北京海淀區(qū)北京一零一中學(xué)2024年高三3月份第一次模擬考試生物試卷含解析

北京海淀區(qū)北京一零一中學(xué)2024年高三3月份第一次模擬考試生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．如圖表示某二倍體動物細(xì)胞分裂的相關(guān)圖像。以下說法正確的是（）A．甲圖和丙圖所示細(xì)胞都可能發(fā)生基因重組B．乙圖和丙圖所示細(xì)胞都含有兩個染色體組C．丁圖所示細(xì)胞是次級精母細(xì)胞或第一極體D．丙圖和丁圖所示細(xì)胞與戊圖所示比例相符2．下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D．毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵3．某研究小組進行“制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型”的活動。下列敘述正確的是（）A．制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色各不相同B．制作脫氧核苷酸模型時，每個磷酸上連接一個脫氧核糖和一個堿基C．制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了堿基互補配對原則D．選取材料時，用4種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和堿基4．不同層次的生命系統(tǒng)均需要物質(zhì)和能量不斷地輸入和輸出，下面敘述不正確的是（）A．人體成熟的紅細(xì)胞利用無氧呼吸獲得所需的能量B．衰老細(xì)胞膜通透性改變使物質(zhì)運輸能力降低并影響到細(xì)胞的新陳代謝C．光合速率大于呼吸速率時，植物體可積累生長所需的有機物D．生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者固定的能量大于消費者和分解者呼吸作用消耗的能量即可維持生態(tài)系統(tǒng)正常的功能5．下列關(guān)于動物細(xì)胞編程性死亡的敘述，正確的是A．細(xì)胞癌變屬于細(xì)胞編程性死亡B．細(xì)胞編程性死亡屬于正常生理過程C．細(xì)胞編程性死亡屬于細(xì)胞分化過程D．細(xì)胞編程性死亡與基因表達(dá)無關(guān)6．在農(nóng)業(yè)以及畜牧業(yè)的生產(chǎn)中，許多措施體現(xiàn)了對生態(tài)學(xué)原理的應(yīng)用，下列敘述正確的是（）A．農(nóng)田除草降低了種間競爭，提高了能量傳遞效率B．利用性引誘劑殺死某害蟲的雄蟲可降低該害蟲的K值C．10萬“鴨子軍隊”出征巴基斯坦滅蝗屬于生物防治，可有效避免環(huán)境污染D．增加人工林生物種類和數(shù)量可提高其營養(yǎng)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度和恢復(fù)力穩(wěn)定性二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）谷氨酸是哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在機體調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。（1）谷氨酸是一種含有2個羧基的非必需氨基酸，這2個羧基在其分子結(jié)構(gòu)中的位置是___________。（2）谷氨酸在神經(jīng)元細(xì)胞體中生成后，會借助囊泡膜上的谷氨酸轉(zhuǎn)運體逆濃度梯度轉(zhuǎn)運到囊泡中貯存，這種跨膜運輸方式是___________。興奮傳導(dǎo)到神經(jīng)末梢后，神經(jīng)末梢將谷氨酸釋放并作用于突觸后膜，引起下一個神經(jīng)元興奮。該過程完成的信號轉(zhuǎn)換是___________。（3）當(dāng)谷氨酸過度釋放時會成為一種毒素。一方面它與突觸后膜上的A受體結(jié)合，促進___________大量進入細(xì)胞內(nèi)，激活了一氧化氮合酶產(chǎn)生過量的一氧化氮（如圖），引起神經(jīng)元嚴(yán)重創(chuàng)傷；另一方面它還能引起神經(jīng)與肌膜對鈉離子的通透性___________（填“增高”或“降低”），引發(fā)神經(jīng)肌肉興奮性增強，導(dǎo)致小兒驚厥發(fā)作。若某種藥物可以通過作用于突觸來緩解小兒驚厥，其作用機理可能是___________。8．（10分）COVID-19感染者的主要癥狀是發(fā)熱、干咳、全身乏力等，其中發(fā)熱與機體的免疫增強反應(yīng)有關(guān)。COVID-19感染人體后，作用于免疫細(xì)胞，后者分泌白介素-1、白介素-6、腫瘤壞死因子和干擾素，這些物質(zhì)可作為內(nèi)源性致熱原進一步引起發(fā)熱癥狀。根據(jù)所學(xué)知識回答下列問題：（1）白介素-1、白介素-6、腫瘤壞死因子和干擾素等屬于免疫系統(tǒng)中的_______。（2）內(nèi)源性致熱原直接或通過中樞介質(zhì)作用于下丘腦____________的神經(jīng)細(xì)胞，通過系列生理活動使產(chǎn)熱增加，如肝臟和骨骼肌細(xì)胞中有機物氧化放能增強；散熱減少，如_____________（至少答兩點），體溫達(dá)到一個更高的調(diào)定點，此時機體的產(chǎn)熱量______（填“大于”、“小于”或“等于”）散熱量。