2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體導學案高二下學期生物人教版選擇性必修3

2.2動物細胞融合技術與單克隆抗體(二)課前自主探究一、動物細胞融合技術 1．概念：使細胞結合形成一個細胞的技術。2．誘導原理和結果(1)誘導原理：。(2)誘導結果：形成細胞。3．誘導方法：法、電融合法和法等。4．意義：突破了的局限，使成為可能。5．動物細胞融合技術的應用(1)成為研究、、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(2)用于制備。二、單克隆抗體1．制備原理(1)B淋巴細胞特點：一種B淋巴細胞分泌一種抗體。(2)骨髓瘤細胞特點：能在體外大量。(3)雜交瘤細胞特點：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞，既能又能產生大量。2．制備過程（如圖）3．單克隆抗體的優(yōu)點能準確地識別，與特定抗原發(fā)生特異性結合，并且可以。4．單克隆抗體的應用(1)作為，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。(2)用于和。判斷對錯：1．動物細胞融合過程中既有細胞膜融合也有核的融合。()2．與植物原生質體融合相比，動物細胞融合特有的誘導因素是聚乙二醇。()3．用特定的抗原對小鼠進行免疫后，從鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細胞。（）4．單克隆抗體是單個B淋巴細胞增殖并產生的抗體。()5．單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。()課堂合作探究一、動物細胞融合1．融合的原理與過程(1)原理：細胞膜的。(2)過程：包括細胞膜融合、細胞質融合和細胞核融合。其中細胞膜融合是細胞融合的先導，在細胞膜融合中體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性，細胞融合的實質是。動物細胞融合完成的標志是兩個或多個細胞核融合為。如下圖(以滅活的病毒誘導為例)：2．融合的結果形成單核雜交細胞，具有原來兩個或多個細胞的，可表現(xiàn)出兩個或多個親本的特點。3．動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的增殖融合前處理先除去細胞壁先使細胞分散開使用的酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導手段物理法：電融合法、離心法化學法：PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法除物理法和化學法外，也可用滅活的病毒誘導結果雜種植株雜交細胞應用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義克服了遠緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴展了雜交的親本組合【合作探究一】1.什么是滅活？滅活病毒誘導融合的原理是什么？2.動物細胞融合與植物原生質體融合的原理相同嗎？二、單克隆抗體1．血清抗體與單克隆抗體的比較名稱產生特點血清抗體由細胞分泌一般從血清中分離，產量低、純度低、特異性差單克隆抗體由細胞分泌特異性強、靈敏度高，能大量制備項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有的細胞從小鼠體內提取的B淋巴細胞有很多種，形成的雜交瘤細胞也有很多種篩選方法用特定的培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞都會死亡，只有細胞才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)和檢測，經多次篩選得到能產生特異性抗體的細胞群篩選目的得到細胞得到能的雜交瘤細胞3．制備單克隆抗體過程中的兩次篩選(1)對動物免疫的原因：B淋巴細胞要經過免疫過程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細胞，才能產生相應的抗體，所以，與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞實際上是漿細胞。(2)雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質，不僅具有漿細胞產生特異性抗體的能力，還具有骨髓瘤細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力，從而可以克服單純B淋巴細胞不能無限增殖的缺點，而大量生產單克隆抗體?！竞献魈骄慷?.制備單克隆抗體的過程中的幾種細胞，如免疫的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞、雜交瘤細胞各有何特點？2．細胞內DNA的合成一般有兩條途徑，主要途徑是在細胞內由糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，而氨基蝶呤可以阻斷此途徑。輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。如何利用DNA合成途徑不同的特點配制培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞？請說明原理?！菊n堂小結】知識網絡構建核心語句背誦1.動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。2.動物細胞融合常用的誘導方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法。3.動物細胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。4.雜交瘤細胞是由經免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產生特定抗體的能力。5.制備單克隆抗體過程中第一次篩選是為了獲得雜交瘤細胞，第二次篩選是為了獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞。識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結合，并可大量制備。7.單克隆抗體的主要用途有：作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物。第2課時動物細胞融合和單克隆抗體課后案1.動物細胞工程技術的基礎是（）A、動物細胞融合B、胚胎移植C、動物細胞培養(yǎng) D、核移植2．動物細胞融合的原理是()A．細胞膜的流動性B．細胞膜的選擇透過性C．細胞質的流動性D．細胞質酶的活性3．關于動物細胞融合的說法，不正確的是()A．動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程B．動物細胞融合后形成的具有兩個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞C．常用的誘導動物細胞融合的方法有聚乙二醇、滅活的病毒誘導、電激、紫外線照射等D．