公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師-實(shí)踐技能-操作技能-4.樣品采集

公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師-實(shí)踐技能-操作技能-4.樣品采集[問答題]1.食品樣品采樣數(shù)量和方法正確答案：詳見解析參考解析：（一）采樣的數(shù)量食品分析檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確與否通常取決（江南博哥）于兩個方面：①采樣的方法是否正確；②采樣的數(shù)量是否得當(dāng)。因此，從整批食品中采取樣品時，通常按一定的比例進(jìn)行。確定采樣的數(shù)量，應(yīng)考慮分析項(xiàng)目的要求、分析方法的要求和被分析物的均勻程度三個因素。一般平均樣品的數(shù)量不少于全部檢驗(yàn)項(xiàng)目的四倍；檢驗(yàn)樣品、復(fù)驗(yàn)樣品和保留樣品一般每份數(shù)量不少于0.5kg。檢驗(yàn)摻偽的樣品，與一般成分分析的樣品不同，分析項(xiàng)目事先不明確，屬于捕捉性分析，因此，相對來講，取樣數(shù)量要多一些。鑒于采樣的數(shù)量和規(guī)則各有不同，一般可按下述方法進(jìn)行。1.液體、半流體食品：如植物油、鮮乳、酒或其他飲料，如用大桶或大罐盛裝者，應(yīng)先行充分混勻后采樣。樣品應(yīng)分別盛放在3個干凈的容器中，盛放樣品的容器不得含有待測物質(zhì)及干擾物質(zhì)。2.糧食及固體食品：應(yīng)自每批食品的上、中、下三層中的不同部位分別采取部分樣品混合后按四分法對角取樣，再進(jìn)行幾次混合，最后取有代表性樣品。3.肉類、水產(chǎn)等食品：應(yīng)按分析項(xiàng)目要求分別采取不同部位的樣品或混合后采樣。4.罐頭、瓶裝食品或其他小包裝食品：應(yīng)根據(jù)批號隨機(jī)取樣。同一批號取樣件數(shù)：250g以上的包裝不得少于6個，250g以下的包裝不得少于10個。摻偽食品和食物中毒的樣品采集，要具有典型性。由于食品數(shù)量較大，而且目前的檢測方法大多數(shù)具有破壞作用，故不能對全部食品進(jìn)行校驗(yàn)，必須從整批食品中采取一定比例的樣品進(jìn)行校驗(yàn)。從大量的分析對象中抽取具有代表性的一部分樣品作為分析化驗(yàn)樣品，這項(xiàng)工作即稱為樣品的收集或采樣。食品的種類繁多，成分復(fù)雜。同一種類的食品，其成分及其含量也會因品種、產(chǎn)地、成熟期、加工或保藏條件不同而存在相當(dāng)大的差異；同一分析對象的不同部位，其成分和含量也可能有較大差異。從大量的、組成成分不均勻的被檢物質(zhì)中采集能代表全部被檢物質(zhì)的分析樣品（平均樣品），必須采用正確的采樣方法。如果采取的樣品不足以代表全部物料的組成成分，即使以后的樣品處理、檢測等一系列環(huán)節(jié)非常精密、準(zhǔn)確，其檢測的結(jié)果亦毫無價值，甚至導(dǎo)出錯誤的結(jié)論?？梢?，采樣是食品分析工作非常重要的環(huán)節(jié)。（二）采樣原則正確采樣，必須遵循以下兩個原則：第一，采集的樣品要均勻一致、有代表性，能夠反映被分析食品的整體組成、質(zhì)量和衛(wèi)生狀況；第二，在采樣過程中，要設(shè)法保持原有的理化指標(biāo)，防止成分逸散或帶入雜質(zhì)。（三）采樣步驟樣品通?？煞譃闄z樣、原始樣品和平均樣品。采集樣品的步驟一般分5步，依次如下：1.獲得檢樣：由分析的整批物料的各個部分采集的少量物料成為檢樣。2.形成原始樣品：許多份檢樣綜合在一起稱為原始樣品。如果采得的檢樣互不一致，則不能把它們放在一起作成一份原始樣品，而只能把質(zhì)量相同的檢樣混在一起，作成若干份原始樣品。3.得到平均樣品：原始樣品經(jīng)過技術(shù)處理后，再抽取其中一部分供分析檢驗(yàn)用的樣品稱為平均樣品。4.平均樣品三份：將平均樣品平分為三份，分別作為檢驗(yàn)樣品（供分析檢測使用）、復(fù)驗(yàn)樣品（供復(fù)驗(yàn)使用）和保留樣品（供備查或仲裁）。5.填寫采樣記錄：采樣記錄要求詳細(xì)填寫采樣的單位、地址、日期、樣品的批號、采樣的條件、采樣時的包裝情況、采樣的數(shù)量、要求檢驗(yàn)的項(xiàng)目以及采樣人等資料。（四）采樣的一般方法采樣通常有兩種方法：隨機(jī)抽樣和代表性取樣。隨機(jī)抽樣是按照隨機(jī)的原則，從分析的整批物料中抽取出一部分樣品。隨機(jī)抽樣時，要求使整批物料的各個部分都有被抽到的機(jī)會。代表性取樣則是用系統(tǒng)抽樣法進(jìn)行采樣，即已經(jīng)掌握了樣品隨空間（位置）和時間變化的規(guī)律，按照這個規(guī)律采取樣品，從而使采集到的樣品能代表其相應(yīng)部分的組成和質(zhì)量，如對整批物料進(jìn)行分層取樣、在生產(chǎn)過程的各個環(huán)節(jié)取樣、定期從貨架上采取陳列不同時間的食品的取樣等。兩種方法各有利弊。隨機(jī)抽樣可以避免人為的傾向性，但是，在有些情況下，如難以混勻的食品（如黏稠液體、蔬菜等）的采樣，僅僅使用隨機(jī)抽樣法是不行的，不如結(jié)合代表性取樣，從有代表性的各個部分分別取樣。因此，采樣通常采用隨機(jī)抽樣與代表性取樣相結(jié)合的方式。具體的取樣方法，因分析對象性質(zhì)的不同而異。1.均勻固體物料（如糧食、粉狀食品）(1)有完整包裝（袋、桶、箱等）的物料：可先按(總件數(shù)/2)1/2確定采樣件數(shù)，然后從樣品堆放的不同部位，按采樣件數(shù)確定具體采樣袋（桶、箱），再用雙套回轉(zhuǎn)取樣管插入包裝容器中采樣，回轉(zhuǎn)180°取出樣品；再用四分法將原始樣品做成平均樣品，即將原始樣品充分混合均勻后堆集在清潔的玻璃板上，壓平成厚度在3cm以下的形狀，并畫對角線或十字線，將樣品分成4份，取對角線的2份混合，再按上述方法加上分為4份，取對角線的2份。這樣操作直至取得所需數(shù)量為止，此即是平均樣品。(2)無包裝的散堆樣品：先劃分若干等體積層，然后在每層的四角和中心點(diǎn)用雙套回轉(zhuǎn)取樣器各采取少量檢樣，再按上述方法處理，得到平均樣品。2.較稠的半固體物料：如稀奶油、動物油脂、果醬等，這類物料不易充分混勻，可先按(總件數(shù)/2)1/2確定采樣件（桶、罐）數(shù)，打開包裝，用采樣器從各桶（罐）中分上、中、下三層分別取出檢樣，然后將檢樣混合均勻，再按上述方法分別縮減，得到所需數(shù)量的平均樣品。3.液體物料（如植物油、鮮乳等）(1)包裝體積不太大的物料：可先按（總件數(shù)/2）1/2確定采樣件數(shù)。開啟包裝，用混合器充分混合（如果容器內(nèi)被檢物不多，可用由一個容器轉(zhuǎn)移到另一個容器的方法混合）。然后用長形管或特制采樣器從每個包裝中采取一定量的檢樣；將檢樣綜合到一起后，充分混合均勻形成原始樣品；再用上述方法分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品。(2)大桶裝的或散（池）裝的物料：這類物料不易混合均勻，可用虹吸法分層（大池的還應(yīng)分四角及中心五點(diǎn)）取樣，每層500ml左右，得到多份檢樣；將檢樣充分混合均勻即得原始樣品；然后，分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品。4.組成不均勻的固體食品（如肉、魚、果品、蔬菜等）：這類食品各部位組成極不均勻，個體大小及成熟程度差異很大，取樣更應(yīng)注意代表性，可按下述方法采樣。(1)肉類：根據(jù)分析目的和要求不同而定。有時從不同部位取得檢樣，混合后形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的代表該只動物的平均樣品；有時從一只或很多只動物的同一部位采取檢樣，混合后形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的代表該動物某一部位情況的平均樣品。(2)水產(chǎn)品：小魚、小蝦可隨機(jī)采取多個檢樣，切碎、混勻后形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品；對個體較大的魚，可從若干個體上切割少量可食部分得到檢樣，切碎、混勻后形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品。(3)果蔬：體積較小的（如山楂、葡萄等），可隨機(jī)采取若干個整體作為檢樣，切碎、混勻形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品；體積較大的（如西瓜、蘋果、菠蘿等），可按成熟度及個體大小的組成比例，選取若干個個體作為檢樣，對每個個體按生長軸縱剖分4份或8份，取對角線2份，切碎、混勻得到原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品；體積蓬松的葉菜類（如菠菜、小白菜等），由多個包裝（一筐、一捆）分別抽取一定數(shù)量的檢樣，混合后搗碎、混勻形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品。5.小包裝食品（罐頭、袋或聽裝奶粉、瓶裝飲料等）：這類食品一般按班次或批號連同包裝一起采樣。如果小包裝外還有大包裝（如紙箱），可在堆放的不同部位抽取一定量（總件數(shù)/2）1/2大包裝，打開包裝，從每箱中抽取小包裝（瓶、袋等）作為檢樣；將檢樣混合均勻形成原始樣品，再分取縮減得到所需數(shù)量的平均樣品。（五）采樣的注意事項(xiàng)1.一切采樣工具（如采樣器、容器、包裝紙等）都應(yīng)清潔、干燥、無異味，不應(yīng)將任何雜質(zhì)帶入樣品中。例如，作3,4-苯并芘測定的樣品不可用石蠟封瓶口或用蠟紙包，因?yàn)橛械氖灪?,4-苯并芘；檢測微量和超微量元素時，要對容器進(jìn)行預(yù)處理；作鋅測定的樣品不能用含鋅的橡皮膏封口；作汞測定的樣品不能使用橡皮塞；供微生物檢驗(yàn)用的樣品，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程。2.設(shè)法保持樣品原有微生物狀況和理化指標(biāo)，在進(jìn)行檢測之前樣品不得被污染，不得發(fā)生變化。例如，做黃曲霉毒素B1測定的樣品，要避免陽光、紫外燈照射，以免黃曲霉毒素B1發(fā)生分解。3.感官性質(zhì)極不相同的樣品，切不可混在一起，應(yīng)另行包裝，并注明其性質(zhì)。4.樣品采集完后，應(yīng)在4小時之內(nèi)迅速送往檢測室進(jìn)行分析檢測，以免發(fā)生變化。5.盛裝樣品的器具上要貼牢標(biāo)簽，注明樣品名稱、采樣地點(diǎn)、采樣日期、樣品批號、采樣方法、采樣數(shù)量、分析項(xiàng)目及采樣人。（六）采樣實(shí)例1.