布洛芬顆粒溶出度的測定

布洛芬顆粒溶出度的測定

布洛芬化學(xué)的名字是氨基丙烯酸苯胺，它是一種非體解熱鎮(zhèn)炎劑。其作用機(jī)制是抑制前列腺素的合成，起到解熱、鎮(zhèn)痛和消炎的作用。適用于感染、非感染疾病和手術(shù)后發(fā)熱。布洛芬僅微溶于水,在水中溶解的質(zhì)量<1mg·mL-1,而布洛芬顆粒已有國家標(biāo)準(zhǔn)中對白色顆粒不檢查溶化性,且無溶出度檢查項(xiàng)。本試驗(yàn)旨在建立布洛芬顆粒的溶出度測定方法,并與國外上市樣品的溶出行為進(jìn)行比較,以利產(chǎn)品質(zhì)量的控制和臨床用藥的安全有效。1高效液相色譜法ZRS-6C溶出試驗(yàn)儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司),UV-1700紫外-可見分光光度計(jì)(日本島津公司),AP-250D電子天平[奧豪斯國際貿(mào)易(上海)有限公司],日本島津LC-10A高效液相色譜儀(含LC-10ATvp高壓恒流泵,SPD-10Avp紫外檢測器,上海天美科學(xué)儀器有限公司T2100p色譜工作站);布洛芬顆粒(由企業(yè)提供,規(guī)格:0.2g/袋,批號:111001、111002、111003);布洛芬顆粒參比制劑:イブプロフェン顆粒(日本辰巳化學(xué)株式會(huì)社,規(guī)格:200g/1000g,使用期限:2014.06);布洛芬對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:100179-201105,含量:98.8%);乙腈(霍尼韋爾honeywell,色譜純);水為純化水;其他試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1紫外-可見分光光度法取布洛芬對照品適量,精密稱定,加少量乙腈使溶解,再加pH=7.2磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋成約0.2mg·mL-1的溶液,搖勻,紫外-可見分光光度計(jì)在200~400nm進(jìn)行掃描,布洛芬在263nm處有最大吸收,另取空白輔料同法測定,在263nm波長處對樣品測定無干擾。故參照中國藥典2010年版二部布洛芬相關(guān)制劑溶出度檢測方法,選擇263nm為本品溶出度檢測波長。2.2檢測波長的確定參照《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第三十冊》布洛芬顆粒含量測定項(xiàng)色譜條件,色譜柱:DiamonsilC18(200mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相:1%氯乙酸溶液(用氨試液調(diào)節(jié)pH至3.0)-乙腈(48:52),流速:1.0mL·min-1,檢測波長選擇最大吸收波長263nm。2.3供試品溶液制備取本品(批號:111001)及參比制劑,照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄ⅩC第二法),分別以水、pH=1.2鹽酸溶液、pH=5.5磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、pH=6.8磷酸鹽緩沖液及pH=7.2磷酸鹽緩沖液各900mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為50r·min-1,依法操作,分別于5、10、15、30、45min時(shí)取溶液20mL(同時(shí)補(bǔ)加20mL同溫度的溶出介質(zhì)),棄去至少10mL初濾液,取續(xù)濾液作為供試品溶液。分別以水、pH=1.2鹽酸溶液、pH=5.5磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、pH=6.8磷酸鹽緩沖液及pH=7.2磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)時(shí),15min累積溶出基本達(dá)到平衡,樣品與參比制劑溶出行為基本一致(見圖1~2)。以pH=7.2磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì),累積溶出量相對最高,參照中國藥典2010年版二部同類品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中溶出度檢查方法,選擇pH=7.2磷酸鹽緩沖液作為本品的溶出介質(zhì)。2.4磷酸鹽緩沖液溶液分別取布洛芬對照品及樣品(批號:111001)各適量,加少量乙腈使溶解,再加pH=7.2磷酸鹽緩沖液稀釋制成200μg·mL-1的溶液,搖勻,濾過;另取空白輔料適量(約相當(dāng)于布洛芬20mg的處方量),置100mL量瓶中,同前法處理,精密量取上述3種溶液各20μL注入液相色譜儀,輔料在263nm波長處無吸收峰,不干擾樣品的測定(見圖3)。