課件速覽-人造沸石吸附細(xì)胞色素C

項(xiàng)目二

細(xì)胞色素C的生產(chǎn)任務(wù)五人造沸石吸附細(xì)胞色素C嚴(yán)格遵守GMP和執(zhí)行人造沸石吸附崗位GMP，預(yù)處理人造沸石及裝吸附柱，完成料液吸附、洗滌和產(chǎn)物洗脫操作，并再生人造沸石任務(wù)描述人造沸石吸附細(xì)胞色素C2任務(wù)支撐（一）人造沸石吸附的目的與作用

人造沸石為吸附用分子篩，能把直徑大小、極性程度和飽和程度等不同的分子分離開。細(xì)胞色素C吸附于人造沸石上后，用自來水洗滌除去停留于人造沸石孔徑但未吸附的雜質(zhì)，用0.2%氯化鈉溶液洗滌除去吸附得不緊密的雜質(zhì)，最后用25%硫酸銨溶液把細(xì)胞色素C洗脫下來。洗脫液中還殘留與細(xì)胞色素C吸附能力相似的雜質(zhì)。3人造沸石吸附細(xì)胞色素C（二）吸附層析技術(shù)41.吸附劑的概念和分類吸附劑是能有效地從氣體或液體中吸附其中某些成分的固體物質(zhì)。吸附劑一般有以下特點(diǎn)：大的比表面、適宜的孔結(jié)構(gòu)及表面結(jié)構(gòu)；對(duì)吸附質(zhì)有強(qiáng)烈的吸附能力，一般不與吸附質(zhì)和介質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；制造方便，容易再生；有良好的機(jī)械強(qiáng)度等等。（二）吸附層析技術(shù)52.吸附劑的作用機(jī)制吸附是一種建立在分子擴(kuò)散基礎(chǔ)上的物質(zhì)表面現(xiàn)象。以固體表面和吸附分子間作用力的性質(zhì)區(qū)分，吸附作用大致可分為物理吸附、化學(xué)吸附和離子交換吸附。（二）吸附層析技術(shù)63.吸附劑的物理性質(zhì)絕大多數(shù)吸附劑，如活性炭、硅膠、硅藻土等都是多孔性物質(zhì)，這些孔是由組成吸附劑的微粒堆成的?？椎男螤罡鳟?，極為復(fù)雜。由于多孔性，吸附劑一般具有很大的內(nèi)表面（由毛細(xì)管壁或微孔內(nèi)壁組成的表面）。吸附作用除與吸附劑和吸附質(zhì)本身的化學(xué)特性有關(guān)外，還與吸附劑的結(jié)構(gòu)特性緊密相關(guān)。表征吸附劑性能的參數(shù)主要有孔徑、比表面積、密度、孔隙率、孔積等。（二）吸附層析技術(shù)74.吸附劑的種類工業(yè)上常用的吸附劑有硅膠、活性氧化鋁、活性炭、分子篩等，另外還有針對(duì)某種組分選擇性吸附而研制的吸附材料。0504030201生產(chǎn)前準(zhǔn)備吸附柱的準(zhǔn)備產(chǎn)品吸附、洗滌產(chǎn)物洗脫、人造沸石再生任務(wù)實(shí)施8人造沸石吸附細(xì)胞色素C清場（一）生產(chǎn)前準(zhǔn)備確認(rèn)是否有前批清場合格證副本，確認(rèn)生產(chǎn)環(huán)境、衛(wèi)生和設(shè)備器具是否符合要求；填寫人造沸石吸附產(chǎn)前檢查記錄；領(lǐng)用原輔料和耗材，領(lǐng)用或配制生產(chǎn)用溶液。（二）吸附柱的準(zhǔn)備1.人造沸石的預(yù)處理稱取人造沸石約60g，置于1000mL的燒杯中。加入500mL蒸餾水，攪拌，使人造沸石懸于液相中，停止攪拌，靜置12s。用傾瀉法除去不下沉的顆粒，燒杯中保留約150mL蒸餾水浸泡人造沸石，待用。2.裝填吸附柱取一根已清潔的具砂板玻璃層析柱（φ30mm×30cm），垂直桌面固定于鐵架臺(tái)上。關(guān)閉旋塞，向柱內(nèi)加蒸餾水20mL，將燒杯中的人造沸石及蒸餾水一次性倒入柱內(nèi)。