罐頭(1)按生產(chǎn)班次取樣，取樣量為1/3000，尾數(shù)超過1000罐者，增取1罐，但每班每個品種取樣量基數(shù)不得少于3罐。(2)某些罐頭生產(chǎn)量較大，則以班產(chǎn)量總罐數(shù)20000罐為基數(shù)，取樣量按1/3000。超過20000罐以上，取樣量按1/10000，尾數(shù)超過1000罐者，增取1罐。(3)個別生產(chǎn)量過小的產(chǎn)品，同品種、同規(guī)格可合并班次取樣，但并班總罐數(shù)不超過5000罐，每生產(chǎn)班次取樣量不少于1罐，并班后取樣基數(shù)不少于3罐。(4)按殺菌鍋取樣，每鍋檢取1罐，但每批每個品種不得少于3罐。2.瓶、袋、聽裝奶粉：按批號采樣，自該批產(chǎn)品堆放的不同部位采取總數(shù)的1‰，但不得少于2件，尾數(shù)超過500件者應(yīng)加取1件。[問答題]2.水樣的采集正確答案：詳見解析參考解析：（一）采樣器材采樣前應(yīng)準(zhǔn)備好采樣裝置和盛放水樣的器皿。根據(jù)所要采集水樣水體的情況，選出適宜的采樣器。用來盛放水樣的容器應(yīng)穩(wěn)定，即在存放期間既不會將容器材質(zhì)溶入樣品中，而容器又不會吸附水樣中的某些組分，考慮到運(yùn)輸和使用方便，最好易于密封和開啟，不易破損，容易清洗并可反復(fù)多次使用。聚乙烯塑料器皿和硬質(zhì)玻璃器皿能基本上滿足這些要求。在多數(shù)情況下兩者都適于盛放水樣，但當(dāng)水樣含大量油類時不宜用塑料制品器皿，因?yàn)樗鼤B透某些碳?xì)浠衔?，測油類的水樣宜用廣口玻璃瓶存放。由于玻璃吸附金屬離子的能力比塑料制品強(qiáng)，而且還可能溶出一些金屬離子，因此宜用塑料容器存放測定微量金屬的水樣。監(jiān)測項(xiàng)目不同，對盛放水樣的容器的要求也不同，表1-2列出了各監(jiān)測項(xiàng)目對存放容器和保存條件的要求。（二）采樣量水質(zhì)檢驗(yàn)所需的水樣量取決于測定項(xiàng)目，不同的測定項(xiàng)目對水樣用量及保存條件有不同的要求，因而應(yīng)根據(jù)各個檢驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)際情況分別計(jì)算，并適當(dāng)增加20%～30%，作為實(shí)際采樣量。各檢驗(yàn)項(xiàng)目的水樣實(shí)際用量和其保存方法見表1-2。如果采樣器的容積有限，一次采樣不能滿足所需樣品量時，就應(yīng)多次采集，并在較大容器中將各次采集的樣品混勻后再裝入樣品容器中。為了防止樣品在運(yùn)輸過程中溢出，裝瓶時應(yīng)保證容器中留有約1/10的空隙。除測定溶解氧等氣體的樣品外，任何情況下容器都不能注滿水樣。（三）采樣方法1.天然水與生活飲用水水樣的采集：采集自來水及具有抽水機(jī)設(shè)備的井水時，應(yīng)先放水?dāng)?shù)分鐘，使積留于水管中的雜質(zhì)流出去，然后再收集水樣。采集湖泊或河流的表面水樣時，可在距岸邊1～2m處，將采集瓶浸入水中，使瓶口位于水面下20～50cm但距水底10～15cm處，打開瓶塞，讓水進(jìn)入瓶中。在這種情況下，要注意防止混入漂浮于水面的物質(zhì)。采集井、河流、湖泊或水庫等較深處的水樣時，宜用水樣采集瓶采集。供衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)用水樣，采集方法與上述方法相近，但要注意進(jìn)行無菌處理。要用酒精燈將水龍頭灼燒消毒。采取含有余氯的水樣時，應(yīng)在水樣瓶消毒前，按每500ml水樣加2ml計(jì)，加入1.5%硫代硫酸鈉溶液。(1)采樣點(diǎn)的選擇：采樣點(diǎn)的設(shè)置應(yīng)有代表性，應(yīng)分別設(shè)在水源取水口、集中式供水單位出水口和居民經(jīng)常用水點(diǎn)處。管網(wǎng)水的采樣點(diǎn)數(shù)，一般按供水人口每2萬人設(shè)1個點(diǎn)計(jì)算，供水人口在20萬以上、100萬以下時，可酌量增減。在全部采樣點(diǎn)中，應(yīng)有一定的點(diǎn)數(shù)選在易受污染的地點(diǎn)和管網(wǎng)系統(tǒng)陳舊部位。具體采樣點(diǎn)的選擇，應(yīng)由供水單位和當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門根據(jù)本地區(qū)具體情況確定。(2)水樣的體積：水樣的體積，取決于所分析項(xiàng)目的多少以及選用的測定方法。分析常規(guī)水質(zhì)項(xiàng)目，只需要3～5L水樣，取樣量應(yīng)能滿足欲測項(xiàng)目的需要。對于細(xì)菌與化學(xué)檢驗(yàn)，由于采集、處理、容器等的不同，不能應(yīng)用同一瓶水樣。(3)水樣容器：樣品瓶可用硼硅玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必須能夠用塞或蓋緊緊密封。選擇容器的原則：①容器不能是新的污染源；②容器壁不應(yīng)吸收或吸附某些待測組分；③容器不應(yīng)與待測組分發(fā)生反應(yīng)。容器的清洗原則：按水樣待測組分的要求來確定清洗容器的原則。用于微生物檢驗(yàn)樣品的容器：容器及瓶塞、瓶蓋應(yīng)能經(jīng)受熱力滅菌的溫度，并且在這個溫度下不釋放或產(chǎn)生任何能抑制生物活動或?qū)е滤劳龌虼龠M(jìn)生長的化學(xué)物質(zhì)。為了除去余氯，在滅菌前向容器里加入硫代硫酸鈉以還原余氯［每次125ml水樣加0.1ml硫代硫酸鈉溶液(100g/L)］。熱力滅菌分干熱和壓力蒸汽滅菌兩類。壓力蒸汽滅菌法要求121℃、15分鐘即可殺死芽胞。干熱滅菌法殺死芽胞需160～180℃、維持2小時。(4)樣品保存：水樣從采集到分析這段時間里，由于物理的、化學(xué)的、生物的作用會發(fā)生不同程度的變化，原則上應(yīng)盡快測定。影響水質(zhì)變化的因素：生物作用、化學(xué)作用、物理作用。水樣保存措施：①通常將水樣充滿容器并密封，但對冷凍保存的水樣不應(yīng)充滿容器。②水樣保存，應(yīng)達(dá)到減慢生物或微生物作用，減慢化合物或絡(luò)合物水解，避免分解，減少揮發(fā)與容器的吸附損失。保存方法，可采用控制pH、加入化學(xué)劑、冷藏或冷凍。應(yīng)根據(jù)具體組分選定適宜的保存方法。(5)現(xiàn)場采樣和記錄現(xiàn)場采樣：采集井水時，須先用泵充分抽水，以保證樣品真正代表地下水源的實(shí)況。采集自來水時，應(yīng)開啟水龍頭，適當(dāng)放水?dāng)?shù)分鐘后再取樣，微生物樣品應(yīng)放水?dāng)?shù)分鐘后關(guān)閉水龍頭，用酒精棉球擦拭水龍頭口并點(diǎn)燃酒精棉球灼燒水龍頭口后迅速采樣封口。采樣記錄：在采樣現(xiàn)場把采樣記錄用膠紙粘貼或懸掛標(biāo)簽于水樣瓶上，注明水樣編號、采樣者、日期、時間及地點(diǎn)等。2.生活污水和工業(yè)廢水水樣的采集：生活污水的成分十分復(fù)雜，變化很大，它既與人們的起居作息有關(guān)，又與季節(jié)性食物的種類有關(guān)，一天之內(nèi)乃至一小時之內(nèi)水質(zhì)的情況也不相同。工業(yè)廢水是指生產(chǎn)過程中排出的各種廢水，它包括工藝過程用水，機(jī)器設(shè)備冷卻水，設(shè)備和場地清洗水等。由于生產(chǎn)工藝過程不同，原材料不均以及工藝的間歇性等，在不同時間內(nèi)，即使是同種工業(yè)廢水，其水質(zhì)情況的變化也十分明顯。對于這種變化很大的水樣，需仔細(xì)設(shè)置采樣點(diǎn)和采樣方法，才能使所取樣品有代表性。為了使所設(shè)置的采樣點(diǎn)合適，布點(diǎn)前應(yīng)進(jìn)行必要的調(diào)查研究。例如，查清工業(yè)的用水量（主要包括工業(yè)用水量、工業(yè)用水中的循環(huán)用水量、廢水排放量），查明工業(yè)廢水的類型和排污去向（車間、工廠或地區(qū)排污口數(shù)量和位置，工業(yè)廢水是直接進(jìn)入還是通過渠道排入江河湖海中等）。一般在工廠總排污口處布點(diǎn)取樣，這種水樣適于監(jiān)測懸浮物、硫化物、揮發(fā)性酚、石油和銅、鋅、氟及其無機(jī)化合物等二類污染物。為了監(jiān)測汞、鎘、砷、鉛及其無機(jī)化合物，六價鉻，有機(jī)氯和強(qiáng)致癌物等一類污染物，則應(yīng)在車間或車間設(shè)備出口處布點(diǎn)取樣。對于有處理設(shè)施的工廠，還應(yīng)在處理設(shè)施的進(jìn)口和出口處布點(diǎn)取樣，這樣可了解處理效果。采集廢水樣品的方式主要有以下幾種：(1)間隔式等量取樣：通常在一晝夜內(nèi)每隔一定的時間采集相等量的水樣混勻，這種方式適于廢水流量比較恒定的情況。(2)平均比例取樣：如果廢水流量不恒定，則需根據(jù)不同流量按比例采集樣品，即流量大時多取，流量小時少取，混勻后裝瓶。如設(shè)有總廢水池，也可在廢水池一次采集混合均勻的水樣進(jìn)行分析。(3)瞬間采樣：如要了解廢水在每天各個不同時間內(nèi)成分的變化，應(yīng)每隔一定時間，如1小時、2小時……有時甚至幾分鐘采集一次水樣，并立即分析。(4)單獨(dú)取樣：有些污染物，如懸浮物、油類等在廢水中的分布極不均勻，很難取到代表性的均勻水樣，而且樣品在放置過程中又易浮于表面或沉于容器底部，如從全分析水樣中取出一部分用來分析這些項(xiàng)目，必然會影響到結(jié)果的正確性，在這種情況下就應(yīng)單獨(dú)取樣，全量分析。采樣點(diǎn)應(yīng)設(shè)在排污總管口或車間污水出口處。3.對河流湖泊等進(jìn)行污染調(diào)查時水樣的采集：對河流湖泊等進(jìn)行污染調(diào)查時，應(yīng)從整個水域來考慮，合理設(shè)置采樣點(diǎn)，建立起水體污染監(jiān)測網(wǎng)，才能及時而準(zhǔn)確地報告污染情況和水域中各種有害物質(zhì)的動態(tài)變化。為了合理地確定采樣點(diǎn)，首先應(yīng)做好調(diào)查研究和收集資料工作。需要了解水體的水文、氣候、地質(zhì)、地貌特征；了解水體沿岸的城市分布和工業(yè)布局情況，污染源分布及排污情況，城市的給水情況；了解水體沿岸的資源現(xiàn)狀，水資源的用途和重點(diǎn)水源保護(hù)區(qū)；收集原有的水質(zhì)檢驗(yàn)資料。必要時，還可在需要設(shè)置采樣點(diǎn)的河段上設(shè)置一些調(diào)查點(diǎn)進(jìn)行采樣分析。然后根據(jù)檢驗(yàn)的目的、項(xiàng)目和樣品類型，并按上述調(diào)查研究和對有關(guān)資料的綜合分析結(jié)果來確定采樣點(diǎn)。[問答題]3.食品樣品制備的前處理正確答案：詳見解析參考解析：采集的樣品多數(shù)不能直接檢測，樣品要進(jìn)行前處理，再制備成樣品溶液進(jìn)行分析。