hiv抗體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序課件

HIV抗體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序天津市衛(wèi)生防病中心夏建暉?全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?〔2004年版〕

共10章

*樣品的采集和處理*HIV抗體檢測(cè)*HIV核酸定性檢測(cè)*HIVRNA定量測(cè)定〔病毒載量測(cè)定〕*CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)*HIV抗原檢測(cè)*艾滋病實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防*艾滋病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理*艾滋病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量考評(píng)方法*HIV診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)估方案HIV抗體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

檢測(cè)程序：生物平安：試驗(yàn)操作：室內(nèi)質(zhì)控：?全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?中的許多內(nèi)容，廣泛適用于臨床實(shí)驗(yàn)室。HIV抗體檢測(cè)程序:初篩-復(fù)檢-確認(rèn)

復(fù)檢： 對(duì)初篩呈陽性反響的樣品用原有試劑 和另外一種不同原理或不同廠家的篩 查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均 呈陰性反響，那么報(bào)告HIV抗體陰性； 如均呈陽性反響，或一陰一陽，需送 艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。HIV抗體檢測(cè)程序:初篩-復(fù)檢-確認(rèn)

重新采血，將兩份標(biāo)本一同送檢HIV抗體復(fù)檢化驗(yàn)單見?技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?附表2見?技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?附表2HIV抗體檢測(cè)程序:現(xiàn)象一

出現(xiàn)HIV抗體篩查陽性時(shí)，有的實(shí)驗(yàn)室僅是通知受檢者到確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室采血檢測(cè)，不向確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室送原血樣和HIV抗體復(fù)檢化驗(yàn)單。這樣是不符合要求的。篩查陽性時(shí)，必須將原血樣和HIV抗體復(fù)檢化驗(yàn)單送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。最好是在送樣單上注明聯(lián)系，以便及時(shí)反響結(jié)果。HIV抗體檢測(cè)程序:現(xiàn)象二出現(xiàn)HIV抗體篩查陽性時(shí)，有的單位過度重視，在沒得到確認(rèn)結(jié)果時(shí)，將受檢者作為HIV感染者對(duì)待，造成不必要的恐慌。天津目前一般人群的HIV感染率在萬分之一左右，尚屬于低發(fā)區(qū)。在術(shù)前、產(chǎn)前篩查中會(huì)出現(xiàn)許多篩查陽性、經(jīng)確認(rèn)為陰性的情況。出現(xiàn)HIV抗體篩查陽性時(shí)，實(shí)驗(yàn)室沒有必要擴(kuò)大知情范圍，及時(shí)送檢。

縮小知情范圍，可能有助于減少恐慌。HIV感染者，與乙肝感染者的消毒處理措施沒有什么差異?！簿蛡魅拘远裕腋尾《靖鼮閮措U(xiǎn)〕

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?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)已正式發(fā)布，并于2004年10月1日正式實(shí)施。

規(guī)定了實(shí)驗(yàn)室生物平安管理和實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)原那么同時(shí)還規(guī)定了生物平安分級(jí)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)和實(shí)驗(yàn)室平安行為等方面內(nèi)容。

該標(biāo)準(zhǔn)解決了實(shí)驗(yàn)室平安管理存在的隱患。

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?全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?第二章[HIV抗體檢測(cè)]中提出“HIV抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?對(duì)II級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室〔BSL-2〕的各項(xiàng)要求。〞第七章[艾滋病實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防]中進(jìn)一步指出“艾滋病血清學(xué)檢測(cè)〔包括篩查和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室〕、免疫學(xué)和核酸檢測(cè)應(yīng)在符合Ⅱ級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室〔BSL-2〕要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。〞

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Ⅱ級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室，是對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室的普遍要求，是臨床實(shí)驗(yàn)室開展的方向。

一份未知樣品，無論檢測(cè)工程如何，都具有相同的潛在傳染性。平安投入缺乏，將成為今后臨床實(shí)驗(yàn)室的重要隱患生物平安

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危害等級(jí)II〔中等個(gè)體危害，有限群體危害〕能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。危害等級(jí)III〔高個(gè)體危害，低群體危害〕能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。Ⅱ級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和設(shè)備要求