（3）研究表明，在一定范圍內(nèi)的體溫升高(41℃～42℃)對特異性免疫應(yīng)答有普遍增強影響，其中包括T細(xì)胞介導(dǎo)的_________和B細(xì)胞介導(dǎo)的_______。9．（10分）單寧酶是一類能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖的水解酶，其可應(yīng)用于鮮柿脫澀處理，可消除其中的苦澀味。注：①選擇培養(yǎng)基成分：蔗糖、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、瓊脂、單寧酸、溴酚藍(lán)②溴酚藍(lán)在單寧酸環(huán)境中為藍(lán)紫色，在沒食子酸環(huán)境中為黃色（1）菌種的分離篩選將從柿子果園所取的土樣置于富集培養(yǎng)液的三角瓶中，30℃、搖床培養(yǎng)48h。稀釋適量倍數(shù)后，采用________法接種于選擇培養(yǎng)基上。根據(jù)選擇培養(yǎng)基的_________________（現(xiàn)象）作為挑取單寧酶產(chǎn)生菌的標(biāo)志。（2）粗酶液制備向培養(yǎng)菌種的三角瓶中按照培養(yǎng)基體積:緩沖液體積=1:1的量加入pH=5.0的檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液，在28℃條件下?lián)u床震蕩，用定性濾紙過濾，所得濾液即為粗酶液。檸檬酸-檸檬酸鈉的作用是____________________。請寫出一種純化得到單寧酶的方法及其原理_______________。（3）酶活力測定從生物體提取出的酶首先要檢測酶的活力，以便更好地將酶用于生產(chǎn)實踐，該酶活性大小的表示方法是_____________。在鮮柿脫澀的過程中，為了使酶能夠被反復(fù)利用，可采用______________技術(shù)。10．（10分）為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。（1）將草甘膦抗性基因作為_____，與Ti質(zhì)粒用相同的_____和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。（2）用_____處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細(xì)胞，將其與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在添加_____的培養(yǎng)基中，經(jīng)篩選1得到含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。（3）利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物_____（填字母）進行PCR。A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'（4）PCR擴增時需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計_____種引物，其原因是_____。（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否_____。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的_____過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。11．（15分）A、轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達(dá)乙肝病毒表面抗原的基因,由此可獲得用來預(yù)防乙肝的一種新型疫苗,其培育過程如圖所示(①至④代表過程,A至C代表結(jié)構(gòu)或細(xì)胞)：（1）圖中①過程用到的酶是____,所形成的B叫做______。（2）②過程常用____處理農(nóng)桿菌,使之成為_____細(xì)胞,利于完成轉(zhuǎn)化過程。（3）圖中③過程需要用到的激素是__________________________。（4）在分子水平上,可采用______的方法來檢測轉(zhuǎn)基因草莓果實提取液中有無相應(yīng)的抗原。B、野生馬鈴薯品種的植株具有較強的抗病、抗蟲、抗鹽堿、抗寒能力，但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專家共同做實驗研究，用野生馬鈴薯與馬鈴薯的體細(xì)胞進行雜交，培育出了生活能力強的雜交系馬鈴薯。（1）專家在實驗中，需用到的酶主要有__________________和____________________等。（2）專家在實驗中，用于誘導(dǎo)融合使用的化學(xué)試劑是____________________。（3）對于農(nóng)民，種植雜交系馬鈴薯除可獲得較高的收成外，還有什么優(yōu)點？（要求寫出兩點）_____________________________________________________________________________________

