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文檔簡介

微生物學(xué)I教案

課程名稱微生物學(xué)I

授課專業(yè)藥物制劑

課程編號生-0401-制

必修課校級公共課();基礎(chǔ)或?qū)I(yè)基礎(chǔ)課(J);專業(yè)課()

課程類型

選修課限選課();任選課()

課堂講授(J);

授課方式考核方式考試(J);考查()

實踐課(V)

課程教學(xué)

52學(xué)時學(xué)分?jǐn)?shù)2.5學(xué)分

總學(xué)時數(shù)

學(xué)時分配課堂講授32學(xué)時;實踐課18學(xué)時;自學(xué)2學(xué)時

微生物學(xué)與免作出版社及人民衛(wèi)生出版社2003年

教材名稱沈關(guān)心,

疫學(xué)(第五版),者出版時間出版

指定參考書醫(yī)學(xué)微生物學(xué)作陸德源出版社及人民衛(wèi)生出版社2002年

微生物學(xué)教程者周德慶出版時間高等教育出版社2002年

微生物學(xué)沈萍高等教育出版社2000年

職微生物與細(xì)胞生物學(xué)教

授課教師蔡蘇蘭講師單位

稱研室

微生物學(xué)I教案

周次第1次課

節(jié)

稱第1章緒論

課理論課N);實踐課();實教學(xué)°a計

方式

習(xí)()時數(shù)

教學(xué)

目的掌握微生物的概念、特點、命名及分類。

及了解微生物學(xué)的研究范圍及其發(fā)展簡史。

要求

教學(xué)主要內(nèi)容

一、微生物與微生物學(xué)

1.微生物的概念

2.微生物的類群及特點

3.微生物的作用

4.微生物的分類及細(xì)菌的命名

5.微生物學(xué)

二、微生物學(xué)的發(fā)展簡史

1.經(jīng)驗時期(一1676年)

2.發(fā)現(xiàn)時期(1676—1861)

3.黃金時期(1861—1897)

4.生理學(xué)時期、奠基(1897—1953)

5.發(fā)展時期(1953—)

三、其他

教學(xué)微生物的概念,微生物的類群及特點

重點微生物的分類及細(xì)菌的命名

與微生物學(xué)發(fā)展過程中典型人物及其貢獻

難點

舉例說明微生物是人類的朋友

啟發(fā)提問少數(shù)微生物也是人類的敵人

自學(xué)內(nèi)容微生物學(xué)發(fā)展過程中典型人物及其貢獻

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

參考資料《微生物學(xué)》沈萍,高等教育出版社2002

第7拿錯卷

第一節(jié)版金物與假金物等

一、微生物的概念

微生物:指在自然界廣泛分布的個體微小,結(jié)構(gòu)簡單,肉眼不能看到,需借助光學(xué)顯微

鏡或電子顯微鏡放大幾百倍,幾千倍,甚至幾萬倍才能看到的微小生物的統(tǒng)稱。

二、微生物的類群及特點

1.微生物類群

r原核領(lǐng)—真如苗、古安苗

器L真核生物—真卻單"藻類.原生磁

*匕四響毓—病毒."毒

2微生物類群的特點

令個體小,結(jié)構(gòu)簡單:

大小以um計,但比表面積(表面積/體積)大。

結(jié)構(gòu):無細(xì)胞結(jié)構(gòu)(病毒)

單細(xì)胞(細(xì)菌,放線菌)

簡單多細(xì)胞(真菌)

令新陳代謝能力強,生長繁殖速度快。

令數(shù)量大,分布廣,種類多;

丸分布:

人跡可到之處,微生物的分布必然很多,

而人跡不到的地方,也有大量的微生物存在!

*種類:

微生物的生理代謝類型多;

代謝產(chǎn)物種類多;

微生物的種數(shù)“多”;

蟲數(shù)量:

在自然界中(土壤、水體、空氣,動物體內(nèi)和體表)

都生存有大量的微生物!

令易變異,抗性強,適應(yīng)性強。

三、微生物的作用:既是人類的敵人,更是人類的朋友!

1、自然界的物質(zhì)循環(huán)和環(huán)境保護

2、醫(yī)藥領(lǐng)域

3、食品行業(yè)

4、生物工程制藥

5、基因工程研究

四、微生物的分類及細(xì)菌的命名

1、微生物的分類

令分類依據(jù):是否有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),是否有分化完整的細(xì)胞核共分為三類:非細(xì)胞

型微生物、原核細(xì)胞型微生物、真核細(xì)胞型微生物

令微生物在生物界的分類地位

1969年,Whittaker提出五界系統(tǒng)學(xué)說,我國學(xué)者在此基礎(chǔ)上提出六界系統(tǒng)學(xué)說:

動物界、植物界、真菌界、原生生物界、原核生物界、病毒界

2、細(xì)菌命名法

<采用生物學(xué)的林奈“拉丁雙名法”

土屬名(名詞,大寫字母開頭)+種名(形容詞,小寫)+(命名者的姓)

+屬名+sp.表示某一屬種的某一種菌

*屬名+spp.表示某一屬種的幾種菌*p或spp為species縮寫的單復(fù)數(shù))

五、微生物學(xué)及其研究內(nèi)容

微生物學(xué)是研究微生物生命活動規(guī)律的學(xué)科。它的基本內(nèi)容是:①微生物細(xì)胞的結(jié)

構(gòu)和功能,研究細(xì)胞的構(gòu)建及其能量、物質(zhì)、信息的運轉(zhuǎn);②微生物的進化和多樣性,研究

微生物的種類,它們之間的相似性和區(qū)別,以及微生物的起源;③生態(tài)學(xué)規(guī)律,研究不同微

生物之間以及它們同環(huán)境之間的相互作用;④微生物同人類的關(guān)系。

第二節(jié)版金物學(xué)的發(fā)展簡史

微生物學(xué)的發(fā)展歷史可分為五個時期

一、感性認(rèn)識階段(史前期)——1676年前

令我國8000年前就開始出現(xiàn)了釀酒;

令4000年前埃及人已學(xué)會釀制果酒;

令2500年前發(fā)明釀醬、醋,用曲治消化道疾??;

令公元九世紀(jì)痘漿法、痘衣法預(yù)防天花;

令16世紀(jì),古羅巴醫(yī)生G.Fracastor。:疾病是由肉眼看不見

令的生物(livingcreatures)引起的;

令1641年,明末醫(yī)生吳又可也提出“戾氣”學(xué)說;

二、形態(tài)學(xué)發(fā)展階段(初創(chuàng)期)——1676-1861

17世紀(jì)中葉荷蘭人呂文虎克(AnlonivanLeeuwenhoek)用自制的簡單顯微鏡觀察

并發(fā)現(xiàn)了許多微生物。

三、生理學(xué)發(fā)展階段(奠基期)——1861-1897

巴斯德:徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說;免疫學(xué)——預(yù)防接種;發(fā)現(xiàn)并證實發(fā)酵