樣品前處理一般分為：粉碎、過篩、勻漿、干燥、脫脂等。1.粉碎：粉碎樣品常用乳缽、藥碾和粉碎機(jī)。用乳缽和藥碾粉碎樣品是實(shí)驗(yàn)室常用的老辦法，該法使樣品全部微粉化，主要適用于含水分少、油脂少的干燥樣品。粉碎機(jī)有電動和手動兩種，較常用電動一種，有滾筒式、球磨式和切削式等，粉碎效果較好。無論使用哪種粉碎方法，都應(yīng)注意以下幾個問題：(1)粉碎時間不宜過長，否則產(chǎn)生的熱量大，可能會引起某些成分變化或水分減少，樣品粉碎到最大顆粒不影響平均組成，最小顆粒不影響成分特點(diǎn)為度。(2)選用粉碎機(jī)應(yīng)根據(jù)測定目的、樣品種類不同來選擇。例如，粉碎含纖維多的樣品不宜選研磨式粉碎機(jī)，而選用沖擊式切削式較好。測定金屬含量的樣品選用瓷的粉碎裝置，否則會造成某種金屬量偏高。(3)對于含水分或含油脂多的樣品，要在不影響測定的情況下預(yù)先干燥除水分或預(yù)先脫脂后再粉碎。(4)所有的粉碎機(jī)使用完后都應(yīng)清掃干凈，用前應(yīng)處理干凈、干燥。2.過篩：經(jīng)粉碎后的樣品由于粒度不一致，會造成取樣不均勻，因此粉碎后的樣品要過篩，將大顆粒篩出來再行粉碎，再過篩，直至全通過。一般過20～35目篩即可。過篩時，一定要上面有蓋下面有底，使整個過篩在密閉的狀態(tài)下進(jìn)行，否則一些細(xì)微粉末會損失。使用過的篩子應(yīng)該用小毛刷輕輕清掃，清除樣品剩余粉末和殘?jiān)?，如果孔目較細(xì)的可將篩反過來進(jìn)行清除。如果篩過含鹽分多的樣品，用過的篩子應(yīng)用水洗凈，然后干燥。3.勻漿：對于含水分或油脂多的樣品，往往不適合用粉碎方法處理，可用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿或組織搗碎。勻漿之前需將樣品切成小塊，勻漿時要注意下列問題：(1)對一些含水分較少的樣品在勻漿時要加一定量的水，以便上下層翻動、沖擊，其加水量視樣品而異，一般可加1～5倍。(2)所用勻漿器材應(yīng)清潔，無污染。用后必須清洗干凈，特別是含酸類樣品，如不及時處理，將腐蝕勻漿器金屬部件，使其生銹。清洗后，干燥。4.干燥（風(fēng)干物的制備）：含水分多、脂肪少、被測成分對熱穩(wěn)定的樣品，可進(jìn)行預(yù)干燥。取樣品適量，將之切細(xì)或切薄，稱取200～300g，平鋪在琺瑯盤中，于60～80℃條件下加熱干燥后置于室溫下1～2日，使其與大氣溫度達(dá)到動態(tài)平衡，稱重，計(jì)算出和未預(yù)干燥前樣品的關(guān)系。5.脫脂：油菜籽、芝麻等種子及其制作的食品含油脂較多，粉碎時由于脂肪出來了而影響粉碎。如果少量損失油脂不影響測定結(jié)果，可選用盡可能減少油脂損失的機(jī)器，粉碎成粗塊。如若將油脂全部除去，則稱取適量樣品于乳缽中粗碎，然后進(jìn)行脫脂，供分析用。[問答題]4.醫(yī)院消毒效果正確答案：詳見解析參考解析：一、采樣的原則與要求（一）采樣時應(yīng)注意無菌操作采樣人員應(yīng)做好個人防護(hù)，并按無菌技術(shù)操作，防止人員、標(biāo)本和環(huán)境的污染；并正確處理采樣及污染的廢棄物。（二）樣品的采取和送檢注意樣品采取的正確時段，并將采取的樣品在6小時內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢測，若樣品保存于0～4℃條件時，送檢時間不得超過24小時。（三）樣品標(biāo)識應(yīng)對采取的樣品進(jìn)行唯一性標(biāo)記，在樣本上注明樣品編號，并附詳細(xì)的采樣單，注明樣品編號、樣品名稱、采樣地點(diǎn)、采樣時間、單位名稱、來源、數(shù)量、檢測項(xiàng)目和采樣人信息。二、采樣器材和采樣液常用的采樣工具主要包括：含營養(yǎng)瓊脂平板(直徑為9cm)、10ml磷酸鹽緩沖液采樣管、含0.1%硫代硫酸鈉10ml磷酸鹽緩沖液采樣管、含3%(W/V)吐溫80和0.3%卵磷脂10ml磷酸鹽緩沖液采樣管、含0.3%甘氨酸10ml磷酸鹽緩沖液采樣管、9ml普通營養(yǎng)肉湯采樣管、含0.1%硫代硫酸鈉9ml營養(yǎng)肉湯采樣管、含3%(W/V)吐溫80和0.3%卵磷脂9ml營養(yǎng)肉湯采樣管、含0.3%甘氨酸9ml營養(yǎng)肉湯采樣管，滅菌規(guī)格板(5cm×5cm)、無菌鑷子、酒精燈、快速手消毒劑、無菌棉簽、一次性使用無菌注射器(5ml)。三、樣本采取方法（一）各類環(huán)境空氣、物體表面分類Ⅰ類環(huán)境：采用空氣潔凈技術(shù)的診療場所、分潔凈手術(shù)部和其他潔凈場所；Ⅱ類環(huán)境：包括非潔凈手術(shù)部（室）、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、血液病病區(qū)、燒傷病區(qū)等保護(hù)性隔離病區(qū)；重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)；新生兒室等；Ⅲ類環(huán)境：包括母嬰同室、消毒供應(yīng)中心的檢查包裝滅菌區(qū)和無菌物品存放區(qū)、血液透析中心（室）、其他普通住院病區(qū)等。Ⅳ類環(huán)境：包括普通門（急）診及其檢查、治療（注射、換藥等）室；感染性疾病科門診和病區(qū)。（二）空氣1.采樣時段Ⅰ類環(huán)境在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動前采樣；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后與從事醫(yī)療活動前采樣。2.采樣方法(1)Ⅰ類環(huán)境可選擇平板暴露法或空氣采樣器法，按照GB50333《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》要求進(jìn)行檢測?？諝獠蓸悠鞣蛇x擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)過驗(yàn)證的空氣采樣器。檢測時將采樣器置于室內(nèi)中央80～150cm高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時間不應(yīng)超過30分鐘。房間大于10m2者，每增加10m2增設(shè)一個采樣點(diǎn)。(2)Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法，室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁1m處；室內(nèi)面積>30m2，設(shè)4角及中央5點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位應(yīng)距墻壁1m處。采樣方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平板(Ф90mm)放置各采樣點(diǎn)，采樣高度為距地面80～150cm；采樣時將平板蓋打開，并將平板蓋平移扣放于平板底上邊邊緣，平板蓋不能遮擋普通營養(yǎng)瓊脂，暴露至規(guī)定時間（Ⅱ類環(huán)境暴露15分鐘，Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境暴露5分鐘）后，蓋上蓋及時送檢。(3)注意事項(xiàng)1)采樣前，關(guān)好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10分鐘后進(jìn)行采樣。2)采樣高度選擇與地面垂直高度80～150cm。3)行走時動作要輕，且盡可能少在室內(nèi)走動。4)先布點(diǎn)（放平板），后開蓋。5)同一房間的空氣與物表采樣，均由一人操作。（三）醫(yī)務(wù)人員手1.采樣時段在醫(yī)院工作人員清洗消毒雙手后，接觸病人或從事醫(yī)療活動前采樣。2.采樣方法將浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的一支棉拭子在雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦各兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)編號送檢。采樣面積按平方厘米(cm2)計(jì)算。工作人員用消毒劑消毒雙手后，手上殘留有消毒劑，應(yīng)用含有與消毒液相對應(yīng)的中和劑的采樣液采樣。3.注意事項(xiàng)采樣必須在工作人員手清洗消毒后，進(jìn)行醫(yī)療活動前，采取兩只手為一個樣品。（四）物體表面1.采樣時段潛在污染區(qū)、污染區(qū)消毒后采樣。清潔區(qū)根據(jù)現(xiàn)場情況確定。2.采樣面積物體被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，采取100cm2。3.樣品采樣方法用5cm×5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的1支棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采4個規(guī)格板，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子涂擦物體表面采樣。若采樣物體表面有殘留的消毒劑時，應(yīng)用含與消毒液相對應(yīng)的中和劑的采樣液采樣。4.注意事項(xiàng)(1)門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子涂擦采樣，菌落總數(shù)是用CFU/件表示。(2)同一房間空氣、物體表面的采樣，應(yīng)先采空氣，后采物體表面，最好由一個人操作。(3)物體表面的采樣應(yīng)由近及遠(yuǎn)，兼顧上下中左右。（五）醫(yī)療用品1.采樣時段在消毒或滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。2.采樣方法樣品采取應(yīng)在100級潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。(1)滅菌的醫(yī)療器材1)可用破壞性方法采取的滅菌醫(yī)療器材；如一次性輸液（血）器、注射器和注射針等參照《中華人民共和國藥典》中的無菌檢查法進(jìn)行。2)對不能用破壞性方法采取的醫(yī)療器材：縫合針、針頭、手術(shù)刀片等醫(yī)療器械各5件，分別投入5ml的無菌洗脫液中；注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5次；手術(shù)鉗、鑷子等大的醫(yī)療器械取2件，用棉拭子涂擦采樣，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中，被采表面<100cm2，取全部表面，被采表面≥100cm3，取100cm2。