傳染病實(shí)驗(yàn)全7細(xì)菌藥敏試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)六細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)一、試驗(yàn)?zāi)康亩?、試?yàn)原理三、試驗(yàn)材料四、試驗(yàn)方法和步驟五、思考題一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饪股睾涂股乜剐缘淖饔脵C(jī)制。掌握藥敏試驗(yàn)的原理和臨床意義。掌握藥敏試驗(yàn)擴(kuò)散法的實(shí)驗(yàn)操作。二、試驗(yàn)原理1.抗生素作用機(jī)制①影響細(xì)胞壁的合成，如青霉素、萬(wàn)古霉素；②抑制蛋白質(zhì)的合成，如四環(huán)素、氯霉素；③作用于細(xì)胞膜，如多粘菌素、多烯類(lèi)化合物；④抑制核酸的合成，如利福平、氯喹；2.藥敏試驗(yàn)稀釋法：待檢細(xì)菌接種于不同稀釋濃度的固體或液體培養(yǎng)基上，測(cè)定MIC或MBC。擴(kuò)散法：抗菌藥物置于接種細(xì)菌的固體培養(yǎng)基上，測(cè)定待檢細(xì)菌的抑菌環(huán)。稀釋法MIC：MinimalinhibitionconcentrationMBC：Minimalbacteriocidalconcentration抗菌藥物稀釋成不同濃度接種待測(cè)菌進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)定藥物的最低抑制濃度(MIC）或最低殺菌濃度（MBC）

精確擴(kuò)散法接種待測(cè)菌在固體培養(yǎng)基上將抗菌藥物置于接菌培養(yǎng)基上抗菌藥物向培養(yǎng)基中擴(kuò)散，形成濃度梯度抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而出現(xiàn)抑菌環(huán)根據(jù)抑菌環(huán)的大小，判定細(xì)菌對(duì)藥物的敏感度

定性三、試驗(yàn)材料被檢細(xì)菌:1株藥敏紙片滅菌生理鹽水培養(yǎng)皿和棉簽吸耳球和吸管四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟細(xì)菌培養(yǎng)比濁稀釋菌液涂布貼藥敏紙片無(wú)菌操作細(xì)菌培養(yǎng)：挑取菌落4~5個(gè)，接種于培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)6~12小時(shí)。比濁：取1ml的細(xì)菌懸液，用麥?zhǔn)媳葷峁軠y(cè)定濃度。稀釋?zhuān)焊鶕?jù)測(cè)定的濃度和終濃度（1.5億/ml），計(jì)算出需要補(bǔ)加的生理鹽水的量，進(jìn)行稀釋和矯正。菌液涂布：用無(wú)菌的棉拭子蘸取上述細(xì)菌懸液，用棉拭子涂于瓊脂表面，蓋好平皿，在室溫干燥5~10min，待平皿表面稍干后再放含藥紙片。貼藥敏紙片：用鑷子取出含藥紙片貼在涂有細(xì)菌的平皿表面，之后輕輕按壓。（將學(xué)號(hào)或姓名寫(xiě)在平皿上）直徑9cm將平皿放在37℃溫箱中培養(yǎng)16~18h，觀察結(jié)果。結(jié)果觀察：周四上午11:00-11:30，407室有無(wú)污染；有無(wú)抑菌環(huán)；量其直徑大小(mm)。附1.試驗(yàn)分組平皿：35個(gè),2人/個(gè)棉簽：35支,2人/支生理鹽水：4人/瓶藥敏紙片:4套小鑷子：