是由微生物引起的:其他貢獻

科赫:微生物學(xué)基本操作技術(shù)方面的貢獻;對病原細(xì)菌的研究作出了突出的貢獻。

四、生化學(xué)發(fā)展階段(發(fā)展期)——1897-1953

令進入微生物生化水平的研究

令分支學(xué)科更為擴大,出現(xiàn)了抗生素等新學(xué)科

令開始尋找有益微生物代謝產(chǎn)物

令普通微生物學(xué)科開始形成

令各相關(guān)學(xué)科和技術(shù)的相互滲透和促進,加速了微生物的發(fā)展

五、分子生物學(xué)發(fā)展階段(成熟期)——1953-至今

令J.D.Waston,H.F.C.Crick發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋模型

令迅速成長為十分熱門的前言學(xué)科;

令進入到分子水平的研究,成為分子生物學(xué)的研究對象

令向著更自覺、更有效和可人為控制的方向發(fā)展

其它:微生物學(xué)發(fā)展過程中的重大事件

周次第2次課

章節(jié)

第2章細(xì)菌(1)

名稱

授課理論課N);實踐課();實教學(xué).工

方式習(xí)()時數(shù)

熟悉細(xì)菌的大小與基本形態(tài)

教學(xué)

掌握細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)中細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成與功能

目的

掌握革蘭染色的原理、方法、意義及革蘭陽性菌和革蘭陰性菌

細(xì)胞壁的異同點

要求

了解細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌特性及意義。

教學(xué)主要內(nèi)容

一、細(xì)菌的大小和形態(tài)

1.細(xì)菌的大小

2.細(xì)菌的形態(tài)

二、細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成以及生理功能

教學(xué)

重點G+和G-細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)、革蘭氏染色的原理,細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)

難點

啟發(fā)提問細(xì)菌細(xì)胞壁的共能功能

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

《微生物學(xué)》沈萍,,高等教育出版社2002

參考資料

第Z章勵苗⑺

細(xì)菌(bacteria)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)在原核生物中具有代表性,是微生物的一大類群,在自然

界分布廣、種類多,與人類生產(chǎn)和生活的關(guān)系也卜分密切,是微生物學(xué)的主要研究對象。

第一節(jié)佃菌的形態(tài)、秸構(gòu)

一、細(xì)菌的大小和形態(tài)

1.細(xì)菌的大小

令球菌大小以其直徑表示,桿菌和螺旋菌以其長度與寬度表示。

令微米是測量細(xì)菌大小的常用單位。

2.細(xì)菌的形態(tài)

盡管細(xì)菌種類繁多,就單個有機體而言,其基本形態(tài)可分為球狀、桿

狀與螺旋狀三種:分別被稱為球菌、桿菌和螺旋菌。

j螺旋狀

SpMiMn

令球菌細(xì)胞呈球形或橢圓形。在分裂后產(chǎn)生的新細(xì)胞常保持一定的空間排列方式,

在分類鑒定上有重要意義。

上單球菌細(xì)胞單個,分散。

*雙球菌細(xì)胞沿一個平面分裂,新個體成對排列。如肺炎雙球菌。

如鏈球菌細(xì)胞沿一個平面分裂,新個體不但可保持成對的樣子,并可連成鏈狀。

如溶血鏈球菌、乳鏈球菌。鏈的長短往往具特征性,例如乳鏈菌每2-3個細(xì)胞

形成一串,而無乳鏈球菌則形成很長的鏈。

4-四聯(lián)球菌細(xì)胞分裂沿兩個互相垂直的平面進行,分裂后四個細(xì)胞特征性地連

在一起,呈田字形。如四聯(lián)微球菌。

4-八疊球菌細(xì)胞沿著三個互相垂直的方面進行分裂,分裂后每八個細(xì)胞特征性

地疊在一起呈一立方體。

*葡萄球菌細(xì)胞無定向分裂,多個新個體形成一個不規(guī)則的群集,猶如一串葡

萄。如金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌。

令桿菌細(xì)胞呈桿狀或圓柱形。

+弧菌菌體只有一個彎曲,其程度不足一圈,猶如“C”字,或似逗號。

土螺旋菌菌體回轉(zhuǎn)如螺旋狀。螺旋數(shù)目和螺距大小因種而異。。

+弧菌與螺旋菌的顯著特征,前者往往為偏端單生鞭毛或叢生鞭毛,后者兩

端都有鞭毛。

二、細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)

其結(jié)構(gòu)可分為兩部分:一是不變部分或基本結(jié)構(gòu),如細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和核糖體,

為全部細(xì)菌細(xì)胞所共有;二是可變部分或特殊結(jié)構(gòu),如鞭毛、菌毛、莢膜、芽抱和氣泡等。

1.基本結(jié)構(gòu)

令細(xì)胞壁

土概念:細(xì)胞壁是位于細(xì)胞表面,內(nèi)側(cè)緊貼細(xì)胞膜的一層較為堅韌,略具彈

性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

上證實細(xì)胞壁存在的方法:

(1)細(xì)菌超薄切片的電鏡直接觀察;

(2)質(zhì)、壁分離與適當(dāng)?shù)娜旧?,可以在光學(xué)顯微鏡下看到細(xì)胞壁

(3)機械法破裂細(xì)胞后,分離得到純的細(xì)胞壁;

(4)制備原生質(zhì)體,觀察細(xì)胞形態(tài)的變化;

上細(xì)胞壁的功能

(1)保護細(xì)胞,使其免受山于滲透壓的變化而引起的細(xì)胞破裂

(2)維持細(xì)菌的基本形態(tài);

(3)為細(xì)胞的生長、分裂和鞭毛運動所必需;

(4)細(xì)胞壁是多孔性的,水和直徑小于Inm的物質(zhì)可以自由通過,故有

一定的通透性和機械阻擋作用;

(5)細(xì)菌的細(xì)胞壁還與細(xì)菌的致病性、抗原性和對某些藥物及噬菌體的

敏感性有關(guān)。

上革蘭染色與細(xì)胞壁:

C.Gram(革蘭)于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細(xì)菌的染色方法。

其染色要點:先用結(jié)晶紫染液染色,再加媒染劑-碘液處理,使菌體著色,

然后用乙醇脫色,最后用復(fù)染液(沙黃或番紅)復(fù)染。顯微鏡下菌體呈紅色者

為革蘭氏染色陰性細(xì)菌(常以G.表示),呈深紫色者為革蘭氏染色陽性反應(yīng)細(xì)

菌(常以G+表示)。G+菌與G菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成結(jié)構(gòu)具有明顯差異。

