常見新生兒遺傳代謝病篩查及遺傳咨詢

常見新生兒遺傳代謝病篩查及遺傳咨詢授課內(nèi)容遺傳代謝疾病的概念遺傳代謝疾病的診斷方法遺傳代謝疾病的質(zhì)譜分析篩查法常見遺傳代謝病的治療指針典型病例介紹質(zhì)譜篩查技術(shù)的臨床合理使用1.遺傳代謝疾病的概念遺傳

代謝紊亂人體內(nèi)生化代謝圖每一代謝環(huán)節(jié)的阻滯都會導(dǎo)致代謝紊亂，這種病態(tài)為代謝病C16C14C12C10C8C6C4先天性代謝異常的概念模式aA ＋ B C ＋ DbEnzyme CoF血中?尿中濃度增高?過量細胞?體液中濃度下降?不足Unbalance!遺傳代謝病的分類小分子代謝異常蛋白質(zhì)（氨基酸）有機酸脂肪酸碳水化合物膽固醇和類固醇脂類代謝核酸代謝金屬代謝血紅素代謝維生素，輔酶和輔助因子糖基化細胞器官功能失調(diào)溶酶體貯積癥線粒體病過氧化物酶體失調(diào)常見遺傳代謝疾病的臨床表現(xiàn)嗜睡,

嘔吐,

脫水,驚厥,

昏迷,腹瀉,

慢性濕疹,黃疸，

色素缺失，異味

…昏睡,

喂奶困難,

呼吸困難，體重減少,肌張力亢進或低下,進行性運動失調(diào)…低血糖,酮癥酸中毒,

代謝性酸中毒,

高氨血癥…生長發(fā)育遲緩，

頭圍小，智力低下

…新生兒及小嬰兒遺傳代謝病的臨床特征高度懷疑遺傳代謝病持續(xù)反復(fù)性嘔吐生長緩慢（體重不增或體重下降）呼吸暫?；蚝粑щy黃疸或肝大反應(yīng)差昏迷（特別是間歇性）難以解釋的出血有新生兒期或嬰兒期死亡家族史，特別是同胞中父母為近親結(jié)婚膿毒血癥（特別是大腸桿菌）考慮遺傳代謝病出生后一段時間正常，突然幾小時和幾周內(nèi)出現(xiàn)行為和喂養(yǎng)異常新生兒或小嬰兒驚厥或肌力低下異常氣味急性代謝性疾病的相關(guān)異常體征疾 病相關(guān)體征腎上腺皮質(zhì)增生兩性畸形多種羧化酶缺乏癥頭發(fā)和（或）皮膚異常生物素酶缺乏癥脫發(fā)、皮炎精氨酸琥珀酸尿癥肝腫大、結(jié)節(jié)性脆發(fā)丙酮酸脫氫酶缺乏癥大腦結(jié)構(gòu)異常（胼胝體發(fā)育不良、皮質(zhì)囊腫）戊二酸血癥I型巨頭畸形戊二酸血癥II型腎囊腫，面部畸形過氧化物酶異常面部畸形Zellweger綜合征視網(wǎng)膜異常半乳糖血癥白內(nèi)障亞硫酸氧化酶缺乏癥晶體脫位，驚厥Lowe綜合征眼、腦、腎病變3-羥基異丁酸CoA脫酰酶缺乏癥面部畸形，心臟畸形，脊柱畸形SIDS：嬰兒猝死癥分疾病名類發(fā)病期主要表現(xiàn)最適篩查方法氨基酸代謝異常①

苯丙酮尿癥②

楓糖尿癥③

同型半胱氨酸尿癥④

高酪氨酸血癥⑤

瓜氨酸血癥⑥

精氨酰琥珀酸尿癥⑦

精氨酸血癥⑧

Citrin缺陷病新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期抽搐、發(fā)育遲緩發(fā)育遲緩、昏睡、酸中毒發(fā)育遲緩、水晶體脫出、血栓肝硬化、腎性佝僂病興奮、發(fā)育遲緩、昏睡興奮、發(fā)育遲緩、昏睡興奮、發(fā)育遲緩、昏睡黃疸、發(fā)育遲緩GCMS/MSMSGCMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMS有機酸代謝異常①

