化學發(fā)光之臨床應用課件

PartII.化學發(fā)光法的臨床應用甲狀腺功能的免疫分析糖代謝紊亂的免疫分析常見腫瘤標志物及其免疫分析常見傳染性疾病的免疫檢測病毒性肝炎HIV感染嚴重急性呼吸綜合征（SARS)其他免疫檢測項目甲狀腺功能的免疫分析甲狀腺機能的常見評價指標及其臨床意義1.甲狀腺機能亢進

2.甲狀腺功能減退

一、甲狀腺機能亢進

1972年提出T3型甲亢的診斷標準：

1.甲亢的癥狀和體征，常無突眼征，但心血管癥狀較明顯；

2.血清TT4、FT4值正常；

3.TT3、FT3值升高；

T3型甲亢在臨床上并非罕見，特別是缺碘地區(qū)患功能自主性腺瘤的部分患者，或用T3治療后出現(xiàn)的碘甲亢，目前認為T3型甲亢不能算作一種獨立疾病，因為發(fā)現(xiàn)T3型甲亢病人中有一部分雖然TT3升高但FT3正?；虻陀谡?，因此改稱高T3綜合征為妥。

T4型甲亢，即T4毒癥患者血清T3、FT3濃度正常；而T4、FT4濃度升高。TSH值為正常低值或低于正常，并伴甲亢臨床癥狀。二、甲狀腺功能減退甲減為甲狀腺激素分泌不足引起的代謝性疾病。臨床上分為原發(fā)性甲減，以及繼發(fā)性甲減，又稱垂體-下丘腦甲減兩類。血循環(huán)中甲狀腺激素濃度的測定在診斷甲減方面，TSH和FT3、FT4是靈敏的診斷指標，明顯優(yōu)于總甲狀腺激素，如TT3、TT4等。其價值依次為TSH=FT4>TT4>FT3>TT3.

三、低T3綜合征

低T3綜合征是一種由于非甲狀腺疾病造成的甲狀腺激素異常，其發(fā)生與機體的代謝狀態(tài)，基礎疾病的性質和嚴重程度以及外來因素，如用藥等有關。代謝狀態(tài)差、基礎病情加重時其發(fā)生率隨之增高；當病情好轉、機體健康狀況趨于正常時，低T3狀態(tài)可自行消失。四、其他甲狀腺疾病有關的免疫學指標抗甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）多見于橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺疾病、原發(fā)性甲狀腺功能減退、甲狀腺功能亢進患者等?？辜谞钕傥⒘ｓw抗體（TMAb）多見于橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺疾病、原發(fā)性甲狀腺功能亢進、原發(fā)性甲狀腺功能減退。小結綜上所述，若對甲狀腺功能指標進行全面評價，則上述

各項指標對甲亢的診斷價值依次為FT3>FT4>TT3>TT4；

各項指標對甲減的診斷價值依次為FT4=TSH>TT4>FT3>TT3ACS180SE特點：分析速度快二、糖尿病的免疫學檢測以下是臨床上常見的有關糖代謝紊亂的免疫分析指標：

1.C肽

2.胰島素

3.胰島素抗體

4.谷氨酸脫羧酶抗體（GAD-Ab）

5.胰高血糖素常見腫瘤標志物及其檢測胚胎性腫瘤標志物含糖物質類標志物酶類標志物激素類標志物胚胎性腫瘤標志物這類腫瘤標志物是指那些原本只能在胎盤期出現(xiàn)，但在機體發(fā)生腫瘤時，其基因表達被再度激活，從而重新再成年個體出現(xiàn)的蛋白，其常見的檢測標志如右圖所示：標志名稱生化本質相關腫瘤的組織細胞來源甲胎蛋白糖蛋白肝細胞、胚細胞癌胚鐵蛋白糖蛋白肝癌胚抗原糖蛋白結腸、直腸、胰腺、肺、乳腺胰癌胚抗原糖蛋白胰腺鱗狀細胞抗原糖蛋白肺、皮膚、頭和頸部組織多肽抗原細胞角蛋白乳腺、結腸AFP原發(fā)性肝癌：AFP作為原發(fā)性肝癌重要指標之一，特異性強，靈敏度高。因此AFP為十分有價值的臨床檢查及普查項目，陽性率達90%。血清含量大于400μg/L作為原發(fā)性肝癌的診斷閾值。孕婦血清AFP與胎兒狀態(tài)當胎兒患低氧癥、宮內死亡、遺傳缺陷、先天性神經(jīng)管畸形、無腦兒、脊柱裂等，母體血清AFP異常增高。其他腫瘤有報道指出，68%-92%卵黃囊腫瘤患者血清AFP上升CEA原發(fā)性結腸癌患者CEA升高者占45-90%.胰腺癌、膽管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系腫瘤，陽性率50-70%。結腸癌患者手術切除后1-3周內血中CEA水平可降至正常水平。如術后CEA持續(xù)陽性，說明手術切除不完全或癌腫發(fā)生轉移，提示病人預后較差或者有復發(fā)的可能。良性腫瘤、炎癥和退行性疾病，如結腸息肉、潰瘍性結腸炎、胰腺炎和酒精性肝硬變病人CEA也有部分升高，但遠遠低于惡性腫瘤，一般小于20μg/L.所以測定CEA可作為良性與惡性腫瘤的鑒別診斷依據(jù)。吸煙也可能導致CEA升高。含糖物質類標志物CA125是上皮性卵巢癌和子宮內膜癌的標志物CA153存在于多種腺癌內，如乳腺癌、肺癌、肺胰癌及卵巢癌等，是檢測乳腺癌比較重要的抗原CA199通常作為胰腺癌和結、直腸癌的標志物CA50通常是胰腺和結、直腸癌的標志物CA72-4其檢測結果與CEA有互補作用，可用于檢測原發(fā)性乳癌、胃癌、直結腸癌以及卵巢癌患者殘余腫瘤細胞，可與CA-125聯(lián)合用于卵巢腫瘤的診斷及復發(fā)檢測，可與CA-199聯(lián)合應用于胃癌的診斷以提高陽性率，也可用于胃癌術后監(jiān)測早期復發(fā)。CA242可用于胃腸道惡性腫瘤病人的治療監(jiān)控和復發(fā)檢測。酶類標志物前列腺特異性抗原（PSA）是前列腺癌的特異性標志物，也是目前少數(shù)幾個器官特異性腫瘤標志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，血清PSA定量測定的陽性臨界值大于10μg/L,此時前列腺癌的診斷特異性達90-97%。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）對小細胞肺癌的診斷，鑒別診斷、病情判斷及療效的估計都有實際的意義。激素類標志物降鈣素：（1）甲狀腺髓樣癌此種癌起源于甲狀腺濾泡旁細胞，可產生多種生物活性物質，其中以降鈣素為主，患者血清降鈣素水平高于正常數(shù)十到數(shù)百倍。（2）肺小細胞癌人絨毛膜促性腺激素（HCG）