(1)革蘭陽性細(xì)菌

細(xì)胞壁的化學(xué)組成以肽聚糖為主,另外還結(jié)合磷壁(酸)質(zhì)。肽聚糖是由

若干個N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸以及少數(shù)氨基酸短肽鏈組成的亞單位

聚合而成。以61,4葡萄糖背鍵連接,形成肽聚糖多糖鏈。以肽鍵連接的

氨基短肽,形成了肽聚糖的肽鏈,其氨基酸的組成和排列順序,通常為L-

丙氨酸、D-谷氨酸、L-賴氨酸和D-丙氨酸。相鄰的短肽通過一定的方式將

肽聚糖亞單位交叉聯(lián)結(jié)成重復(fù)結(jié)構(gòu)。

磷壁(酸)質(zhì)又名垣酸,可分為甘油型和核糖醇型兩種。

(2)革蘭氏陰性細(xì)菌

革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁分為內(nèi)壁層和外壁層。

內(nèi)壁層由肽聚糖組成。肽聚糖多糖鏈結(jié)構(gòu)與革蘭氏陽性細(xì)菌相同,但肽

鏈中的I」賴氨酸往往被其他二氨基酸取代。由于它們只有30%的肽聚糖亞單

位彼此交織聯(lián)結(jié),故其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不及革蘭氏陽性細(xì)菌的堅固,顯得比較疏松。

外壁層再分為內(nèi)、中、外三層.最外層為脂多糖層,中間為磷脂層,內(nèi)層為

脂蛋白層

細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌

(1)原生質(zhì)體(protoplast)在革蘭氏陽性細(xì)菌培養(yǎng)物中加溶菌酶或

在含青霉素等的培養(yǎng)基里培養(yǎng)陽性細(xì)菌,便可破壞或抑制細(xì)胞壁的合成。

細(xì)菌除去細(xì)胞壁后剩下的部分叫做原生質(zhì)體。特點:均呈球形、對環(huán)境條

件很敏感,、有的原生質(zhì)體還保留著鞭毛,但不能運動,也不能被相應(yīng)的

噬菌體感染。

(2)球形體(spheroplast)多用革蘭氏陰性細(xì)菌,以上述同樣方法處理

便可獲得。球形體較之原生質(zhì)體外界環(huán)境具一定抗性,并能在普通培養(yǎng)基上

生長。

(3)L-型細(xì)菌(bacterialL-form)是細(xì)菌在某些環(huán)境條件下所形成的變

異型。沒有完整而堅韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多形態(tài),有的能通過濾器,故又稱

"濾過型菌”。在低滲條件下生長緩慢,在固體培養(yǎng)基上形成一種直徑約

0.1mm的微小菌落,

周次第3次課

章節(jié)

第2章細(xì)菌(2)

名稱

授課理論課N);實踐課();實教學(xué).工

2學(xué)時

方式習(xí)()時數(shù)

教學(xué)掌握細(xì)菌細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成以及生理功

目的能

要求

教學(xué)主要內(nèi)容

一、細(xì)胞膜

定義、結(jié)構(gòu)、組成、功能

二、細(xì)胞質(zhì)

定義、結(jié)構(gòu)、組成、功能

三、核質(zhì)

定義、結(jié)構(gòu)、組成、功能

教學(xué)

重點

細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)與功能

難點

啟發(fā)提問細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)包括哪兒部分?

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

《微生物學(xué)》沈萍,高等教育出版社2002

參考資料

第2章佃苗(刃

一、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)

i.細(xì)胞膜

令概述

工細(xì)胞膜(cellmembrace)又稱原生質(zhì)膜或質(zhì)膜(plasmalemma),是外側(cè)緊貼于細(xì)

胞壁而內(nèi)側(cè)包圍細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟而富有彈性的半透性薄膜。間體

上用電子顯微鏡觀察細(xì)菌細(xì)胞的超薄切片,在細(xì)胞質(zhì)中可見一個或數(shù)個較大的、

不規(guī)則的層狀、管狀或囊狀物,稱為間體(mesosome)。它是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中主

要的、典型的單位膜結(jié)構(gòu),與細(xì)胞膜連接。對間體的生理功能還不完全了解。

2.細(xì)胞核

令概述

上為細(xì)菌的核比較原始,故稱為原始形態(tài)的核或擬核(nucleoid),它實際上是

DNA性質(zhì)的、與高等生物細(xì)胞核功能相似的核物質(zhì),所以又稱染色質(zhì)體或細(xì)菌

染色體。

法在靜止期的細(xì)菌,核多呈球形、棒狀或啞鈴狀。正常情況下,一個菌體內(nèi)具

體一個核;而細(xì)菌處于活躍生長時,由于DNA的復(fù)制先于細(xì)胞分裂,,個菌

體內(nèi)往往有2-4個核:質(zhì)粒(plasmid)

*很多細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中,除染色體外還有質(zhì)粒。它是存在于細(xì)菌染色體外或附加

于染色體上的遺傳物質(zhì),絕大多數(shù)由共價閉合環(huán)狀雙螺旋DNA分子所構(gòu)成。

3.細(xì)胞質(zhì)及其內(nèi)含物

令細(xì)胞質(zhì)是細(xì)胞膜內(nèi)的物質(zhì),除細(xì)胞核外,皆為細(xì)胞質(zhì)。它無色透明,呈粘液狀,

主要成分為水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類,并有少量糖及無機鹽。此外還有氣泡和顆

粒狀內(nèi)含物。

令顆粒狀內(nèi)含物在許多細(xì)菌細(xì)胞中,常含有各種較大的顆粒,大多系細(xì)胞貯藏物,

如異染顆粒、聚羥基丁酸、肝糖、硫滴等。這些內(nèi)含物常因菌種而異,即使

同一種菌,顆粒的多少也隨菌齡和培養(yǎng)條件不同而有很大變化。往往在某些營養(yǎng)

物質(zhì)過剩時,細(xì)菌就將其聚合成各種貯藏顆粒,當(dāng)營養(yǎng)缺乏時,它們又被分解利

用。

令核糖體由65%的核糖酸和35%的蛋白質(zhì)組成。沉降系數(shù)均為70S;真核微生物細(xì)

胞器核糖體變?yōu)?0S,而細(xì)胞質(zhì)中的卻為80S。

二、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)

1.糖被

令糖被(glycocalyx)某些細(xì)菌在生活過程中,能夠向其細(xì)胞壁外分泌一層疏松、

透明的粘液狀物質(zhì),稱為糖被。

令糖被按其有無固定層次、層次厚薄又可細(xì)分為:莢膜(capsule或macrocapsule,

大莢膜):叁0.2um;微莢膜(microcapsule):<0.2um;粘液層(slimelayer):

邊界不明顯;菌膠團(zoogloea):細(xì)菌群體共用一個莢膜

令莢膜的化學(xué)組成因菌種而異,主要是多糖,有的也含有多肽、蛋白、脂以及由它

們組成的復(fù)合物一脂多糖、脂蛋白等.