2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立精密稱取布洛芬對照品適量,加少量乙腈使溶解,再加pH=7.2磷酸鹽緩沖液稀釋制成系列線性濃度的溶液(40.15、120.44、160.65、200.76、241.07、280.99μg·mL-1),精密量取20μL注入液相色譜儀,記錄色譜圖,以濃度C(μg·mL-1)對峰面積A進(jìn)行回歸的線性方程為:A=1385C+1577,r=0.9999。結(jié)果表明,本品在40.15~280.99μg·mL-1與峰面積呈良好的線性關(guān)系。2.6供試品溶液制備取本品(批號:111001),研細(xì),取適量(約相當(dāng)于布洛芬20mg),精密稱定,置100mL量瓶中,加少量乙腈使溶解,再加pH=7.2磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。放置12h,每隔2h精密量取20μL注入液相色譜儀,記錄色譜圖,供試品溶液峰面積的RSD為1.1%,表明供試品溶液在12h內(nèi)較穩(wěn)定。2.7供試品溶液的制備按主藥量的80%、100%、120%,取布洛芬對照品適量,精密稱定,各3份(共9份),分別置100mL量瓶中,加入按處方比例混合均勻的輔料,加溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液;另取布洛芬對照品20mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加少量乙腈使溶解,再加溶出介質(zhì)稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。照含量項(xiàng)下的方法測定,計(jì)算回收率,結(jié)果見表2。2.8方法的重復(fù)性取樣品(批號:111001),照溶出度測定方法重復(fù)測定6次,計(jì)算每袋的溶出量,樣品6次試驗(yàn)溶出量均值為98.9%,RSD為0.52%,本方法重復(fù)性好,溶出均一性較好。2.93溶液制備與測定取本品3批,照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄ⅩC第二法),以900mL磷酸鹽緩沖液(pH=7.2)為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為50r·min-1,依法操作,經(jīng)15min時(shí),取溶液適量,濾過,至少棄去10mL初濾液,取續(xù)濾液作為供試品溶液;另取布洛芬對照品約20mg,精密稱定,置100mL量瓶中,加少量乙腈使溶解,再加溶出介質(zhì)稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液;照“2.2”項(xiàng)下方法,精密量取上述2種溶液各20μL,分別注入液相色譜儀,按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每袋的溶出量。3批樣品的溶出度均>90%(見表3)。3討論3.1液相吸收分析文獻(xiàn)多為采用263nm為檢測波長,經(jīng)采用二極管陣列檢測器分析,發(fā)現(xiàn)在本文的液相色譜系統(tǒng)中樣品的溶出液在263nm波長處有最大吸收(見圖4)。3.2溶出介質(zhì)體積溶出介質(zhì)的體積需使藥物符合漏槽條件,一般一個(gè)劑量單位以溶劑900mL或1000mL為最普遍,參照中國藥典2010年版二部同類品種溶出度項(xiàng)下方法,選擇溶出介質(zhì)的體積為900mL。3.3轉(zhuǎn)籃法目前,各國藥典中收載的溶出度測定方法中的轉(zhuǎn)速,大部分在50~100r·min-1。轉(zhuǎn)籃法為100r·min-1;槳法50r·min-1。參照中國藥典2010年版二部同類劑型溶出度項(xiàng)下方法,選擇溶出度測定法第二法,轉(zhuǎn)速為50r·min-1。3.4布洛芬的體外溶出度仿制藥是與被仿制藥具有相同的活性成分、劑型、給藥途徑和治療作用的替代藥品,具有降低醫(yī)療支出,提高藥品普及性,提升醫(yī)療服務(wù)水平等重要經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。本文按《國家藥品安全“十二五”規(guī)劃》的要求,參照仿制藥質(zhì)量一致性評價(jià)工作方案進(jìn)行探索,對布洛芬顆粒進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn),并進(jìn)行了與進(jìn)口參比制劑的體外溶出度比對,增加了產(chǎn)品參與國際競爭的砝