甲基丙二酸血癥②

丙酸血癥③

3-醛基硫解酶缺乏癥④

異戊酸血癥⑤

甲基巴豆酰甘氨酸尿癥⑥

羥甲基戊二酸血癥⑦

多種羧化酶缺乏癥⑧

戊二酸血癥I型新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--幼兒期代酸、發(fā)育落后代酸、發(fā)育落后酮癥酸中毒代酸、異味肌無力、Lei病Lei病、低血糖皮疹、乳酸血癥不隨意運動、發(fā)育遲緩GCMSGCMSGCMSGCMSGCMSGCMSGCMSGCMS脂肪酸代謝異常①

短鏈脂肪酸氧化異常②

中鏈脂肪酸氧化異常③

長鏈脂肪酸氧化異常④

極長鏈脂肪酸氧化異常⑤

長鏈羥基脂肪酸氧化異常⑥

肉堿轉(zhuǎn)運異常I型⑦

肉堿轉(zhuǎn)運異常II型⑧

肉堿傳遞異常⑨

全身性肉堿缺乏癥⑩

戊二酸血癥II型新生兒--乳兒期乳兒期--幼兒期新生兒--乳兒期乳兒期--幼兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--乳兒期新生兒--幼兒期乳兒期--幼兒期新生兒--乳兒期Lei病、SIDSLei病、SIDSLei病、SIDS低血糖、骨骼肌心肌損傷Lei病、SIDSLei病、肝損傷Lei病、肌病改變Lei病、SIDSLei病、SIDSLei病、低血糖GCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSGCMS/MSMSMSMSMSMSMSMSMSMSGCMS/MSMSSIDS：嬰兒猝死癥2.

代謝疾病的診斷方法遺傳代謝病的研究和診斷方法1. 基因?qū)W研究：基因組學(xué)研究、染色體檢查、單基因分析2. 蛋白（酶）學(xué)研究：蛋白組學(xué)研究、蛋白結(jié)構(gòu)分析、蛋白活性測定3. 代謝產(chǎn)物分析：單成分檢測、代謝譜分析、代謝組學(xué)研究4. 臨床表征分析：特殊表征、特殊異味、特異性家族史基因分析↓↓酶活性↓↓代謝產(chǎn)物↓↓臨床表現(xiàn)代謝病的一般檢查和診斷·研究方法PCR基因檢查G-band檢查FISH檢查酶活性測定蛋白結(jié)構(gòu)分析法蛋白電泳法現(xiàn)行的新生兒篩查技術(shù)HPLC:氨基酸，脂肪酸層析分析CE/MS:

極性化合物分析LC/MS:同類化合物層析分析GC/MS（尿篩查）MS/MS（血脂酰肉堿分析）層析和質(zhì)譜分析多疾病篩查單疾病檢測特異性強不能任意定制，耗時短可以任意定制，耗時中等3.遺傳代謝疾病的質(zhì)譜分析篩查法氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法（GC/MS）

尿篩查一滴尿液分析可以篩查

140

余種疾病液相串聯(lián)質(zhì)譜法（LC/MS/MS）

血篩查一滴血液分析可以篩查

30

余種疾病兩種質(zhì)譜方法的組合分析可以為臨床提供更確切的診斷依據(jù)常見代謝病的診斷方法疾病名稱MSMS測定指標確診檢測法1.MMAC3>3.5

C3/C2>0.25GC/MS、

酶學(xué)分析2.PPAC3>3.5

C3/C2>0.25GC/MS、

酶學(xué)分析3.B-ketothiolase

deficiencyC5-OH>1.0,C5:1>0.2GC/MS、

酶學(xué)分析4.Isovaleric

acidemiaC5>0.7GC/MS、

酶學(xué)分析5.MethylcrotonylglycineuriaC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析6.HMGC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析7.MCDC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析8.Glutaricaciduriatype