細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能4．動物細胞融合和植物原生質體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點C、融合的誘導手段 D、融合的過程5．下列關于動物細胞融合與植物體細胞雜交技術的說法，正確的是()A．基本原理相同B．誘導細胞融合的方法相同C．細胞融合前的處理過程相同D．融合后都需要進行篩選6．將小鼠的骨髓瘤細胞與一種免疫B淋巴細胞融合，融合后的細胞經培養(yǎng)產生單克隆抗體，其依據(jù)是()A．骨髓瘤細胞可以產生抗體，但不能無限增殖B．淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合才能產生抗體C．骨髓瘤細胞可以無限增殖，且能產生抗體D．淋巴細胞可以產生抗體，但不能無限增殖，骨髓瘤細胞可以無限增殖7．科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交瘤細胞，經培養(yǎng)可產生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）C.經過免疫的T淋巴細胞 8．在單克隆抗體制備過程中，對骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是()①B淋巴細胞②骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．①③9．運用細胞工程技術獲得單克隆抗體時，下列操作不必要的是()A．對小動物注射抗原 B．融合并篩選雜交瘤細胞C．培養(yǎng)雜交瘤細胞 D．將胰蛋白酶注入小鼠腹腔10.下列關于單克隆抗體制備的說法，正確的是()A．將特定抗原注射到小鼠體內，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體B．經特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體C．誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，發(fā)生融合的細胞均為雜交瘤細胞D．篩選出雜交瘤細胞后，需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細胞11.下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質和A細胞的名稱為 （）A.抗體、T淋巴細胞 B.抗原、T淋巴細胞C.抗體、B淋巴細胞 D.抗原、B淋巴細胞12.單克隆抗體和血清抗體相比，其優(yōu)越性在于（）“生物導彈”C.單克隆抗體比血清抗體的特異性強、靈敏度高13．為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。下列說法錯誤的是（）A．實驗前，必須給小鼠甲注射病毒A以獲得產生相應抗體的B淋巴細胞B．制備單細胞懸液需要將小鼠甲脾臟剪碎并用胰蛋白酶處理C．利用抗原抗體反應的特異性原理完成篩選D．雜交瘤細胞體外培養(yǎng)需要95%空氣和5%O2的混合氣體環(huán)境班級姓名14．下圖為利用小鼠制備單克隆P抗體的過程示意圖，圖中HAT培養(yǎng)基為選擇性培養(yǎng)基只有雜交瘤細胞能在該培養(yǎng)基中生活。據(jù)圖分析，下列說法錯誤的是（）A．獲取B淋巴細胞前需要給小鼠注射P抗原B．加入的聚乙二醇可促進B細胞和瘤細胞融合C．細胞集落①②③④為單個鼠瘤細胞的克隆 D．細胞集落①能無限增殖且產生P抗體15.(不定項)右圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是()A．可用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合B．兩兩融合的細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C．雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產D．細胞膜的流動性是細胞融合的基礎16.（不定項）下列是應用動物細胞工程技術獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟：①從患骨髓瘤的小鼠體內獲取骨髓瘤細胞②將X抗原注入小鼠體內，獲得能產生抗X抗體的B淋巴細胞③將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)④篩選出能產生抗X抗體的雜交瘤細胞⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞⑥從腹水中提取抗體⑦利用促細胞融合因子使兩種細胞發(fā)生融合其中對單克隆抗體制備的相關敘述中正確的是（）A．實驗順序應當是①②⑦⑤④③⑥B．③過程中產生的多個雜交瘤細胞稱為克隆C．⑦過程獲得的細胞均可無限增殖D．利用細胞融合生產單克隆抗體通常要經過兩次篩選17．下圖表示單克隆抗體的制備過程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)據(jù)圖可知，_______________技術是動物細胞工程技術的基礎，而___________技術突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(2)圖中過程①常用的誘導因素是______________，過程②常在________培養(yǎng)基中完成。(3)A細胞為___________細胞，其特點是_____________________________________。(4)合成的單克隆抗體最終可以從___________和______________中提取。第2節(jié)動物細胞融合和單克隆抗體課前自主探究一、動物細胞融合技術1．兩個或多個2.（1）細胞膜的流動性（2）雜交3.PEG融合滅活病毒誘導4.有性雜交遠緣雜交5.（1）細胞遺傳細胞免疫（2）單克隆抗體二、單克隆抗體1．（1）特異性(2)增殖（3）大量增殖特定抗體3．抗原的細微差異大量制備4.（1）診斷試劑（2）治療疾病運載藥物判斷對錯：√××××課堂合作探究一、動物細胞融合1.（1）流動性（2）核融合一個細胞核2.遺傳信息【合作探究一】1.提示：滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結構。滅活病毒誘導細胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。2.提示：相同，都依據(jù)細胞膜的流動性。二、單克隆抗體1.B淋巴（漿）雜交瘤3.第一次篩選：未融合選擇融合的雜交瘤雜交瘤第二次篩選：克隆化抗體分泌所需抗體【合作探究二】1.提示：免疫的B淋巴細胞：能產生單一抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產生抗體；雜交瘤細胞：既能產生特定的抗體，又能在組織培養(yǎng)條件下進行無限增殖。2．提示：在培養(yǎng)基中加氨基蝶呤呤就可以篩選出雜交瘤細胞。因為培養(yǎng)基中加入氨基蝶呤后，骨髓瘤細胞和兩兩融合的骨髓瘤細胞由于其唯一的DNA合成途徑被抑制而不能增殖。B淋巴細胞本身不增殖，兩兩融合的B淋巴細胞也不增殖，只有雜交瘤細胞通過輔助途徑合成DNA進行增殖。課后習題檢測1—14CACCDDAADDDCDC15.AC