(?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?)

u

實(shí)驗(yàn)室所用設(shè)施、設(shè)備和材料〔含防護(hù)屏障〕均應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和要求u

BSL-2實(shí)驗(yàn)室滿足BSL-1的要求。

實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗。應(yīng)有足夠的存儲(chǔ)空間擺放物品以方便使用。在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外還應(yīng)當(dāng)有供長(zhǎng)期使用的存儲(chǔ)空間。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)使用專門的工作服；應(yīng)戴乳膠手套。在實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)域外應(yīng)有存放個(gè)人衣物的條件。在實(shí)驗(yàn)室所在的建筑內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物平安柜(防止的危害：氣溶膠和噴濺)。應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。有可靠的電力供給和應(yīng)急照明。必要時(shí)，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物平安柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備用電源。實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確識(shí)別的標(biāo)識(shí)。

生物平安生物平安柜(防止的危害：氣溶膠和噴濺)

確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的實(shí)驗(yàn)過程包括:離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器(容器內(nèi)部的壓力可能與大氣壓不一致)、動(dòng)物鼻孔接種、從動(dòng)物或胚胎卵采集感染組織。生物平安

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對(duì)于已經(jīng)建成的實(shí)驗(yàn)室，由于格局無法改變，需要提醒大家注意:應(yīng)努力將工作區(qū)與休息區(qū)別離，并盡可能滿足生物平安實(shí)驗(yàn)室的其它要求。個(gè)人防護(hù)裝備：手套與實(shí)驗(yàn)室工作服2

手套：所戴手套無漏損。戴好手套后可完全遮住手及腕部，如必要，可覆蓋實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)罩服或外衣的袖子〔一次性袖套〕。在撕破、損壞或疑心內(nèi)部受污染時(shí)更換手套。手套為實(shí)驗(yàn)室工作專用。在工作完成或中止后應(yīng)消毒、摘掉并平安處置。2

實(shí)驗(yàn)室工作服:離開實(shí)驗(yàn)室區(qū)域之前應(yīng)脫去防護(hù)服。當(dāng)具潛在危險(xiǎn)的物質(zhì)極有可能濺到工作人員時(shí)，應(yīng)使用塑料圍裙或防液體的長(zhǎng)罩服。生物平安

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實(shí)驗(yàn)操作中的生物平安本卷須知：

進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾，修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲，以免刺破手套。長(zhǎng)發(fā)應(yīng)束在腦后。在工作區(qū)內(nèi)不應(yīng)配帶戒指、耳環(huán)、腕表、手鐲、項(xiàng)鏈和其他珠寶。l

進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣，戴手套。必要時(shí)〔手套質(zhì)量欠佳或接觸物傳染危險(xiǎn)性大〕，那么應(yīng)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。2

嚴(yán)禁在艾滋病實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化裝。2

不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。2

食品、飲料及類似物品只應(yīng)在指定的區(qū)域中準(zhǔn)備和食用。食品和飲料只應(yīng)存放于非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域內(nèi)指定的專用處。冰箱應(yīng)適當(dāng)標(biāo)記以明確其規(guī)定用途。2