然后將除去手接觸部分的棉拭子進(jìn)行無菌檢查。3)牙科手機(jī)樣品，將每支手機(jī)分別置于含20m1～25ml采樣液的無菌大試管(內(nèi)徑25mm)中，液面高度應(yīng)大于4.0cm，于旋渦混合器上洗滌振蕩30秒以上，取洗脫液進(jìn)行無菌檢查。(2)消毒醫(yī)療器材1)可整件放入無菌試管的滅菌物品，用洗脫液浸沒后震蕩30秒以上，取洗脫液1.0ml接種于滅菌的平板，將冷至40～45℃的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個平板傾注15～20ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，冷至室溫將平板翻過來，置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48小時，計(jì)數(shù)菌落數(shù)（單位CFU/件），必要時分離致病性微生物。2)可用破壞性方法采取的消毒醫(yī)療器材，在100級超凈工作臺稱取1～10g樣品，放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)進(jìn)行洗脫，取洗脫液1.0ml接種滅菌的平板，計(jì)數(shù)菌落數(shù)(CFU/g)，必要時分離致病性微生物；對不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，在100級超凈工作臺，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面<100cm2，取全部表面，被采表面≥100cm2，取100cm2。3)消毒后內(nèi)鏡，取清洗消毒后內(nèi)鏡，采用無菌注射器抽取50ml含與消毒劑相應(yīng)中和劑的洗脫液，從內(nèi)鏡的活檢入口注入沖洗內(nèi)鏡管路，并全量收集（可使用蠕動泵）送檢。3.注意事項(xiàng)(1)在潔凈度100級區(qū)域中進(jìn)行，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免微生物污染。(2)當(dāng)消毒因子為消毒劑時，采樣液中應(yīng)加入與消毒劑相應(yīng)的中和劑。(3)應(yīng)采有效期內(nèi)的樣品（高壓滅菌-2周；環(huán)氧乙烷-2年）。（六）消毒劑1.采樣要求(1)采樣時間，采取更換前使用中消毒液與無菌器械保存液。(2)消毒劑采樣分庫存消毒劑和使用中消毒液。2.采樣方法在無菌條件下，用無菌吸管吸取1ml被檢樣液，加入9ml含相應(yīng)的稀釋液中混勻。對于醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可；對于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需用含0.1%硫代硫酸鈉磷酸緩沖液；對于洗必泰、季銨鹽消毒劑，需用含3%(W/V)吐溫80和0.3%卵磷脂磷酸緩沖液；對于醛類消毒劑，需用含0.3%甘氨酸磷酸緩沖液；對于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需用含3%(W/V)吐溫8磷酸緩沖液，也可使用該消毒劑消毒效果檢測的中和劑鑒定試驗(yàn)確定的中和劑，以中和被檢樣液的殘效作用。3.注意事項(xiàng)(1)采集消毒液樣品時應(yīng)在消毒液內(nèi)沒有物品或放入物品消毒作用到規(guī)定時間之后進(jìn)行采樣。(2)采樣后1小時內(nèi)檢測，實(shí)際工作中由于各種原因做不到，因此，我們加入9ml與所采消毒劑相對應(yīng)的中和劑中和其消毒作用，帶回實(shí)驗(yàn)室后及時檢測。(3)不同消毒劑使用與之相對應(yīng)的中和劑中和，以中和被檢消毒液的殘效作用。[問答題]5.人禽流感樣品采集、運(yùn)輸和檢測正確答案：詳見解析參考解析：（一）標(biāo)本的采集1.標(biāo)本采集人員：醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)生、護(hù)士或當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心專業(yè)人員負(fù)責(zé)標(biāo)本采集并填寫標(biāo)本登記表，標(biāo)本采集人員按照《與禽流感病禽密切接觸者個人防護(hù)指導(dǎo)原則（試行）》做好個人防護(hù)。2.采集對象：禽流感病人，疑似病人，根據(jù)需要可采集病禽以及人禽流感密切接觸者。3.標(biāo)本采集種類和時限(1)采集標(biāo)本的種類：疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液、血清、糞便以及死亡病例的尸檢肺組織、氣管分泌物、其他臟器。(2)采集標(biāo)本時間：咽、鼻拭子或含漱液、糞便在發(fā)病的頭3天內(nèi)采集。急性期血清在發(fā)病后7天內(nèi)采集，恢復(fù)期血清在發(fā)病后2～4周采集。尸檢標(biāo)本尸檢時采集。(3)標(biāo)本的運(yùn)送：采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在﹣70℃以下保存。無﹣70℃條件的需在﹣20℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。(4)標(biāo)本采集的方法病毒分離標(biāo)本：應(yīng)采集發(fā)病后3天內(nèi)相關(guān)標(biāo)本進(jìn)行病毒分離。標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４?，常用的采樣液為：普通肉湯，pH7.4～7.6的Hank液、Eagle液或水解乳蛋白液。在采樣液中需加入抗生素，抗生素多用青霉素、鏈霉素(1000U/ml)，慶大霉素(其終濃度為1mg/ml)和制霉菌素(終濃度為50μg/ml)。主要的采集樣本的方法有以下幾種：1)鼻拭子：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入4～5ml采樣液中，尾部棄去。2)咽拭子：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，同樣將棉簽頭浸入4～5ml采樣液中，尾部棄去。3)鼻咽抽取物：用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取黏液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的黏液，并用采樣液刷洗收集器3次。4)鼻洗液：患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將1～1.5ml洗液注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使洗液流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過程數(shù)次。洗兩側(cè)鼻孔最多可用10～15ml洗液。5)漱口液：用10ml洗液漱口。漱口時讓患者頭部微后仰，發(fā)噢聲，讓洗液在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液。注意：取鼻洗液和漱口液時，需預(yù)先了解患者是否對抗生素有過敏史，如有則洗液和含漱液中不應(yīng)含有相應(yīng)的抗生素。6)肺活檢材料：肺活檢組織在無菌條件下，用滅菌過的乳缽磨碎，用生理鹽水配成20%懸液，2000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取上清液加入上述提到的抗生素。7)糞便標(biāo)本：采集10～20g糞便（或用塑料桿人造纖維頭的肛拭子2支）放入含有10mlPBS或生理鹽水無菌的50ml有螺旋蓋的塑料瓶內(nèi)，密封，40℃條件下立即送至有關(guān)實(shí)驗(yàn)室。血清標(biāo)本：血清標(biāo)本應(yīng)包括急性期和恢復(fù)期雙份血清5～10ml。急性期血樣應(yīng)盡早采集，一般不晚于發(fā)病后7天?；謴?fù)期血樣則在發(fā)病后2～4周采集。血液標(biāo)本2000～2500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘。收集血清，血清可在40℃存放1周，長期保存置﹣20℃。（二）標(biāo)本包裝、運(yùn)送1.禽流感病例（包括疑似禽流感病例）標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋的內(nèi)有橡膠圈的塑料管里（一級容器）擰緊。2.將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。3.直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名，同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填寫在禽流感人體標(biāo)本送檢表（見附表），連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。4.將裝標(biāo)本的密封袋放入二級帶螺旋蓋的內(nèi)有橡膠圈的塑料容器內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。5.將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)（或疫苗運(yùn)輸箱），放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封。(1)同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。(2)二級容器要承受不小于95kPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。(3)若進(jìn)行病毒分離，可將密封好的裝有標(biāo)本的一級容器直接放入液氮運(yùn)輸罐內(nèi)運(yùn)輸。(4)所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。(5)標(biāo)本需由專人（2人）運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。（三）標(biāo)本的接收1.省（市）預(yù)防控制中心為本轄區(qū)內(nèi)標(biāo)本接收指定單位，并開展相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢測工作。