乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵對粕粗蛋白質(zhì)、ph、理化性質(zhì)及抗營養(yǎng)因子含量的影響

乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵對粕粗蛋白質(zhì)、ph、理化性質(zhì)及抗營養(yǎng)因子含量的影響

豆餅、豆餅和豆餅是一般的植物蛋白質(zhì)飼料。不僅蛋白質(zhì)含量高（豆餅42%46%；棉碗38%42%；油菜籽35%38%），氨基酸組成合理，包括各種礦物和微量元素，對動物飼料有重要影響。然而，這些脂肪飼料中含有的胰蛋白酶抑制劑、腫脹因素、硫醇鋅、棉酚等抗營養(yǎng)因素限制了高脂肪飼料的使用。特別是，高含量的多囊卵巢和高口感的差異嚴重限制了不同飼料在食品工業(yè)中的使用（劉威海，2013；鄧露芳等，2012；常磊，2012）。目前,化學處理、添加酶制劑和微生物處理是常用改善飼料品質(zhì)的方法。但化學和酶制劑處理方法單一,效果欠佳,而微生物發(fā)酵具有反應溫和、干物質(zhì)損失少等優(yōu)點,微生物發(fā)酵過程中除了能夠消除抗營養(yǎng)因子外,還能將大分子蛋白質(zhì)降解為多肽和小肽,甚至是游離氨基酸,同時發(fā)酵產(chǎn)物還含有豐富的益生素、有機酸等活性物質(zhì),從而改善蛋白質(zhì)品質(zhì),提高養(yǎng)分利用率(李文立等,2013;姜丹,2011)。乳酸菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生乳酸、乙酸、丙酸和細菌素等多種物質(zhì),這些物質(zhì)除具有殺毒抑菌作用外,還具有維持腸道內(nèi)菌群平衡、抑制病原菌微生物生長、調(diào)節(jié)胃腸道功能等作用,同時餅粕類飼料經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后,有特殊的酸甜芳香氣味,pH下降,能有效改善飼料的適口性。目前,大多數(shù)生物發(fā)酵飼料以單一或復合菌種發(fā)酵,但是以乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵的研究報道較少。因此,本試驗以豆粕、棉籽粕和菜籽粕為原料,以乳酸菌為發(fā)酵菌種,同時添加酸性蛋白酶,研究固態(tài)發(fā)酵酶解對這3種粕類飼料粗蛋白質(zhì)、pH、酸度及抗營養(yǎng)因子含量的影響,為合理利用粕類飼料資源及開發(fā)生物蛋白飼料提供科學依據(jù)。1材料和方法1.1培養(yǎng)基的制備豆粕(市售,粗蛋白質(zhì)為41.49%);棉籽粕(市售,粗蛋白質(zhì)為41.22%);菜籽粕(市售,粗蛋白質(zhì)為40.12%)。乳酸菌為吉林省農(nóng)業(yè)科學院畜牧分院動物營養(yǎng)研究所自主保藏。MRS固體培養(yǎng)基:蛋白胨10g、肉膏10g、酵母提取物5g、檸檬酸二銨2g、乙酸鈉5g、K2HPO42g、MnSO4·4H2O0.25g、MgSO4·7H2O0.58g、葡萄糖20g、吐溫-801mL、瓊脂25g、H2O1L,調(diào)pH6.2~6.4,121℃滅菌20min。液體培養(yǎng)基:葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母提取物5g、K2HPO42g、H2O1L,pH7.0,121℃滅菌20min。1.2抑制劑和儀器酸性蛋白酶(50000U/g)購自黑龍江省肇東日成酶制劑有限公司;植酸標準品購自成都曼斯特生物有限公司;棉酚標準品購自中國藥檢所;棉籽糖標準品、水蘇糖標準品、蔗糖、胰蛋白酶(1∶250)均購自Sigma公司;葡萄糖、二甲基甲酰胺均購自沈陽東興試劑廠;單寧酸購自天津精細化工廠;間苯三酚、磺基水楊酸均購自天津市光復精細化工有限公司;偏礬酸銨購自北京化工廠;BAPNA、大豆胰蛋白酶抑制劑標準品均購自上海藍季生物有限公司。