禁止在工作區(qū)內(nèi)使用化裝品和處理隱形眼鏡。l

離開實(shí)驗(yàn)室前必須脫去隔離衣，并洗手。工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動(dòng)水洗手。HIV抗體檢測(cè)技術(shù)要求建立標(biāo)準(zhǔn)操作程序禁止肉眼判讀！保證酶標(biāo)儀，洗板機(jī)正常運(yùn)轉(zhuǎn)保證加樣器準(zhǔn)確選擇高質(zhì)量的與加樣器配套的TIP頭使用有效期內(nèi)的試劑保證樣品質(zhì)量酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)〔ELISA〕ELISA是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做半定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA的影響因素較多，加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。HIV抗體檢測(cè)中常規(guī)使用ELISA試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)〔ELISA〕1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)開展為ELISA技術(shù)，酶聯(lián)免疫吸附劑試驗(yàn)。特點(diǎn)：在聚苯乙烯固相載體外表組裝免疫活性物質(zhì)形成“免疫吸附劑〞酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，化學(xué)顯色劑進(jìn)行信號(hào)放大ELISA試驗(yàn)結(jié)果判斷在進(jìn)行ELISA試驗(yàn)時(shí)，要嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。按照說明書中的方法，計(jì)算臨界值〔Cutoff值〕。樣品OD值≥臨界值陽性樣品OD值<臨界值陰性本卷須知保證實(shí)驗(yàn)室溫度，室溫過低有可能造成吸光度值偏低。ELISA試驗(yàn)的敏感性很高，如果操作不當(dāng)很容易出現(xiàn)非特異性反響。在操作過程中，尤其應(yīng)注意洗滌過程。洗滌徹底可減少假陽性的時(shí)機(jī)。進(jìn)行ELISA試驗(yàn)時(shí)，必須用酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定，不得目測(cè)結(jié)果。使用酶標(biāo)儀時(shí)，要防止酶標(biāo)孔內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響判讀結(jié)果。初篩陽性標(biāo)本應(yīng)做進(jìn)一步確認(rèn)?；覅^(qū)灰區(qū)定義：通常把在臨界值(Cutoff)下10％的OD值標(biāo)本定為灰色帶反響。處理原那么：對(duì)這類標(biāo)本包括OD值等于或略高于Cutoff值的標(biāo)本，建議進(jìn)行復(fù)檢或用其他方法(不同類型的篩查試劑或確證試劑)進(jìn)行復(fù)檢，這將有助于發(fā)現(xiàn)早期感染者。ELISA操作中的本卷須知試劑準(zhǔn)備加樣溫育洗板顯色比色試劑準(zhǔn)備從冰箱中取出的試劑，待溫度與室溫平衡后使用；所用蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。加樣加樣不可太快，防止加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。孵育ELISA孵育：水浴箱？枯燥恒溫箱？由于水的比熱大于空氣的，水浴箱里的各局部溫差要小于恒溫箱中的。

水浴箱也有他的缺乏出就是有水氣比照色有影響

恒溫箱沒有水氣，不會(huì)對(duì)杯底有干擾孵育時(shí)，一定要用膠紙封將板子封好，而且不要疊放洗板洗板液一般為含0.05%Tween20的中性PBS。Tween20為一種非離子去垢劑，既含親水基團(tuán)，也含疏水基團(tuán)。洗滌作用機(jī)理，借助其疏水基團(tuán)與固相上蛋白的疏水基團(tuán)形成疏水鍵，從而削弱蛋白與固相的吸附，同時(shí)在其親水基團(tuán)與液相中水分子的結(jié)合作用下，促使蛋白質(zhì)脫離固相而進(jìn)入液相ELISA試驗(yàn)中的疑問：洗板洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反響步驟，卻也決定著實(shí)驗(yàn)成敗ELSIA就是靠洗滌來到達(dá)別離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以去除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反響過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來?？梢哉f在ELISA操作中，洗滌是最關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

