《免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)》課件

《免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)》PPT課件REPORTING2023WORKSUMMARY目錄CATALOGUE免疫學(xué)基礎(chǔ)免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)分類抗原抗體反應(yīng)試驗(yàn)細(xì)胞免疫試驗(yàn)分子免疫試驗(yàn)免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用與展望PART01免疫學(xué)基礎(chǔ)

免疫系統(tǒng)的組成免疫器官骨髓、胸腺、淋巴結(jié)、脾等是免疫細(xì)胞生成、成熟或集中分布的場(chǎng)所。免疫細(xì)胞淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞等執(zhí)行免疫功能的細(xì)胞。免疫分子抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子等發(fā)揮免疫作用的分子。免疫應(yīng)答的機(jī)制非特異性免疫天然屏障、吞噬作用、炎癥反應(yīng)等非特異性防御機(jī)制。特異性免疫細(xì)胞免疫和體液免疫兩種途徑，針對(duì)特定抗原的免疫應(yīng)答。抗原能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)，通常為外源性的微生物或大分子物質(zhì)?？贵w由漿細(xì)胞分泌，能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)的球蛋白。細(xì)胞因子由免疫細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化、活化的小分子蛋白質(zhì)。免疫學(xué)的基本概念PART02免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)分類免疫熒光技術(shù)利用熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體或抗原，對(duì)細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞表面的抗原或抗體進(jìn)行定位和定性檢測(cè)。免疫沉淀技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)，將抗原與抗體結(jié)合形成的復(fù)合物進(jìn)行分離和檢測(cè)的技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）利用酶標(biāo)記的抗體或抗原與特異性抗體或抗原結(jié)合，通過顯色反應(yīng)對(duì)特異性抗體或抗原進(jìn)行定性或定量檢測(cè)?？乖贵w反應(yīng)技術(shù)細(xì)胞毒試驗(yàn)利用特異性抗體與靶細(xì)胞表面的抗原結(jié)合，通過補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用殺傷靶細(xì)胞，以檢測(cè)細(xì)胞表面抗原的表達(dá)情況。細(xì)胞因子檢測(cè)利用特異性抗體檢測(cè)細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，以了解細(xì)胞的活化狀態(tài)和功能。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)利用特異性抗原刺激淋巴細(xì)胞，觀察淋巴細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)化情況，以檢測(cè)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。細(xì)胞免疫技術(shù)123利用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增特定的DNA片段，用于檢測(cè)和鑒定DNA或RNA的序列。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）利用載體將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，以研究基因的功能和表達(dá)調(diào)控?；蜣D(zhuǎn)染和基因敲除技術(shù)利用特異性抗體檢測(cè)蛋白質(zhì)的表達(dá)和修飾情況，以了解蛋白質(zhì)的功能和作用機(jī)制。蛋白質(zhì)印跡技術(shù)分子免疫技術(shù)PART03抗原抗體反應(yīng)試驗(yàn)抗原的純化、抗原的滅活、抗原的定量等?？乖闹苽涿庖咴淖⑸?、抗體的提取、抗體的純化等?？贵w的制備抗原抗體的制備特異性檢測(cè)方法ELISA、Westernblot、免疫熒光等。特異性檢測(cè)原理抗原抗體結(jié)合的特異性、抗體與不同抗原的交叉反應(yīng)等?？乖贵w的特異性檢測(cè)間接免疫熒光法、酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫測(cè)定法等。滴度測(cè)定方法滴度的高低與抗體或抗原的濃度有關(guān)，可反映免疫反應(yīng)的強(qiáng)弱。滴度測(cè)定的意義抗原抗體的滴度測(cè)定PART04細(xì)胞免疫試驗(yàn)利用密度梯度離心法將淋巴細(xì)胞從血液或組織液中分離出來。通過抗體包被的磁珠或免疫吸附柱進(jìn)一步純化淋巴細(xì)胞，提高純度。淋巴細(xì)胞分離與純化純化技術(shù)淋巴細(xì)胞分離VS利用抗原抗體反應(yīng)或細(xì)胞表面標(biāo)志物進(jìn)行T細(xì)胞亞群的分離。鑒定方法通過流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光染色等技術(shù)對(duì)T細(xì)胞亞群進(jìn)行鑒定和表型分析。T細(xì)胞亞群分離T細(xì)胞亞群的分離與鑒定細(xì)胞因子種類檢測(cè)的細(xì)胞因子包括白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等。要點(diǎn)一要點(diǎn)二檢測(cè)方法利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、蛋白質(zhì)芯片等技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞因子的表達(dá)水平。細(xì)胞因子的檢測(cè)PART05分子免疫試驗(yàn)通過基因克隆技術(shù)，將目的基因從原核或真核細(xì)胞中提取出來，經(jīng)過酶切、連接、轉(zhuǎn)化等步驟，構(gòu)建成基因克隆載體。將目的基因?qū)氡磉_(dá)宿主細(xì)胞，通過特定的誘導(dǎo)手段，使目的基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)或核酸產(chǎn)物?；蚩寺』虮磉_(dá)基因克隆與表達(dá)重組蛋白的表達(dá)與純化將目的基因插入到表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)化入宿主細(xì)胞，使目的基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出相應(yīng)的重組蛋白。重組蛋白表達(dá)通過一系列的分離純化技術(shù)，如沉淀、離心、過濾、親和層析等，將重組蛋白從細(xì)胞培養(yǎng)液或發(fā)酵液中分離出來，并進(jìn)行純化。重組蛋白純化免疫原性檢測(cè)通過檢測(cè)重組蛋白與特異性抗體結(jié)合的能力，評(píng)估重組蛋白的免疫原性。常用的方法包括ELISA、Westernblot、免疫熒光等技術(shù)。免疫反應(yīng)機(jī)制了解免疫反應(yīng)的機(jī)制，包括抗原抗體的結(jié)合、淋巴細(xì)胞的活化、細(xì)胞因子的分泌等，有助于更好地理解重組蛋白的免疫原性及其在免疫學(xué)試驗(yàn)中的應(yīng)用。免疫原性檢測(cè)PART06免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用與展望免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)在疾病診斷與監(jiān)測(cè)中發(fā)揮著重要作用，通過檢測(cè)免疫指標(biāo)的變化，可以輔助醫(yī)生對(duì)疾病進(jìn)行早期診斷和病情監(jiān)測(cè)。免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)還可以用于鑒別感染性疾病與自身免疫性疾病，為臨床治療提供依據(jù)。免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)還可以用于監(jiān)測(cè)治療效果和評(píng)估病情預(yù)后，幫助醫(yī)生制定更加精準(zhǔn)的治療方案。疾病診斷與監(jiān)測(cè)免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)在疫苗研發(fā)與生產(chǎn)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，通過檢測(cè)疫苗免疫原性和安全性等指標(biāo)，確保疫苗的有效性和安全性。免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)還可以用于研究疫苗接種后的免疫應(yīng)答機(jī)制，為疫苗接種策略的制定提供科學(xué)依據(jù)。免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)還可以用于監(jiān)測(cè)疫苗在人群中的免疫效果，評(píng)估疫苗接種計(jì)劃的實(shí)施效果。疫苗研發(fā)與生產(chǎn)免疫學(xué)研究的新技術(shù)與新方法隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，免疫學(xué)研究的新技術(shù)與新方法也不斷涌現(xiàn)，如單細(xì)胞免疫分析技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)、免疫細(xì)胞功能分析技術(shù)等。新技術(shù)與新方法的應(yīng)用為免疫學(xué)研究提供了更