生物技術(shù)制藥考試題復(fù)習(xí)

一：選擇題1、酶的主要來源是（C）A、生物體中分離純化

B、化學(xué)合成

C、微生物生產(chǎn)

D、動/植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)

2、所謂“第三代生物技術(shù)”是指(A)A、海洋生物技術(shù)

B、細(xì)胞融合技術(shù)

C、單克隆技術(shù)

D、干細(xì)胞技術(shù)3、菌體生長所需能量與菌體有氧代謝所能提供的能量在什么情況下，菌體往往會產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物乙酸：(A)

A、大于

B、等于

C、小于

D、無關(guān)4、促紅細(xì)胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達(dá)，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長素，這是因?yàn)椋海‥）A、人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌有毒性作用

B、人促紅細(xì)胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定

C、大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活D、人的促紅細(xì)胞生長素對大腸桿菌蛋白水解酶極為敏感E、大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長素糖基化

5、目前基因治療最常用的載體是：(B)A、腺病毒

B、反轉(zhuǎn)錄病毒

C、腺相關(guān)病毒

D、痘苗病毒

E、皰疹病毒6、cDNA第一鏈合成所需的引物是：（D）A、Poly

A

B、Poly

C

C、Poly

G

D、Poly

T

E、發(fā)夾結(jié)構(gòu)7、為了減輕工程菌的代謝負(fù)荷，提高外源基因的表達(dá)水平，可以采取的措施有：(A)A將宿主細(xì)胞生長和外源基因的表達(dá)分成兩個階段

B、在宿主細(xì)胞快速生長的同時誘導(dǎo)基因表達(dá)

C、當(dāng)宿主細(xì)胞快速生長時抑制重組質(zhì)粒的表達(dá)

D、當(dāng)宿主細(xì)胞快速生長時誘導(dǎo)重組質(zhì)粒的復(fù)制8、基因工程制藥在選擇基因表達(dá)系統(tǒng)時，首先應(yīng)考慮的是：(A)

A、表達(dá)產(chǎn)物的功能

B、表達(dá)產(chǎn)物的產(chǎn)量

C.表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性

D.表達(dá)產(chǎn)物分離純化的難易

9、疫苗出產(chǎn)前需進(jìn)行理化鑒定、效力鑒定和（安全性鑒定）。10、基因工程藥物的化學(xué)本質(zhì)屬于：(C)A.糖類

B.脂類

C.蛋白質(zhì)和多肽類

D.氨基酸類

11、用聚二乙醇（PEG）誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，下列錯誤的是：(C)

A、PEG的相對分子量大，促進(jìn)融合率高

B、PEG的濃度高，促進(jìn)融合率高

C、PEG的相對分子量小，促進(jìn)融合率高

D、PEG的最佳相對分子量為400012、以大腸桿菌為目的基因的表達(dá)體系，下列正確的是：(C)

A、表達(dá)產(chǎn)物為糖基化蛋白質(zhì)

B、表達(dá)產(chǎn)物存在的部位是在菌體內(nèi)

C、容易培養(yǎng)，產(chǎn)物提純簡單D、表達(dá)產(chǎn)物為天然產(chǎn)物

13、人類第一個基因工程藥物是：(A)

A、人胰島素

B、重組鏈激酶

C、促紅細(xì)胞生成素

D、乙型肝炎疫苗

14、下列不屬于加工改造后的抗體是：

(C)A、人-鼠嵌合抗體

B、單鏈抗體C、鼠源性單克隆抗體

D、單域抗體

15、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件中，不正確的是：(D)

A.最適pH為7.2-7.4

B.最適溫度為37±0.5C

C.最理想的滲透壓為290-300mOsm/kg

D.氧濃度為100%

16、第三代抗體是指：(D)A、B淋巴細(xì)胞合成和分泌的球蛋白

B、多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白

C、融合細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體D、利用基因工程技術(shù)制備的基因工程抗體17、現(xiàn)代生物技術(shù)的標(biāo)志是：(C)A、DNA互補(bǔ)雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的提出

B、DNA測序技術(shù)的誕生C、第一只克隆羊“多莉”的誕生

D、人類基因組草圖的完成

18、獲得目的基因最常用的方法是：(B)A、化學(xué)合成法

B、PCR技術(shù)

C、逆轉(zhuǎn)錄法

D、DNA探針技術(shù)