ELISA試驗(yàn)中的疑問洗板：洗板機(jī)?手工?只要操作符合要求，都能得到正確的結(jié)果。最后要用吸水紙徹底拍干，方能得到好的結(jié)果。ELISA試驗(yàn)中的疑問洗板機(jī)：更為科學(xué)合理，效率高加強(qiáng)日常保養(yǎng)、維護(hù)，預(yù)防洗板機(jī)堵孔和機(jī)械故障。合理設(shè)置洗板機(jī)參數(shù)，防止孔間交叉污染，減少殘留液〔沖洗針位置調(diào)整好〕〔Uor平底〕出現(xiàn)問題及時(shí)與廠家聯(lián)系ELISA試驗(yàn)中的疑問手工洗板：如何防止孔與孔之間的交叉污染。第一次加液加8成〔因?yàn)榇藭r(shí)候污染的時(shí)機(jī)也最大〕，甩掉液體后立即扣干，以后按照說明書要求進(jìn)行洗板。顯色參加底物A和B后，應(yīng)振蕩混勻當(dāng)?shù)孜餅镺PD時(shí)，顯色反響應(yīng)避光進(jìn)行一般商品試劑盒顯色反響條件為37℃或室溫反響15～30min?！惨栽噭┱f明為準(zhǔn)〕顯色顯色是ELISA中的最后一步溫育反響，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反響的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔那么隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。各類酸性終止液那么會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)〔450nm〕測(cè)讀吸光值。比色加酸終止顯色反響后，比色測(cè)定前應(yīng)振蕩混勻測(cè)定時(shí)，要注意酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)是否已調(diào)至適宜比較好的酶標(biāo)儀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)比色測(cè)定，所謂雙波長(zhǎng)比色，即在敏感波長(zhǎng)〔此時(shí)對(duì)所顯色具最大光吸收〕如450nm和非敏感波長(zhǎng)〔所測(cè)得的光吸收為微孔板上的劃痕、污跡以及指紋等所致〕，最后從儀器得到的讀數(shù)為在敏感波長(zhǎng)測(cè)得的吸光度與非敏感波長(zhǎng)測(cè)得的吸光度之差。比色酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000－2.000，新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900，甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以“*〞或“over〞或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小于可測(cè)范圍，比方某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000－2.900，而其線性范圍僅0.000－2.000，這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15－30℃，使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

ELISA試驗(yàn)中假陽性產(chǎn)生原因？ELISA試驗(yàn)中的疑問：假陽性產(chǎn)生原因？樣品加錯(cuò)位置，標(biāo)本搞錯(cuò)洗板機(jī)設(shè)置不當(dāng)，洗板時(shí)洗滌液溢出，污染其它孔洗板機(jī)內(nèi)部管道有真菌生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)際孵育時(shí)間過長(zhǎng)，溫度過高待測(cè)標(biāo)本溶血或含有血細(xì)胞。待測(cè)標(biāo)本長(zhǎng)菌或其它原因混濁。不明原因的假陽性．假陽性產(chǎn)生原因？標(biāo)本溶血

注意防止出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，那么其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面參加的HRP底物反響顯色。假陽性產(chǎn)生原因？標(biāo)本被細(xì)菌污染細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。

假陽性產(chǎn)生原因？標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng)

標(biāo)本在2~8℃下保存時(shí)間過長(zhǎng)，IgG可聚合成多聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性。血清標(biāo)本如是以無菌操作別離，那么可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，那么建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在－70℃以下。假陽性產(chǎn)生原因？標(biāo)本凝固不全

血液采集后，如收集管中無促凝劑和抗凝劑，那么血液通常在半小時(shí)后開始凝固，18~24h完全凝固。日常檢驗(yàn)中，常在血液還未開始凝固時(shí)即離心別離血清，此時(shí)因血液沒有完全凝固，離出的“血清〞并非為完全的血清，其中仍殘留局部纖維蛋白原，如將其參加微孔中，在ELISA測(cè)定過程中仍可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果血液標(biāo)本采集后，應(yīng)使其充分凝固后再別離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶別離膠的采血管或于采血管中參加適當(dāng)?shù)拇倌齽?。冰凍保存?biāo)本防止反復(fù)凍融反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。影響ELISA測(cè)定的因素試劑盒的因素：妥善保存試劑，在有效期內(nèi)使用試驗(yàn)操作形成良好的操作習(xí)慣：加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，防止加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。嚴(yán)格按試劑說明書操作:空白孔不加樣品和酶標(biāo)試劑操作過程中集中精力：防止加樣錯(cuò)誤什么是“花板〞空白和陰性，陽性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本的陽性率很高，每板除對(duì)照孔外，有時(shí)陽性高達(dá)10孔之多，而大多數(shù)陽性標(biāo)本都出現(xiàn)弱陽性結(jié)果。這就是試驗(yàn)中所說的“花板〞問題。這種現(xiàn)象對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的正常判斷造成了很大的影響。

