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寄生蟲病的免疫學診斷目錄/CONTENTS1皮內(nèi)實驗2環(huán)卵沉淀實驗3間接血凝試驗4酶聯(lián)免疫吸附試驗01皮內(nèi)實驗實驗原理:宿主在寄生蟲變應原刺激后,體內(nèi)產(chǎn)生親細胞性抗體,當其與相應抗原結(jié)合后,肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質(zhì),引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅疹,以此便可判斷體內(nèi)是否含有某種特異性抗體存在。皮內(nèi)實驗操作方法:按照1:3000的比例制備新鮮成蟲勻漿,使用無菌注射器和皮試針頭對待檢動物進行皮試注射,注射劑量為0.1mL。注射后15min觀察待檢動物的注射部位是否出現(xiàn)丘疹,如果出現(xiàn)要測量其最大直徑,最大直徑大于或等于1cm的為陽性反應。皮內(nèi)實驗02環(huán)卵沉淀實驗操作方法:1、抽取待檢動物的血液樣本進行離心處理獲得血清;2、用融化的石蠟在干凈的載玻片上劃2道間距約為20mm的直線,待石蠟干燥后在2道線間滴加2滴待檢動物的血清。3、向血清中加入約100-150個干燥的蟲卵混勻,覆上蓋玻片并用石蠟密封四周。4、將玻片置于溫箱中培育48h后在顯微鏡下觀察結(jié)果。根據(jù)蟲卵周圍出現(xiàn)的沉淀物的大小進行結(jié)果判斷。環(huán)卵沉淀實驗03間接血凝試驗操作方法:先在U型微量血凝板的第一排的第1~4孔內(nèi)分別滴加0.9%的氯化鈉溶液,再向第1孔加入待檢血清樣本混勻,對第2、3、4孔依次根據(jù)遞減稀釋法進行滴加。在第3孔和第4孔內(nèi)加入稀釋后的致敏紅細胞懸液,旋轉(zhuǎn)震搖混勻后在室溫下靜置1h后觀察記錄結(jié)果。間接血凝試驗04酶聯(lián)免疫吸附試驗操作方法:將蟲體抗原包被聚苯乙烯板,4℃冰箱內(nèi)過夜培育,沖洗后加入患畜血清,使免疫反應在載體上進行,然后加入酶標記的第二抗體,作為免疫反應的指示劑,通過酶對底物的催化作用而產(chǎn)生有色產(chǎn)物,根據(jù)其光密度以定量測定抗體含量。此法可用于宿主體液、排泄物和分泌物內(nèi)特異性抗體或抗原的檢測,靈

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