SpecordS600型紫外可見分光光度計購自AnalyticJena公司;Konic高效液相色譜儀(配備SHE-DOX示差檢測器)購自Konic公司;HZQ-C空氣浴振蕩器購自哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠。1.3發(fā)酵工藝的確定按照本實驗室篩選優(yōu)化的發(fā)酵條件(劉海燕,2013),將豆粕、棉籽粕和菜籽粕分別粉碎至40目,乳酸菌的接種量為3%,含水量調(diào)節(jié)至40%,同時添加0.5%酸性蛋白酶,自然pH,37℃密閉發(fā)酵72h。發(fā)酵期間,每隔12h取樣1次(其中粗蛋白質(zhì)測定每隔24h采樣1次),于50~55℃烘干備測。1.4指標和方法的測量1.4.1發(fā)酵樣品中粗蛋白質(zhì)含量的測定發(fā)酵前和發(fā)酵后樣品中粗蛋白質(zhì)含量的測定采用微量凱氏定氮法(GB5511-85)進行。1.4.2u3000酸、堿分別滴定待測樣品的體積取發(fā)酵前和發(fā)酵后樣品各10g,加蒸餾水90mL,于搖床上100r/min振蕩30min,測其pH?；旌弦哼^濾,取10mL濾液,加入2滴酚酞指示劑,用0.1mol/LNaOH標準液滴定至微紅色,30s不褪色即為終點,記錄消耗的NaOH體積。酸度(%以乳酸計)=C×V×K×10×100/10式中,C,標準NaOH溶液的濃度;V,滴定待測樣消耗NaOH標準溶液的體積;K,乳酸的毫克當量。1.4.3測定項目及方法發(fā)酵樣品中低聚糖含量參照宋志峰等(2009)方法進行測定;胰蛋白酶抑制劑含量其樣品處理參照趙元等(2007)方法進行,活性參照Liu等(1989)方法進行測定;脲酶活性采用pH增值法進行測定;游離棉酚含量采用間苯三酚法進行測定;植酸含量采用FeCl3顯色法進行測定;單寧含量采用礬顯色法進行測定;異硫氰酸酯含量采用紫外法進行測定;唑烷硫酮含量采用比色法進行測定。1.5數(shù)據(jù)分析2結(jié)果與分析2.1蘑菇的固結(jié)酶分解對豆粗、白質(zhì)、ph、ph和養(yǎng)分含量的影響2.1.1不同促進劑用量,分別考察不同由表1可知,豆粕經(jīng)乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解后,粗蛋白質(zhì)含量從41.49%上升至42.81%、43.66%和45.40%,分別增加了3.18%、5.23%和9.42%;在發(fā)酵前期(0~24h)pH和酸度變化迅速,pH從6.63下降至4.34,酸度從0.60%增加至4.19%,此后,pH持續(xù)下降,而酸度持續(xù)升高,但變化較平緩,發(fā)酵至72h時,pH和酸度分別達到4.23和4.69%。2.1.2棉籽糖的降解由表2可知,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對豆粕低聚糖(水蘇糖和棉籽糖)含量影響較大,未發(fā)酵時水蘇糖含量為5.21mg/g,發(fā)酵12h后降解至4.53mg/g,降解率為13.05%,此后隨著發(fā)酵時間延長,水蘇糖降解率均有不同程度增加,分別為37.62%、42.99%、53.36%、57.77%和61.42%;棉籽糖的降解情況與水蘇糖相似,未發(fā)酵時棉籽糖含量為1.73mg/g,此后隨發(fā)酵時間的延長,棉籽糖均有不同程度的降解,降解率分別為28.32%、36.99%、49.13%、52.02%、53.76%和56.65%;乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對豆粕胰蛋白酶抑制劑影響很大,發(fā)酵前豆粕的胰蛋白酶抑制劑活性為4550.94TIU/g,發(fā)酵12h后急劇下降至912.68TIU/g,下降近80%,此后胰蛋白酶抑制劑活性持續(xù)下降,至72h時僅為50.32TIU/g;未發(fā)酵豆粕中脲酶的活性較低,僅為0.05mgN/(g·min),發(fā)酵12h后脲酶活性為0;乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對豆粕植酸含量影響不明顯,未發(fā)酵時豆粕中植酸含量為25.59mg/g,發(fā)酵72h時植酸含量為23.07mg/g,降解率僅為9.85%,說明乳酸菌對植酸的降解能力十分有限。