肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌機理研究

液，并在4℃下避光保存。營養(yǎng)肉湯(NutrientBroth)和營養(yǎng)瓊脂(Nutrient無菌操作臺(蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司)等。恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，進行菌種的復(fù)蘇。之后，將菌液轉(zhuǎn)接至新營養(yǎng)肉湯稀釋至不同濃度(如32mg/mL),分別加入含有對數(shù)生長對照組。將各組置于37℃恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，觀察細菌生長情積為1mL。將各組置于37℃恒溫搖床中培養(yǎng)24小時，觀察細菌生長 源性致病微生物。該菌最適宜生長溫度為37℃,pH為4,耐高鹽，金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力，在80℃以上的高溫高鹽環(huán)境，最高可以耐受15%濃度的NaCl溶液。由于細菌本身結(jié)構(gòu)特點，利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死。金黃色葡起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右，金黃色葡腸毒素是一種單鏈小分子蛋白，分子量約26-29kDa,相對分癥狀。研究已發(fā)現(xiàn)多種類型的腸毒素或類腸毒素，除傳統(tǒng)腸毒素A我國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會于2013年發(fā)布《食品安全國家品等8大類食品中，同批次采集5份樣品，每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出1000CFU/g,僅允許其中1份樣品在100~1000菌依據(jù)國家標準《食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗》(GB410-2016)中的方法進行。國家標準執(zhí)行內(nèi)(例如干酪，土豆沙拉，火腿和牛奶)中的金黃色葡萄球菌。該技術(shù)主要包括聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)技術(shù)，核酸探針技術(shù)，環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)等技術(shù)。①聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)：該方法的原理是在DNA聚合酶的作用下，游離的脫氧核糖核酸參照堿基互補配對的原則，以模板DNA為主鏈，強、敏感度高，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域中。PCR作為致病微生物的檢測方法，穩(wěn)定性強，是主流的檢測方法。在微生物檢測應(yīng)用中，引物的設(shè)計以及靶序列的選擇是PCR方法的核心。PCR法同時會對實驗造成干擾。與其他方法相比，PCR技術(shù)儀器設(shè)備價格高，需要花費的成本較高，推廣普及需要一定的時間和資金支持。②核酸探針技術(shù)：通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術(shù)，通過檢測該段特異性的標記物，從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學(xué)檢測技術(shù)的靈敏度高、特異性強的優(yōu)點，但是實驗周期長，操作繁瑣，如果樣品中目標微生物含量過低，極易造成樣品目標微生物未檢出，出現(xiàn)假陰性③環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)：該技術(shù)基于DNA擴增技術(shù)，能夠在恒溫2022年9月，南京郵電大學(xué)團隊構(gòu)建了一種由透明質(zhì)酸、光敏葡菌”,隸屬于葡萄球菌屬，是革蘭氏陽性菌代表，為一種常見的食源性致病微生物。該菌最適宜生長溫度為37℃,pH為4,耐高鹽，可在鹽濃度接近10%的環(huán)境中生長。金黃色葡萄球菌常寄生于人和動金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力，在80℃以上的高溫高鹽環(huán)境，最高可以耐受15%濃度的NaCl溶液。由于細菌本身結(jié)構(gòu)特點，利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死。金黃色葡起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右，金黃色葡腸毒素是一種單鏈小分子蛋白，分子量約26-29kDa,相對分我國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會于2013年發(fā)布《食品安全國家品等8大類食品中，同批次采集5份樣品，每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出1000CFU/g,僅允許其中1份樣品在100~1000菌依據(jù)國家標準《食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗》(GB410-2016)中的方法進行。國家標準執(zhí)行內(nèi)容包括定性檢測和定量檢測兩部分。在無菌條件下接種到肉湯中進行前增菌，最后將培養(yǎng)物接種劃線，根據(jù)生化鑒定方法進行血清學(xué)鑒定。傳統(tǒng)生化鑒定方法操作簡單，穩(wěn)定性強，成本低，是最常用的鑒定方法。免疫學(xué)檢測方法主要是基于免疫學(xué)理論研究，其是通過設(shè)計的抗原、抗體和免疫細胞，檢測抗原和抗體的結(jié)合以及免疫細胞分泌的細胞因子的，從而達到檢測目的一種實驗方法。該技術(shù)方法主要包括酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法、免疫膠體金法等。①酶聯(lián)免疫法：其原理是利用抗體與抗原在載體表面的特異性結(jié)合，加入某種酶，酶與抗體或抗原結(jié)合在一起，從而形成可以跟蹤抗體或抗原的標記物，由于抗原或抗體與受檢樣品的反應(yīng)產(chǎn)生抗原或抗體的復(fù)合物，此時加入酶反應(yīng)顯色底物，產(chǎn)物的量的大小與檢測物質(zhì)的量的大小呈正相關(guān)，分析顯色情況從而確定樣品中待檢測物的含量。已經(jīng)開發(fā)了幾種根據(jù)ELISA技術(shù)用于檢測培養(yǎng)上清液和食物樣品(例如干酪，土豆沙拉，火腿和牛奶)中的金黃色葡萄球菌。②免疫熒光法：免疫熒光技術(shù)利用熒光色素對抗體或抗原進行標記，然后檢測目標抗原或抗體?？乖涂贵w特異結(jié)合后，通過考察熒光信號的強弱進行定性定量檢測。與酶介導(dǎo)的免疫測定相比，基于熒②核酸探針技術(shù)：通過使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術(shù)，通過檢測該段特異性的標記物，從而判斷是否含有目標微生物。核酸探針具有分子生物學(xué)檢測技術(shù)的靈敏度高、特異性強的優(yōu)點，但是實驗周期長，操作繁瑣，如果樣品中目標微生物含量過低，極易造成樣品目標微生物未檢出，出現(xiàn)假陰性③環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)：該技術(shù)基于DNA擴增技術(shù)，能夠在恒溫花費成本較低，且對儀器要求低，能夠廣泛利用在食源性致病微生物試劑盒法：試劑盒法通常將十多種，甚至幾十種培養(yǎng)基或成分集中在特定微型裝置內(nèi)，通過觀察微生物的生長和代謝過程的某些產(chǎn)物縮短了檢測時間。此法可大大縮短測試時間，在24h內(nèi)得出結(jié)果，甚至某些可縮短至4h內(nèi)。用于檢測金黃色葡萄球菌的成品試劑盒有API、測試片法：其將紙膜、紙片或膠片附著相關(guān)培養(yǎng)基和特定顯色液作為金葡菌的培養(yǎng)載體，依據(jù)金葡菌在載體上的生長以及顯色情況，