IC5-DC>3.0GC/MS、

酶學(xué)分析9.MCADC8>0.3GC/MS、

酶學(xué)分析10.VLCADC14:1>0.4酶學(xué)分析11.LCHADC16OH>0.2GC/MS、

酶學(xué)分析12.CPTIC0/(C16+C18)>100酶學(xué)分析13.CPTIIC16>8,C18:1血清C16>0.3、

酶學(xué)分析14.TRANSC16>8血清C16>0.3、

酶學(xué)分析15.Carnitine

deficiencyC0<8血游離肉堿、肉堿清除率16.Glutaricaciduriatype

IIC8>0.3,C10>0.35GC/MS、

酶學(xué)分析17.TyrosinemiaTyr>200GC/MS、

血琥珀酰丙酮酸18.CitrullinemiaCit>100GC/MS、

氨基酸、酶學(xué)19.Araginisuccinic

aciduriaCit>100,ASA

highGC/MS、

氨基酸、酶學(xué)20.PKUPhe>180GC/MS、

HBH4負荷21.MSUDLeu+isoLeu>350,Val>250GC/MS、氨基酸、酶學(xué)22.HomocystineuriaMet>80氨基酸分析氨基酸代謝疾病共16種1.氨甲酰磷酸合成酶缺乏癥(先天性高氨血癥I型)2.鳥氨酸氨甲酰磷酸轉(zhuǎn)移酶缺乏癥(先天性高氨血癥II型)3.精氨基琥珀酸尿癥4.組氨酸血癥5.精氨酸血癥6.瓜氨酸血癥I型7.瓜氨酸血癥Ⅱ型(Citrin蛋白缺乏癥)8.同型胱氨酸尿癥9.高甲硫氨酸血癥10.高鳥氨酸血癥－高血氨癥－高同型瓜氨酸尿癥綜合癥11.楓糖尿病12.非酮性高甘氨酸血癥13.酪氨酸血癥Ⅰ型；Ⅱ型；Ⅲ型14.高脯氨酸血癥15.5-羥脯氨酸血癥16.高鳥氨酸血癥Citrin

是克隆基因

SLC25A13

的蛋白產(chǎn)物Citrin

deficiency包括兩種病態(tài)：causesadult-onsettypeIIcitrullinemia

(CTLN2)成人型瓜氨酸血癥II型又稱為CTLN2alsocausesneonatalintrahepaticcholestasis

(NICCD)新生兒肝內(nèi)淤膽性肝炎又稱為NICCD特別是NICCD的臨床和發(fā)病特點并不是太典型，如何早期診斷和早發(fā)現(xiàn)本病受到了醫(yī)患雙方的關(guān)注。希特林蛋白（Citrin）缺乏癥2001年日本學(xué)者研究證實了新生兒肝內(nèi)淤膽性肝炎是因為Citrin缺陷癥引起的，因此把新生兒期的這種病態(tài)命名為：NICCD(Neonatal

Intrahepatic

CholestasiscausedbyCitrin

Deficiency).NICCD發(fā)現(xiàn)時間還不長，確診主要靠分子學(xué)檢查，治療方法也還在探討中尚不完善。其病態(tài)表現(xiàn)主要表現(xiàn)為生后不久黃疸，與生理性黃疸的區(qū)別在于黃疸時間長，黃疸不退，大便色淺白，出生體重低，體重增加不良，有些患者可以無任何表現(xiàn)，就診原因主要是黃疸。常常被誤認為核黃疸，膽道閉鎖，溶血性貧血等常見疾病。實驗室檢查可見，總膽汁酸高，直接膽紅素增高，膽道系統(tǒng)酶測定：ALP,