2.2蘑菇的固結(jié)酶分解對棉碗白、ph、ph和養(yǎng)分含量的影響2.2.1發(fā)酵溫度和粗蛋白質(zhì)量由表3可知,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對棉籽粕粗蛋白質(zhì)含量影響明顯,未發(fā)酵時棉籽粕粗蛋白質(zhì)含量為41.22%,發(fā)酵24、48和72h時,粗蛋白質(zhì)含量分別增加了3.66%、5.92%和7.76%;pH和酸度在發(fā)酵前期(0~24h)時分別迅速降低和升高,pH從5.98下降至4.83,酸度從0.60%增加至3.16%,隨后持續(xù)降低和升高,但是變化趨勢平緩。2.2.2乳酸菌固體發(fā)酵酶解對棉籽粕的降解作用由表4可知,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解不但沒有降解游離棉酚,反而還有不同程度的增加,發(fā)酵前游離棉酚含量為0.49mg/g,發(fā)酵48h時為0.76mg/g,增加了55.10%,發(fā)酵72h時為0.89mg/g,增加了81.63%;同樣,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對棉籽粕中的植酸降解能力也十分有限,發(fā)酵24、48和72h時的植酸降解率分別為5.48%、14.34%和15.91%;但是,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對單寧有較強的降解能力,并呈現(xiàn)出前期降解慢,而中后期降解快的趨勢,發(fā)酵24h時單寧的降解率為19.75%,48h降解率為37.52%,72h時降解率可達62.30%。2.3蘑菇的固結(jié)酶分解對菜籽、粗蛋白質(zhì)、ph、ph值和抗養(yǎng)分含量的影響2.3.1發(fā)酵溫度對粗蛋白質(zhì)的影響由表5可知,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對菜籽粕粗蛋白質(zhì)含量影響明顯,發(fā)酵24、48和72h時,粗蛋白質(zhì)含量分別增加了2.32%、6.33%和8.35%;pH和酸度呈現(xiàn)出與豆粕和棉籽粕相同的變化趨勢,發(fā)酵前期變化迅速,后期趨于平緩。2.3.2發(fā)酵12h后異硫氰酸酯和唑烷硫酮的降解由表6可知,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對菜籽粕中異硫氰酸酯和唑烷硫酮具有明顯的降解作用,未發(fā)酵時異硫氰酸酯和唑烷硫酮分別為3.86和1.73mg/g,發(fā)酵12h后異硫氰酸酯和唑烷硫酮降解率分別為58.81%和28.90%,發(fā)酵48h時降解率分別為74.09%和58.96%,發(fā)酵72h后降解率分別為78.24%和88.44%;同樣,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對菜籽粕中植酸的降解能力也十分有限,發(fā)酵48和72h時,植酸的降解率分別為1.19%和5.39%。3討論3.1豆?jié){營養(yǎng)品質(zhì)變化植物蛋白的結(jié)構(gòu)大都十分緊密,分子質(zhì)量較大,不易消化吸收,吸收率往往也低于動物蛋白。