19、疫苗組成是由抗原和（佐劑）組成20、鳥槍法克隆目的基因的戰(zhàn)略適用于（A）A、原核細(xì)菌B、酵母菌C、絲狀真菌D、植物E、人類21、cDNA法獲得目的基因的優(yōu)點(diǎn)是：（B）A.成功率高

B.不含內(nèi)含子

C.操作簡便

D.表達(dá)產(chǎn)物可以分泌

E.能糾正密碼子的偏愛性22、有機(jī)相酶反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)：

1．有利于疏水性底物的反應(yīng)；2．可提高酶的熱穩(wěn)定性；3．從低沸點(diǎn)的溶劑中易分離純化產(chǎn)物；4．熱力學(xué)平衡向產(chǎn)物方向移動如脂合成和肽合成；5．減少由水引起的副反應(yīng)，如水解反應(yīng)；6．酶易于實(shí)現(xiàn)固定化；7．酶和產(chǎn)物易于回收；8．可避免微生物污染。23、抗體發(fā)展階段：抗血清、單克隆抗體、基因工程抗體。24、25、凝膠過濾層析進(jìn)行分離的依據(jù)是：分子大小26、質(zhì)粒載體必備三要素：復(fù)制子、選擇標(biāo)記、多克隆位點(diǎn)。27、體外培養(yǎng)動物細(xì)胞三類型：貼壁依賴性細(xì)胞、非貼壁依賴性細(xì)胞、兼性貼壁細(xì)胞。28、下列關(guān)于細(xì)胞凍存及復(fù)蘇過程的描述不正確的是（B）。

A.凍存的細(xì)胞提前一天更換全部培養(yǎng)液

B.細(xì)胞凍存的原則為快速凍存

C.每只凍存管中以凍存（1～1.5）×106個細(xì)胞為宜

D.凍存液中含有8％二甲基亞砜

E.復(fù)蘇時將凍存細(xì)胞從液氮中取出迅速投入42℃溫水中速溶29、能將IgG水解成兩個抗原片段和一個可結(jié)晶片段的是：（木瓜蛋白酶）。30、單克隆技術(shù)抗體是B細(xì)胞和（雜交瘤細(xì)胞）的結(jié)合。31、所謂“第二代基因工程”是指(A)A、蛋白質(zhì)工程

B、細(xì)胞工程

C、酶工程

D、抗體工程32、酶和細(xì)胞固定化最常用、最有效的方法是：(A)A、載體結(jié)合法

B、交聯(lián)法

C、包埋法

D、選擇性熱變性法33、真核基因在大腸桿菌中以融合蛋白形式表達(dá)，下列錯誤的是：(D)A、基因操作簡便

B、只能作抗原用

C、容易實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)

D、易被細(xì)菌酶類水解

34、目前應(yīng)用最廣泛的產(chǎn)酶菌是：(A)生物技術(shù)藥物：是指采用DNA重組技術(shù)或其他創(chuàng)新生物技術(shù)生產(chǎn)的治療藥物。細(xì)胞因子類藥物、激素類藥物、酶與輔酶類藥物、疫苗、單克隆抗體藥物、反義核酸藥物、RNA干擾(RNAi)藥物、基因治療藥物。

2、簡述生物技術(shù)藥物和生物技術(shù)制藥的概念。答：生物技術(shù)藥物是指采用DNA重組技術(shù)或其他生物技術(shù)生產(chǎn)的用于預(yù)防、治療和診斷疾病的藥物；生物技術(shù)制藥是指利用基因工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程等生物技術(shù)，來研究、開發(fā)和生產(chǎn)用于預(yù)防、治療和診斷疾病的藥物。3、比較基因工程疫苗與傳統(tǒng)疫苗？答：傳統(tǒng)疫苗是用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制成的制劑或用理化方法將病原微生物殺死制備的生物制劑。傳統(tǒng)疫苗受制作工藝的限制，其保存、使用和接種副反應(yīng)等方面都容易出現(xiàn)一些問題。

基因工程疫苗指使用重組DNA技術(shù)克隆并表達(dá)保護(hù)性抗原基因，利用表達(dá)的抗原產(chǎn)物，或重組體本身制成的疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙鐑?yōu)點(diǎn)：