待人造沸石自然沉降，檢查裝柱質(zhì)量，確認(rèn)柱內(nèi)無氣泡。任務(wù)實(shí)施9（三）產(chǎn)品吸附1.上料打開旋塞，將蒸餾水逐漸放出，至蒸餾水液面略高于人造沸石面，關(guān)閉旋塞。緩緩加入少量提取液，打開旋塞，控制流量使柱出口流出液流速保持在1.0mL/min，其余提取液置于下口瓶中，隨著吸附的進(jìn)行逐漸加入到吸附柱中。2.吸附隨時(shí)觀察流出液顏色應(yīng)為黃色或微紅色，并于每10min記錄一次。3.卸料待全部料液經(jīng)過吸附柱，柱出口處無液體流出，關(guān)閉旋塞。取下層析柱，將人造沸石取出，置于500mL燒杯中，觀察其顏色，應(yīng)為紅色。任務(wù)實(shí)施10（四）洗滌1.自來水洗滌向盛有人造沸石的燒杯中加入適量自來水，攪拌洗滌人造沸石。停止攪拌后，待人造沸石沉降，傾出液體。2.蒸餾水洗滌向盛有人造沸石的燒杯中加入適量蒸餾水，攪拌洗滌人造沸石。停止攪拌后，待人造沸石沉降，傾出液體。觀察傾出液，應(yīng)為清水，如有雜質(zhì)或帶顏色，應(yīng)重復(fù)此步驟，直至傾出液為清水。3.0.2%氯化鈉溶液洗滌向盛有人造沸石的燒杯中加入100mL0.2%氯化鈉溶液，攪拌洗滌人造沸石。停止攪拌后，待人造沸石沉降，傾出液體。任務(wù)實(shí)施11（五）產(chǎn)物洗脫1.裝柱按照“（二）吸附柱的準(zhǔn)備”中裝填吸附柱的步驟，將經(jīng)洗滌的人造沸石裝入玻璃柱內(nèi)。2.洗脫洗脫液為25%硫酸銨溶液（飽和度大約為45%）。向吸附柱中緩緩加入少量洗脫液，打開旋塞，控制流量使柱出口流出液流速保持在2.0mL/min，其余洗脫液置于下口瓶中，隨著洗脫的進(jìn)行逐漸加入到吸附柱中。用試管收集流出的洗脫液，至洗脫液顏色不為紅色時(shí)，停止洗脫。合并所有紅色的洗脫液，待用。任務(wù)實(shí)施12（六）人造沸石再生將使用過的沸石，先用自來水洗去硫酸銨，再用0.2mol/LNaOH和1mol/LNaCl混合液洗滌至白色，然后用蒸餾水反復(fù)洗到pH為7～8。（七）清場檢查、整理各項(xiàng)記錄。規(guī)范地存放生產(chǎn)用試劑，清洗器具，維護(hù)設(shè)備，處置廢物和廢液，清潔、消毒工作臺(tái)和潔凈室。最后，填寫清場合格證。任務(wù)實(shí)施13注意：請(qǐng)?jiān)谌蝿?wù)實(shí)施過程中規(guī)范填寫各項(xiàng)紀(jì)錄，不可補(bǔ)填和篡改！知識(shí)學(xué)習(xí)反思與反饋學(xué)習(xí)成果實(shí)踐操作考核與評(píng)價(jià)14拓展任務(wù)活性炭吸附實(shí)訓(xùn)15查閱資料，了解吸附等溫線含義。查閱設(shè)計(jì)《活性炭吸附實(shí)訓(xùn)操作記錄》，在任務(wù)實(shí)施過程中同步填寫。根據(jù)實(shí)訓(xùn)操作具體步驟，繪制吸附等溫線并完成相關(guān)計(jì)算。設(shè)計(jì)實(shí)操設(shè)計(jì)（一）任務(wù)描述16（二）實(shí)訓(xùn)材料（1）儀器設(shè)備。解剖剪、解剖刀、燒杯、平皿、量筒、勻漿管、勻漿器、勻漿搗桿、紗布、載玻片、離心機(jī)、顯微鏡。（2）藥品試劑。0.9％NaCl、預(yù)冷的0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化鈣溶液、l％甲苯胺蘭、0.02％詹納斯綠B染液。（3）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。小鼠。17（三）實(shí)訓(xùn)操作030