令產(chǎn)生莢膜是微生物的一種遺傳特性,種的特征,但并非細(xì)胞絕對必要的結(jié)構(gòu),失

去莢膜的變異株同樣正常生長。

令莢膜的形成與環(huán)境條件密切相關(guān)。

令莢膜雖不是細(xì)胞的重要結(jié)構(gòu),但它是細(xì)胞外碳源和能源性貯藏物質(zhì),并能保護細(xì)

胞免受干燥的影響,同時能增加某些病原菌的致病能力,使之抵御宿主吞噬細(xì)胞

的吞噬。

令產(chǎn)莢膜細(xì)菌,常常給生產(chǎn)帶來麻煩。

令在一定條件下,有害的東西可變?yōu)橛幸娴奈镔|(zhì)。

2.鞭毛

令運動性微生物細(xì)胞的表面,著生有一根或數(shù)根由細(xì)胞內(nèi)伸出的細(xì)長、波曲、毛發(fā)

狀的絲狀體結(jié)構(gòu)即為鞭毛(flagellum)。它是細(xì)菌的"運動器官"。

令鞭毛著生的位置和數(shù)目是種的特征,具有分類鑒定的意義。

X偏端單生鞭毛菌在菌體的一端只生--根鞭毛,如霍亂弧菌、熒光假單胞菌。

;兩端單生鞭毛菌在菌體兩端各具一根鞭毛,如鼠兄咬熱螺旋體。

土偏端叢生鞭毛菌菌體-端生-束鞭毛,如銅綠假單胞菌、產(chǎn)堿桿菌。

4-周生鞭毛菌周身都生有鞭毛,如大腸桿菌、枯草桿菌等。

令鞭毛抗原又叫H(H)抗原,各種細(xì)菌的鞭毛蛋白質(zhì)由于氨基酸組成不同導(dǎo)致H抗原

性質(zhì)上的差別,幫可通過血清學(xué)反應(yīng),進行細(xì)菌分類鑒定。近代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展

和應(yīng)用,對鞭毛的結(jié)構(gòu)也有了比較清楚的認(rèn)識。例如大腸桿菌,一根完整的鞭毛,

從形態(tài)上可分為三個部分:細(xì)胞最外面的是螺旋形鞭毛絲,靠近細(xì)胞表面的是鞭

毛鉤,埋在細(xì)胞膜里的基體。

3.菌毛

令很多革蘭氏陰性細(xì)菌,尤其是腸道細(xì)菌和某些假單胞菌屬的菌株以及少數(shù)革蘭氏

陽性細(xì)菌的細(xì)胞表面,有一些比鞭毛更細(xì)、較短而直硬的絲狀體結(jié)構(gòu)叫上菌毛

(fimbria)?菌毛不是細(xì)菌的“運動器官"。某不具鞭毛的細(xì)菌生有菌毛,有的細(xì)

菌二者兼有。

令菌毛的類型很多,腸道菌就有性毛和普通菌毛兩種。

令性菌毛(sexpili)是在性質(zhì)粒(F因子)控制下形成的,故又稱F-菌毛(F-pili)。

它比普通菌毛粗而長,數(shù)目較少,通過性菌毛,雄性株就可將遺傳物質(zhì)傳遞給不

具性質(zhì)粒的雌性菌株,使之也能產(chǎn)生性菌毛。至于遺傳物質(zhì)到底怎樣傳遞的,有

待進一步研究。

令菌毛亦由蛋白質(zhì)組成。

4.芽抱

令某些細(xì)菌,在其生長的一定階段,在細(xì)胞內(nèi)形成一個圓形,橢圓形的結(jié)構(gòu),對不良

環(huán)境條件具有較強的抗性,這種休眠體即稱芽抱(spore)或泡子。

令能否形成芽抱是細(xì)菌種的特征。

令芽抱形成的位置、形狀、大小因菌種而異,在分類鑒定上有一定意義。

令芽抱具有厚而致密的壁,不易著色,在相差顯微鏡下呈現(xiàn)折光性很強的小體;用芽

泡染色法染色后,普通光學(xué)顯微鏡下也可看見。

令芽抱的形成是一個非常復(fù)雜的過程,絕非細(xì)胞質(zhì)的簡單濃縮和核物質(zhì)的簡單分配。

芽抱形成的機制,有待進一步研究。

令芽泡一旦形成,對惡劣環(huán)境條件具有很強的抗抵能力。目前有一種較新的解釋芽泡

抗熱性的理論,被稱為"滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說”。

令應(yīng)該注意的是一個營養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)只能形成一個芽抱,而一個芽抱也只產(chǎn)生一個營養(yǎng)

體。芽抱,僅僅是芽泡細(xì)菌生活史中的一環(huán),是細(xì)菌的休眠體,而不是一種繁殖方

式。

令伴泡晶體:芽抱桿菌屬中有些種,如蘇云金芽泡桿菌等,形成芽抱的同時,在細(xì)

胞內(nèi)產(chǎn)生一種日體狀多肽類內(nèi)含物,稱為伴抱晶體。伴抱晶體由蛋白質(zhì)組成,是

一種毒性晶體,對100種以上的鱗翅目昆蟲有毒性。

周次第4次課

章節(jié)

第2章細(xì)菌(3)

名稱

授課理論課N);實踐課();實教學(xué).工

2學(xué)時

方式習(xí)()時數(shù)

掌握細(xì)菌生長的必要條件、繁殖方式,細(xì)菌群體生長的四個時

教學(xué)期及意義。

目的掌握細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況,細(xì)菌培養(yǎng)的用途。熟悉細(xì)菌

及的營養(yǎng)分型、營養(yǎng)物質(zhì)與營養(yǎng)物質(zhì)的吸收方式。

要求

了解培養(yǎng)細(xì)菌的方法和條件,培養(yǎng)基的種類和作用,

教學(xué)主要內(nèi)容

細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖

1.細(xì)菌細(xì)胞的化學(xué)組成

2.細(xì)菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)及生理功能

3.吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式

4.細(xì)菌的營養(yǎng)類型

5.細(xì)菌的生長繁殖

6.細(xì)菌的人工培養(yǎng)

教學(xué)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、營養(yǎng)類型

重點細(xì)菌的生長繁殖的條件

與細(xì)菌的人工培養(yǎng)、培養(yǎng)基、菌落、生長曲線

難點

微生物如何吃“食物”?

