分很早就作為藥物在臨床應(yīng)用，但隨著研究的不斷深入，逐漸地發(fā)現(xiàn)這些產(chǎn)生藥效的物質(zhì)也常伴有不同程度的毒副作用。通常按其毒害的部位分類。

1．具有消化系統(tǒng)毒性的中藥常表現(xiàn)為胃腸道反應(yīng)，如惡心、嘔吐、上腹不適、腹痛、腹瀉等。同時(shí)，還有可能引起肝臟毒性反應(yīng)，如黃疸、肝腫大、肝炎、膽汁淤積、肝硬化、肝細(xì)胞壞死等。根據(jù)臨床報(bào)道和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，常引起胃腸道反應(yīng)的中藥有：鴉膽子Bruceajavanica（L.）Merr.、了哥王Wikstroemiaindica（L.）C.A.Mey.、常山DichroafebrifugaLour.、苦楝子MeliaazedarachL.、巴豆CrotontigliumL.等。具有肝臟毒性的中藥有：姜半夏Pinelliaternate（Thunb.）Breit.、桑寄生Taxilluschinensis（DC.）Danser、蒲黃TyphaangustifoliaL.等。天花粉TrichosantheskirilowiiMaxim.或其注射劑可引起肝功能異常；千里光SenecioargunensisTurcz.可造成肝內(nèi)血管閉塞；野百合CrotalariasessilifloraL.提取物可引起急性肝炎。川楝子MeliatoosendanSieb.etZucc.、蒼耳子XanthiumsibiricumPatr.、草烏AconitumkusnezoffiiReichb.、蓖麻子RicinuscommunisL.、雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.等中藥的煎劑可導(dǎo)致肝損害；大黃RheumpalmatumL.、澤瀉Alismaorientalis（Sam.）Juzep.或其靜脈注射液會(huì)引起膽紅素代謝障礙導(dǎo)致黃疸。

2．具有泌尿系統(tǒng)毒性的中藥

毒性癥狀有尿少、尿閉、尿頻、尿急、浮腫、血尿、蛋白尿、尿毒癥、腎功能衰竭等。關(guān)木通AristolochiamanshuriensisKom.、廣防己AristolochiafangchiY.C.WuexL.D.chouetS.M.Hwang。另?yè)?jù)報(bào)道，具有腎臟毒性的常用中藥還有草烏AconitumkusnezoffiiReichb.、巴豆CrotontigliumL.、天花粉TrichosantheskirilowiiMaxim.、蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch、斑蝥MylabrisphalerataPallas、光慈菇Tulipaedulis（Miq.）Baker、益母草LeonurusheterophyllusSweet、厚樸MagnoliaofficinalisRehd.etWils.等。3．具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的中藥

癥狀為口唇麻木、嗜睡、抽搐、驚厥、牙關(guān)緊閉、眩暈、意識(shí)模糊、煩躁不安、昏迷、瞳孔縮小或放大、嚴(yán)重者死亡。臨床常用的中藥:馬錢子Strychnosnux-vomicaL.所含士的寧（strychnine）；顛茄屬Hyoscyamus植物含有的阿托品（atropine）、天仙子胺（hyoscyamine）；西紅花CrocussativusL.所含的藏紅花素（crocetin）；罌粟PapaversomniferumL.所含的嗎啡（morphine）都被動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有不同程度的中樞神經(jīng)毒性。4．具有造血系統(tǒng)毒性的中藥

癥狀是溶血性貧血、缺血性貧血、白細(xì)胞減少、粒細(xì)胞缺乏、再生障礙性貧血、嚴(yán)重者導(dǎo)致死亡。可引起造血系統(tǒng)毒性反應(yīng)的中藥有:雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.、光慈菇Tulipaedulis（Miq.）Baker、八角蓮Dysosmaversipellis（Hance）M.Cheng、青風(fēng)藤Sinomeniumacutum（Thumb.）Rehd.etWils.以及正清風(fēng)痛寧、蝮蛇抗栓酶、穿琥寧注射液、小檗堿（berberine）、枯痔寧、感冒清、感冒通等中成藥制劑。5．具有心血管系統(tǒng)毒性的中藥

