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文檔簡介

第二十章金免疫技術(shù)教學(xué)目標(biāo)掌握膠體金免疫滲濾技術(shù)及免疫層析技術(shù)的基本原理及技術(shù)要點(diǎn)。熟悉膠體金免疫技術(shù)的方法學(xué)評價(jià)。了解金免疫技術(shù)試劑盒的組成。知識目標(biāo)技能目標(biāo)掌握金免疫技術(shù)的操作方法、正確判讀和分析結(jié)果。思政-素質(zhì)目標(biāo)臨床免疫學(xué)思維、生物安全、質(zhì)控意識、責(zé)任意識。膠體金免疫滲濾技術(shù)的檢測原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。膠體金免疫層析技術(shù)的檢測原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。金免疫技術(shù)的方法學(xué)評價(jià)及臨床意義。本章要點(diǎn)膠體金免疫層析技術(shù)二三一膠體金免疫滲濾技術(shù)金免疫技術(shù)的評價(jià)與應(yīng)用目錄免疫滲濾試驗(yàn)始創(chuàng)于1985年,最初以酶作為標(biāo)記物。20世紀(jì)90年代初金免疫滲濾技術(shù)得到了快速發(fā)展,用于檢測各種傳染病的抗體和腫瘤標(biāo)志物等。目前臨床中用于檢測尿液HCG的“金標(biāo)”早孕診斷試劑就是應(yīng)用這種方法。一膠體金免疫滲濾技術(shù)將抗原或抗體點(diǎn)加在固相載體硝酸纖維素膜上,制成抗原或抗體包被的微孔濾膜并貼置于吸水材料上,依次在膜上滴加標(biāo)本、免疫金及洗滌液等,液體很快滲入吸水材料中,陽性反應(yīng)即在膜上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)。一、檢測原理二、方法類型雙抗體夾心法測抗原

間接法測抗體

膠體金反應(yīng)板膠體金標(biāo)記物洗滌液抗原參照品或抗體陽性對照品

三、關(guān)鍵技術(shù)(一)試劑盒組成1將反應(yīng)板平放于實(shí)驗(yàn)臺面上,于小孔內(nèi)滴加含待測抗原的標(biāo)本1~2滴,待完全滲入,待測抗原與膜上的抗體反應(yīng)而結(jié)合在膜上。2于小孔內(nèi)滴加膠體金標(biāo)記抗體試劑1~2滴,待完全滲入,使膠體金標(biāo)記抗體與結(jié)合在膜上的待測抗原反應(yīng)。

(二)技術(shù)要點(diǎn)3于小孔內(nèi)滴加洗滌液2~3滴,待完全滲入,洗去未結(jié)合的膠體金標(biāo)記抗體。4在膜中央有清晰的淡紅色或紅色斑點(diǎn)顯示者判定為陽性反應(yīng);反之則為陰性反應(yīng)。斑點(diǎn)呈色

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