雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定課件

第四章

藥物的雜質(zhì)檢查藥物分析教研室Testforpurity第四章

藥物的雜質(zhì)檢查藥物分析教研室Testforpur1Contents特殊雜質(zhì)檢查方法3概述1一般雜質(zhì)檢查方法2Contents特殊雜質(zhì)檢查方法3概述1一般雜質(zhì)檢查方法2第一節(jié)概述一、藥物純度的概念與要求1.純度（Purities）藥物的純凈程度2.雜質(zhì)

(Impurities)

藥物中存在的無(wú)治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。需綜合考慮藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定,綜合評(píng)定。第一節(jié)概述一、藥物純度的概念與要求1.純度（Puritie3.藥物純度與試劑純度第一節(jié)概述共同點(diǎn)——均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類和限量.不同點(diǎn)①藥物純度從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只有合格品和不合格品.

②試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定,它不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用.化學(xué)試劑——一般分為4個(gè)等級(jí)〔基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純〕3.藥物純度與試劑純度第一節(jié)概述共同點(diǎn)——均規(guī)定所含雜質(zhì)的第一節(jié)概述二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類雜質(zhì)的來(lái)源生產(chǎn)過(guò)程儲(chǔ)藏過(guò)程合成過(guò)程中，原料不純或反應(yīng)不完全，中間體、副產(chǎn)物在精制中未除盡制劑過(guò)程試劑、溶劑、還原劑殘留異構(gòu)體、多晶體使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化第一節(jié)概述二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類雜質(zhì)的來(lái)源生產(chǎn)儲(chǔ)藏合成過(guò)程中第一節(jié)概述第一節(jié)概述三、雜質(zhì)的限量(LimitTest)藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾(partspermillion,ppm)雜質(zhì)限量控制限量檢查對(duì)照法靈敏度法比較法定量測(cè)定雜質(zhì)含量注意平行原則第一節(jié)概述三、雜質(zhì)的限量(LimitTest)藥物中所含雜質(zhì)的最大允第一節(jié)概述注意單位統(tǒng)一！第一節(jié)概述注意單位統(tǒng)一！第一節(jié)概述示例一茶苯拉明中氯化物檢查取本品0.30g

置200ml量瓶中，加水50ml、氨試液3ml和10%硝酸銨溶液6ml，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱15min，并時(shí)時(shí)振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，放置15min，濾過(guò)，取續(xù)濾液25ml置納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(10μg

Cl-/ml)1.5

ml制成的對(duì)照液比較，求氯化物的限量。C=10μg/mlV=1.5mlS=?第一節(jié)概述示例一茶苯拉明中氯化物檢查取本品0.30g置示例三腎上腺素上酮體的檢查第一節(jié)概述取本品0.2g,置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測(cè)定吸光度不得超過(guò)0.05，酮體的百分吸收系數(shù)為435，求酮體的限量V=100mlC=A/E=0.05/435=1.15×10-4

g/100ml

S=0.2g示例三腎上腺素上酮體的檢查第一節(jié)概述取本品0.2g,置1習(xí)題一磷酸可待因中嗎啡的檢查第一節(jié)概述取本品0.10g,加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15min，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡試液[取無(wú)水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成100ml]5.0ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深。問(wèn)限量是多少？習(xí)題一磷酸可待因中嗎啡的檢查第一節(jié)概述取本品0.10g習(xí)題二苯巴比妥鈉中重金屬的檢查第一節(jié)概述取本品2.0g,加水32ml，溶解后緩緩加入1mol/L鹽酸溶液8ml，充分振搖，靜置數(shù)分鐘，濾過(guò)，取濾液20ml，加酚酞指示液1滴與氨試液恰顯粉紅色，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量成25ml，依法檢查，含重金屬不得超過(guò)10ppm。試計(jì)算應(yīng)取得標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(每1ml相當(dāng)于10μgPb)的體積。習(xí)題二苯巴比妥鈉中重金屬的檢查第一節(jié)概述取本品2.0g,第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法一、氯化物檢查法供試品稀HNO310mlH2OAgNO31ml標(biāo)準(zhǔn)溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml

暗處放置5min(避免AgCl分解)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法一、氯化物檢查法供試品稀HNO31二、硫酸鹽檢查法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鐵法

(Ch.P

和USP采用)紅色二、硫酸鹽檢查法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法三、鐵鹽檢查法1.第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法供試品顯色，立即與同法制成的對(duì)照溶液比較加水溶解25ml稀HCl

4ml過(guò)硫酸銨50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水定容第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法供試品顯色，立即與同法制成的對(duì)照溶2.巰基醋酸法

(BP采用)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法紅色2.巰基醋酸法(BP采用)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法紅色第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法四、重金屬檢查法(Pb)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法四、重金屬檢查法(Pb)1.第一法

硫代乙酰胺法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法條件：

介質(zhì)：醋酸鹽緩沖液

(pH3.5)

2ml

試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)

