影響供精人工授精成功率的因素分析

影響供精人工授精成功率的因素分析

隨著人類精子庫和輔助生殖技能的快速發(fā)展，以精人工教育為輔助遺傳技術(shù)的一個(gè)方面，為人類優(yōu)秀者開辟了一條新的道路，并為許多病人的家庭提供了祝福。本文通過對(duì)98對(duì)夫婦131個(gè)AID周期和10個(gè)供精I(xiàn)CSI周期的結(jié)果進(jìn)行分析,以便為無精子癥患者提供最合適的治療方案。材料和方法一、臨床數(shù)據(jù)1.歲以下可生精子癥2000年7月~2001年10月就診于本生殖中心的98對(duì)不孕夫婦,其中男方無精子癥94例,近親結(jié)婚2例,嚴(yán)重少弱精子癥1例(精子密度為4×106/mL3,快速和慢速前向精子的活動(dòng)率占8%),出生低智能兒(已出生3個(gè)孩子,最大的10歲,最小的4歲)1例。女方年齡23~45歲(平均28.9±4.0歲),不孕年限2~25年(平均4.7±3.6年)。全部患者經(jīng)輸卵管碘油造影證實(shí)至少有一側(cè)輸卵管通暢。94例患者均經(jīng)2次以上精液分析,并將精液離心沉淀后,顯微鏡仍未發(fā)現(xiàn)精子。94例患者中有87例行顯微外科附睪穿刺或睪丸活檢證實(shí)為無精子癥。所有患者需憑結(jié)婚證、身份證、當(dāng)?shù)劓?zhèn)級(jí)以上的計(jì)劃生育證明書及夫妻雙方簽署知情同意書后才能獲得進(jìn)行AID的資格。2.精髓的來源精子來源于上海市人類精子庫和重慶市人類精子庫,要求供者和受者的血型相符合,但不苛求相貌、膚色等。二、方法1.促性腺激素hgm自然周期組:于月經(jīng)周期的第12天開始行陰道超聲監(jiān)測(cè)。克羅米芬(CC)組:于月經(jīng)第3~5天開始,每日服CC50mg,連續(xù)5天,然后行超聲監(jiān)測(cè),若50mg無反應(yīng),下周期增加劑量但最多不超過150mg。促性腺激素組:在月經(jīng)周期的第3~5天開始注射人絕經(jīng)期促性腺激素(hMG)每日150IU,連續(xù)5天,然后根據(jù)卵泡發(fā)育調(diào)整劑量直到成熟后停藥。當(dāng)卵泡直徑達(dá)14mm時(shí),每日測(cè)尿LH峰,當(dāng)LH峰出現(xiàn)或卵泡直徑平均達(dá)18mm時(shí),注射hCG(Serono)5000~10000IU,18及42小時(shí)或36小時(shí)后行AID。第一次AID后24小時(shí)超聲提示尚未排卵,則再次行AID。確定排卵后予以黃體功能支持,每日注射黃體酮針20mg,連續(xù)一周。2.精華洗劑精子洗滌采用Percoll梯度離心法。3.精子懸液的制備類似于宮腔內(nèi)人工授精,受者取膀胱截石位,暴露宮頸后,用1mL的注射器與特制的無損傷導(dǎo)管連接,吸取經(jīng)Percoll梯度離心處理后的冷凍精子懸液0.5~1mL,將導(dǎo)管輕輕插入宮腔,于2~3分鐘將精子懸液注入后,緩慢取出導(dǎo)管,臀高位仰臥30min。4.icsi流程10個(gè)周期的促排卵方案、卵泡的監(jiān)測(cè)及取卵按本中心常規(guī)進(jìn)行,ICSI操作見文獻(xiàn)。三、統(tǒng)計(jì)處理所有數(shù)據(jù)輸入SPSS8.0軟件,采用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。結(jié)果一、各組生在各期次妊娠率及相關(guān)率98對(duì)夫婦共行131個(gè)AID周期,有20例妊娠,周期妊娠率為15.3%,這20例妊娠均發(fā)生在第1~3個(gè)AID周期。其中自然周期組20個(gè)周期,2例妊娠,周期妊娠率為10%;CC組69個(gè)周期,9例妊娠,周期妊娠率為13.4%;hMG組42個(gè)周期,9例妊娠,周期妊娠率為20.5%。三組中以hMG組的周期妊娠率最高,但兩兩間比較差異無顯著性(P>0.05)。