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ortho-TopolinRiboside對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)機(jī)制
摘要:肝癌是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,且其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。盡管有多種治療方法,然而對(duì)于晚期肝癌的治療仍面臨很大挑戰(zhàn)。因此,尋找高效、低毒副作用的新型抗肝癌藥物至關(guān)重要。最近的研究表明,ortho-TopolinRiboside(orto-TR)是一種植物生長(zhǎng)素,對(duì)多種腫瘤類型具有抗癌活性。本研究旨在探究ortho-TR對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的凋亡誘導(dǎo)機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)方法:使用MTT法測(cè)定ortho-TR處理后SMMC-7721細(xì)胞的細(xì)胞毒性。通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率。使用Westernblotting分析細(xì)胞中的凋亡相關(guān)蛋白。
結(jié)果:ortho-TR在濃度依賴性下抑制了SMMC-7721的生存能力,IC50為15μM。此外,ortho-TR導(dǎo)致了細(xì)胞周期靜止于G1期,并增加了凋亡率。在分子水平上,ortho-TR出現(xiàn)了Bax、Bcl-2、caspase-9和caspase-3的表達(dá)改變,這些蛋白在細(xì)胞凋亡中起關(guān)鍵作用。
結(jié)論:ortho-TR通過(guò)調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白,誘導(dǎo)了SMMC-7721細(xì)胞的凋亡。這些發(fā)現(xiàn)揭示了ortho-TR對(duì)于抗肝癌治療的潛在作用,為肝癌治療提供了新的治療策略。
關(guān)鍵詞:ortho-TopolinRiboside,肝癌,SMMC-7721細(xì)胞,凋亡,細(xì)胞周期,凋亡相關(guān)蛋白
引言
肝癌是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率在過(guò)去幾年中不斷上升。盡管有多種治療方法,如手術(shù)切除、放療和化療,然而對(duì)于晚期肝癌的治療仍面臨很大挑戰(zhàn)。因此,尋找高效、低毒副作用的新型抗肝癌藥物具有重要意義。
ortho-TopolinRiboside(ortho-TR)是一種植物生長(zhǎng)素,已被證實(shí)對(duì)多種腫瘤類型具有抗癌活性。然而,關(guān)于ortho-TR在肝癌細(xì)胞中的抗癌作用和凋亡誘導(dǎo)機(jī)制的研究尚不充分。因此,本研究旨在探究ortho-TR對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的凋亡誘導(dǎo)機(jī)制。
材料與方法
細(xì)胞培養(yǎng):人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721通過(guò)RPMI1640培養(yǎng)基添加10%胎牛血清在37°C的5%CO2中進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn):MTT法用于測(cè)定ortho-TR處理后SMMC-7721細(xì)胞的細(xì)胞毒性,測(cè)定IC50。
流式細(xì)胞術(shù):使用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期和凋亡率。通過(guò)染色劑PI和AnnexinV-FITC進(jìn)行雙染。
Westernblotting:用于分析細(xì)胞中的凋亡相關(guān)蛋白。使用特定抗體檢測(cè)Bax、Bcl-2、caspase-9和caspase-3的表達(dá)。
結(jié)果與討論
MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ortho-TR在濃度依賴性下抑制了SMMC-7721的生存能力。IC50為15μM。此外,流式細(xì)胞術(shù)分析表明,ortho-TR處理后SMMC-7721細(xì)胞周期呈現(xiàn)G1期靜止,并且凋亡率顯著提高。
進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ortho-TR導(dǎo)致了Bax蛋白的顯著上調(diào)和Bcl-2蛋白的下調(diào)。這些結(jié)果表明,ortho-TR通過(guò)改變Bax/Bcl-2比例,調(diào)控了凋亡相關(guān)途徑。進(jìn)一步的Westernblotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ortho-TR處理還導(dǎo)致了caspase-9和caspase-3蛋白的表達(dá)上調(diào)。這些蛋白在細(xì)胞凋亡中起關(guān)鍵作用。
結(jié)論
本研究結(jié)果表明,ortho-TR通過(guò)調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白,誘導(dǎo)了SMMC-7721細(xì)胞的凋亡。這些發(fā)現(xiàn)揭示了ortho-TR對(duì)于抗肝癌治療的潛在作用,為肝癌治療提供了新的治療策略。
然而,本研究還需要進(jìn)一步的研究來(lái)探究ortho-TR的分子機(jī)制以及其在體內(nèi)抗肝癌作用的有效性。此外,還可以進(jìn)一步探索ortho-TR與其他抗癌藥物的聯(lián)合應(yīng)用,以增強(qiáng)其抗肝癌活性。綜上所述,ortho-TR有望成為一種具有潛力的抗肝癌藥物總之,本研究結(jié)果顯示,ortho-TR通過(guò)調(diào)控凋亡相關(guān)途徑,誘導(dǎo)了SMMC-7721肝癌細(xì)胞的凋亡,并且抑制了其生存能力。這一發(fā)現(xiàn)揭示了ortho-TR作為一種潛在的抗肝癌治療藥物的作用機(jī)制,為肝癌治療提供了新的治療策略。然而,進(jìn)一步的研究仍然需要來(lái)探究ortho-TR
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