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第二十章金免疫技術(shù)教學(xué)目標(biāo)掌握膠體金免疫滲濾技術(shù)及免疫層析技術(shù)的基本原理及技術(shù)要點。熟悉膠體金免疫技術(shù)的方法學(xué)評價。了解金免疫技術(shù)試劑盒的組成。知識目標(biāo)技能目標(biāo)掌握金免疫技術(shù)的操作方法、正確判讀和分析結(jié)果。思政-素質(zhì)目標(biāo)臨床免疫學(xué)思維、生物安全、質(zhì)控意識、責(zé)任意識。膠體金免疫滲濾技術(shù)的檢測原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。膠體金免疫層析技術(shù)的檢測原理、方法類型和關(guān)鍵技術(shù)。金免疫技術(shù)的方法學(xué)評價及臨床意義。本章要點膠體金免疫層析技術(shù)二三一膠體金免疫滲濾技術(shù)金免疫技術(shù)的評價與應(yīng)用目錄免疫層析技術(shù)的原理與滲濾技術(shù)相同,不同點在于液體的移動是基于層析作用的橫流,而不是通過直向的穿流。該方法的試劑為試紙條形式,結(jié)構(gòu)簡單。測定項目包括HCG等激素、腫瘤標(biāo)志物、心血管病標(biāo)志物、傳染病的抗原和抗體等。膠體金免疫層析技術(shù)二將各種反應(yīng)試劑分點固定在試紙條上,檢測標(biāo)本滴加在試紙條的一端,通過層析作用使樣品在層析材料上泳動,樣本中的待測物與試紙條上的試劑發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),形成的復(fù)合物被富集或固定在層析條上的特定區(qū)域(檢測線),無關(guān)物則越過該區(qū)域而被分離,通過膠體金的呈色條帶判讀實驗結(jié)果。一、檢測原理雙抗體夾心法測抗原二、方法類型AGTBC競爭法測抗原AGTCB
A、B兩端分別粘貼吸水材料,G處為干燥固定在玻璃纖維膜等材料上的膠體金結(jié)合物,T處粘附有已知的抗體或抗原,C處為粘附的質(zhì)控品(抗免疫金抗體),T、C點物質(zhì)往往以直線的形式包被在膜上。三、關(guān)鍵技術(shù)(一)試劑盒組成AGTCB以雙抗體夾心法為例:1將試紙條標(biāo)記線一端浸入待測標(biāo)本中2秒~5秒或在標(biāo)本加樣處加一定量的待檢標(biāo)本,平放于水平桌面。25min~20min內(nèi)觀察結(jié)果。3結(jié)果判斷。(二)技術(shù)要點吸水墊結(jié)合物墊NC膜觀察窗吸水墊待測標(biāo)本層析金標(biāo)抗體
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