G-GTP,AFP

輕微增高，低蛋白血癥，血中氨基酸分析提示多種氨基酸血癥：瓜氨酸，蘇氨酸，絲氨酸，蛋氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，精氨酸等，凝血功能低下，低血糖等，肝活檢提示肝臟內(nèi)膽汁淤積，脂肪肝。NICCD的癥狀多為一過性的改變，各種檢查的時機掌握很重要，生后3-4月時，一般氨基酸轉(zhuǎn)入正常，直接膽紅素，總膽汁酸，ALP,G-GTP,AFP也都到5-6月前后正?；?，但是也有重癥患者的報道，肝功嚴重受損需要進行肝移植術(shù)治療，因此不是所有的NICCD的病態(tài)都是良好的。是一種遺傳性支鏈氨基酸代謝障礙的疾病，是由于在細胞線粒體基質(zhì)內(nèi)支鏈α酮酸脫氫酶（BCKD）多酶復(fù)合體功能有缺陷。使得人體內(nèi)亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸在降解代謝過程中分別產(chǎn)生的α-酮異乙酸，α-酮-1-甲基戊酸和α-酮異戊酸。

3種酮酸從小便排出，使尿呈甜的楓糖漿氣味，故而得名。為常染色體隱性遺傳性疾病，該病的發(fā)病率因種族、地區(qū)而不同。臨床特點是嬰兒期喂食困難，中樞神經(jīng)受損臨床表現(xiàn)和代謝性酸中毒，如果未及時得到正確的治療，常在嬰兒期即死亡。楓糖尿病楓糖尿病分型基因分型--根據(jù)基因突變有人把楓糖尿病分為IA型（E1α亞基突變）IB型（E1β亞基突變）II型（E2亞基突變）Ⅲ型（E3亞基突變）Ⅳ和Ⅴ則被保留作為特異性激酶和磷酸酶基因突變型，但迄今尚無報告臨床診

斷本病常發(fā)生于嬰兒期，且臨床表現(xiàn)極不均一，從無癥狀到有嚴重臨床表現(xiàn)，故診斷不易。如能在新生兒中用串聯(lián)質(zhì)譜儀進行篩查，則可獲得早期診斷。本病雖為遺傳性疾病，但遺傳方式為常染色體隱性遺傳，故家族史對診斷沒有幫助。新生兒尿、汗有楓糖臭味或出現(xiàn)不明原因的代謝性酸中毒應(yīng)高度疑及本病。典型患者多見，主要臨床表現(xiàn)為中樞神經(jīng)受損，如肌張力增加、驚厥、嗜睡和昏迷，同時有代謝性酸中毒。臨床診斷有賴于血漿支鏈氨基酸及其代謝產(chǎn)物2-酮酸（2-oxo

acid）測定都升高，特別是不參與體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的別異亮氨酸濃度升高更具診斷意義，或測定尿中支鏈氨基酸的代謝產(chǎn)物也有助于臨床診斷。確診必需用分子生物技術(shù)證實E1、E2或E3有突變，可用周圍血中白細胞和皮膚纖維母細胞中所提取出來的這些酶基因的DNA用分子生物學(xué)技術(shù)進行突變檢查。甲基丙二酸血癥4種氨基酸（頡氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸）和膽固醇以及奇數(shù)脂肪酸代謝過程中甲基丙二酰CoA變位酶的活性低下引起的甲基丙二酸大量蓄積的有機酸血癥。甲基丙二酰CoA變位酶活性低的原因分為甲基丙二酰CoA變位酶異常和輔酶維生素B12的代謝異常的兩類，前者略稱為Mut，后者略稱為Cbl，根據(jù)細胞間的互補實驗可以分為不同的亞型。還有一些病理機制尚不清楚的良性甲基丙二酸血癥。常染色體隱性遺傳。臨床表現(xiàn)：