常見的心血管毒性的癥狀是心律失常、心悸、胸悶、循環(huán)衰竭、嚴(yán)重者死亡。烏頭AconitiumcarmichaeliDebx.、附子及其炮制品均為臨床常用中藥，具有鎮(zhèn)靜、強(qiáng)心、抗腫瘤等作用，常用于多種痛癥的治療。其主要藥效成分烏頭堿（aconitine）、中烏頭堿（mesaconitine）、次烏頭堿（hypaconitine）等可引起心血管毒性，并可損害外周脊髓。其它具有心血管毒性反應(yīng)的中藥還有蟾酥VenenumBufonis、藜蘆VeratumnigrumL.、黃花夾竹桃Thevetiaperuviana（Pers.）.K.Schum.等。6．具有呼吸系統(tǒng)毒性的中藥

癥狀有咳嗽、呼吸困難、肺水腫、呼吸麻痹、呼吸衰竭、甚至窒息死亡。常見產(chǎn)生呼吸系統(tǒng)毒性的中藥有：苦杏仁SemenArmeniacaeAmarum和桃仁SemenPersicae所含苦杏仁苷（amygdalin）、鬧羊花RhododendronmolleG.Don所含毒性成分八厘麻毒素（andromedotoxin）、烏頭AconitiumcarmichaeliDebx.和附子中所含成分烏頭堿（aconitine）、細(xì)辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.mandshuricum（Maxim.）Kitag.所含成分甲基丁香酚（methyleugenol）等，這些成分主要是通過(guò)影響延髓呼吸中樞引起呼吸困難乃至呼吸衰竭。7．具有免疫系統(tǒng)毒性的中藥

最常見的免疫系統(tǒng)的毒性就是過(guò)敏反應(yīng)。通常表現(xiàn)為皮疹、蕁麻疹、哮喘、發(fā)熱、黏膜水腫等癥狀，有時(shí)甚至?xí)?dǎo)致過(guò)敏性休克等嚴(yán)重后果。常引起過(guò)敏反應(yīng)的大多是中藥注射劑。造成這種毒性作用的原因之一就是中藥注射劑中所含的大分子動(dòng)、植物蛋白，以及具有抗原或半抗原性質(zhì)的物質(zhì)，如綠原酸、酶、皂苷和角質(zhì)蛋白等。有些中藥如雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.、防己StephaniatetrandraS.Moore等，還存在不同程度的免疫抑制作用。8．具有致畸胎、致突變及致癌作用的中藥

有些中藥可干擾胚胎的正常發(fā)育而引起畸胎。具有這種生殖毒性的中藥有雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.、棉酚（gossypol）、昆明山海棠Tripterygiumhypoglaucum（Lévl.）Hutch.、苦瓜MomordicacharantiaL.、川楝子MeliatoosendanSieb.etZucc.、天花粉蛋白（trichosanthin，TCS）有些中藥可引起基因突變和癌變，如檳榔ArecacatechuL.、款冬花TussilagofarfaraL.、千里光SenecioargunensisTurcz.、廣防己AristolochiafangchiY.C.WuexL.D.chouetS.M.Hwang、關(guān)木通AristolochiamanshuriensisKom.、細(xì)辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.mandshuricum（Maxim.）Kitag.、土荊芥ChenopodiumambrosioidesL.、雄黃(Realgar)、砒霜(Arsenouseoxide)、土貝母Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franq.、野百合CrotalariasessilifloraL.等。如果長(zhǎng)期過(guò)量使用這類中藥，可增加基因突變和引發(fā)癌癥的概率。此外，石菖蒲AcorustatarinowiiSchott、花椒ZanthoxylumbungeanumMaxim.、八角茴香IlliciumverumHook.f.等植物所含的黃樟醚（safrole）和青木香AristolochiadebilisSieb.etZucc.等所含的N-硝基化合物等，現(xiàn)已證實(shí)可誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生肝癌。9．具有內(nèi)分泌系統(tǒng)毒性的中藥