“花板〞產(chǎn)生的原因：檢測(cè)過程存在瑕疵：首先考慮檢測(cè)過程中的操作是否存在問題。通過完善的質(zhì)量控制措施，可以查找可能存在的操作問題，或排除“操作〞造成“花板〞的可能。2試劑質(zhì)量問題：用戶，有權(quán)利反響產(chǎn)品質(zhì)量問題，要求廠家提供效勞。反映問題時(shí)要有根據(jù)，至少應(yīng)該能夠證明主要問題在于試劑質(zhì)量在檢測(cè)過程中采取措施預(yù)防“花板〞1抽取樣本時(shí)應(yīng)抽出足夠檢驗(yàn)量的血液標(biāo)本，按比例加抗凝劑，便于離心，得到足夠的血清〔血漿〕。2血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測(cè)或讓血液過夜后再檢測(cè)。這樣才能使得血液充分收縮，讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至最低。3檢測(cè)之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長(zhǎng)時(shí)間，使血細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細(xì)胞與血清徹底別離。4加樣時(shí)不能參加紅細(xì)胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否那么會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板〞的出現(xiàn)。6用洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板〞的出現(xiàn)。提問某實(shí)驗(yàn)室將假設(shè)干HIV抗體初篩陽性標(biāo)本，送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，確認(rèn)結(jié)果為陰性。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？

某HIV抗體初篩一年的檢測(cè)量在3000－5000份，所有試驗(yàn)均未出現(xiàn)呈陽性反響的標(biāo)本，連續(xù)多年。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？

某實(shí)驗(yàn)室在使用某種ELISA試劑進(jìn)行HIV抗體初篩時(shí)，屢次出現(xiàn)“花板〞現(xiàn)象。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？在缺乏有效的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制和質(zhì)量管理的情況下，

不能排除實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題的可能。

某實(shí)驗(yàn)室將假設(shè)干HIV抗體初篩陽性標(biāo)本，送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，確認(rèn)結(jié)果為陰性。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？

某HIV抗體初篩一年的檢測(cè)量在3000－5000份，所有試驗(yàn)均未出現(xiàn)呈陽性反響的標(biāo)本，連續(xù)多年。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？

某實(shí)驗(yàn)室在使用某種ELISA試劑進(jìn)行HIV抗體初篩時(shí)，屢次出現(xiàn)“花板〞現(xiàn)象。此初篩實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量存在問題嗎？?全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?〔2004年版〕

第八章艾滋病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理HIV抗體檢驗(yàn)質(zhì)量保證質(zhì)量控制〔qualitycontrol〕對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)來說是實(shí)施醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量保證中的一局部，主要由實(shí)驗(yàn)室來完成，將質(zhì)控物和待測(cè)標(biāo)本一起進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，從控制值了解分析過程的質(zhì)量情況，同時(shí)使用一些統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行歸鈉和分析，嚴(yán)格控制外來誤差，所以質(zhì)量控制又被稱為過程質(zhì)量控制或統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制。質(zhì)量控制〔qualitycontrol〕在理論和實(shí)踐上，又可分為兩個(gè)主要局部：室內(nèi)質(zhì)量控制：用來評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室批間精密度室間質(zhì)量評(píng)價(jià)/能力驗(yàn)證(ProficiencyTesting)目的在于幫助實(shí)驗(yàn)人員發(fā)現(xiàn)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度，以利提高實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作質(zhì)量。每年的血清考評(píng)與能力驗(yàn)證本質(zhì)是相同由于考評(píng)結(jié)果具有懲罰性，考核樣品經(jīng)常受到特殊照顧，并且存在互通結(jié)果的情況。作為組織者，為了使考評(píng)更為公正，不得不對(duì)樣品組成、樣品號(hào)順序進(jìn)行組合，減少互通結(jié)果的情況，從而偏離了能力驗(yàn)證的目標(biāo)。室內(nèi)質(zhì)量控制

(internalqualitycontrol,IQC)

全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)中要求：在每次實(shí)驗(yàn)中必須包含有內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清和外部對(duì)照質(zhì)控血清。n內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對(duì)照血清。內(nèi)部對(duì)照是質(zhì)量控制的根底。每一次檢測(cè)必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。n外部對(duì)照質(zhì)控血清是