啟發(fā)提問

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

《微生物學(xué)》沈萍,高等教育出版社2002

參考資料

第2章癡菌(3)

佃菌的管條和繁殖

微生物的特點:食譜廣、胃口大。營養(yǎng)物質(zhì)(nutrient):那些能夠滿足微生物機體生長、

繁殖和完成各種生理活動所需的物質(zhì)。營養(yǎng)(nutrition):微生物獲得和利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。

一、微生物的六大營養(yǎng)要素

1.碳源

凡是可以被微生物用來構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中碳素來源的物質(zhì)通稱碳源(carbon

source)o碳源通過機體內(nèi)一系列復(fù)雜的化學(xué)變化被用來構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和(或)為機體提供完

成整個生理活動所需要的能量。因此,碳源通常也是機體生長的能源。

2.氮源

凡是能被微生物用來構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)中或代謝產(chǎn)物中氮素來源的營養(yǎng)物質(zhì)通常稱為氮源

(nitrogensource)o

3.能源

能為微生物生命活動提供能量來源的營養(yǎng)物或輻射能稱為能源(energysource)?根據(jù)來源

不同可以把能源分為兩類:一是化學(xué)物質(zhì),化能有機異養(yǎng)型微生物的能源為有機物,與它們

的碳源相同?;軣o機自養(yǎng)型微生物的能源為無機物,與它們的能源物質(zhì)不同。二是輻射能,

是光能自養(yǎng)型和光能異養(yǎng)型微生物的能源。

4.無機鹽

無機鹽(mineralsalts)是微生物生長必不可少的一類營養(yǎng)物質(zhì),它們?yōu)闄C體生長提供

必需的金屬元素。這些金屬元素在機體中的生理作用有參與前的組成、控制細(xì)胞的氧化還原

電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)等。

5.生長因子某些微生物在?般含有碳源、氮源、無機鹽的培養(yǎng)基里培養(yǎng)時還不能生長或

生長極差,但當(dāng)在這種培養(yǎng)基里加進某種組織(或細(xì)胞)提取液時,這些微生物能生長得很

好。說明這種組織(或細(xì)胞)里含有某些微生物生長所需要的因子。生長因子(growthfactor)

通常指那些微生物生長所必需而且需要量很小,但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足

機體需要的有機化合物??蓪⑺鼈兎殖删S生素(vitamin)、氨基酸與噪吟(或喀咤)堿基三大

類。

6.水水是微生物生長所需要的另外一種重要物質(zhì),它在微生物的生存中起著重要的作用。

水在機體中的生理作用主要有:1.起到溶劑與運輸介質(zhì)的作用;2.參與細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反

應(yīng);3.維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象;4.能有效地吸收代謝過程中放出的

熱并將吸收的熱迅速地散發(fā)出去,從而有效地控制細(xì)胞內(nèi)溫度變化;5.水是維持細(xì)胞正常形

態(tài)的重要因素;6.微生物通過水合作用與脫水作用控制由多亞基組成的結(jié)構(gòu),。

二、微生物的營養(yǎng)類型

1.光能無機自養(yǎng)型微生物這是一類能以C02作為唯一碳源或主要碳源并利用光能進行生

長的微生物,它們能以無機物如硫化氫、硫代硫酸鈉或其它無機硫化物作為供氫體,使C02

還原成細(xì)胞物質(zhì),并且伴隨有元素硫的放出。

2.光能有機異養(yǎng)型微生物這類微生物不能以C02作為主要碳源或唯一碳源,而必須以有

機物作為供氫體,利用光能將C02還原成細(xì)胞物質(zhì),光能異養(yǎng)型細(xì)菌在生長時大多數(shù)需要

外源的生長因子。

3.化能無機自養(yǎng)型微生物這類微生物與光能自養(yǎng)型微生物相比,它們生長所需要的能量來

自無機物氧化過程中放出的化學(xué)能。它們在以C02或碳酸鹽作為唯一或主要碳源進行生長

時,利用電子供體如氫氣、硫化氫、二價鐵離子或亞硝酸鹽等使C02還原成細(xì)胞物質(zhì)。

4.化能有機異養(yǎng)型微生物目前在已知的微生物中大多數(shù)屬于化能異養(yǎng)型。它們生長所需

要的能量均來自有機物氧化過程中放出的化學(xué)能,生長所需要的碳源主要是一些有機化合

物,如淀粉、糖類、纖維素、有機酸等。因此,在化能異養(yǎng)型微生物里有機物通常即是它們

生長的碳源物質(zhì)又是能源物質(zhì)。

在化能異養(yǎng)型微生物中,根據(jù)它們利用的有機物的特性,又可分為腐生型(metatrophy)

與寄生型(paratrophy)兩種類型。

上述四大類型微生物的劃分不是絕對的。它們在不同的條件下生長時,往往可以互相轉(zhuǎn)變。

三、營養(yǎng)物質(zhì)進入細(xì)胞的方式

1.擴散

擴散(diffusion)是一種簡單的吸收方式。不規(guī)則運動溶質(zhì)(如營養(yǎng)物質(zhì))通過細(xì)胞膜中

的含水小孔,由高濃度的胞外環(huán)境向低濃度的胞內(nèi)擴散,這種擴散是非特異性的,但膜上的

含水小孔的大小和形狀對被擴散的營養(yǎng)物質(zhì)的分子大小有一定的選擇性。

2.促進擴散

促進擴散(facilitateddiffusion)也是?種物質(zhì)運輸方式,它與擴散的方式相類似,例如物

質(zhì)在運輸過程中不需要代謝能,物質(zhì)本身在分子結(jié)構(gòu)上也不會發(fā)生變化,不能進行逆濃度運

輸,運輸?shù)乃俾孰S著細(xì)胞內(nèi)外該物質(zhì)的濃度差的縮小而降低,直至膜內(nèi)外的濃度差消失,從

而達到動態(tài)平衡。但是促進擴散與擴散的重要不同點是物質(zhì)在運輸過程中,需要借助位于膜

上的一種載體蛋白參與物質(zhì)的運輸,并且每種載體蛋白只運輸相應(yīng)的物質(zhì)。因此,這種運輸

的第二個特點是對被運輸?shù)奈镔|(zhì)有高度的立體專一性。

3.主動運輸

主動運輸(activetransport)是物質(zhì)運輸?shù)倪^程中要消耗代謝能,運輸?shù)乃俾什灰蕾囉诩?xì)胞

膜內(nèi)外被運輸物質(zhì)的濃度差,而是可以逆濃度運輸?shù)倪\輸方式。另外主動運輸也需要載體蛋

白參與運輸過程,因而這種運輸方式對被運輸?shù)奈镔|(zhì)有高度的立體專?性,被運輸?shù)奈镔|(zhì)與

相應(yīng)的載體蛋白之間存在著親和力,并且這種親和力在膜內(nèi)外大小不同。

4.基團轉(zhuǎn)位

基團轉(zhuǎn)位(grouptranslocation)除了在運輸過程中,物質(zhì)分子發(fā)生化學(xué)變化這?特點以外,

其它的特點都與主動運輸方式相同。

除以上四種運輸方式外,在原生動物特別是變形蟲中存在著膜泡運輸(membranevesicle

transport)o

四、細(xì)菌的生長繁殖

生長:細(xì)菌進行營養(yǎng)活動,體積增大,表現(xiàn)為生長。

繁殖:生長到一定程度,細(xì)胞開始分裂,形成兩個基本相似的子細(xì)胞每個子細(xì)胞又重復(fù)此過

程,稱為繁殖。

1.細(xì)菌生長與繁殖的條件

令充足的營養(yǎng)物質(zhì)