乳酸菌在發(fā)酵過程中,需要利用底物中的營養(yǎng)物質(zhì)來滿足其維持需要和生長繁殖,底物中碳水化合物是乳酸菌生長繁殖能量的主要供應者,同時也為微生物蛋白質(zhì)、脂肪和核酸等大分子物質(zhì)的合成提供碳源,與此同時,在乳酸菌發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酶類能夠降解底物中纖維素、半纖維素、淀粉和果膠等大分子物質(zhì)。因此,植物蛋白原料經(jīng)微生物發(fā)酵后,其蛋白質(zhì)絕對含量不變或略有下降,但由于碳水化合物的降解導致粗蛋白質(zhì)相對含量的上升(孫宏,2013)。本試驗中,豆粕經(jīng)乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵后,發(fā)酵底物中粗蛋白質(zhì)含量略有增加,這與尹惠君(2011)、胡永娜(2012)、胡瑞等(2013)研究結(jié)果一致。乳酸菌為化能異養(yǎng)型微生物,代謝活動以葡萄糖為碳源和能源,經(jīng)發(fā)酵作用可將單糖轉(zhuǎn)變?yōu)榈头肿拥娜樗岷推渌袡C酸,使得環(huán)境pH下降,酸度升高。本試驗中豆粕經(jīng)乳酸菌發(fā)酵酶解后,在前期(0~12h)pH和酸度變化迅速,此后分別持續(xù)下降和升高,但趨于穩(wěn)定。劉可(2009)研究發(fā)現(xiàn),乳酸菌在發(fā)酵酸豆乳過程中,酸度不斷增加,發(fā)酵前期(0~6h)酸度增加明顯,后期增加幅度趨于平緩;甘晶(2012)研究指出,乳酸菌發(fā)酵豆乳,發(fā)酵7h后菌種達到對數(shù)期,pH下降趨于穩(wěn)定,這與本試驗結(jié)果基本一致。豆粕雖然蛋白質(zhì)含量較高,氨基酸配比合理,是公認理想的飼料蛋白來源,但也存在著胰蛋白酶抑制劑等多種抗營養(yǎng)因子,限制了對豆粕的使用。豆粕中的抗營養(yǎng)因子主要有胰蛋白酶抑制因子、凝集素、抗原蛋白、單寧、植酸、致甲狀腺腫素、抗維生素因子、脹氣因子、生物堿等。其中,含量較高,對豆粕營養(yǎng)效價、適口性及動物健康危害較大的有脹氣因子、胰蛋白酶抑制因子、植酸和脲酶等。大豆低聚糖是可溶性寡糖的總稱,其主要成分是水蘇糖、棉籽糖和蔗糖等。棉籽糖是三糖,是半乳糖以α(1,6)糖苷鍵與蔗糖的葡萄糖基連接,而水蘇糖是四糖,是棉籽糖的半乳糖以α(1,6)糖苷鍵與半乳糖連接。水蘇糖和棉籽糖是半乳糖類的非還原性糖,由于動物小腸黏液中缺乏α-半乳糖苷酶,水蘇糖和棉籽糖不被消化而直接進入大腸中,經(jīng)腸道產(chǎn)氣微生物利用,轉(zhuǎn)化成揮發(fā)性脂肪酸,然后再產(chǎn)生氣體,如CO2、H2、NH3,也可產(chǎn)生少量甲烷等氣體,從而引起動物嗝氣、腸鳴等腸胃脹氣或腹疼現(xiàn)象。大豆低聚糖可以被α-半乳糖苷酶所降解,許多乳酸菌具有較強的α-半乳糖苷酶活性。本試驗中,乳酸菌固態(tài)復合發(fā)酵具有較強的低聚糖降解能力,發(fā)酵48h時,水蘇糖和棉籽糖的降解率分別達到53.36%和52.02%。蔡國林等(2008)研究指出,采用乳酸菌和酵母菌固態(tài)混合發(fā)酵豆粕,可使棉籽糖含量從1.2%降解至0.1%,水蘇糖則被完全降解,這與本試驗結(jié)果基本一致。胰蛋白酶抑制劑是一種分子質(zhì)量為7975~21500u的多肽。胰蛋白酶抑制劑的主要危害是抑制人和動物分泌的胰蛋白酶活性。當人和動物食用了含有胰蛋白酶抑制劑的大豆制品后,一方面胰蛋白酶抑制劑阻礙腸道內(nèi)蛋白水解酶的作用而使蛋白質(zhì)消化率下降,從而引起惡心、嘔吐等腸胃中毒癥狀;另一方面胰蛋白酶抑制劑還作用于胰腺本身,發(fā)生補償性反應,造成機能亢進,刺激胰腺分泌過多的胰腺酶,導致胰腺分泌的內(nèi)源性必需氨基酸缺乏,從而造成含硫氨基酸豐富的蛋白質(zhì)內(nèi)源代謝損失,動物出現(xiàn)消化吸收功能失調(diào)或紊亂,嚴重時出現(xiàn)腹瀉,抑制了機體的生長。