2ml雜質(zhì)對(duì)照液：PbNO3

(10μg/ml)靈敏度范圍：10~20

g/27ml黃色至棕黑色混懸液1.第一法硫代乙酰胺法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法條件：黃2.第二法熾灼后的硫代乙酰胺法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法

緩緩熾灼放冷H2SO40.5-1.0ml供試品炭化

加熱

HNO3500-600℃H2SO4

除盡放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml

中性按第一法檢查

蒸干氨試液注意：做空白試驗(yàn)

2.第二法熾灼后的硫代乙酰胺法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法3.第三法

硫化鈉法4.第四法微孔濾膜法CABFE濾器下部濾器上蓋連接頭輔助濾板D濾膜(直徑10mm,孔徑3.0μm)墊圈(外徑10mm,內(nèi)徑6mm)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法3.第三法硫化鈉法4.第四法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法五、砷鹽檢查法(一)古蔡氏法(Gutzeit)

黃色棕色黑色第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法五、砷鹽檢查法(一)古蔡氏法(第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法

古蔡氏法檢砷器8cm有孔玻璃旋塞導(dǎo)氣管AsH3發(fā)生瓶溴化汞試紙醋酸鉛棉花(60mg)HClZn粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液生成砷斑吸收硫化氫氣體第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法古蔡氏法檢砷器8cm有孔玻璃注意事項(xiàng)砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)干燥、避光、立即比較。有機(jī)結(jié)合態(tài)的砷應(yīng)破壞后檢查（加酸或堿），但溫度應(yīng)低于600

C。供試品若為鐵鹽，能消耗碘化鉀和氯化亞錫，可加酸性氯化亞錫，使高鐵離子還原后檢查。供試品（硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽）若在酸性條件下生成硫化氫或二氧化硫，與溴化汞試紙作用生成黑色硫化汞和金屬汞，可先用硝酸處理，使其氧化為硫酸鹽。銻鹽含量較多時(shí)，可改用白田道夫（Bettendorff）法檢查砷注意事項(xiàng)砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)干燥、避光、立即比較。(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法[Ag(DDC)法]

第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法紅色膠態(tài)銀目視比色法510nm測(cè)定A值(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法紅線性范圍：1～10μg/40ml含銻藥物不干擾測(cè)定用于砷鹽的限量檢查和微量砷鹽的含量測(cè)定線性范圍：1～10μg/40ml(三)次磷酸法

第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法棕色1)用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物的砷鹽檢查，不產(chǎn)生干擾。

2）靈敏度較古蔡法低。(三)次磷酸法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法棕色1)用于硫六、溶液顏色檢查法七、易碳化物檢查法八、溶液澄清度檢查法九、熾灼殘?jiān)?Residueonignition)

系指有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱扑a(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。0.1%～0.2%1～2mg第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法六、溶液顏色檢查法0.1%～0.2%1～2mg第二節(jié)一般十、干燥失重測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法干燥失重：藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量。用于檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性物質(zhì)。恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下。（干燥至恒重的第二次及以后每次稱重都應(yīng)在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行）十、干燥失重測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法干燥失重：藥品在第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法(四)熱分析法（Thermalanalysis）

測(cè)定物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與溫度關(guān)系的儀器分析方法。熱重分析法(ThermogravimetricAnalysis,TGA)差熱分析法(Differential

ThermalAnalysis,DTA)差示掃描量熱法(Differential

ScanningCalorimetry,DSC)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法(四)熱分析法（Thermala第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法1.熱重分析法(TGA)供試品TGA熱重曲線WW結(jié)晶水失重臺(tái)階應(yīng)用熱天平在程序控溫的條件下測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分析技術(shù),可計(jì)算出樣品在相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率.第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法1.熱重分析法(TGA)供試品W特點(diǎn)分析樣品用量少,適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失重測(cè)定.靈敏度高,可達(dá)1

g以下

測(cè)定速度快可用于判斷結(jié)晶水或吸附水,并推斷結(jié)晶水含量.特點(diǎn)分析樣品用量少,適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法2.差熱分析法(DTA)在程序控制溫度下，測(cè)量供試品和惰性參比物(常用石英砂、煅制MgO)之間的溫度差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的熱分析技術(shù)T△T供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰參比物質(zhì)供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法2.差熱分析法(DTA)在程序控DTA用途(1)熔點(diǎn)測(cè)定熔程T△T=0DTA用途(1)熔點(diǎn)測(cè)定熔程T△T=0(2)

定性和純度檢定——根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對(duì)供試品進(jìn)行純度判別T供試品對(duì)照品(2)定性和純度檢定——根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對(duì)供試品進(jìn)ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)草酸鈣(CaC2O4·H2O)的熱重曲線在溫度T1時(shí)CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在溫度T2時(shí)CaC2O4CaCO3+CO在溫度T3時(shí)CaCO3CaO+CO2ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T10090807060DTAT(℃/min)196℃233℃鹽酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲線10090807060DTAT(℃/min)196℃233℃3.差示掃描量熱法(DSC)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法