典型病例在新生兒期至乳兒期發(fā)病，出現(xiàn)嘔吐、哺乳困難、嗜睡，肌張力低下、呼吸困難的表現(xiàn)，明顯的代謝性酸中毒、高氨血癥、還有合并高甘氨酸血癥、貧血以及嗜中細胞、血小板減少病例，治療遲延會導(dǎo)致預(yù)后不良，即使挽救生命也會伴有不同程度的發(fā)育落后。ViB12依賴型患者，早期治療的效果比較好。長期合并癥有腎功能損傷。GC/MS尿分析可以發(fā)現(xiàn)尿中有大量甲基丙二酸排泄，血的MS/MS分析可以看到丙酰肉堿上升。甲基丙二酸血癥的代謝通路乏力/不活潑嘔吐、腹瀉昏睡/意識障礙抽搐/痙攣異常面孔/畸形色素異常特殊異味構(gòu)思先天性代謝疾病的臨床診斷流程高氨血癥？高膽汁酸？代謝性酸中毒？低血糖？MSUD/PKU？線粒體?。磕芰看x異常？核酸代謝異常？白化病/PKU？溶媒體?。刻厥鈾z查手段使用黃疸小頭/發(fā)育落后

昏迷/意識障礙伴有高氨血癥

血氨↑尿GC/MS分析血氨基酸分析BCAA,Gln,Arg,Cit,Orn,

Arg-Suc特殊有機酸等成分↑尿嘧啶+乳清酸↑or尿嘧啶+乳清酸-/

+

Gln有無無上述特征有（尿素循環(huán)異常）有機酸血癥/脂肪酸氧化異常MMA,PPA,MCAD……酶學(xué)檢查:

相關(guān)酶活性測定基因?qū)W分析：責任基因變異檢索陽性確診陰性不能結(jié)論治療方法明確診斷性治療繼發(fā)性一過性高氨血癥ArgCitArg-SucOrn+/-精氨酸血癥/瓜氨酸血癥/精氨酸琥珀酸血癥/OTCD/CPSD

et

al.血氣、血糖、血生化分析···代謝組學(xué)蛋白組學(xué)+基因組學(xué)分析臨床表象高氨血癥診斷病例

GC/MS尿分析結(jié)果高氨血癥診斷病例

MS/MS血分析結(jié)果ureaargininosuccinicacidargininosuccinate

lyasecitrullineornithinearginasearginineargininosuccinatesynthasemitochondriacarbamylphosphatyesynthase

Icarbamylphosphateornithinetranscarbamylaseorotic

acidNH4+

+HCO3-TheUrea

Cycle尿素循環(huán)異常Pyrimidineuracil高氨血癥的病因高氨血癥診斷病例綜合分析結(jié)果P-No.BM34265/X0674GC/MS

尿分析：尿嘧啶、乳清酸增高MS/MS

血分析：精氨酸明顯增高代謝組學(xué)診斷結(jié)果：尿素循環(huán)異常精氨酸血癥酶學(xué)檢查：未實施基因?qū)W檢查：未實施根據(jù)上述結(jié)果不管有否基因?qū)W酶學(xué)檢查結(jié)果，臨床管理方向可以確定治療方案：急性期降血氨+低蛋白高熱卡飲食代謝病的病理機制與臨床表現(xiàn)和診斷的關(guān)系基因異常信息RNA異常蛋白合成異常酶活性下降代謝紊亂代謝產(chǎn)物異常體液內(nèi)成分濃度異常臨床表現(xiàn)異常確診

指導(dǎo)治療↑酶學(xué)分子基因?qū)W檢查↑臨床印象↑相關(guān)檢查↑臨床表現(xiàn)異常4.常見遺傳代謝病的治療原則以有機酸血癥和脂肪酸代謝異常為例有機酸血癥的治療原則時機對策急性期① 禁食（限制蛋白負荷）② 高濃度葡萄糖補液③ 糾酸、堿性療法④ 血液凈化療法（血液透析、交換輸血、腹膜透析）⑤ 補充維生素（VitB1