<適宜的酸堿度(pH)

令適宜的溫度

令氣體條件

2.細(xì)菌的繁殖方式和繁殖速度

令繁殖方式:無性二分裂

令繁殖速度:一般為20~30分鐘

五、細(xì)菌的人工培養(yǎng)

培養(yǎng)基(medium)是人工配制的,適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。無

論是以微生物為材料的研究,還是利用微生物生產(chǎn)生物制品,都必須進行培養(yǎng)基的配制,它是

微生物學(xué)研究和微生物發(fā)酵工業(yè)的基礎(chǔ)。

1.配制培養(yǎng)基的原則

令選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)

令營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適

<控制pH條件、氧化還原電位

令滅菌處理

2.培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用

令培養(yǎng)基種類繁多,根據(jù)其成分、物理狀態(tài)和用途可將培養(yǎng)基分成多種類型。

按成份不同劃分

上天然培養(yǎng)基(complexmedium):以化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然

有機物組成,牛肉膏蛋白豚培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基就屬于此類。

工合成培養(yǎng)基(syntheticmedium):由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基,

也稱化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemicallydefinedmedium)?

令根據(jù)培養(yǎng)基中凝固劑的有無及含量的多少,可將培養(yǎng)基劃分為固體培養(yǎng)基、半固體

培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基三種類型。

*固體培養(yǎng)基(solidmedium)

在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑即為固體培養(yǎng)基。常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠

(gelatin)和硅膠(silicagel)。在實驗室中,固體培養(yǎng)基一般是加入平皿或試管中,制成培養(yǎng)微生

物的平板或斜面。固體培養(yǎng)基為微生物提供一個營養(yǎng)表面,單個微生物細(xì)胞在這個營養(yǎng)表面

進行生長繁殖,可以形成單個菌落。固體培養(yǎng)基常用來進行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)

及菌種保藏等。

4-半固體培養(yǎng)基(semisolidmedium)

半固體培養(yǎng)基中凝固劑的含量比固體培養(yǎng)基少,培養(yǎng)基中瓊脂量一般為0.2?0.7%。半固

體培養(yǎng)基常用來觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定等。

工液體培養(yǎng)基(liquidmedium)

液體培養(yǎng)基中未加任何凝固劑。在用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時,通過振蕩或攪拌可以增

加培養(yǎng)基的通氣量,同時使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)分布均勻。液體培養(yǎng)基常用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)以及在實

驗室進行微生物的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用方面的研究。

令按用途劃分

4-基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimummedium)

基礎(chǔ)培養(yǎng)基是含有般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白陳培

養(yǎng)基是最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基?;A(chǔ)培養(yǎng)基也可以作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分,再根據(jù)某

種微生物的特殊營養(yǎng)需求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入所需營養(yǎng)物質(zhì)。

i-加富培養(yǎng)基(enrichmentmedium)

加富培養(yǎng)基也稱營養(yǎng)培養(yǎng)基,即在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的?類營養(yǎng)豐富

的培養(yǎng)基,這些特殊營養(yǎng)物質(zhì)包括血液、血清、酵母浸膏、動植物組織液等。加富培養(yǎng)基一

般用來培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物。

上選擇培養(yǎng)基(selectivemedium)

選擇培養(yǎng)基是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。根據(jù)

不同種類微生物的特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特

殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要的微生物的生長,有利于所需微生物的生長。

4-鑒別培養(yǎng)基(differentialmedium)

鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),

某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物,而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊

化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化,根據(jù)這種特征性變化,可將該種微生

物與其他微生物區(qū)分開來。鑒別培養(yǎng)基主要用于微生物的快速分類鑒定,以及分離和篩選產(chǎn)

生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌種。

六、細(xì)菌培養(yǎng)方法及其生長現(xiàn)象

1.固體培養(yǎng)法

令菌落(colony):在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部由單個微生物細(xì)胞殖形成的肉眼可見的

細(xì)胞集團。又稱純種細(xì)胞群或克隆(clone)。

令用途:微生物分離、純化、活菌計數(shù)、保存、鑒別菌種等。眾多菌落連成一片稱

菌苔。使微生物在固體培養(yǎng)基平板上形成單個菌落的基本原理是稀釋。

<基本方法平板劃線法、稀釋倒平板法:操作較麻煩,對好氧菌、熱敏感菌效果不

好!涂布平板法:使用較多的常規(guī)方法,但有時涂布不均勻!

2.半固體培養(yǎng)法

令用途:細(xì)菌的運動能力、菌種保藏或某些生化反應(yīng)等。

3.液體培養(yǎng)法

令用途:觀察生長狀況,檢測生化反應(yīng)及代謝產(chǎn)物等。

令方法:

4-靜止培養(yǎng)(stationaryculture):渾濁、菌膜、沉淀。

工搖瓶培養(yǎng)(shakingculture):促進生長繁殖。

土罐培養(yǎng)法(tankculture):放大實驗,實驗室或工業(yè)生產(chǎn)。

4.生長曲線(GrowthCurve):

*定義:將一定量的細(xì)菌接種到定量適宜的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),定時取樣測定細(xì)胞

數(shù)量,以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo),以菌數(shù)的對數(shù)為縱座標(biāo)作圖,得到的一條反映細(xì)菌

在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。

工根據(jù)細(xì)菌生長繁殖速率的不同,可將生長曲線大致分為延遲期、對數(shù)期、調(diào)整期

或滯留適應(yīng)期。

(I)延遲期處于延遲期細(xì)菌細(xì)胞的特點可概括為8個字:分裂遲緩、代謝

活躍。

延遲期出現(xiàn)的原因,可能是為了調(diào)整代謝。

延遲期的長短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)境條件等因素有

關(guān),短的只需幾分鐘,長的可達幾小時。在生產(chǎn)實踐中,通常采取的措施有增加

接種量,在種子培養(yǎng)中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些營養(yǎng)成分,采用最適種齡(即處于對

數(shù)期的菌種)的健壯菌種接種以及選用繁殖快的菌種等措施,以縮短延遲期,加速

發(fā)酵周期,提高設(shè)備利用率。

(2)對數(shù)期(logphase)對數(shù)期又稱指數(shù)期(exponentialphase)。在此期中,細(xì)