對病毒分離物的血凝實(shí)驗(yàn)陽性和血清H5N1抗體陽性的標(biāo)本，連同送檢表同時送至省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行復(fù)檢。2.省CDC負(fù)責(zé)其他地級市樣本的接收和實(shí)驗(yàn)室檢測工作。并對復(fù)核樣本進(jìn)行檢測、鑒定及上送國家流感中心。3.指定實(shí)驗(yàn)室應(yīng)實(shí)行24小時標(biāo)本接收制。（四）相關(guān)病毒學(xué)的檢測項(xiàng)目1.病毒分離和鑒定：用組織培養(yǎng)（MDCK細(xì)胞）和雞胚分離法，細(xì)胞和雞胚培養(yǎng)物進(jìn)一步用HA和HI實(shí)驗(yàn)鑒定。經(jīng)HI實(shí)驗(yàn)（用H5抗血清）檢測陽性者報送國家流感中心。經(jīng)特異性H5RT-PCR病毒核酸檢測陽性的采樣標(biāo)本的病毒分離及鑒定工作必須在生物安全Ⅲ級(BSL-3級)實(shí)驗(yàn)室里操作。2.血清抗體檢測3.禽H5病毒核酸檢測：對疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液，死亡病例的尸檢肺組織、氣管分泌物采用RT-PCR的方法快速檢測禽H5亞型流感病毒及排除工作。4.微量中和試驗(yàn)：對部分疑似病例的急性期和恢復(fù)期的雙份血清進(jìn)一步做微量中和試驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)必須在生物安全Ⅲ級(BSL-3級)實(shí)驗(yàn)室里操作。（五）檢測結(jié)果的確認(rèn)1.各流感監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室對血凝實(shí)驗(yàn)(HA)陽性或H5血凝抑制試驗(yàn)(HI)陽性的標(biāo)本，上送進(jìn)行復(fù)核。2.省CDC流感實(shí)驗(yàn)室對血凝(HA)陽性、H5血凝抑制試驗(yàn)(HI)陽性、RT-PCR檢測陽性、微量中和試驗(yàn)陽性的標(biāo)本，上送國家流感中心復(fù)核檢測及確認(rèn)。（六）檢測報告時限一般情況下，實(shí)驗(yàn)室收到的樣本應(yīng)立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并于收到標(biāo)本后48小時內(nèi)出具RT-PCR檢測報告，3～5天出具病毒分離培養(yǎng)結(jié)果，于分離到病毒后的3～5天出具流感病毒的血凝抑制試驗(yàn)結(jié)果，微量中和實(shí)驗(yàn)需3～5天后完成。當(dāng)實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)不可預(yù)測情況或意外事件，影響了按時出具報告時，應(yīng)及時報告和說明。（七）流感實(shí)驗(yàn)室檢測中應(yīng)注意的問題1.初期病毒分離標(biāo)本的處理可以在二級生物安全柜中進(jìn)行；如標(biāo)本確認(rèn)為H5N1陽性后，此標(biāo)本的有關(guān)實(shí)驗(yàn)應(yīng)在P3實(shí)驗(yàn)室中操作。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在二級生物安全柜中或生物安全二級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。2.禁止在同一實(shí)驗(yàn)室，更不能在同一接種柜中，同時處理、接種未知臨床標(biāo)本和已知陽性標(biāo)本。3.禁止在同一實(shí)驗(yàn)室，同一時間處理、接種采自不同動物的標(biāo)本；動物標(biāo)本（如禽、豬等）必須與人的標(biāo)本分別保存。4.接種后剩余原始標(biāo)本，尤其分離出病毒的標(biāo)本需暫時凍存，有條件的應(yīng)置﹣70℃或以下保存，以便需要時可進(jìn)行復(fù)查，待分離物經(jīng)國家流感中心鑒定完成后方可處理掉。分離陰性的標(biāo)本也應(yīng)隨時廢棄處理。5.嚴(yán)禁實(shí)驗(yàn)室交叉污染：在病毒分離時嚴(yán)禁設(shè)陽性對照及操作在人群中已消失的流感病毒。6.流感病毒在﹣40～﹣20℃時不穩(wěn)定，故長期保存應(yīng)在﹣70℃以下。[問答題]6.常用的現(xiàn)場檢測項(xiàng)目正確答案：詳見解析參考解析：（一）空氣溫度目前我國測定室內(nèi)溫度的標(biāo)準(zhǔn)方法有玻璃液體溫度計(jì)法和數(shù)顯示溫度計(jì)法。測定時，測點(diǎn)離地面高度0.8～1.6m，應(yīng)離開墻壁與熱源0.5m以上。1.玻璃液體溫度計(jì)法溫度計(jì)的刻度最小分度值<0.2℃，測量精度±0.5℃，測量范圍為0～50℃?，F(xiàn)場測定時，溫度計(jì)應(yīng)在現(xiàn)場放置5～10分鐘后讀數(shù)，讀數(shù)時視線與溫度計(jì)標(biāo)尺垂直，水銀溫度計(jì)按凸出彎月面的最高點(diǎn)讀數(shù)，酒精溫度計(jì)應(yīng)按凹月面的最低點(diǎn)讀數(shù)。2.數(shù)顯式溫度計(jì)法數(shù)顯式溫度計(jì)最小分辨率0.1℃，測量范圍0～60℃，測量精度±0.5℃?，F(xiàn)場測定時，應(yīng)首先安裝好電池，然后將儀器的傳感器桿接好（或拔出），打開儀器開關(guān)，按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求選點(diǎn)，待儀器讀數(shù)穩(wěn)定后讀取現(xiàn)場溫度值。待測定完成后，將傳感器桿回復(fù)原位，關(guān)閉儀器開關(guān)，記錄測得值。（二）空氣相對濕度測定室內(nèi)空氣濕度的方法包括干濕球法、氯化鋰露點(diǎn)法、電阻電容法。1.電阻電容法目前常用的測定方法。測定前，應(yīng)首先安裝好電池，然后將儀器的傳感器桿接好（或拔出），打開儀器開關(guān)，按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求選點(diǎn)，待儀器讀數(shù)穩(wěn)定后讀取相對濕度值。待測定完成后，將傳感器桿回復(fù)原位，關(guān)閉儀器開關(guān)，記錄測得值。2.干濕球法利用通風(fēng)干濕表測量空氣的相對濕度，在-10～45℃條件下，相對濕度的測量范圍為10%RH～100%RH。（三）大氣壓使用空盒氣壓表測定室內(nèi)大氣壓力，普通空盒氣壓表測量范圍800～1064hPa環(huán)境的測定，應(yīng)用高原空盒氣壓表可用于氣壓為500～1020hPa環(huán)境的測定。測定時將空盒氣壓表直接帶到現(xiàn)場，先讀附溫，準(zhǔn)確到0.1℃輕敲盒面，待指針擺動靜止后讀數(shù)。（四）室內(nèi)風(fēng)速測定室內(nèi)風(fēng)速常用指針式熱電風(fēng)速計(jì)或數(shù)顯式熱電風(fēng)速計(jì)，其最低檢測值不應(yīng)大于0.05m/s，在0.05～2m/s范圍內(nèi)，其測量誤差不大于±10%。1.指針式熱電風(fēng)速計(jì)現(xiàn)場測定時基本步驟如下：(1)將風(fēng)速傳感器與風(fēng)速計(jì)連接，打開電源開關(guān)；(2)按照儀表使用說明書調(diào)整儀表的機(jī)械零點(diǎn)、滿度和零點(diǎn)；(3)輕輕拉動螺塞，使測桿測頭露出，測頭上的紅點(diǎn)對準(zhǔn)來風(fēng)方向，從表上讀出風(fēng)速值。2.數(shù)顯式熱電風(fēng)速計(jì)測定時基本步驟如下：(1)將風(fēng)速傳感器與風(fēng)速計(jì)連接，打開電源開關(guān)；(2)按使用說明書進(jìn)行自檢或預(yù)熱等操作；(3)輕輕將測桿測頭拉出，測頭上的紅點(diǎn)對準(zhǔn)來風(fēng)方向，讀出風(fēng)速值；（五）噪聲測定室內(nèi)噪聲通常采用數(shù)字聲級計(jì)測定，其原理通常利用電容式聲電換能器，將被測的聲音信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，?jīng)內(nèi)部一定處理后成為聲級值。使用聲級計(jì)在規(guī)定時間內(nèi)測量一定數(shù)量的室內(nèi)環(huán)境A計(jì)權(quán)聲級值，經(jīng)過計(jì)算得出等效A聲級LAeq，即為室內(nèi)噪聲值。1.數(shù)字聲級計(jì)測量范圍30～120dB(A)，精度±1.0dB。2.測定時基本要求(1)測點(diǎn)選擇：測定時大于100m2的公共場所，距聲源中心（或一側(cè)墻壁）畫一直線至對側(cè)墻壁中心，在此直線上均勻分布3點(diǎn)為監(jiān)測點(diǎn)，小于100m2的公共場所在中央?yún)^(qū)一點(diǎn)作為監(jiān)測點(diǎn)。(2)儀器校準(zhǔn)：測量前使用聲校準(zhǔn)器對聲級計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。(3)測量時聲級計(jì)可以手持也可以固定在三角架上，并盡可能減少聲波反射影響。(4)穩(wěn)態(tài)噪聲測定，用聲級計(jì)快檔讀取1分鐘指示值或平均值，對于脈沖噪聲讀取峰值和脈沖保持值。(5)周期性噪聲測定，用聲級計(jì)慢檔每隔5秒讀取一個瞬時A聲級值，測量一個周期。(6)非周期非穩(wěn)態(tài)噪聲測定，用聲級計(jì)慢檔每隔5秒讀取一個瞬時A聲級值，連續(xù)讀取若干數(shù)據(jù)。（六）照度測定目前我國公共場所標(biāo)準(zhǔn)中測定照度使用的儀器是利用光敏半導(dǎo)體元件的物理光現(xiàn)象制成的。當(dāng)外來光線射到硒光電池（光電元件）后，硒光電池即將光能轉(zhuǎn)變?yōu)殡娔?，通過電流表顯示出光的照度值。使用的照度計(jì)性能應(yīng)符合公共場所照度測定方法要求。1.照度計(jì)量程下限不大于1lx，上限不小于5000lx，測定公共場所室內(nèi)照度儀器示值誤差要求不超過±8%，室內(nèi)照明測定儀器示值誤差不超過+4%。2.測點(diǎn)要求在進(jìn)行公共場所整體照明調(diào)查時，測定面高度為地面以上80～90cm。一般大小的房間在房間的對角線上或呈梅花式均勻分布取5個點(diǎn)，影劇院、商場等大面積場所的測量可用等距離布點(diǎn)法，一般以每100m2布10個點(diǎn)為宜。局部照明測量時，要根據(jù)實(shí)際情況合理選擇，并在測定結(jié)果中注明。3.測定時間要求測定時應(yīng)注意，測定前白熾燈至少開5分鐘，氣體放電燈至少開30分鐘。為使受光器不產(chǎn)生初始效應(yīng)，在測量前至少曝光5分鐘。測定時受光器一律水平放置在待測面上。