中藥合劑振明正生對k562、cn1和p3的抑制作用

中藥合劑振明正生對k562、cn1和p3的抑制作用

將人腫瘤細胞移植到裸鼠，建立了人腫瘤細胞移植小鼠的不同模式，并使用該模型觀察藥物對腫瘤的抑制作用。該方法已廣泛應用于腫瘤實驗治療和藥物效應研究。本研究分別建立了人白血病、鼻咽癌和胰腺癌三個裸鼠移植瘤模型,觀察中藥合劑“振明正生”對腫瘤的抑制作用。1材料和試劑1.1材料表面1.1.1藏紅花等5種植物屬中藥合劑“振明正生”由北京立國之路科技有限公司提供。主要成分為:藏紅花、西藏秦艽、昆明雞血藤、千里光、黑胡桃、啤酒花、訶子、臭草等(批號20071018,規(guī)格100ml/瓶)。1.1.2腫瘤細胞系統(tǒng)人白血病細胞系K562、人鼻咽癌細胞系CN1和人胰腺癌細胞系P3均為中國醫(yī)學科學院血液學研究所病理細胞庫保存并提供。1.1.3常規(guī)培養(yǎng)試劑BALB/c裸鼠購自中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所。常規(guī)培養(yǎng)試劑:1640培養(yǎng)液和胎牛血清(美國GIBCO公司)。銫源照射裝置(加拿大NORDION公司)。1.2實驗方法1.2.1胎牛血清培養(yǎng)組三株腫瘤細胞系均采用RPMI1640培養(yǎng)液,含10%胎牛血清;37℃,含5%CO2的二氧化碳孵箱培養(yǎng)。貼壁細胞傳代用常規(guī)0.25%胰蛋白酶液消化傳代。1.2.2腫瘤細胞毒性檢測BALB/c裸鼠4-5周齡,雌性。全身照射3.3Gy,于照射當天皮下接種腫瘤細胞,2×106/只。分成實驗組(或?qū)嶒灲M高劑量組、低劑量組)和對照組,每組6只裸鼠。1.2.3分組和給藥時間接種后24小時開始給藥,實驗組口服中藥合劑ZMZS,0.2ml/只,每天一次;對照組口服生理鹽水0.2ml/只,每天一次;實驗組連續(xù)給藥四周。實驗高劑量組:口服中藥合劑ZMZS三倍濃縮溶液,0.2ml/只,低劑量組:口服中藥合劑ZMZS,0.2ml/只。1.2.4腫瘤體積計算每周用游標卡尺測量實驗組和對照組動物腫瘤大小,腫瘤體積按照下列公式計算:V=1/2長徑×短徑2。腫瘤生長抑制率=(對照組腫瘤體積-實驗組腫瘤體積)/對照組腫瘤體積1.3統(tǒng)計方法兩組實驗采用t檢驗,兩組以上實驗采用方差分析,Q檢驗進行統(tǒng)計檢驗。2結(jié)果2.1組患者給藥后三組腫瘤抑制率的比較經(jīng)過三至四周治療后,實驗組裸鼠腫瘤體積明顯小于對照組,經(jīng)統(tǒng)計處理有顯著性差異。給藥后三周腫瘤抑制率低劑量和高劑量分別為43.6%和70.3%;給藥后四周分別為44.6%和69.1%(表1和圖1)。2.2給藥后2周腫瘤抑制率經(jīng)過三至四周治療后,實驗組裸鼠腫瘤體積明顯小于對照組,經(jīng)統(tǒng)計處理有顯著性差異。給藥后第二周實驗組腫瘤抑制率為38%;給藥后第三周為65.4%和給藥后第四周為70.8%(表2和圖1)。2.3兩組患者給藥后腫瘤抑制率比較經(jīng)過三至四周治療后,實驗組裸鼠腫瘤體積明顯小于對照組,經(jīng)統(tǒng)計處理有顯著性差異。給藥后第二周實驗組腫瘤抑制率為72.3%;給藥后第三周為57.6%和給藥后第四周為73.5%(表3和圖1)。3中藥復方生物制劑的復配中藥復方抗腫瘤是多成分、多途徑產(chǎn)生抗腫瘤作用,其不良作用低,能提高機體免疫力,不易產(chǎn)生耐藥性。中醫(yī)治療腫瘤的理論基礎(chǔ),“清熱解毒、活血化瘀、軟堅散結(jié)、扶正賠本”,通過近年來現(xiàn)代醫(yī)學的實驗證明,主要包括調(diào)節(jié)機體免疫功能、調(diào)節(jié)腫瘤細胞生命周期、逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性、直接細胞毒作用、抑制腫瘤血管生成、抑制腫瘤細胞黏附與浸潤轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)細胞信號傳導、阻斷致癌和抗突變作用等途徑發(fā)揮抗腫瘤作用。中藥方劑的特點是:“藥有個性之特長,方有合群之妙用”,以配伍為特色的中藥復方有數(shù)千年的經(jīng)驗積累,合理配伍可增效減毒。復方中各味中藥所含成分往往多達幾十種,其療效的物質(zhì)基礎(chǔ)包括小分子化合物(包括揮發(fā)油、生物堿、黃酮類、皂甙類等)及生物大分子(肽、蛋白及多糖等)?；钚晕镔|(zhì)群通過多靶點、多途徑、多因素整合發(fā)揮作用。如復方黃黛片用于治療粒細胞白血病,該方主要成分是四硫化四砷、靛玉紅和丹參酮IIA,研究發(fā)現(xiàn)三藥聯(lián)合可顯著增強硫化砷引起的癌蛋白降解。隨著分子生物學和分子藥理學發(fā)展抗腫瘤藥物的作用機制研究有顯著提高,如菊花含有黃酮類和揮發(fā)油成分能通過細胞毒作用、阻滯細胞周期、抑制腫瘤細胞生長,誘導腫瘤細胞凋亡。白花蛇草中的黃酮類化合物、甾醇類化合物、三萜類化合物和多糖等成分誘導細胞凋亡提高免疫功能。三七所含皂甙類成分,可直接抑制腫瘤細胞生長轉(zhuǎn)移,促癌細胞凋亡,誘導癌細胞分化,逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞多藥耐藥。半枝蓮、丹參、莪術(shù)、人參皂甙能下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子的蛋白表達,有效抑制腫瘤血管生成。川芎嗪、苦參對腫瘤細胞與內(nèi)皮細胞的黏附有明顯的抑制作用,減少腫瘤轉(zhuǎn)移。將人腫瘤細胞植入免疫缺陷小鼠體內(nèi),建立人腫瘤細胞裸鼠模型,利用該模型便于觀察藥物對人類腫瘤的療效,尤其適合于中藥復方不同劑型藥物的實驗研究。中藥合劑ZMZS的組成藥材均是無毒可食性植物,急性毒性實驗證明中藥合劑ZMZS是無/低毒