二、妊娠率與周期授精時(shí)間的妊娠率比較131個(gè)AID周期中,73個(gè)周期每周期授精1次,58個(gè)周期授精2次,妊娠率分別為15.1%(11/73)和15.1%(9/58),兩組的妊娠率比較無顯著性差異(P>0.05)。三、妊娠率高的患者年齡分布妊娠組和非妊娠組的年齡分別為28.1±3.3歲及29.7±4.7歲,兩組的年齡比較無顯著差異性(P>0.05)。按不同年齡分組后,大于35歲患者的妊娠率僅5.0%,顯著低于其它兩組。不孕年限妊娠組比非妊娠組短,分別為3.3±2.3年及6.0±4.8年,兩組相比有顯著性差異(0.01<P<0.02)。當(dāng)患者的不孕年限超過10年時(shí),妊娠率下降為4.3%,明顯低于其它兩組。見表1和表2。四、活動(dòng)率和洗滌劑前后的活動(dòng)率131個(gè)冷凍精液標(biāo)本采用Percoll梯度離心處理,妊娠組和非妊娠組洗滌前兩組精子的活動(dòng)率分別為(43.8±13.8)%和(44.3±11.8)%,洗滌后分別為(67.9±14.5)%和(60.2±14.8)%,顯著高于洗滌前(P=0.000)。洗滌后的精子活動(dòng)率妊娠組比非妊娠組高,差異有顯著性(0.02<P<0.05)。見表1。五、icsi的懷孕結(jié)果10例患者行3次以上AID未成功,其中8例改為供精I(xiàn)CSI共10個(gè)周期,有5例妊娠,周期妊娠率50.0%。妊娠合并妊娠率無精子癥約占男性不育患者的7%~14%,由于導(dǎo)致的病因復(fù)雜,治療上相當(dāng)困難,但是隨著生殖工程技術(shù)的興起和發(fā)展,以及對(duì)某些不可恢復(fù)性或無法治愈的男子不育癥的治療需要,AID正逐漸被不孕夫婦所接受。盡管有些患者經(jīng)附睪穿刺或睪丸活檢找到精子而行ICSI,但因該項(xiàng)技術(shù)費(fèi)用昂貴,故大量的患者仍需行AID,且該技術(shù)合乎自然,費(fèi)用相對(duì)低廉,故如何提高AID的成功率是生殖醫(yī)學(xué)者一直所關(guān)注的。影響AID成功率的因素較多,如女方年齡、每周期的授精頻率及冷凍精子的洗滌方法等。女性年齡是生育力的標(biāo)志,盡管妊娠組和非妊娠組的年齡比較無顯著區(qū)別,可能與本研究所選的大多數(shù)對(duì)象年齡偏輕有關(guān),但女性年齡超過35歲患者的妊娠率顯著降低,僅5.0%。不孕年限越長,妊娠率越低,本研究不孕年限大于10年患者的妊娠率僅4.3%,隨著不孕時(shí)間延長,不僅不孕程度加重,而且不孕原因更加復(fù)雜化。有報(bào)道夫精宮腔內(nèi)人工授精(IUI)聯(lián)合促性腺激素能增加妊娠率,且促性腺激素組的妊娠率顯著高于克羅米芬組和未用藥組。本研究三組的妊娠率雖以促性腺組最高,但兩兩間相比無顯著差異,可能因無精子癥患者其女方條件較好,排卵功能正常,即使不進(jìn)行促排卵也能獲得比較好的妊娠率,也可能與本研究例數(shù)不多有關(guān)。另有報(bào)道每周期授精2次的成功率高于授精1次,差異有極顯著性。本研究未發(fā)現(xiàn)有顯著性差異,可能與密切監(jiān)測(cè)LH峰,適時(shí)進(jìn)行AID有關(guān)。因此,我們認(rèn)為只要準(zhǔn)確掌握AID的時(shí)機(jī),建議每周期進(jìn)行1次授精,既節(jié)約費(fèi)用又可獲得同樣的妊娠率。高質(zhì)量的精子是AID成功的關(guān)鍵因素,國外許多文獻(xiàn)報(bào)道,如果冷凍后精子活動(dòng)率>40%,則與新鮮精子的成功率相似。因此選擇高質(zhì)量的供體及合適的冷凍精子洗滌方法是保證AID高成功率的一個(gè)重要因素。Percoll梯度離心法因其具有快速簡便,處理后精子質(zhì)量明顯提高,而成為很多生殖中心首選的精子體外處理方法。本研究也采用Percoll梯度離心法,洗滌后的精子活動(dòng)率顯著優(yōu)于洗滌前,而且在妊娠組顯著高于非妊娠組。AID聯(lián)合促性腺激素促排卵3個(gè)以上周期未孕時(shí),建議行體外受精-胚胎移植術(shù)(IVF-ET),可獲得較高的