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文檔簡介
子情境:谷氨酸發(fā)酵過程控制-
味精成品純度的測(cè)定
旋光法測(cè)定味精中谷氨酸鈉的含量谷氨酸鈉分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)不對(duì)稱碳原子,具有光學(xué)活性,能使偏振光面旋轉(zhuǎn)一定角度,所以,可用旋光儀測(cè)定其旋光度。根據(jù)旋光度換算成谷氨酸鈉的含量。在實(shí)際工作中旋光法操作簡便、快捷,數(shù)據(jù)穩(wěn)定,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差很小,不失為首選的方法。應(yīng)用旋光儀測(cè)量旋光物質(zhì)(光學(xué)活性物質(zhì))的旋光度以確定其含量的分析方法叫旋光法。自然光與偏振光:自然光—有無數(shù)個(gè)與光的前進(jìn)方向互相垂直的光波振動(dòng)面。偏振光—只有一個(gè)與光的前進(jìn)方向互相垂直的光波振動(dòng)面。旋光法偏振光的產(chǎn)生方法:1.用尼克爾棱鏡(蘇格蘭人發(fā)明的用兩個(gè)切成了特殊角度并用加拿大香脂粘起來的冰晶石組成。)2.用Polaroid濾光器(美E.H.Land發(fā)明由嵌在透明塑料中的幾種晶體組成。)3.聚乙烯醇人造偏振片例WXG—4型旋光儀旋光法旋光度的大小與光源的波長、液層厚度、光學(xué)活性物質(zhì)的種類、濃度、溶劑及其溫度有關(guān)。旋光度旋光系數(shù)溶液濃度液層厚度旋光法旋光度——當(dāng)偏振光通過光學(xué)活性物質(zhì)溶液時(shí),偏振面旋轉(zhuǎn)的角度叫作該物質(zhì)的旋光度。
=α/LC——查手冊(cè)得到不同物質(zhì)的比旋光度。
α——測(cè)定樣液的旋光度。
L——旋光管長度(液層厚度)分米。
C——樣液濃度(所求值)。
t——測(cè)定溫度為20℃。
λ——光源波長通常為D鈉線589.3nm。2.比旋光度——在一定溫度和一定光源情況下,當(dāng)溶液濃度為1g/ml,液層厚度為1分米時(shí)偏振光所旋轉(zhuǎn)的角度。記為:
旋光法糖類的比旋光度+53.3+138.5+194.8+196.4乳糖麥芽糖糊精淀粉+52.5-92.5-20.0+66.5葡萄糖果糖轉(zhuǎn)化糖蔗糖【α】糖類【α】糖類變旋光作用
具有光學(xué)活性的還原糖類(如葡萄糖,果糖,乳糖,麥芽糖等),在溶解之后,其旋光度起初迅速變化,然后慚漸變得較緩慢,最后達(dá)到恒定值,這種現(xiàn)象稱為變旋光作用。
這是由于有的糖存在兩種異構(gòu)體,即α型和β型,它們的比旋光度不同。這兩種環(huán)型結(jié)構(gòu)及中間的開鏈結(jié)構(gòu)在構(gòu)成一個(gè)平衡體系過程中,即顯示出變旋光作用。在用旋光法測(cè)定蜂蜜,商品葡萄糖等含有還原糖的樣品時(shí),樣品配成溶液后,宜放置過夜再測(cè)定。若需立即測(cè)定,可將中性溶液(pH7)加熱至沸,或加幾滴氨水后再稀釋定容;若溶液已經(jīng)稀釋定容,則可加入碳酸鈉干粉至石蕊試紙剛顯堿性。在堿性溶液中,變旋光作用迅速,很快達(dá)到平衡。但微堿性溶液不宜放置過久,溫度也不可太高,以免破壞果糖。旋光儀
光源起偏器小棱鏡旋光管補(bǔ)償器檢偏器目鏡最基本的光學(xué)元件示意圖使用方法(三分視場(chǎng))從目鏡中可觀察到的幾種情況:(1)中間明亮,兩旁較暗。(2)中間較暗,兩旁較明亮。(3)視場(chǎng)內(nèi)明暗相等的均一視場(chǎng)。測(cè)定時(shí),旋轉(zhuǎn)手輪,調(diào)整檢偏鏡刻度盤,應(yīng)調(diào)節(jié)視場(chǎng)成明暗相等的單一視場(chǎng),讀取刻度盤上所示的刻度值。讀數(shù)
刻度盤分兩個(gè)半圓分別標(biāo)出0一180°,固定游標(biāo)分為20等分。讀數(shù)時(shí),先讀游標(biāo)的0落在刻度盤上的位置(整數(shù)值),再用游標(biāo)尺的刻度盤畫線重合的方法,讀出游標(biāo)尺上的數(shù)值(可讀出兩位小數(shù)).檢測(cè)1儀器
WZZ-2B自動(dòng)旋光儀(附20W鈉光燈),容量瓶100mL燒杯250mL,分析天平2步驟配制糖液及樣液儀器預(yù)熱校正測(cè)試步驟:1、配溶液:稱取10g,精確至0.0001g,加少量水溶解并移人100mL容量瓶中,加鹽酸20mL,混勻,待冷卻至20℃,加水至刻度,搖勻。2、將儀器電源插入220V交流電源(要求使用交流電子穩(wěn)壓器)并將接地腳可靠接地。3、打開電源開關(guān),這時(shí)鈉光燈在交流工作狀態(tài)下起輝經(jīng)5分鐘,鈉光燈激活后,鈉光燈才發(fā)光穩(wěn)定。檢測(cè)4、將裝有蒸餾水或其它空白溶劑的試管放入樣品室,試管中若有氣泡,應(yīng)先讓氣泡浮在凸頸處。通光面兩端的霧狀水滴,應(yīng)用軟布搽干。試管螺帽不宜旋的過緊,以免產(chǎn)生應(yīng)力,影響讀數(shù),試管安放時(shí),應(yīng)注意正確的位置和方向,蓋上箱蓋。5、校正目鏡的焦距,使視野清晰。旋轉(zhuǎn)手輪,調(diào)整檢偏鏡刻度盤,使視場(chǎng)中三分視場(chǎng)的明暗程度一致,讀取刻度盤上所示的刻度值。反復(fù)操作兩次,取其平均值作為零點(diǎn)(零點(diǎn)偏差值)。檢測(cè)6、取出試管,并待樣品注入試管,按相同的位置和方向放入樣品室內(nèi),蓋好箱蓋。注意試管應(yīng)用旋光儀測(cè)試樣洗濕數(shù)次。7、換放盛有待測(cè)樣品的測(cè)試管,按上述方法測(cè)其旋光度值,重復(fù)兩次,取其平均值,由谷氨酸鈉溶液的旋光度作圖,計(jì)算未知谷氨酸鈉溶液濃度。檢測(cè)1、根據(jù)測(cè)定的旋光度a,可計(jì)算出樣品液中L-谷氨酸的濃度C。C=(a×100)/L×[a]tD2、根據(jù)樣品中L-谷氨酸的濃度,計(jì)算樣品中味精的純度。C味=C×187.13/147.13味精純度=
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