中藥引起內(nèi)分泌毒性的研究報(bào)道不多，但較為明確地是含重金屬中藥對(duì)內(nèi)分泌具有較大的毒性，例如砒霜和朱砂。砷元素破壞人和動(dòng)物的內(nèi)分泌系統(tǒng)，通常是以阻斷或模仿激素的方式來(lái)干擾正常激素的作用。二、外源性具有毒害作用的物質(zhì)外源性具有毒害作用的物質(zhì)主要來(lái)自中藥材的栽培或養(yǎng)殖、采收加工、包裝、運(yùn)輸和貯藏等環(huán)節(jié)。此外，中藥制劑生產(chǎn)中所涉及到的輔料、提取溶劑、工藝設(shè)備、接觸器皿等也都是外源性有毒副作用物質(zhì)污染的重要途徑。1．農(nóng)藥類有害物質(zhì)

目前我國(guó)生產(chǎn)和使用的農(nóng)藥主要分為5類：第一類為有機(jī)磷農(nóng)藥，屬磷酸酯類或硫代磷酸酯類化合物，是應(yīng)用最廣泛的農(nóng)藥。長(zhǎng)期少量接觸有機(jī)磷農(nóng)藥會(huì)出現(xiàn)慢性中毒癥狀，表現(xiàn)為神經(jīng)衰弱綜合征——頭痛、頭昏、乏力、惡心、食欲不振、視物模糊。第二類為氨基甲酸酯類農(nóng)藥，屬中低毒性農(nóng)藥?？山?jīng)呼吸道、消化道侵入人體，也可經(jīng)皮膚、黏膜緩慢吸收，中毒癥狀與輕度有機(jī)磷農(nóng)藥中毒相似。第三類為殺蟲脒，皮膚吸收或消化道侵入人體，可直接對(duì)心肌和血管平滑肌引起損害以及嚴(yán)重的高鐵血紅蛋白癥造成缺氧，最終導(dǎo)致組織或器官的損害。第四類為溴氰菊酯（凱嗪靈），毒癥狀主要表現(xiàn)為皮膚刺激，有燒灼感、紅斑、丘疹；神經(jīng)系統(tǒng)癥狀表現(xiàn)為：惡心、嘔吐、腹痛、頭痛、頭昏、乏力、肌肉跳動(dòng)、流涎、視物模糊。第五類為百草枯，毒性非常強(qiáng)，不但損害腎小管，導(dǎo)致蛋白尿、血尿，引起腎功能損害，而且極易引起進(jìn)行性呼吸困難，最終導(dǎo)致呼吸衰竭而死亡，還會(huì)造成心、肝、腎上腺中毒，引起相應(yīng)癥狀和體征。由于中藥的需求量日漸增多，藥農(nóng)們不得不頻繁地使用各種農(nóng)藥，預(yù)防病蟲害，以達(dá)到提高中藥栽培品的產(chǎn)量的目的。因此，造成了中藥中農(nóng)藥的污染嚴(yán)重。目前，中藥常見的農(nóng)藥殘留（pesticideresidues）種類主要有三大類：①有機(jī)氯農(nóng)藥，如六六六（BHC）、滴滴涕（DDT）、及五氯硝基苯（PCNB）等。②有機(jī)磷農(nóng)藥，如敵敵畏、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂果、氧化樂果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷等。③擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，如氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯等。2．重金屬類有害物質(zhì)

在常見的重金屬元素中，鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞（Hg）、砷（As）是目前被公認(rèn)的對(duì)人體最有害的4種元素。這些物質(zhì)的毒性作用主要是通過(guò)與體內(nèi)一系列蛋白質(zhì)、酶和氨基酸內(nèi)的官能團(tuán)上的巰基（-SH）和雙硫鍵（-S-S-）牢固地結(jié)合在一起，從而使蛋白質(zhì)變性，酶失去活性，組織細(xì)胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能上的改變。鉛主要損害造血、消化、神經(jīng)、血液、心血管和泌尿系統(tǒng)。鎘可抑制各種氨基酸脫羧酶、組氨酸酶、淀粉酶、過(guò)氧化物酶的活性，從而使肝、腎等組織中的酶系統(tǒng)正常功能受損。此外，鎘還有致癌、致畸、導(dǎo)致基因突變的作用。汞主要是損害腎臟，造成腎功能衰竭。汞中毒還嚴(yán)重影響人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、使聽力減弱、語(yǔ)言失控、四肢麻痹甚至造成癡呆。砷主要是擴(kuò)張毛細(xì)血管，麻痹血管舒張中樞，使腹腔臟器嚴(yán)重充血，引起肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的損害。長(zhǎng)期吸收砷化合物會(huì)誘發(fā)肺癌和呼吸道腫瘤。3．黃曲霉毒素