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

圖丙為減數(shù)第一次分裂后期，細(xì)胞質(zhì)均等分裂，因此該二倍體動物為雄性，且體細(xì)胞含有4條染色體。圖甲為有絲后期。圖乙為體細(xì)胞的示意圖。圖丁為減II前期（次級精母細(xì)胞）。戊圖表示減數(shù)分裂第二次分裂前期及中期，染色體數(shù):染色單體數(shù):DNA分子數(shù)=1:2:2?！驹斀狻緼、甲圖所示細(xì)胞進行的是有絲分裂，不能發(fā)生基因重組，A錯誤；B、乙圖和丙圖所示細(xì)胞都含有兩個染色體組，B正確；C、丁圖所示細(xì)胞只能是次級精母細(xì)胞，C錯誤；D、戊圖中染色體數(shù)為N，與其所示比例相符的是丁圖所示細(xì)胞，D錯誤。故選B。2、B【解析】

制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能在無氧條件下繁殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸?！驹斀狻咳樗峋且环N嚴(yán)格的厭氧菌，有氧氣存在時，其發(fā)酵會受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過程中所用的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低；果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯誤；毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯誤。3、A【解析】

本題考查制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的活動，需要制備若干四種顏色的堿基、一種顏色的脫氧核糖、一種顏色的磷酸，在制作的過程中注意堿基互補配對原則，即A與T配對、G與C配對?！驹斀狻緼、制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色應(yīng)該各不相同，A正確；B、制作脫氧核苷酸模型時，每個磷酸上連接一個脫氧核糖，但是不連接堿基，B錯誤；C、制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了嘧啶與嘌呤配對，但是不能體現(xiàn)堿基互補配對原則的全部內(nèi)容，C錯誤；D、選取材料時，用6種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和四種堿基，D錯誤。故選A。4、D【解析】

沒有線粒體的真核生物細(xì)胞只能進行無氧呼吸。代謝旺盛的細(xì)胞與外界進行物質(zhì)交換的能力強。凈光合速率=總光合速率-呼吸速率，當(dāng)凈光合速率大于0時，植物可積累有機物，表現(xiàn)為生長?！驹斀狻緼、人體成熟的紅細(xì)胞沒有線粒體，只能進行無氧呼吸，利用無氧呼吸獲得所需的能量，A正確；B、衰老細(xì)胞中細(xì)胞膜通透性改變，物質(zhì)運輸功能降低，細(xì)胞的新陳代謝減弱，B正確；C、植物體光合速率大于呼吸速率時，可積累生長所需的有機物，C正確；D、生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入為生產(chǎn)者固定的太陽能，能量輸出為各種生物（包括生產(chǎn)者、消費者和分解者）呼吸散失的能量，生產(chǎn)者固定的能量大于消費者和分解者呼吸作用消耗的能量時，生態(tài)系統(tǒng)的能量積累可能為負(fù)值，此時生態(tài)系統(tǒng)的功能不能正常運行，D錯誤。故選D。5、B【解析】

細(xì)胞編程性死亡是由基因所決定的細(xì)胞自動結(jié)束生命的過程，受到嚴(yán)格的由遺傳機制決定的程序性調(diào)控，是一種正常的生理過程。而細(xì)胞癌變是由于原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長和分裂失控所致。因此，B正確。6、C【解析】

提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的措施（1）控制對生態(tài)系統(tǒng)的干擾程度。（2）實施相應(yīng)的物質(zhì)、能量投入，保證生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)與功能的協(xié)調(diào)關(guān)系?！驹斀狻緼、農(nóng)田除草降低了雜草與莊稼的競爭程度，提高了能量利用率，A錯誤；B、利用性引誘劑殺死雄蟲，改變了性別比例，降低了出生率，但沒有改變K值，B錯誤；C、鴨子捕食蝗蟲屬于生物防治，可以避免過多使用農(nóng)藥造成環(huán)境污染，C正確；D、增加人工林中生物種類和數(shù)量可增加營養(yǎng)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度，從而使其抵抗力穩(wěn)定性增強，D錯誤。故選C?！军c睛】本題綜合考查生態(tài)學(xué)的知識，識記教材基本內(nèi)容即可解答。二、綜合題：本大題共4小題7、一個羧基與氨基連接在同一個碳原子上（或一個與中心C原子相連），另一個在R基上主動運輸電信號到化學(xué)信號到電信號Ca2+增高抑制突觸前膜釋放谷氨酸（或抑制突觸后膜鈉離子內(nèi)流）【解析】

由圖可知，突觸前膜釋放谷氨酸后，谷氨酸可以與突觸后膜上的A受體結(jié)合，引起突觸后膜的興奮?！驹斀狻浚?）每個氨基酸的中心碳原子上至少連有一個氨基和一個羧基，若有多余的氨基或羧基應(yīng)該位于R基上，故谷氨酸的一個羧基與氨基連接在同一個碳原子上（或一個與中心C原子相連），另一個在R基上。（2）谷氨酸在神經(jīng)元細(xì)胞體中生成后，會借助囊泡膜上的谷氨酸轉(zhuǎn)運體逆濃度梯度轉(zhuǎn)運到囊泡中貯存，這種跨膜運輸方式需要載體和能量，為主動運輸。興奮傳導(dǎo)到神經(jīng)末梢后，神經(jīng)末梢將谷氨酸釋放并作用于突觸后膜，引起下一個神經(jīng)元興奮。該過程會經(jīng)過電信號→化學(xué)信號（谷氨酸）→電信號的轉(zhuǎn)變。（3）谷氨酸可以與突觸后膜上的A受體結(jié)合，促進鈣離子大量進入細(xì)胞內(nèi)，激活了一氧化氮合酶產(chǎn)生過量的一氧化氮，引起神經(jīng)元嚴(yán)重創(chuàng)傷；另一方面它還能引起神經(jīng)與肌膜對鈉離子的通透性增強，鈉離子內(nèi)流增多，引發(fā)神經(jīng)肌肉興奮性增強，導(dǎo)致小兒驚厥發(fā)作。由于小兒驚厥是由于谷氨酸過度釋放引起的，故可以通過藥物抑制突觸前膜釋放谷氨酸?！军c睛】興奮在神經(jīng)纖維上以電信號的形式傳導(dǎo)，在突觸部位會經(jīng)過電信號→化學(xué)信號→電信號的轉(zhuǎn)化。8、免疫活性物質(zhì)體溫調(diào)節(jié)中樞汗腺分泌減少，毛細(xì)血管收縮，血流量減少等于細(xì)胞免疫體液免疫【解析】