100?200mg/日；VitB2

100?300mg/日；

VitＢ12

1?2mg/日（靜注）、VitＢ12

10mg/日（経口）；

VitC

120mg/kg/日、

生物素

5?20

mg/日）⑥ L?肉堿（靜脈點滴效果好，無藥情況口服）⑦ 高氨血癥對癥治療，安息香酸（重曹）有效⑧ 急性期無法確診時、尿、血清、血液濾紙等采取后保存、邊治療邊診斷長期治療① 基本：降低前驅(qū)物質(zhì)，補充充足能量② 飲食療法（特殊奶粉利用）③ 飲食間隔指導(dǎo)（避免長時間空腹）④ 代謝激惹時（感染、腹瀉）、盡早補充葡萄糖液體⑤ L-肉堿（30?200mg/kg/日）口服⑥ 維生素（根據(jù)病種不同選擇使用）⑦ 特殊藥物療法藥物治療① 生物素（10mg/日）：MCD患者② 維生素Ｂ12（10mg/日）：Ｂ12依賴性MMA患者③ 維生素B2（50?100mg/日）：GAII患者④ 巴氯芬（1.5?2.0mg/日）：GAI患者（抗肌痙攣）⑤ 甘氨酸（250mg/日）：異戊酸血癥脂肪酸代謝異常治療原則疾病長鏈脂肪酸代謝異常短、中鏈脂肪酸代謝異常CPT1缺乏癥、CPT2缺乏癥、TRANS缺乏癥、VLCAD缺乏癥、TFP／LCHAD缺乏癥MCAD缺乏癥、GA2急性期治療１）對癥治療①

足量葡萄糖輸液，②

高血糖時併用胰島素，③

糾正酸中毒，④

急救復(fù)蘇，⑤

心肌損傷嚴重時給與3羥基丁酸慢性期治療２）生活指導(dǎo)①控制良好的飲食間隔，②

有代謝紊亂時補充葡萄糖，③

合理休息３）飲食間隔①

新生児期：3時間內(nèi)，②

<6月：4時間內(nèi),③

<１歳：6時間內(nèi),④

<3歳：8時間內(nèi),⑤

4歳以上：10時間４）飲食療法①

1歲前：根據(jù)病情發(fā)作情況給與低脂肪飲食（3g/日以下）②

使用MCT奶粉，③

1歲后:脂肪比例按MCT:LCT（3：1）④

試用玉米粉（2g/kg）① 不用MCT奶粉。② 難治性低血糖發(fā)作時，試用玉米粉（2g/

kg）５）肉堿治療①

血中肉堿濃度監(jiān)測，②

CPT1欠損癥患者不用肉堿，③

左旋肉堿使用量（30?200

mg

/kg/日、分3次① 血中肉堿濃度監(jiān)測，② ②左旋肉堿使用量（30?200） mg/kg/日、分3次）６）其他治療經(jīng)驗①

給與3羥基丁酸，②

給與肌酸，③試用一些運動員飲料補充能量略字：CPT1andCPT2=carnitinepalmitoyltransferase1and2；TRANS=carnitineacylcarnitinetranslocase；VLCAD=very-long-chainacyl-CoAdehydrogenase；TFP／LCHAD=trifunctionalprotein/long-chain3-hydroxyacyl-CoAdehydrogenase；MCADandSCAD=medium-andshort-chainacyl-CoAdehydrogenase；GA2=glutaricacidemiatype

25.典型病例介紹第四軍醫(yī)大學(xué)DNA分型中心病人檢測結(jié)果2013-2015Disease

nameCase%5-羥脯氨酸尿癥13.4%苯丙酮尿癥或高苯丙氨酸血癥1034.5%楓糖尿癥26.9%瓜氨酸血癥和希特林蛋白缺乏癥26.9%甲基丙二酸血癥724.1%甲基丙二酸血癥或丙酸血癥13.4%精氨酸血癥413.8%酪氨酸血癥I型13.4%生物素酶缺乏癥13.4%合計29甲基丙二酸血癥Methylmalonic

