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文檔簡(jiǎn)介
培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化探究:計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室(中間大方格)的長(zhǎng)和寬各為1mm,,其體積為_(kāi)_____mm3,合_________mL。1mm011×10-4血球計(jì)數(shù)板:一種專(zhuān)門(mén)計(jì)數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀器計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室分為25中格(雙線邊)每一中格又分為16小格計(jì)數(shù)室是由___________個(gè)小格組成25×16=400如何計(jì)數(shù)?五點(diǎn)取樣法樣方法每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量==A平均每個(gè)中格酵母細(xì)胞數(shù)×25×104×稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4酵母菌數(shù)量變化記錄表25個(gè)中格16個(gè)小格16個(gè)中格25個(gè)小格2516=400小格1625=400小格每個(gè)計(jì)數(shù)室(大方格)共有400小格,3*********抽樣檢測(cè):5×16=80個(gè)小格抽樣檢測(cè):4×25=100個(gè)小格例2:酵母菌的計(jì)數(shù)通常用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行,3,由400個(gè)小方格組成?,F(xiàn)對(duì)某一樣液進(jìn)行檢測(cè),如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多,難以計(jì)數(shù),應(yīng)先
后再計(jì)數(shù)。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后,算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有
個(gè)。2×108稀釋例1:在用血球計(jì)數(shù)板(2mm×2mm方格)對(duì)某一稀釋50倍樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),發(fā)現(xiàn)在一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)()酵母菌平均數(shù)為16,據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌
個(gè)。2107例3
檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16=400個(gè)小格組成,容納液體的總體積為0.1mm3?,F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè),則上述水樣中約有藍(lán)藻
個(gè)/mL。5n×105
酵母菌的計(jì)數(shù)的操作稀釋?zhuān)簩⒔湍妇囵B(yǎng)液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)蝗艟翰粷?可不必稀釋。鏡檢計(jì)數(shù)室:在加樣前,先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物,則需清洗后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)加樣品:在清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片,再用無(wú)菌細(xì)口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴(將計(jì)數(shù)室充滿(mǎn)即可),讓菌液沿縫隙自行滲入計(jì)數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。酵母菌的計(jì)數(shù)的操作顯微計(jì)數(shù):靜止5分鐘后,先用低倍鏡(16×10)找
到計(jì)數(shù)室所在的位置。然后根據(jù)血球計(jì)數(shù)
板規(guī)格,每個(gè)計(jì)數(shù)室選取5個(gè)(或4個(gè))中
方格中的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)。每個(gè)小方格內(nèi)約
有5-10個(gè)菌體為宜。對(duì)于壓在小方格界線
上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。如
遇酵母出芽,芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半
時(shí),即作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)一個(gè)樣品
要從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的值來(lái)計(jì)算樣品的
含菌量。血球計(jì)數(shù)板的清洗:使用完畢后,將血球計(jì)數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干。鏡檢,觀察每個(gè)小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。酵母菌的計(jì)數(shù)注意事項(xiàng):進(jìn)行計(jì)數(shù)前,應(yīng)先將試管搖勻,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻,以減少計(jì)數(shù)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)時(shí),對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌,應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。若一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過(guò)多,難以數(shù)清時(shí),則可將培養(yǎng)
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