在本試驗中,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對豆粕胰蛋白酶抑制劑具有較強的降解能力,發(fā)酵12h時降解率達到80%。劉雪花(2011)利用乳酸菌、芽孢桿菌和酵母菌復合發(fā)酵豆粕,結(jié)果發(fā)現(xiàn),胰蛋白酶抑制劑活性從2.687mg/g降至0.467mg/g,活性降低82.6%;李文立等(2013)采用枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌復合發(fā)酵豆粕,結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著發(fā)酵時間的延長,豆粕中胰蛋白酶抑制劑含量顯著降低,這與本試驗結(jié)果一致,說明乳酸菌發(fā)酵酶解能夠有效降解胰蛋白酶抑制劑,主要是由于乳酸菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的蛋白酶和復合添加的酸性蛋白酶可以將胰蛋白酶抑制劑水解成多肽,改變其結(jié)構(gòu)和活性中心,并隨著發(fā)酵酶解的進行而逐步水解。脲酶是大豆中能將尿素水解成NH3和CO2的酶。它本身沒有毒性,但在適宜的水分、溫度和pH條件下可被激活,將大豆中的部分含氮化合物分解成氨,降低蛋白氮、非蛋白氮的利用率,大量氨的存在會引起機體氨代謝障礙,導致人和動物體中毒。由于脲酶活性對溫度十分敏感,在120℃時超過97.2%的脲酶就會失活。在本試驗中,未發(fā)酵豆粕中脲酶活性僅為0.05mgN/(g·min),這可能與豆粕的生產(chǎn)工藝相關(guān),發(fā)酵12h后脲酶活性為0。唐翔宇(2011)研究指出,未發(fā)酵豆粕的脲酶活性為0.201mgN/(g·min),用益生菌發(fā)酵后降解至0.01mgN/(g·min);劉雪花(2011)用混合菌株發(fā)酵豆粕,結(jié)果發(fā)現(xiàn),脲酶活性由豆粕發(fā)酵前的0.473U/g降解至0.114U/g,降解率為75.81%,本試驗結(jié)果與上述研究結(jié)果一致,充分說明微生物發(fā)酵能夠有效降解脲酶。植酸是維生素B族的一種肌醇六磷酸酯,是植物性飼料中有機磷的主要存在形式,豆粕中60%~80%的磷酸以植酸形式存在。豆粕中的植酸含量可達2%左右,是一種很強的絡合劑,能在腸胃中與帶正電荷的金屬陽離子形成難溶的植酸鹽絡合物,從而導致礦物質(zhì)元素的利用率和生物學效價降低,嚴重者會影響機體正常代謝和生殖能力。此外,植酸還能與蛋白質(zhì)或酶結(jié)合形成難溶的植酸—蛋白復合物,降低了蛋白質(zhì)的吸收利用。在本試驗中,所篩選的乳酸菌對植酸的降解能力十分有限,發(fā)酵72h時降解率僅為9.85%,這與Stale等(2005)研究結(jié)果一致,表明乳酸菌能夠顯著降低胰蛋白酶抑制劑的活性,但對植酸的降解作用不明顯。目前,關(guān)于微生物發(fā)酵降解植酸的報道隨著發(fā)酵菌種的不同,結(jié)果也不盡一致,唐翔宇(2011)利用納豆芽孢桿菌發(fā)酵豆粕,結(jié)果發(fā)現(xiàn)48h后植酸的降解率為28.65%;姜丹(2011)研究指出,酵母對豆粕中植酸的降解能力要強于木霉;王婧瑤(2013)利用高蛋白酶降解菌通過紫外誘變的方式,可使豆粕中植酸的降解率達50%以上。微生物發(fā)酵對植酸的降解取決于發(fā)酵過程中產(chǎn)生植酸降解酶的活性,因此,不同菌種對植酸的降解不同,本試驗中所篩選的乳酸菌對植酸的降解能力十分有限,需要進一步的改造優(yōu)化。3.2復合固體發(fā)酵對游離棉酚的影響乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解棉籽粕與豆粕一樣,同樣能夠提高粗蛋白質(zhì)的含量,降低pH,增加酸度。棉籽粕中含有的棉酚、單寧、植酸等抗營養(yǎng)因子,嚴重制約了棉籽粕在畜禽日糧中的使用。