4.測量步驟(1)按使用說明書要求檢查調(diào)整照度計(jì)；(2)照度計(jì)的受光器上必須潔凈無塵；(3)測量時照度計(jì)受光器應(yīng)水平放置；(4)將受光器置于待測位置，選擇量程并讀取照度值；(5)操作人員的位置和服裝不應(yīng)該影響測量結(jié)果；(6)按要求對儀器進(jìn)行期間核查和使用前校準(zhǔn)。（七）紫外輻照計(jì)紫外輻照計(jì)是寬譜線功率測量儀，主要用于測量紫外線的輻射能功率密度，即每平方厘米的輻射能功率。單位為：微瓦/平方厘米(μW/cm2)。1.操作方法(1)安裝電池。(2)按下開關(guān)按鈕，液晶顯示屏顯出數(shù)字。(3)調(diào)零：左邊紫外輻照計(jì)插上接觸頭，不需要調(diào)零；右邊紫外輻照計(jì)，在無紫外線照射下，旋轉(zhuǎn)調(diào)零旋鈕調(diào)零。(4)選擇正確擋位：左邊紫外輻照計(jì)需要選擇擋位，紫外線強(qiáng)度監(jiān)測選擇253.7mm波長。(5)檢查一下?lián)Q擋開關(guān)是否在×1擋。(6)取下探頭保護(hù)蓋，檢查光敏感窗是否清潔。(7)測量：將探頭窗口置于測量位置，顯示數(shù)值即為輻照強(qiáng)度，單位：μW/cm2。當(dāng)數(shù)值顯示1時，即為超量程，請將換擋開關(guān)至×10擋位置，輻照強(qiáng)度即為讀數(shù)乘10。(8)數(shù)據(jù)保持：在測量過程中，測量數(shù)值尾數(shù)不穩(wěn)定時，按下HOLD鍵會保持當(dāng)前讀數(shù)，且屏幕上會出現(xiàn)HOLD標(biāo)志。如需退出保持功能，只需再按下HOLD鍵，HOLD標(biāo)志消失并退出保持功能。(9)使用結(jié)束，將電源關(guān)閉，并蓋上探頭蓋。2.注意事項(xiàng)(1)在現(xiàn)場監(jiān)測時，拿到儀器檢查是否有在有效期內(nèi)的檢定合格標(biāo)記。(2)因紫外線對人體皮膚及眼睛有損害，所以測量中要注意安全防護(hù)，監(jiān)測少量紫外線燈時要戴上防護(hù)眼鏡；監(jiān)測大量紫外線燈時戴上防護(hù)式頭盔和手套，無暴露皮膚，以免損害身體健康。(3)在監(jiān)測紫外線燈的輻照強(qiáng)度時，紫外線燈表面應(yīng)清潔，發(fā)現(xiàn)燈管表面有灰塵、油污時，應(yīng)用酒精棉球?qū)艄懿潦酶蓛艉笤龠M(jìn)行檢測。(4)普通30W直管紫外線燈在開燈5分鐘后，距紫外線殺菌燈管(GB28235-2011)表面正中法線1.000m處用波長為253.7nm的紫外照度計(jì)測定，打開探頭蓋，待儀器穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈的輻照強(qiáng)度，使用中的紫外線燈的輻照強(qiáng)度不得低于70μW/cm2為合格。(5)HOLD鍵每次按下時間不應(yīng)超過15秒，否則影響液晶壽命。[問答題]7.大氣樣品采集方法正確答案：詳見解析參考解析：大氣樣品的采集方法分為直接采樣法和富集（濃縮）采樣法兩類。一、直接采樣法--容器采樣法適用于大氣中被測組分濃度較高或監(jiān)測方法靈敏度高的情況，這時不必濃縮，只需用儀器直接采集少量樣品進(jìn)行分析測定即可。此法測得的結(jié)果為瞬時濃度或短時間內(nèi)的平均濃度。常用容器有注射器、塑料袋、采氣管、真空瓶等。1.注射器采樣：常用100ml注射器采集有機(jī)蒸氣樣品。采樣時，先用現(xiàn)場氣體抽洗2～3次，然后抽取100ml，密封進(jìn)氣口，帶回實(shí)驗(yàn)室分析。樣品存放時間不宜長，一般當(dāng)天即分析完成。氣相色譜分析法常采用此法取樣。取樣后，應(yīng)將注射器進(jìn)氣口朝下，垂直放置，以使注射器內(nèi)壓略大于外壓。2.塑料袋采樣：應(yīng)選不吸附、不滲漏，也不與樣氣中污染組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的塑料袋，如聚四氟乙烯袋、聚乙烯袋、聚氯乙烯袋和聚酯袋等，還有用金屬薄膜作襯里（如襯銀、襯鋁）的塑料袋。采樣時，先用二聯(lián)球打進(jìn)現(xiàn)場氣體沖洗2～3次，再充滿樣氣，夾封進(jìn)氣口，帶回實(shí)驗(yàn)室盡快分析。3.采氣管采樣：采氣管容積一般為100～1000ml。采樣時，打開兩端旋塞，用二聯(lián)球或抽氣泵接在管的一端，迅速抽進(jìn)比采氣管容積大6～10倍的欲采氣體，使采氣管中原有氣體被完全置換出，關(guān)上旋塞，采氣管體積即為采氣體積。4.真空瓶采樣：真空瓶是一種具有活塞的耐壓玻璃瓶，容積一般為500～1000ml。采樣前，先用抽真空裝置把采氣瓶內(nèi)氣體抽走，使瓶內(nèi)真空度達(dá)到1.33kPa之后，便可打開旋塞采樣，采完即關(guān)閉旋塞，則采樣體積即為真空瓶體積。二、富集采樣法--濃縮采樣法富集（濃縮）采樣法：是使大量的樣氣通過吸收液或固體吸收劑得到吸收或阻留，使原來濃度較小的污染物質(zhì)得到濃縮，以利于分析測定。適用于大氣中污染物質(zhì)濃度較低，用直接采樣法所得的樣品進(jìn)行分析，往往不易檢出的情況。采樣時間一般較長，測得結(jié)果可代表采樣時段的平均濃度，更能反映大氣污染的真實(shí)情況。具體采樣方法包括溶液吸收法、固體阻留法、低溫冷凝法、自然積集法等。（一）溶液吸收法主要用于吸收以氣態(tài)和蒸氣態(tài)存在的有害物質(zhì)。當(dāng)空氣通過裝有吸收液的吸收管時，有害物質(zhì)分子被阻留在吸收液中，因而能同時達(dá)到采集大氣和濃集有害物質(zhì)的目的。其吸收原理是：當(dāng)空氣通過適當(dāng)?shù)奈找簳r，在氣泡和吸收液的界面上，有害物質(zhì)分子由于溶解作用或化學(xué)反應(yīng)能很快地進(jìn)入吸收液中。同時，處于氣泡中間的氣體分子，由于運(yùn)動速度很大，也能迅速地擴(kuò)散到氣液界面上而被吸收，因而整個吸收過程能很好地完成。各種氣體吸收管就是根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)的，是采集大氣中氣態(tài)、蒸氣態(tài)及某些氣溶膠態(tài)污染物質(zhì)的常用方法。采樣時，用抽氣裝置將欲測空氣以一定流量抽入裝有吸收液的吸收管（瓶），使被測物質(zhì)的分子阻留在吸收液中，以達(dá)到濃縮的目的。采樣結(jié)束后，倒出吸收液進(jìn)行測定，根據(jù)測得的結(jié)果及采樣體積計(jì)算大氣中污染物的濃度。吸收效率主要決定于吸收速度和樣氣與吸收液的接觸面積。常用的吸收液有水、水溶液和有機(jī)溶劑等。選擇吸收液時應(yīng)考慮到以下幾點(diǎn)：被測物質(zhì)在吸收液中的溶解度大，且具有足夠的穩(wěn)定時間；選擇吸收液要考慮下一步化學(xué)反應(yīng)，應(yīng)與以后的分析步驟銜接；吸收液要價廉易得。1.吸收液的選擇原則(1)與被采集的物質(zhì)發(fā)生不可逆化學(xué)反應(yīng)快或?qū)ζ淙芙舛却螅?2)污染物質(zhì)被吸收液吸收后，要有足夠的穩(wěn)定時間，以滿足分析測定所需時間的要求；(3)污染物質(zhì)被吸收后，應(yīng)有利于下一步分析測定，最好能直接用于測定；(4)吸收液毒性小，價格低，易于購買，并盡可能回收利用。2.常用吸收管(1)氣泡式吸收管：適用于采集氣態(tài)和蒸氣態(tài)物質(zhì)，不宜采集氣溶膠態(tài)物質(zhì)。(2)沖擊式吸收管：適宜采集氣溶膠態(tài)物質(zhì)和易溶解的氣體樣品，而不適用于氣態(tài)和蒸氣態(tài)物質(zhì)的采集。(3)多孔篩板吸收管（瓶）：是在內(nèi)管出氣口熔接一塊多孔性的砂芯玻板，當(dāng)氣體通過多孔玻板時，一方面被分散成很小的氣泡，增大了與吸收液的接觸面積；另一方面被彎曲的孔道所阻留，然后被吸收液吸收。所以多孔篩板吸收管既適用于采集氣態(tài)和蒸氣態(tài)物質(zhì)，也適用于采集氣溶膠態(tài)物質(zhì)。（二）填充柱阻留法（固體阻留法）空氣通過裝有固體吸附劑的采樣管時，有害物質(zhì)被固體吸附劑吸附而被濃集。固體吸附劑有顆粒狀吸附劑和纖維狀吸附劑兩種。填充柱是用一根6～10cm長、內(nèi)徑3～5mm的玻璃管或塑料管，內(nèi)裝顆粒狀填充劑制成。采樣時，讓氣樣以一定流速通過填充柱，則欲測組分因吸附、溶解或化學(xué)反應(yīng)而被阻留在填充劑上，達(dá)到濃縮采樣的目的。采樣后，通過加熱解吸，吹氣或溶劑洗脫，使被測組分從填充劑上釋放出來測定。1.常用的顆粒吸附劑種類：常用的顆粒吸附劑有硅膠、活性炭、素?zé)沾珊头肿雍Y等，它們是多孔性物質(zhì)，具有較大的比表面積，對氣體和蒸氣有極強(qiáng)的吸附作用。同時塵粒在多孔性氣路中因慣性碰撞而被阻留。因此，用固體顆粒狀吸附劑采樣，在氣體和塵粒共存時，有時是個較好的采樣方法。采樣完后，再選擇適當(dāng)?shù)娜軇?，將被測物質(zhì)洗脫下來；如為有機(jī)蒸氣，也可用加熱吹氣法解析，然后進(jìn)行分析測定。2.常用填充柱的種類：根據(jù)填充劑阻留作用的原理，可分為吸附型、分配型和反應(yīng)型三種類型。(1)吸附型填充柱：所用填充劑為顆粒狀固體吸附劑，如活性炭、硅膠、分子篩、氧化鋁、素?zé)沾伞⒏叻肿佣嗫孜⑶虻榷嗫仔晕镔|(zhì)，對氣體和蒸氣吸附力強(qiáng)。(2)分配型填充劑：所用填充劑為表面涂有高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（如甘油異十三烷）的惰性多孔顆粒物（如硅藻土、耐火磚等），適于對蒸氣和氣溶膠態(tài)物質(zhì)（如六六六、DDT、多氯聯(lián)苯等）的采集。氣樣通過采樣管時，分配系數(shù)大的或溶解度大的組分阻留在填充柱表面的固定液上。(3)反應(yīng)型填充柱：其填充柱是由惰性多孔顆粒物（如石英砂、玻璃微球等）或纖維狀物（如濾紙、玻璃棉等）表面涂漬能與被測組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的試劑制成，也可用能與被測組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的純金屬（如金、銀、銅等）絲毛或細(xì)粒作填充劑。采樣后，將反應(yīng)產(chǎn)物用適宜溶劑洗脫或加熱吹氣解吸下來進(jìn)行分析。3.固體阻留法的優(yōu)點(diǎn)(1)用固體采樣管可以長時間采樣，測得大氣中日平均或一段時間內(nèi)的平均濃度值；溶液吸收法則由于液體在采樣過程中會蒸發(fā)，采樣時間不宜過長。(2)只要選擇合適的固體填充劑，對氣態(tài)、蒸氣態(tài)和氣溶膠態(tài)物質(zhì)都有較高的富集效率，而溶液吸收法一般對氣溶膠吸收效率要差些。(3)濃縮在固體填充柱上的待測物質(zhì)比在吸收液中穩(wěn)定時間要長，有時可放置幾天或幾周也不發(fā)生變化。所以，固體阻留法是大氣污染監(jiān)測中具有廣闊發(fā)展前景的富集方法。