HCG測定對葡萄胎、絨癌的診斷和化療后的療效觀察，以及葡萄胎終止后的隨訪有重大意義，一般而言，良性葡萄胎、惡性葡萄胎、絨癌治療前HCG均增高，其升高順序為：絨癌>惡性葡萄胎>良性葡萄胎。貝克曼Acess2主要用于激素類物質的檢測。常見傳染性疾病的免疫檢測病毒性肝炎HIV感染及艾滋?。ˋIDS）嚴重急性呼吸綜合征乙肝標志物定量檢測

.檢測方法：乙肝五項定量檢測目前最先進的是化學發(fā)光法，避免了假陰性和漏檢的問題，而且準確，尤其對乙肝病人的療效觀察提供了依據(jù)，這是檢驗發(fā)展的趨勢。

乙肝五項獨特優(yōu)點：一、對于乙肝患者而言：1、通過定量檢測乙肝標志物，直觀地顯示體內五項指標的具體情況，不再是簡單的“陰性”和“陽性”，有利于動態(tài)觀察病情，為選擇治療方案提供重要依據(jù)；2、定量檢測方法更靈敏，能測出低水平復制的樣本，特別是“窗口期”的感染者，3、定量檢測的測定范圍更寬，定性檢測時候，高濃度的乙肝表面抗原樣本需要稀釋，否則會有假陰性出現(xiàn)，但是，定量檢測能有效檢出高濃度的乙肝表面抗原樣本。

二、對正常體檢者而言：可反映HBV-抗體的濃度變化，有利于對機體免疫狀況進行評估，對注射乙肝疫苗有指導意義。雅培i2000優(yōu)勢是檢測病毒系列，包括乙肝病毒檢測，堪稱業(yè)界標準幾種常見的乙肝模式HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb臨床意義1+-+-+急性期、慢性期、有較強傳染性，俗稱“大三陽”2+---+急性或慢性期，傳染性較強3+--++恢復期，傳染性弱，長期持續(xù)易癌變，俗稱“小三陽”4-+--+既往感染。仍有免疫力，非典型恢復期5---++既往感染，急性乙型肝炎恢復期，基本無產燃性（少數(shù)仍有傳染性）6----+急性窗口期，既往過后康復期7-+---注射乙肝疫苗后，乙肝感染后已康復，有免疫力8-+-++急性感染期后康復期，既往感染，具有免疫力9-----未感染過乙肝其他檢測項目臨床常見藥物的濃度檢測1.強心類藥：西地蘭、地高辛、洋地黃毒等；2.抗癲癇藥：苯妥英、苯巴比妥、酰胺咪嗪、乙琥胺等；3.三環(huán)類抗抑郁藥：丙咪嗪、去甲丙咪嗪、去甲替林、阿米替林、多慮平等；4.茶堿類：氨茶堿；

5.氨基糖苷類抗生素：鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素；腎上腺激素：兒茶酚胺類激素等性激素測定：促黃體生成素、卵泡刺激素、垂體泌乳素、睪酮、孕酮、雌二醇。內分泌免疫分析：腺垂體激素、生長激素、促腎上腺皮質激素等。

PartⅢ.化學發(fā)光免疫檢測的特點

免疫學技術的迅速發(fā)展對精密度的要求越來越高，一般的酶免技術已逐漸無法適應形勢需求。發(fā)光免疫技術30年以來得到快速發(fā)展，國際上已實現(xiàn)商品化，可以分為化學發(fā)光、電化學發(fā)光等。敏感度高，甚至超過RIA精密度和準確性均可與RIA相比試劑穩(wěn)定，無毒害測定耗時短發(fā)展成自動化系統(tǒng)化學發(fā)光免疫分析的發(fā)展(1)常見發(fā)光體系的不斷完善,以及發(fā)光增強劑的研究;(2)基因工程抗原、抗體的制備及廣泛應用促進了化學發(fā)光免疫分析方法的發(fā)展;(3)化學發(fā)光與其它方法聯(lián)用,提高化學發(fā)光免疫分析的速度以及靈敏度,拓寬化學發(fā)光體系的應用范圍。多組份同時檢測的化學發(fā)光分析檢測目前在利用化學發(fā)光免疫反應進行在多組份同時檢測方面已有很多報道。多樣品同時檢測不但節(jié)約試劑、樣品,同時還節(jié)省時間,將是未來發(fā)展的趨勢。Fu等建立了基于磁顆粒的多組分免疫分析方法(Multianalyteimmunoassay,M