棉酚是一類多元酚類毒性物質(zhì),在棉籽粕中的含量為2.4%~4.8%。棉酚按其存在形式可分為結(jié)合棉酚和游離棉酚2大類。研究表明,動物攝入游離棉酚可直接產(chǎn)生急、慢性毒害反應,游離棉酚也可與棉籽蛋白中的賴氨酸結(jié)合,降低有效氨基酸的含量。世界衛(wèi)生組織及FDA建議,食用棉籽蛋白制品中游離棉酚的含量不得超過400mg/kg,總棉酚含量不超過12000mg/kg,國家飼料衛(wèi)生標準GB13078-2001明確規(guī)定,肉雞、蛋雞和育肥豬的配合飼料中游離棉酚含量的容許量分別不超過100、20和60mg/kg。本試驗中,乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵不但沒有降低棉籽粕中游離棉酚的含量,而且還有不同程度的增加,發(fā)酵48h時,游離棉酚增加55.10%,發(fā)酵72h時增加81.63%,這主要是由于乳酸菌發(fā)酵酶解過程中產(chǎn)生的蛋白酶或添加的酸性蛋白酶將結(jié)合棉酚降解為游離棉酚,從而使得游離棉酚含量增加。目前,國內(nèi)關(guān)于棉酚的微生物降解結(jié)果也不一致。許多報道認為,微生物固態(tài)發(fā)酵對棉酚的脫毒率達70%以上(顧賽紅等,2003;張文舉等,2006),但也有不少研究結(jié)果認為,微生物發(fā)酵對游離棉酚沒有作用。賈曉峰等(2009)研究指出,利用2株黑曲霉發(fā)酵棉籽粕不但沒有脫毒作用,反而使游離棉酚的含量增加了7.79和6.3倍,假絲酵母對棉酚的脫毒率僅為5.96%~19.64%;常磊(2012)研究指出,利用3種芽孢桿菌和5種酵母處理棉籽粕,均不能有效去除游離棉酚;孫宏(2013)研究發(fā)現(xiàn),利用芽孢桿菌和蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵對游離棉酚有負面影響。單寧又稱鞣酸,是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚類化合物,在棉籽粕中平均含量為3mg/g。單寧可以干擾蛋白質(zhì)的利用,在畜禽體內(nèi)可與消化道中的蛋白質(zhì)和酶結(jié)合發(fā)生沉淀反應,形成溶解度極低的絡合物,使飼料產(chǎn)生澀味影響其適口性,從而導致營養(yǎng)物質(zhì)消化率下降。在本試驗中,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對單寧有較強的降解作用,但是發(fā)酵前期較慢而中后期快,發(fā)酵24h時降解率為19.75%,48h降解率為37.52%,72h降解率可達62.30%;同樣,乳酸菌固態(tài)發(fā)酵酶解對棉籽粕植酸的降解能力也十分有限,發(fā)酵72h時降解率為15.91%。然而目前國內(nèi)對微生物發(fā)酵棉籽粕的研究主要集中在對棉酚的降解,而對單寧、植酸的研究報道很少。國內(nèi)關(guān)于微生物發(fā)酵對菜籽粕植酸降解的報道不一致,且大多采用復合菌種發(fā)酵,發(fā)酵效果受菌種、基質(zhì)pH、溫度和濕度等因素影響很大。孫林(2008)選用6%植物乳桿菌、4%蠟樣芽胞桿菌和6%枯草芽孢桿菌,30℃發(fā)酵2d時,菜籽粕中植酸的降解率高達90.15%;陳娟等(2010)研究指出,白地霉、產(chǎn)朊假絲酵母、黑曲霉和熱帶假絲酵母復合發(fā)酵可使植酸降解率高達43.9%;胡永娜等(2012)研究發(fā)現(xiàn),枯草芽孢桿菌、糞腸球菌和產(chǎn)朊假絲酵母混合發(fā)酵對植酸的降解率為19%。在本試驗中,乳酸菌發(fā)酵對菜籽粕植酸的降解能力十分有限,發(fā)酵72h時降解率僅為5.39%,這與上述試驗結(jié)果相比,降解率較低,其具體原因還有待進一步的研究。4乳酸菌固體發(fā)酵酶解對養(yǎng)魚業(yè)的影響(1)乳酸菌和酸性蛋白酶復合固態(tài)發(fā)酵豆粕、