①純度高；產(chǎn)量高。②易制備。③安全性好。④這種疫苗穩(wěn)定性好，免疫期長，便于保存和運(yùn)輸。

4、如何控制基因工程藥物的質(zhì)量？答：①原材料：主要檢查目的基因、表達(dá)載體及宿主細(xì)胞（如細(xì)菌、酵母、人和動物的細(xì)胞），防止其產(chǎn)生我們不想要的遺傳變異。②培養(yǎng)過程：無論是發(fā)酵還是細(xì)胞生產(chǎn)，關(guān)鍵是保證基因的穩(wěn)定性和不被污染。主要控制生產(chǎn)用的細(xì)胞庫、有限代次的生產(chǎn)、連續(xù)培養(yǎng)過程。③純化工藝過程：要求能保證去除微量DNA、糖類、殘余宿主蛋白質(zhì)、純化過程帶入的有害化學(xué)物質(zhì)、致熱原，或者將這類雜質(zhì)減少至允許量。④最終產(chǎn)品：主要表現(xiàn)在生物學(xué)效價測定、蛋白質(zhì)純度檢查、蛋白質(zhì)的比活性、蛋白質(zhì)的性質(zhì)鑒定幾個方面。

⑤雜質(zhì)檢測：蛋白類，由于降解、聚合或者錯誤折疊而造成的目的蛋白變構(gòu)體在體內(nèi)往往會導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生；非蛋白類，主要有細(xì)菌、病毒、熱原質(zhì)和DNA幾種類型，往往在極低的水平就可產(chǎn)生嚴(yán)重的危害作用。⑥安全性試驗(yàn)：其中的無菌試驗(yàn)、熱原試驗(yàn)、安全性和毒性試驗(yàn)按我國新頒布的《中國生物制品規(guī)程》進(jìn)行。5、簡述單克隆抗體的制備。答：（1）．對動物注射特定的抗原蛋白，使其產(chǎn)生免疫反應(yīng)；提取合成專一性抗體的單個B淋巴細(xì)胞，但這種B淋巴細(xì)胞不能在體外生長。（2）．應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性。

（3）．對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，用特定的選擇培養(yǎng)基選出所需要的細(xì)胞群，體外或體內(nèi)培養(yǎng)，從培養(yǎng)液或動物腹水中提取單克隆抗體。6、簡述基因工程操作流程。答：1目的基因的獲取2構(gòu)建表達(dá)載體3將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞4重組DNA篩選與鑒定4目的基因的檢測與表達(dá)。7、動物大規(guī)模培養(yǎng)有哪些方式？答：（1）懸浮培養(yǎng)法、（2）微載體培養(yǎng)法、（3）多孔載體培養(yǎng)法、（4）微囊化培養(yǎng)法、（5）中空纖維培養(yǎng)法。8、生產(chǎn)用動物細(xì)胞的種類有哪些？各有什么特點(diǎn)？答：（1）原代細(xì)胞,特點(diǎn)：不能直接獲得，需臨時制備，生長不旺盛；（2）傳代細(xì)胞系，特點(diǎn)：接觸抑制和貼壁依賴性，增值能力有限，無致瘤性；（3）轉(zhuǎn)化細(xì)胞系，特點(diǎn)：無限增殖，倍增時間短，較低的營養(yǎng)條件要求，適用于大規(guī)模生產(chǎn)；（4）工程細(xì)胞系（包括融合細(xì)胞系和基因工程細(xì)胞系），特點(diǎn)：穩(wěn)定遺傳9、獲得部分或全部人員化的質(zhì)量抗體采用何種方法？10、何為治療性疫苗？比較治療性疫苗和預(yù)防性疫苗的主要區(qū)別。（p129）.答：治療性疫苗：指在已感染病原生物或患某些疾病的機(jī)體中，通過誘生機(jī)體的特異性或非特異性免疫應(yīng)答，以達(dá)到治療或防止疾病惡化的天然、人工修飾合成或用基因重組技術(shù)表達(dá)的產(chǎn)品或生物制品。區(qū)別：a.使用對象不同：治療性疫苗的使用對象為已病者，而預(yù)防性疫苗的使用對象為未病者。b.使用目的不同：治療性疫苗的目的是治療疾病，預(yù)防性疫苗的目的是預(yù)防疾病。c.監(jiān)測手段不同：預(yù)防性疫苗接種后產(chǎn)生保護(hù)性抗體，可通過實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果準(zhǔn)確，可靠。而治療性疫