胞代謝活性最強,組成新細(xì)胞物質(zhì)最快,所有分裂形成的新細(xì)胞都生活旺盛。這

一階段的突出特點是細(xì)菌數(shù)以幾何級數(shù)增加,代時穩(wěn)定,細(xì)菌數(shù)目的增加與原生

質(zhì)總量的增加,與菌液混濁度的增加均呈正相關(guān)性。

處于對數(shù)期的微生物,其個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致,代謝

旺盛,生長迅速,代時穩(wěn)定,所以是研究基本代謝的良好材料,也是發(fā)酵生產(chǎn)的

良好種子,如果用作菌種,往往延遲期很短以至檢查不出,這樣可在短時間內(nèi)得

到大量微生物,以縮短發(fā)酵周期。

(3)穩(wěn)定期(stationaryphase)又稱恒定期或最高生長期。處于穩(wěn)定期的微

生物,新增殖的細(xì)胞數(shù)與老細(xì)胞的死亡數(shù)幾乎相等,整個培養(yǎng)物中二者處于動態(tài)

平衡,此時生長速度,又逐漸趨向零。

穩(wěn)定期的細(xì)胞內(nèi)開始積累貯藏物,如肝糖、異染顆粒、脂肪粒等,大多數(shù)芽

泡細(xì)菌也在此階段形成芽泡。如果為了獲得大量菌體,就應(yīng)在此階段收獲,因這

時細(xì)胞總數(shù)量最高;這一時期也是發(fā)酵過程積累代謝產(chǎn)物的重要階段,某些放線

菌抗生素的大量形成也在此時期。

(4)衰亡期(declinehpase)穩(wěn)定期后如再繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)菌死亡率逐漸增加,

以致死亡數(shù)大大超過新生數(shù),群體中活菌數(shù)目急劇下降,出現(xiàn)了"負(fù)生長",此階

段叫衰亡期。

不同的微生物或同一種微生物對不同物質(zhì)的利用能力是不同的。有的物質(zhì)可直

接被利用(例如葡萄糖或NH+4等);有的需要經(jīng)過一定的適應(yīng)期后才能獲得利

用能力(例如乳糖或N03-等)。前者通常稱為速效碳源(或氮源),后者稱為遲

效碳源(或氮源)。當(dāng)培養(yǎng)基中同時含有這兩類碳源(或氮源)時,微生物在生

長過程中會形成二次生長現(xiàn)象。

微生物生長的測定

微生物生長:單位時間里微生物數(shù)量或生物量(Biomass)的變化。微生

物生長的測定:個體計數(shù);群體重量測定;群體生理指標(biāo)測定。

周次第5次課

章節(jié)

第2章細(xì)菌(4)

名稱

授課理論課N);實踐課();實教學(xué)

2學(xué)時

方式習(xí)()時數(shù)

教學(xué)

目的掌握細(xì)菌分解代謝產(chǎn)物及其生化反應(yīng)的原理、意義

及掌握細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物及其在醫(yī)學(xué)上的意義。

要求

教學(xué)主要內(nèi)容

一、細(xì)菌的代謝

細(xì)菌的重要代謝產(chǎn)物:糖發(fā)酵試驗、IMVC

二、細(xì)菌的感染與致病性

毒素

教學(xué)糖發(fā)酵試驗、IMVC實驗的原理與意義

重點內(nèi)毒素與外毒素

難點

啟發(fā)提問

熱原質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么?

自學(xué)內(nèi)容細(xì)菌的致病性

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

《微生物學(xué)》沈萍,高等教育出版社2002

參考資料

第2章佃首(句

加省的新眈代謝

新陳代謝(metabolism)是細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的各種化學(xué)反應(yīng)的總稱,它主要由分解代謝

(catabolism)和合成代謝(anabolism)兩個過程組成。

分解代謝是指細(xì)胞將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì),合成代謝是指細(xì)胞利用簡單的小

分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子的過程。

一、細(xì)菌的酶

1.按存在部位可將細(xì)菌的酶劃分為胞內(nèi)酶和胞外酶。

2.按產(chǎn)生方式可將細(xì)菌的酶分為組成酶和誘導(dǎo)酶。

3.按專屬性可將細(xì)菌的酶分為共有酶和特有酶。

4.限制與修飾系統(tǒng)近年來,在基因工程研究中,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌體內(nèi)含有與防御作用有關(guān)

的限制酶(restrictionenzyme)和修飾酶(modificationenzyme),稱為限制與修飾系統(tǒng)(R-M

系統(tǒng))。

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

1.分解代謝產(chǎn)物和相關(guān)的生化反應(yīng)試驗

由于不同細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的酶系統(tǒng)不完全相同,對同一營養(yǎng)物質(zhì)的代謝途徑和代謝產(chǎn)物也不

相同,因此可以通過檢測不同的代謝產(chǎn)物對細(xì)菌進行鑒定,稱為細(xì)菌的生化反應(yīng),其中以細(xì)

菌分解糖和氨基酸產(chǎn)物的生化反應(yīng)類型為主。

令糖發(fā)酵試驗(carbohydratetermentationtest)不同種類的細(xì)菌對糖的分解利用能

力不同,對同種糖分解的途徑也不盡相同:有的只產(chǎn)酸,有的可同時產(chǎn)生酸和氣

體,借此可以鑒別細(xì)菌。

令甲基紅試驗(methylredtest)大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌均屬6一短桿菌,并且都

能分解葡萄糖、乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,二者不易區(qū)別。但兩者所產(chǎn)生的酸類和總酸量不

-:大腸埃希菌可產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸和乙醇,而產(chǎn)氣腸桿菌只產(chǎn)生

甲酸以及乙醉和乙酰甲基乙醉。從而大腸埃希菌培養(yǎng)液酸性強,pH在4.5以下,

加入甲基紅指示劑呈紅色,為甲基紅試驗陽性;產(chǎn)氣腸桿菌將分解葡萄糖產(chǎn)生的

兩分子丙酮酸轉(zhuǎn)變成1分子中性的乙酰甲基甲醇,故生成的酸類少,培養(yǎng)液最終

pH在5.4以上,加入甲基紅指示劑呈桔黃色,甲基紅試驗陰性。

令VP試驗(Voges-Proskauertest)產(chǎn)氣腸桿菌在含有葡萄糖的培養(yǎng)基中,可分解

葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進一步脫竣生成乙酰甲基甲醇,在堿性溶液中能被空

氣中的氧氧化成二乙酰,二乙??膳c蛋白陳中精氨酸的胭基發(fā)生反應(yīng),生成紅色

的化合物,此為VP反應(yīng)陽性。大腸埃希菌分解葡萄糖不能產(chǎn)生乙酰甲基甲醇,

最終培養(yǎng)液的顏色不能變紅,故其VP反應(yīng)為陰性。

令枸椽酸鹽利用試驗(citrateutilizationtest)產(chǎn)氣腸桿菌能利用拘椽酸鹽為碳源,

在僅含有枸檬酸鹽為唯一碳源的培養(yǎng)基中能生長,分解枸椽酸鹽產(chǎn)生CO2,再轉(zhuǎn)