acidemia(MMA)MethylmalonylCoAmutase

deficiencyAdenosylcobalamin,cobalaminas

coenzyme案例1精神運動落后G2P1，頭部MRI提示腦室，腦外間隙增寬間斷抽搐50天G4P2，自然流產(chǎn)1，人工流產(chǎn)1，生后3個月同胞死亡1，頭部MRI雙側(cè)額頂區(qū)硬膜下積液，腦外間隙增寬；EEG：額顳區(qū)全導(dǎo)癇性放電，背景慢活動。典型病例患者：楊XX，女，2月3天主訴：反應(yīng)差，偶有吐奶病史：患者系一胎一產(chǎn)，足月順產(chǎn)。1余月前家長發(fā)現(xiàn)患兒反應(yīng)差，表現(xiàn)睡眠較多，食納較差，偶有吐奶，眼神稍呆滯，體重增長較緩慢，偶有自發(fā)性微笑。本實驗室血液、尿液譜篩查結(jié)果：血液氨基酸檢測 C3，C3/C2升高尿液有機酸檢測

甲基丙二酸升高提示：甲基丙二酸血癥，建議做維生素B12負荷試驗。確診歷程2E+101.8E+101.6E+101.4E+101.2E+101E+108E+096E+094E+092E+090初查復(fù)查注射5天B12治療后甲基丙二酸楊XX尿液代謝譜分析基因分型結(jié)果楊XX，在MMACHC基因外顯子4測序檢測顯示，箭頭所指位置發(fā)現(xiàn)一個c.658_660delAAG缺失，確診為B12依賴型甲基丙二酸血癥的Cbl

C型。圖2

MMACHC外顯子4突變檢測的測序結(jié)果合理利用各種組學(xué)綜合診斷實例CitrinDeficiency

的臨床診斷例DNA分析?蛋白分析?代謝產(chǎn)物分析臨床表現(xiàn)型肝功檢查、生化分析黃疸不退

出血傾向

體重增加不良大便色淺

膽汁淤積性肝炎氨基酸血癥/尿癥半乳糖血癥改變酪氨酸血癥改變

膽紅素增高Citrin

蛋白檢不出肝臟ASS酶活性下降SLC25A13變異檢索皮膚成纖維細胞培養(yǎng)肝活檢基因提取，PCR增幅Hot

spot

檢索，直接測序尿GC/MS分析HPLC

or

MSMS血氨基酸分析案例2Citrin

Deficiency病例Case2：CitrinDeficiency

Patient患者：

YRZ

,男

,5個月，河北省出生主訴：生后黃染5月余病史：生后一周當?shù)蒯t(yī)院發(fā)現(xiàn)顏面，軀干皮膚黃染，無熱。生后80天復(fù)診，發(fā)現(xiàn)顏面，軀干皮膚仍黃染，血色素68g/L，診斷為“溶血性貧血？低蛋白水腫？”經(jīng)丙球4天，激素5天同時白蛋白靜脈點滴治療一周后復(fù)查血色素78g/L，黃染見輕，后未經(jīng)治療，入院前當?shù)蒯t(yī)院復(fù)查仍黃染，血色素104g/L，以“溶血性貧血？”收入院。入院檢查：血常規(guī)RBC

4.4X1012/L,

WBC

3.01X109/L,

Hb

94g/L,

Plt

307X109/，網(wǎng)織紅細胞7.0%,

外周血涂片見紅細胞體增大，中空明顯，有變形。血生化：谷丙轉(zhuǎn)氨酶251U/L，直接膽紅素29.2umol/L（正常），

間接膽紅素181.2umol/L（升高），

肝功大致正常，G6PD、

PK酶測定，紅細胞滲透脆性，紅細胞抗體均正常，EVB,

CMV抗體IgM,

IgG均陰性，血氨，乳酸輕度增高，顯著低蛋白血癥，凝血3項提示PT.APTT明顯延長，F(xiàn)ib減低。Case

2

GC/MS

尿分析結(jié)果Galactose,galactitol,galactonate,Tyr,4HPL,4HPP,Thr,Met

highCase2

MS/MS

血分析結(jié)果Acylcarnintine

normalAmino

acidsCitCit/Ser98nmol/ml

(6-42)1.81nmol/ml

(<0.18)ByProf.Shigematsu,Fukui

Univ.Case

2

基因分析結(jié)果患者是來自母親的IVS6+5G>A[X]