測(cè)量保持供試品和惰性參比物的溫度相同,系統(tǒng)所需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時(shí)間)變化的熱分析技術(shù).···樣品參比加熱爐至信號(hào)放大器加熱器導(dǎo)線爐溫控制器3.差示掃描量熱法(DSC)第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法用于待測(cè)物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測(cè)定，更適合于測(cè)量物質(zhì)在物理變化或化學(xué)變化中焓的變化。不純物質(zhì)的DSC圖t(min)△T用于待測(cè)物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測(cè)定不同純度苯甲酸的DSC曲線溫度97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品低共熔雜質(zhì)不同純度苯甲酸的DSC曲線溫度97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品低共應(yīng)用熱分析法檢查藥物純度的條件樣品純度在98.0%以上雜質(zhì)不與主成分反應(yīng)雜質(zhì)不與主成分形成共晶或固熔體雜質(zhì)與熔融試樣有化學(xué)相似性藥物在熔融過(guò)程中化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定藥物如存在多晶現(xiàn)象則必須全部轉(zhuǎn)變成某一晶型應(yīng)用熱分析法檢查藥物純度的條件甲磺酸二氫麥角毒堿的DSC-TGA曲線℃50100150200DSCTGA失溶劑失水分解甲磺酸二氫麥角毒堿的DSC-TGA曲線℃5010015020十一、水分測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法A——供試品消耗的Fisher試液的體積B——空白消耗的Fisher試液的體積F——每1mlFisher試劑相當(dāng)于水的重量(mg)W——供試品的重量十一、水分測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法A——供試品消耗的指示終點(diǎn)方法：①Fisher試液顏色

淡黃色——紅棕色②永停法指示終點(diǎn)方法：十二、殘留溶劑測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法殘留溶劑：在合成原料藥，輔料或制劑生產(chǎn)的過(guò)程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑。十二、殘留溶劑測(cè)定法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法殘留溶劑：在合第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法色譜系統(tǒng)與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(SystemSuitabilityTests;SSTs)以直徑為0.25-0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80-170℃；并符合下列條件：⑴用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算的N應(yīng)大于1000；⑵內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物的兩個(gè)色譜峰的R≥1.5；⑶每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD≤5%；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD≤10%第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法色譜系統(tǒng)與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)進(jìn)行有機(jī)溶劑限度測(cè)定時(shí)，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定來(lái)確定對(duì)照品溶液的濃度；進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，應(yīng)根據(jù)供試品中實(shí)際殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃度。對(duì)照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過(guò)2倍為宜。第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法進(jìn)行有機(jī)溶劑限度測(cè)定時(shí)，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定來(lái)確定對(duì)照品溶雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定課件第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法一、色譜分析法(一)TLC法比移值一般要求：顆粒直徑10~40μm薄層涂布：無(wú)粘合劑含粘合劑：常加入10~15%

煅石膏(CaSO4·2H2O,180℃烘4h)

或0.5~0.7%羧甲基纖維素鈉水溶液第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法一、色譜分析法比移值一般要求：顆粒第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法①雜質(zhì)對(duì)照法

適用于已知雜質(zhì)并能夠得到雜質(zhì)對(duì)照品的情況②供試品溶液自身稀釋法適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品的情況(僅限于二者的顏色相近或相同的情況)③雜質(zhì)對(duì)照法與供試品溶液自身稀釋法對(duì)照使用④對(duì)照藥物法無(wú)合適的雜質(zhì)對(duì)照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色和主成分顏色有差異，難以判斷限量。第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法①雜質(zhì)對(duì)照法第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法(二)HPLC法第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法(二)HPLC法主要方法內(nèi)標(biāo)法加校正因子法：用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)能夠測(cè)定雜質(zhì)的校正因子雜質(zhì)的含量測(cè)定。外標(biāo)法：用于有雜質(zhì)對(duì)照品或雜質(zhì)對(duì)照品易制備的情況。加校正因子的主成分自身對(duì)照法：用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)，雜質(zhì)的含量測(cè)定不加校正因子的主成分自身對(duì)照法：用于沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品的情況峰面積歸一化法：粗略測(cè)量供試品中雜質(zhì)的含量

第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法主要方法內(nèi)標(biāo)法加校正因子法：用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)能夠測(cè)定雜質(zhì)的220260300nm腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線λmax310nm二、光譜分析法220260雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法三、化學(xué)分析法呋塞米中芳香第一胺的檢查呋塞米2-氨基-4-氯-5-氨磺酸基苯甲酸重氮化-耦合反應(yīng)顯色雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法三、化學(xué)分析氯硝柳胺中5-氯水楊酸的檢查氯硝柳胺5-氯水楊酸三氯化鐵顯色氯硝柳胺中5-氯水楊酸的檢查氯硝柳胺5-氯水楊酸三氯化鐵顯色第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查方法四、物理分析法嗅味及揮發(fā)性的差異顏色的差異溶解行為的差異旋光性質(zhì)的差異吸附或分配性質(zhì)的差異