醫(yī)學(xué)知識一免疫測定室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用

免疫測定室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用張瑞衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心免疫測定用室內(nèi)質(zhì)控血清的調(diào)整隨著臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)水平的不斷提高和檢測試劑質(zhì)量的不斷改進(jìn)，原有的室內(nèi)質(zhì)控物已經(jīng)不能滿足室內(nèi)質(zhì)控工作的需要，因此部中心對免疫測定用室內(nèi)質(zhì)控血清的含量進(jìn)行了調(diào)整，同時(shí)改進(jìn)了包裝。針對的檢測項(xiàng)目

HBsAg抗HCV抗HIV梅毒螺旋體抗體提供不同含量的質(zhì)控物是為了實(shí)驗(yàn)室根據(jù)不同試劑的檢測值選擇合適的質(zhì)控物，使質(zhì)控物的檢測值（S/CO值）在1.5～4之間。HBsAg質(zhì)控血清定值的調(diào)整HBsAg定值單位改變：2004年，WHO研制了第二代HBsAg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并將定值單位從ng/ml改為IU/ml?，F(xiàn)1IU/ml≈0.5ng/ml定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）調(diào)整原因0.2IU/ml用于一些靈敏度較高的試劑0.5IU/ml0.5ng/ml1IU/ml1ng/ml2IU/ml2ng/ml4IU/ml5ng/ml濃度較高≥1萬ng/ml“鉤狀效應(yīng)”HBsAg室內(nèi)質(zhì)控品的選用定值適用試劑0.2IU/mlMurex，生物梅里埃試劑0.5IU/mlOrtho，Bio-Rad試劑，雅培i2000和Axsym檢測系統(tǒng)和配套試劑1IU/ml國產(chǎn)試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華……），血站和醫(yī)院用2IU/ml國產(chǎn)試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華……），醫(yī)院用4IU/ml國產(chǎn)試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華……），醫(yī)院用抗HCV質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml國產(chǎn)試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華、麗珠……）和DiaSorin的試劑1NCU/ml2NCU/mlMurex、Ortho等試劑2NCU/ml4NCU/ml雅培i2000和Axsym檢測系統(tǒng)和配套試劑現(xiàn)1NCU/ml≈0.5NCU/ml抗HIV質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml國產(chǎn)試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華、麗珠……）1NCU/ml2NCU/mlBio-Rad等試劑2NCU/ml4NCU/ml進(jìn)口試劑及配套儀器4NCU/ml8NCU/ml進(jìn)口試劑及配套儀器現(xiàn)1NCU/ml≈0.5NCU/ml1NCU/ml的確定：參考國際單位定值方法，采用5種或以上試劑盒，結(jié)果63％的試劑盒（按泊松分布計(jì)算）檢測結(jié)果為陽性的值為1NCU/ml。梅毒螺旋體抗體定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml（特異）國產(chǎn)試劑盒2NCU/ml（特異）國產(chǎn)試劑盒2NCU/ml（特異）4NCU/ml（特異）進(jìn)口試劑及/或配套儀器2NCU/ml（非特異）2NCU/ml（非特異）RPR、TRUST現(xiàn)1NCU/ml≈0.25NCU/ml注意事項(xiàng)室內(nèi)質(zhì)控物僅用于相應(yīng)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)量控制，不能用于陰陽性結(jié)果的判斷。定值質(zhì)控物不適合評價(jià)試劑盒整體性能是否合格,但可用于試劑的批內(nèi)、批間變異和測定下限的評價(jià)質(zhì)檢。如果需要對試劑進(jìn)行比較評價(jià)和全面質(zhì)檢請選用相應(yīng)項(xiàng)目的臨床考核血清盤。臨床考核血清盤項(xiàng)目規(guī)格支數(shù)/套HBsAg0.5ml/支40抗HCV0.25ml/支40梅毒螺旋體抗體0.5ml/支40HBsAg血清盤靈敏度特異性HBsAg變異的檢測能力：如G145R等Hook效應(yīng)導(dǎo)致的假陰性樣本編號含量(IU/ml)A（S/CO)B（S/CO)C（S/CO)D（S/CO)E（S/CO)16~80.20.40.49.57.328~101.00.70.49.814.910﹥200000040.837.636.227.124.116約160000040.043.941.047.135.08陰性20.91.50.40.70.719陰性9.47.719.20.40.427陰性16.60.30.80.50.6360.5-1.01.61.62.97.38.5370.5-1.01.11.33.03.86.838約0.20.60.81.82.43.9390.2-0.50.20.60.91.13.0HBsAg血清盤抗HCV血清盤不同試劑廠家的ELISA試劑盒所用包被抗原的差異：目前抗HCV檢測ELISA試劑盒均采用HCV的基因工程或合成多肽抗原（核心區(qū)、NS3、NS4和NS5等）包被固相，以間接法進(jìn)行測定，上述HCV抗原的組合、來源及用量等方面的差異而造成檢測結(jié)果不一致。

抗HCVELISA出現(xiàn)假陽性的主要原因有：

1.類風(fēng)濕因子（RF）的干擾2.高免疫球蛋白血癥3.標(biāo)本中超氧化物歧化酶（SOD）的干擾4.用于固相包被的HCV基因工程抗原不純抗HCV血清盤樣本編號ABCDEFG

RIBA

NS4NS3CNS5281.221.870.650.780.770.67<0.3–+±+337.8311.96.324.286.24.760.62±++––340.920.680.610.841.140.65<0.3++–±356.414.111.862.992.812.040.34–++–381.62.061.860.681.682.051.38±+±±152.420.820.550.65

0.5

0.5

0.5––––檢測方法1.檢測非特異性抗體----使用類脂質(zhì)抗原的血清學(xué)試驗(yàn)：RPR、TRUST2.檢測特異性抗體----使用密螺旋體抗原的血清學(xué)試驗(yàn)：FTA-ABS、TPHA、TPPA、ELISA、WB梅毒螺旋體抗體血清盤梅毒螺旋體抗體血清盤TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR膠體金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++

++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++

++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082

1.329

0.90

0.027

0.662

+–Hook效應(yīng)原倍1：101：201：401：801：16013.3572.9462.0991.4280.9360.49042.2772.2561.9701.6151.0600.60371.7033.0662.9383.0233.1252.289232.3603.0892.8842.9752.2581.481梅毒螺旋體抗體血清盤1、4、7、23號血清稀釋結(jié)果顯示存在hook效應(yīng)。IgM抗體漏檢梅毒螺旋體抗體血清盤TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR膠體金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++

++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++

++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082

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+–使用方法質(zhì)控血清都經(jīng)過滅活處理，但仍應(yīng)按照有潛在生物傳染