變異和來自父親的[XXXVIII]Nonsense

mutation變異的

[X]/[XXXVIII]復(fù)合變異。父親是[XXXVIII]變異攜帶者。母親是[X]變異攜帶者。ByProf.KeikoKobayashi,Kakoshima

Univ.粘多糖貯積癥Ⅱ

型(mucopolysaccharidosistypeⅡ,MPSⅡ,OMIM309900),又稱Hunter

綜合征,是一種X連鎖隱性遺傳病,

其發(fā)病率約為1/132,000個男嬰。送檢人的粘多糖貯積癥Ⅱ型致病基因IDS外顯子9檢測到一個已經(jīng)報道致病突變位點c.1132C＞T，符合粘多糖貯積癥Ⅱ型基因突變特征。案例3Case

3

男，3歲，面容特殊，關(guān)節(jié)強直、爪狀手、短小，肝脾腫大，臨床診斷懷疑粘多糖貯積癥。行粘多糖貯積癥相關(guān)致病基因的基因檢測。粘多糖貯積癥IIIA型（靶向捕獲技術(shù)）6.質(zhì)譜篩查技術(shù)的臨床合理使用糖代謝異常核酸代謝異常有機酸血癥氨基酸代謝異常脂肪酸代謝異常GC/MS尿篩查MS/MS血篩查常見代謝病的診斷方法疾病名稱MSMS測定指標確診檢測法1.MMAC3>3.5

C3/C2>0.25GC/MS、

酶學(xué)分析2.PPAC3>3.5

C3/C2>0.25GC/MS、

酶學(xué)分析3.B-ketothiolase

deficiencyC5-OH>1.0,C5:1>0.2GC/MS、

酶學(xué)分析4.Isovaleric

acidemiaC5>0.7GC/MS、

酶學(xué)分析5.MethylcrotonylglycineuriaC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析6.HMGC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析7.MCDC5-OH>1.0GC/MS、

酶學(xué)分析8.Glutaricaciduriatype

IC5-DC>3.0GC/MS、

酶學(xué)分析9.MCADC8>0.3GC/MS、

酶學(xué)分析10.VLCADC14:1>0.4酶學(xué)分析11.LCHADC16OH>0.2GC/MS、

酶學(xué)分析12.CPTIC0/(C16+C18)>100酶學(xué)分析13.CPTIIC16>8,C18:1血清C16>0.3、

酶學(xué)分析14.TRANSC16>8血清C16>0.3、

酶學(xué)分析15.Carnitine

deficiencyC0<8血游離肉堿、肉堿清除率16.Glutaricaciduriatype

IIC8>0.3,C10>0.35GC/MS、

酶學(xué)分析17.TyrosinemiaTyr>200GC/MS、

血琥珀酰丙酮酸18.CitrullinemiaCit>100GC/MS、

氨基酸、酶學(xué)19.Araginisuccinic

aciduriaCit>100,ASA

highGC/MS、

氨基酸、酶學(xué)20.PKUPhe>180GC/MS、

HBH4負荷21.MSUDLeu+isoLeu>350,Val>250GC/MS、氨基酸、酶學(xué)22.HomocystineuriaMet>80氨基酸分析如何根據(jù)MS/MS脂酰肉堿結(jié)果指導(dǎo)代謝病臨床診斷-1脂肪酸代謝異常的應(yīng)用CategoricalFattyacidoxidationdisorders11

diseasesPrimarymarkerfreecarnitinefreecarnitineC16-ACC16-ACC14:1-ACDiseaseCarnitinetransport

defectCa