（三）濾料阻留法主要用以采取塵粒狀氣溶膠，如煙和總懸浮顆粒物。采用動力裝置使空氣通過濾紙或?yàn)V膜時，阻留塵粒于膜或?yàn)V料上。常用的濾料有玻璃纖維濾料、有機(jī)合成纖維濾料、微孔濾膜和浸漬試劑濾料等。所選用的濾料和采樣條件要保證有足夠高的采樣效率。濾料的選擇，要求不含待測物質(zhì)，或含量低而分布均勻；例如，分析空氣無機(jī)元素應(yīng)選用有機(jī)濾料，而分析有機(jī)成分時，應(yīng)選用無機(jī)的玻璃纖維濾料。濾料的阻力要盡量小，以提高采樣速度。為此，在采樣前，應(yīng)常根據(jù)目的和要求對濾膜進(jìn)行預(yù)處理。常用濾料有兩類：①纖維狀濾料，如定量濾紙、玻璃纖維濾膜（紙）、氯乙烯濾膜等；②篩孔狀濾料，如微孔濾膜、核孔濾膜、銀薄膜等。各種濾料由不同的材料制成，性能不同，適用的氣體范圍也不同。將過濾材料（濾紙、濾膜等）放在采樣夾上，用抽氣裝置抽氣，則空氣中的顆粒物被阻留在過濾材料上，稱量過濾材料上富集的顆粒物質(zhì)量，根據(jù)采樣體積，即可計(jì)算出空氣中顆粒物的濃度。（四）低溫冷凝法是借制冷劑的制冷作用使空氣中某些低沸點(diǎn)氣態(tài)物質(zhì)被冷凝成液態(tài)物質(zhì)，以達(dá)到濃縮的目的。適用于大氣中某些沸點(diǎn)較低的氣態(tài)污染物質(zhì)，如烯烴類、醛類等。1.常用致冷劑：冰、干冰、冰-食鹽、液氯-甲醇、干冰-二氯乙烯、干冰-乙醇等。2.優(yōu)點(diǎn)：效果好、采樣量大、利于組分穩(wěn)定。（五）自然積集法利用物質(zhì)的自然重力、空氣動力和濃差擴(kuò)散作用采集大氣中的被測物質(zhì)，如自然降塵量、硫酸鹽化速率、氟化物等大氣樣品的采集。其優(yōu)點(diǎn)是不需動力設(shè)備，簡單易行，且采樣時間長，測定結(jié)果能較好地反映大氣污染情況。[問答題]8.樣品管理與運(yùn)輸正確答案：詳見解析參考解析：1.樣品管理除用于現(xiàn)場測定的樣品外，大部分水樣都要運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析，在水樣運(yùn)輸和實(shí)驗(yàn)室檢測過程中應(yīng)保證其性質(zhì)穩(wěn)定、完整、不受玷污、損壞和丟失。采集的水樣應(yīng)有采樣標(biāo)簽和采樣記錄，注明水樣編號、采樣者、采樣日期、采樣時間、采樣地點(diǎn)、水樣體積、數(shù)量、保存方法、水樣采集點(diǎn)周邊狀況、氣溫、水溫、需檢測指標(biāo)等信息。2.樣品運(yùn)輸樣品裝箱運(yùn)輸前應(yīng)逐一核對樣品標(biāo)簽、采樣記錄，檢查容器是否蓋好或封好，用于檢測油類的水樣不能用蠟封；然后按照冷藏、保溫、常溫等分類裝箱；做好防震、防碰撞等襯墊工作等。夏季應(yīng)注意運(yùn)輸時間不宜過長，同時注意防止樣品溫度過高，導(dǎo)致水中化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，尤其應(yīng)注意微生物學(xué)檢測水樣的保存條件；冬季應(yīng)避免水樣在運(yùn)輸過程中結(jié)冰，影響檢測結(jié)果。[問答題]9.食品樣品正確答案：詳見解析參考解析：一、采樣原則1.根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康摹⑹称诽攸c(diǎn)、批量、檢驗(yàn)方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。2.應(yīng)采用隨機(jī)原則進(jìn)行采樣，確保所采集的樣品具有代表性。3.采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染。4.樣品在保存和運(yùn)輸?shù)倪^程中，應(yīng)采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化，保持樣品的原有狀態(tài)。二、采樣工具常用的采樣工具主要包括兩類，一類是適合采集各種樣品的無菌采樣器具，一類是盛放樣品的滅菌容器（袋）等。如鏟子、匙、夾子、鑷子、吸管、滅菌廣口瓶、滅菌袋以及剪子、刀具、開罐器等。此外還應(yīng)準(zhǔn)備消毒用的75%酒精棉球、酒精燈、打火機(jī)或火柴。三、樣品采集的數(shù)量散裝食品一般采集5倍或以上檢驗(yàn)單位的樣品量，即固體樣品不少于250g，液體樣品不少于250ml，或按照檢驗(yàn)方法要求的樣品數(shù)量進(jìn)行采集。四、采樣操作散裝食品的采樣必須在無菌操作下進(jìn)行。采樣前操作人員應(yīng)先穿戴好工作服、工作帽和口罩，將酒精燈、打火機(jī)或火柴移至采樣點(diǎn)后，用75%酒精棉球消毒手，然后用75%酒精棉球?qū)⒉蓸娱_口處周圍消毒后將容器或包裝打開。固體樣品可用已經(jīng)過消毒滅菌的合適的取樣工具適量取樣放入滅菌容器或滅菌袋中，在酒精燈火焰下將盛放樣品的容器（袋）封口。散裝液體樣品在采樣前先用滅菌玻璃棒攪拌均勻或搖勻，有活塞的應(yīng)用75%的酒精棉球?qū)⒒钊俺隹谔幈砻婺ú料荆缓蟠蜷_活塞待樣品通過出口流出一些后再用滅菌樣品瓶接取樣品，或用滅菌吸管吸取樣品，裝入滅菌采樣容器內(nèi)，在酒精燈火焰下封口。采集進(jìn)行微生物檢驗(yàn)的樣品時，無菌采樣是操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，無菌采樣的注意事項(xiàng)包括：采樣時使用的各種取樣用具要滅菌后才能使用，通常可在酒精燈火焰上灼燒滅菌；要使用無菌容器或無菌袋盛放樣品，確保容器（袋）密封，防止樣品外漏；不要觸摸或接觸無菌容器（袋）的里面以防污染；妥善保管已經(jīng)消毒滅菌的采樣用品；采集液態(tài)樣本時，譬如牛奶、飲料等，要注意采集前將樣本充分混勻，樣本容量不要超過容器體積的3/4，以避免樣品泄漏造成污染。五、采集樣品的標(biāo)記應(yīng)對采集的樣品進(jìn)行及時、準(zhǔn)確的標(biāo)記和記錄，填寫相應(yīng)的采樣單，采樣單應(yīng)包括以下主要內(nèi)容：樣品名稱、來源、批號、數(shù)量、保存條件、采樣地點(diǎn)、時間、采樣人等信息。六、采集樣品的貯存和運(yùn)輸采樣后，應(yīng)將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。運(yùn)輸時應(yīng)保持樣品完整。如不能及時送檢，應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存樣品。[問答題]10.現(xiàn)場直讀儀使用注意事項(xiàng)正確答案：詳見解析參考解析：1.應(yīng)是國家標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的檢測設(shè)備。2.測量范圍與精度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定。3.應(yīng)定期到有資質(zhì)的計(jì)量部門進(jìn)行檢定或校準(zhǔn)，并將所得結(jié)果進(jìn)行有效確認(rèn)，確認(rèn)合格后將合格證貼到儀器明顯處，方可使用。4.應(yīng)按照儀器使用說明書定期對儀器進(jìn)行保養(yǎng)與維護(hù)。5.儀器在使用前應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。[問答題]11.水樣的保存正確答案：詳見解析參考解析：微生物的新陳代謝活動和化學(xué)作用能引起水樣組分的變化；有些物質(zhì)的聚合、解聚合作用也能引起水樣的變化；膠體的絮凝和沉淀的吸附作用也能引起水樣組分發(fā)生變化。這些變化有的很迅速，有的則比較緩慢。完全不損失的樣品保存實(shí)際上是不可能的，為了盡量減少水樣組分的變化，最有效的辦法就是力求縮短從采樣到分析之間的時間間隔。采集水樣后應(yīng)盡快進(jìn)行分析，相隔的時間越短，分析結(jié)果越能代表取水樣所屬水體的水質(zhì)情況。如來不及分析，則應(yīng)根據(jù)不同檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求，采取不同的保存方法。保存樣品時總希望能盡量減慢微生物的作用，盡量減慢化合物與絡(luò)合物的水解作用，盡量減少組分的揮發(fā)損失。對于那些易受微生物分解、易氧化而發(fā)生變化的水樣，應(yīng)放在冷庫、低溫室等在4℃以下的陰暗處保存，也可加一些防腐劑，如氯化汞(每升加20～60mg)，苯、甲苯或氯仿(每升加0.5～1ml)等起到抑制微生物的作用；為了減少金屬離子的水解和與容器壁發(fā)生吸附交換等，需將水樣用酸酸化，通常每升水加5ml濃硝酸；對于有些金屬離子，比如Cr[～+6.gif]，就不能保存酸化樣品，而應(yīng)在中性或堿性條件下保存，因?yàn)樵谒嵝匀芤褐蠧r[～+6.gif]可轉(zhuǎn)化成Cr[～+3.gif]。我們還發(fā)現(xiàn)水中的鉬在中性或天然pH下遠(yuǎn)比酸性溶液中穩(wěn)定?？傊?，由于水樣的性質(zhì)不同，檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求不同，對水樣的保存方法也各不相同。水樣保存的期限既取決于水樣的性質(zhì)，又取決于保存條件和測定項(xiàng)目的要求。各種不同水樣的保存條件、保存期限見表1-2、表1-3。[YS247_50.gif][問答題]12.食品樣品采樣要求正確答案：詳見解析參考解析：（一）樣品具有代表性由于各類食品名目繁多，包裝不一，采樣時具體的做法也不盡相同，但首先要考慮到采樣的樣品必須具有代表性，一般情況下樣品的采樣數(shù)可按理論式S=(n/2)1/2進(jìn)行，其中，S代表采樣次數(shù)（份數(shù)）。（二）樣品具有典型性針對檢驗(yàn)?zāi)康?，采集能說明這一目的的典型樣品。對污染或懷疑污染的樣品，采樣時應(yīng)采集接近污染源的食品，以證明是否污染，同時要采集確認(rèn)出未被污染的同種食品作空白對照；對摻偽或懷疑摻偽的食品，應(yīng)采集這些認(rèn)為有問題的樣品，而不能采集均勻的樣品作代表；對造成中毒或懷疑造成中毒的食品，應(yīng)采集造成食物中毒的樣品或懷疑造成中毒的樣品。（三）樣品具有適時性分析化驗(yàn)工作者要有強(qiáng)烈的時間概念。待測食品總是隨著時間的推移而不斷變化，想得到正確結(jié)論就不能坐失良機(jī)。（四）要認(rèn)真填寫采樣記錄寫明樣品的生產(chǎn)日期、批號、采樣條件、包裝情況等，外地調(diào)入的食品應(yīng)結(jié)合運(yùn)貨單、獸醫(yī)衛(wèi)生人員證明、商品檢驗(yàn)機(jī)關(guān)或衛(wèi)生部門的化驗(yàn)單、廠方化驗(yàn)單了解起運(yùn)日期、來源地點(diǎn)、數(shù)量、品質(zhì)情況，并填寫檢驗(yàn)項(xiàng)目及采樣人。