黃曲霉菌（aspergillusflavus）含多種黃曲霉毒素（aflatoxins），有強(qiáng)烈的致肝損害和致癌作用。4．其它外來(lái)雜質(zhì)

中藥在采收、加工和貯藏等過(guò)程中有可能混入其它有毒有害物質(zhì)，如某些中藥在產(chǎn)地加工時(shí)，為了使藥材色澤潔白，防止霉?fàn)€，常在干燥前后用硫黃熏制，造成藥材中二氧化硫（SO2）殘留。除此之外，砂石、泥塊、塵土、明礬、鹽等無(wú)機(jī)化合物以及其它非藥用部位的雜質(zhì)都直接影響著中藥的安全性。因此，中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中常設(shè)置有專項(xiàng)檢查。第二節(jié)中藥安全性評(píng)價(jià)方法中藥安全性評(píng)價(jià)方法也分為二大類：一類是屬于中藥毒理學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)方法。主要分為三個(gè)階段：臨床前的中藥毒理學(xué)研究、臨床中藥毒理學(xué)以及中藥上市后的不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)。另一類是物理和化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)方法。此類方法主要是利用經(jīng)典的或現(xiàn)代的物理和化學(xué)手段，針對(duì)產(chǎn)生毒副作用的中藥成分和有害物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析和測(cè)定。一、農(nóng)藥殘留量的檢查方法及限量指標(biāo)（一）農(nóng)藥殘留量檢測(cè)樣品的處理

1．取樣原則

2．樣品的前處理

常規(guī)的提取純化方法先進(jìn)的提取方法：固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取、微波輔助萃取、凝膠滲透色譜和免疫親和色譜等先進(jìn)方法（二）農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法1．毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定法采用高效能的毛細(xì)管氣相色譜柱（CGC）和火焰光度檢測(cè)器或高靈敏度的電子捕獲器（ECD）分離和檢測(cè)常見的農(nóng)藥的殘留量。具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)等特點(diǎn)。應(yīng)用于中藥中的有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。2．氣相-紅外光譜測(cè)定法可將多種微量的混合農(nóng)藥成分分離又可給出明確的結(jié)構(gòu)信息。缺點(diǎn)：①靈敏度較低，檢測(cè)限每組約100ng。②光管的溫度不能高于30℃，否則會(huì)影響色譜柱的溫度，使信號(hào)強(qiáng)度降低，噪聲急劇增長(zhǎng)，造成聯(lián)機(jī)檢測(cè)困難。③譜庫(kù)檢索是GC-FTIR定性的主要方法，而農(nóng)藥的氣相紅外光譜庫(kù)存量很小，嚴(yán)重地影響了檢測(cè)結(jié)果的分析。（三）農(nóng)藥殘留量的其他測(cè)定方法填充柱氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、超臨界流體色譜法、薄層色譜法、毛細(xì)管電泳色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法、共振光散射比濁法以及基于酶抑制原理的分光光度法等。（四）限量指標(biāo)《中國(guó)藥典》（2005年版）在甘草和黃芪項(xiàng)下規(guī)定了每2克藥材所含有機(jī)氯類農(nóng)藥限量為：六六六（總BHC）不得過(guò)千萬(wàn)分之二；滴滴涕（總DDT）不得過(guò)千萬(wàn)分之二；五氯硝基苯（PCNB）不得過(guò)千萬(wàn)分之一。二、重金屬及有害元素的檢查方法及限量指標(biāo)（一）重金屬及有害元素檢測(cè)樣品的前處理傳統(tǒng)的方法：濕法消化干法灰