變?yōu)樘妓猁},使培養(yǎng)基由中性變?yōu)閴A性,導(dǎo)致含有浪麝香草酚藍(lán)(BTB)指示劑

的培養(yǎng)基由中性時的綠色變?yōu)樗{(lán)色,此為枸椽酸鹽利用試驗陽性。大腸埃希菌不

能利用枸檬酸鹽,在上述培養(yǎng)基上不能生長,結(jié)果為陰性。

令“引珠試驗(indoletest)有些細(xì)菌體內(nèi)含有色氨酸酶,能分解色氨酸生成?引噪,

在培養(yǎng)液中加入對-二甲基氨基苯甲醛試劑,可生成紅色的玫瑰叫I睬,稱為吧跺試

驗陽性。大腸埃希菌、霍亂弧菌等叫I咪試驗為陽性;產(chǎn)氣腸桿菌、傷寒沙門菌等

為陰性。

2.合成性代謝產(chǎn)物

令毒素(toxin)

細(xì)菌毒素按其來源、性質(zhì)和作用的不同分為外毒素和內(nèi)毒素。

蟲外毒素(exotoxin)

病原細(xì)菌,主要是一些革蘭氏陽性菌,在生長過程中合成并分泌到胞外的毒

素,化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。特點:通常為蛋白質(zhì),抗原性強,可選擇作用于各自特

定的組織器官,不同病原菌產(chǎn)生的外毒素不同,所引起的癥狀也不同。其毒性作

用強,但毒性不穩(wěn)定,對熱和某些化學(xué)物質(zhì)敏感。

類毒素(toxoid)和抗毒素(antitoxin):因外毒素對熱和某些化學(xué)物質(zhì)敏感,

可以脫毒形成類毒素。用0.3-04%甲醛處理外毒素,使其毒性完全喪失,但仍保

持抗原性,這種經(jīng)處理的外毒素為類毒素,常用來預(yù)防注射。也可用類毒素注射

動物(如馬、兔子等),以制備外毒素的抗體,稱為抗毒素,作治療用。

+內(nèi)毒素(endotoxin)

革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁物質(zhì),主要成分是脂多糖(LPS),當(dāng)菌體裂解時釋放發(fā)

揮毒性,即為內(nèi)毒。特點:化學(xué)成分是脂多糖,抗原性弱,作用于白細(xì)胞、血小

板、補體系統(tǒng)、凝血系統(tǒng)等多種細(xì)胞和體液系統(tǒng),引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、血壓

下降及微循環(huán)障礙,有多方面復(fù)雜作用,但相對毒性較弱。各種革蘭氏陰性菌的

內(nèi)毒素作用相似,且沒有器官特異性。

屏毒素用毒素

產(chǎn)生菌革蘭氏陽性菌為主革蘭氏陰性菌

化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖(LPS)

釋放時間一般隨時分泌菌體死亡裂解后釋放

致病特異性不同外毒素各不相同不同病原菌的內(nèi)毒素作用基本相同

毒性強*弱

抗原性完全抗原,抗原性強不完全抗原,抗原性弱

制成類毒素能不能

熱穩(wěn)定性差耐熱性強

周次第6次課

節(jié)

稱第3章放線菌、第4章真菌(1)

授課理論課(。;實踐課();實教學(xué)。曲汁

方式習(xí)()時數(shù)子時

教學(xué)掌握放線菌的概念、特點、生物學(xué)地位及經(jīng)濟價值。

目的7解鏈霉菌屬及其他兒個代表菌屬的生物學(xué)特性。

及掌握真菌的定義和霉菌及酵母菌的劃分方式。

要求

教學(xué)主要內(nèi)容

一、概述

1.概念

2.分類地位

3.分布特點及與人類的關(guān)系

二、生物學(xué)特性

1.形態(tài)與結(jié)構(gòu)

2.生長與繁殖

3.菌落形態(tài):

三、放線菌的代表類型

1■.小單抱菌

2游.動放線菌

3.諾卡氏菌

4.馬杜拉放線菌

5.其他一些致病放線菌

四、真菌概述

1.真菌的概念、特征

2.具菌E

教學(xué)放線菌屬于細(xì)菌范疇的生物學(xué)證據(jù)

重點

與放線菌的生長繁殖

真菌的特征

難點

啟發(fā)提問1.放線菌生物學(xué)特性與細(xì)菌有什么異同點?

2.為什么說放線菌屬于細(xì)菌范疇?

教學(xué)手段多媒體課件教學(xué)

《微生物學(xué)與免疫學(xué)》沈關(guān)心,高等教育出版社2003

參考資料《微生物學(xué)》沈萍,高等教育出版社2002

第M章效狡菌

一、概述

1.概念:放線菌(actinomycetes)是一類呈分支狀生長,以抱子進行繁殖,陸生

性強的革蘭氏染色陽性的多核單細(xì)胞原核微生物。

2.分類地位:放線菌實際上是屬于細(xì)菌范疇內(nèi)的原核微生物,只不過其細(xì)胞形態(tài)

為分枝狀菌絲。

3.分布特點及與人類的關(guān)系

令放線菌最喜歡生活在有機質(zhì)豐富的微堿性土壤中。

令能產(chǎn)生大量的、種類繁多的抗生素(其中90%由鏈霉菌產(chǎn)生)。

令土壤具有特殊的泥腥味就是因為放線菌的代謝產(chǎn)物——土腥味素。

令有的放線菌可用于生產(chǎn)維生素、酶制制;此外,在幽體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟、

燒類發(fā)酵、污水處理等方面也有應(yīng)用。

令少數(shù)寄生型放線菌可引起人、動物(如皮膚、腦、肺和腳部感染)、植物

(如馬鈴薯和甜菜的瘡痂病)的疾病。

二、生物學(xué)特性

1.形態(tài)與結(jié)構(gòu)

令單細(xì)胞,大多由分枝發(fā)達的菌絲組成;

令菌絲直徑與桿菌類似,小于lum;

令細(xì)胞壁組成與細(xì)菌類似,(含肽聚糖、磷壁酸、DAP),多數(shù)是陽性菌;

令細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)菌基本相同,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)無細(xì)胞器的分化,細(xì)胞核為原核。

令細(xì)胞按形態(tài)和功能可分為營養(yǎng)、氣生和抱子絲三種。

2.生長與繁殖

令繁殖方式:無性繁殖(無性抱子、菌絲斷裂)

3.菌落形態(tài):干燥、不透明,表面呈緊密的絲絨狀,

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