[問答題]13.食物中毒樣品采集要求正確答案：詳見解析參考解析：食物中毒事件發(fā)生后，由于送檢單位采集樣品時存在一些問題，給中毒食品和毒物品種的鑒定工作帶來很大困難，影響了現(xiàn)場處理和救治的針對性和時效性。送檢樣品存在的主要問題包括：采樣的漫無邊際性，提出檢驗(yàn)毒物的無針對性，送檢樣品數(shù)量不足以及食物中毒現(xiàn)場情況不甚明了等。食物中毒樣品采集要求：1.針對采樣的漫無邊際性，要求現(xiàn)場調(diào)查采樣人員對食物中毒個案詳細(xì)的調(diào)查，全面分析，了解集體性食物中毒的潛伏期、容易引發(fā)中毒的食物及其規(guī)律，有目的地采集食物樣品。主要采集：(1)可疑食物、食品用工具樣品：可疑食物樣品和食品用工具樣品的采集，往往是確定食物中毒原因的關(guān)鍵之一，應(yīng)該盡可能早地采集。兩類樣品較高的檢出率，說明該采樣原則在變形桿菌食物中毒的調(diào)查中具有重要意義。(2)環(huán)境條件樣品：在應(yīng)急處理食物中毒時，對盛裝剩余廢棄食物的桶、熟食間、地面等環(huán)境采樣。但也要考慮到所采集樣品的目的性和可疑病原物質(zhì)的檢出率，不要盲目地貪大求全。(3)嘔吐物：采集病人嘔吐物樣品，可能由于病人在開始出現(xiàn)嘔吐、腹瀉等胃腸癥狀時，自行口服諾氟沙星（氟哌酸）等廣譜抗菌藥，從而影響鑒定結(jié)果。因此，發(fā)生細(xì)菌性食物中毒時，只有在病人用藥前采集嘔吐物樣品，才能對食物中毒原因的確定有意義。(4)糞便及肛拭子：一般糞便樣品的檢出率要明顯高于肛拭檢出率，在采集糞便樣品時，要盡量采集腹瀉物，不要或少采肛拭子樣品。(5)血液樣品：采集病人急性期血液樣品及恢復(fù)期血液樣品，作血清凝集試驗(yàn)。2.針對提出檢驗(yàn)毒物的無針對性，要求現(xiàn)場調(diào)查采樣人員了解引發(fā)食物中毒各類毒源的特征和臨床表現(xiàn)，有目標(biāo)地對實(shí)驗(yàn)室提出檢驗(yàn)毒源要求，而非要求實(shí)驗(yàn)室逐一篩檢判定。3.送檢樣品數(shù)量要足夠（表1-6）。4.要求送檢人員了解食物中毒現(xiàn)場情況，包括中毒的具體情況和中毒人員的臨床表現(xiàn)，為實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)提供有利于確定檢驗(yàn)項(xiàng)目的信息，減少檢驗(yàn)的盲目性。故送檢人員為中毒現(xiàn)場調(diào)查處理人員，送檢時須持有正式的報檢介紹信或文函，明確送檢樣品種類和數(shù)量、要求檢驗(yàn)項(xiàng)目，同時注明責(zé)任單位的聯(lián)系方式，責(zé)任人的姓名、電話、傳真、通信地址等。5.提供系統(tǒng)流行病學(xué)分析資料。系統(tǒng)的流行病學(xué)和臨床分析資料，對確定檢驗(yàn)項(xiàng)目十分有幫助。送檢時須攜帶現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查和臨床分析資料，或提供大部分中毒病人的《食物中毒個案調(diào)查登記表》以及《食物中毒報告登記表》。6.為了提高食物中毒樣品檢驗(yàn)的針對性和時效性，迅速切斷毒源，爭取救治病人時間，努力縮短送檢時間，盡早為臨床救治提供依據(jù)。7.采樣應(yīng)根據(jù)中毒病人發(fā)生的時間分布，確定中毒餐次，采集該餐食剩的可疑食物和中毒病人的嘔吐物。8.采樣應(yīng)使用無菌袋無菌采集。懷疑微生物中毒時應(yīng)使用相應(yīng)增菌液或者無菌生理鹽水。樣品應(yīng)置冰箱內(nèi)保存運(yùn)送（溫度通?？刂圃?℃左右）。[問答題]14.食品理化檢驗(yàn)樣品的采集、收樣與檢驗(yàn)正確答案：詳見解析參考解析：（一）采樣原則食品采樣是指從較大批量食品中抽取能較好地代表其總體樣品的方法。因此，應(yīng)遵循下列采樣原則：1.代表性：在大多數(shù)情況下，待鑒定食品不可能全部進(jìn)行檢測，而只能抽取其中的一部分作為樣品，因此，所采的樣品應(yīng)能夠較好地代表待鑒定食品各方面的特性。2.真實(shí)性：采樣人員應(yīng)親臨現(xiàn)場采樣，以防止在采樣過程中的作假或偽造食品。所有采樣用具都應(yīng)清潔、干燥、無異味、無污染食品的可能。應(yīng)盡可能避免使用對樣品可能造成污染或影響檢驗(yàn)結(jié)果的采樣工具和采樣容器。3.準(zhǔn)確性：性質(zhì)不同的樣品必須分開包裝，并應(yīng)視為來自不同的總體；采樣方法應(yīng)符合要求，采樣的數(shù)量應(yīng)滿足檢驗(yàn)及留樣的需要；可根據(jù)感官性狀進(jìn)行分類或分檔采樣；采樣記錄務(wù)必清楚地填寫在采樣單上，并緊附于樣品。4.及時性：采樣應(yīng)及時，采樣后也應(yīng)及時送檢。尤其是檢測樣品中水分、微生物等易受環(huán)境因素影響的指標(biāo)，或樣品中含有揮發(fā)性物質(zhì)或易分解破壞的物質(zhì)時，應(yīng)及時赴現(xiàn)場采樣并盡可能縮短從采樣到送檢的時間。（二）樣品采集1.采樣應(yīng)注意樣品的生產(chǎn)日期、批號、代表性和均勻性（摻偽食品和食物中毒樣品除外）。采集的數(shù)量應(yīng)能反映該食品的衛(wèi)生質(zhì)量和滿足檢驗(yàn)項(xiàng)目對樣品量的需要，一式三份，供檢驗(yàn)、復(fù)驗(yàn)、備查或仲裁，一般散裝樣品每份不少于0.5kg。2.采樣容器根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目，選用硬質(zhì)玻璃瓶或聚乙烯制品。3.液體、半流體飲食品如植物油、鮮乳、酒或其他飲料，如用大桶或大罐盛裝著，應(yīng)先充分混勻后再采樣。樣品應(yīng)分別盛放在三個干凈的容器中。4.糧食及固體食品應(yīng)自每批食品上、中、下三層的不同部位分別采取部分樣品，混合后按四分法對角取樣，最后取有代表性樣品。5.肉類、水產(chǎn)等食品應(yīng)按分析項(xiàng)目要求分別采取不同部位的樣品或混合后采樣。6.罐頭、瓶裝食品或其他小包裝食品，應(yīng)根據(jù)批號隨機(jī)取樣，同一批號取樣件數(shù)，250g以上的包裝不得少于6個，250g以下的包裝不得少于10個。7.摻偽食品和食物中毒的樣品采集，要具有典型性。[問答題]15.食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)樣品的采集和處理正確答案：詳見解析參考解析：（一）樣品的采集1.采樣數(shù)量：每批樣品要在容器的不同部位采取，一般定型包裝食品采取1袋/瓶(不少于250g)及散裝食品采取250g。2.采樣方法(1)采樣必須在無菌操作下進(jìn)行。(2)根據(jù)樣品種類，袋裝、瓶裝和罐裝食品，應(yīng)采完整的未開封的樣品。如果樣品很大，則需要無菌采樣器取樣；固體粉末樣品，應(yīng)邊取邊混合；液體樣品通過振搖混勻；冷凍食品應(yīng)保持冷凍狀態(tài)（可放在冰內(nèi)、冰箱的冷盒內(nèi)或低溫冰箱內(nèi)保存），非冷凍食品需在1～5℃中保存。(3)采樣標(biāo)簽：采樣前或后應(yīng)貼上標(biāo)簽，每件樣品必須標(biāo)記清楚（如品名、來源、數(shù)量、采樣地點(diǎn)、采樣人及采樣時間等）。（二）運(yùn)送樣品送到微生物檢驗(yàn)室應(yīng)越快越好。如果路途遙遠(yuǎn)，可將不需冷凍樣品保持在1～5℃環(huán)境中（如冰壺）。如需保持冷凍狀態(tài)，則需保存在泡沫塑料隔熱箱內(nèi)（箱內(nèi)有干冰可維持在0℃以下）。送檢時，必須認(rèn)真填寫申請單，以供檢驗(yàn)人員參考。微生物檢驗(yàn)室接到送檢申請單，應(yīng)立即登記，填寫實(shí)驗(yàn)序號，并按檢驗(yàn)要求，立即將樣品放在冰箱或冰盒中，積極準(zhǔn)備條件進(jìn)行檢驗(yàn)。（三）保存與處理各食品微生物檢驗(yàn)室必須備有專用冰箱存放樣品。一般陽性樣品，發(fā)出報告后3天（特殊情況適當(dāng)延長）方能處理樣品。進(jìn)口食品的陽性樣品，需保存6個月方能處理。陰性樣品可及時處理。檢驗(yàn)完后，檢驗(yàn)人員應(yīng)及時填寫原始記錄，簽名后，送質(zhì)控辦出具檢驗(yàn)報告。[問答題]16.艾滋病檢測樣品的采集處理和送檢正確答案：詳見解析參考解析：（一）HIV抗體、抗原檢測最常使用的樣品是血清或血漿。1.血清樣品采集和處理：用一次性注射器或真空采血管抽取3～5ml靜脈血，室溫放置1～2小時，待血液凝固、血塊收縮后再離心，盡可能地吸出血清備用。2.血漿樣品采集和處理：抗凝劑最常用的是K[2.gif]EDTA，用一次性注射器抽取3～5ml靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管，或直接用加有抗凝劑的真空采血管，反復(fù)輕搖，室溫放置，血漿和血細(xì)胞會分層，盡可能地吸出血漿備用。3.送檢要求(1)經(jīng)HIV初篩實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行初篩檢測后，若需上送的樣品，只送血清或血漿，標(biāo)本量要求達(dá)到1ml，最少不能低于0.7ml，不符合要求的標(biāo)本將可能被拒收。標(biāo)本用螺口的血清管裝，在管外標(biāo)記好病人姓名；每份標(biāo)本需填寫HIV復(fù)檢送檢單，表格內(nèi)資料要填寫齊全，送檢時與標(biāo)本分開放置。(2)應(yīng)采用WHO提出的三級包裝系統(tǒng)第一層容器：裝樣品，要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與樣品分開放置。第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：放在一個運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。（二）HIV核酸定性檢測最常用的樣品是血清、血漿或血細(xì)胞。1.血清樣品采集和處理：同HIV抗體、抗原檢測。2.血漿和血細(xì)胞樣品采集和處理：抗凝劑最常用的是K[2.gif]EDTA，采集的抗凝血應(yīng)在4～8小時內(nèi)分離PBMC和血漿，否則應(yīng)在24～48小時內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞。3.樣品的運(yùn)送和保存：4℃冷藏送檢采集的抗凝全血，采集后務(wù)必在24小時內(nèi)送到目的實(shí)驗(yàn)室。分離出的血清、血漿、血細(xì)胞、PBMC均立即放入﹣80℃冰箱備用。樣品的包裝同上述三層容器包裝。（三）HIV核酸定量（病毒載量）測定最常用的樣品是血漿。1.抗凝劑的選擇：不同病毒載量檢測方法選用不同