免疫系統(tǒng)組成：免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫活性物質(zhì)。免疫包括非特異性免疫（第一道防線：皮膚、粘膜等；第二道防線：體液中殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞）和特異性免疫（第三道防線：體液免疫和細(xì)胞免疫）?！驹斀狻浚?）免疫活性物質(zhì)指由免疫細(xì)胞或其他細(xì)胞產(chǎn)生的發(fā)揮免疫作用物質(zhì)，如：抗體、淋巴因子、溶菌酶等。因此免疫細(xì)胞分泌的白介素-1、白介素-6、腫瘤壞死因子和干擾素屬于免疫系統(tǒng)中的免疫活性物質(zhì)。（2）體溫調(diào)節(jié)中樞在下丘腦，內(nèi)源性致熱原可直接作用于體溫調(diào)節(jié)中樞的神經(jīng)細(xì)胞，散熱減少的途徑包括：汗腺分泌減少，毛細(xì)血管收縮，血流量減少。人體維持體溫恒定的原理是機體的產(chǎn)熱量=散熱量，體溫達(dá)到一個更高的調(diào)定點，此時機體的產(chǎn)熱量等于散熱量。（3）在一定范圍內(nèi)的體溫升高（41℃～42℃）對特異性免疫應(yīng)答有普遍增強影響，其中包括T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫?！军c睛】答題關(guān)鍵在于掌握免疫調(diào)節(jié)和體溫調(diào)節(jié)過程，建立知識內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)。9、稀釋涂布平板法黃色圈（變色圈）直徑的大小作為緩沖溶液，抵制外界的酸和堿對溶液PH的影響，維持PH基本不變凝膠色譜法根據(jù)蛋白質(zhì)分子之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進行純化（或電泳法根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷，分子大小等差異進行純化）（或透析法根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小差異進行純化）單位時間內(nèi)單寧的降解量（或沒食子酸或葡萄糖的生產(chǎn)量）固定化酶（固定化細(xì)胞）【解析】

微生物的篩選需要使用選擇培養(yǎng)基，進行稀釋時需要無菌水；對微生物進行鑒定時還需要加入鑒別的指示劑；接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。據(jù)此分析作答?！驹斀狻浚?）稀釋適量倍數(shù)后，接種到選擇培養(yǎng)基的方法為稀釋涂布平板法；由題干信息知“單寧酶能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖”且“溴酚藍(lán)在單寧酸環(huán)境中為藍(lán)紫色，在沒食子酸環(huán)境中為黃色”，若存在單寧酶，則會從藍(lán)紫色變?yōu)辄S色，故可根據(jù)黃色圈（變色圈）直徑的大小作為挑取單寧酶產(chǎn)生菌的標(biāo)志。（2）本實驗中檸檬酸檸檬酸鈉的作用是作為緩沖溶液，抵制外界的酸和堿對溶液PH的影響，維持PH基本不變；可用凝膠色譜法對單寧酶進行純化，實驗原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進行純化。（或電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷，分子大小等差異進行純化）（或透析法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小差異進行純化）（3）“單寧酶是一類能夠水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖的水解酶”，故該酶活性的大小可用單位時間內(nèi)單寧的降解量（或沒食子酸或葡萄糖的生產(chǎn)量）表示；固定化酶等技術(shù)使酶能夠重復(fù)利用，而且還能提高產(chǎn)品的品質(zhì)?！军c睛】本題主要考查微生物的利用的知識，明確單寧酶的作用及擴大培養(yǎng)的機理的步驟是解題關(guān)鍵。10、目的基因限制性核酸內(nèi)切酶CaCl2潮霉素BD2保證基因的兩條反向平行的鏈都做模板，且其上堿基序列不同表達(dá)再分化【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）用相同的限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒后露出相同的黏性末端再用DNA連接酶連接，從而構(gòu)建基因表達(dá)載體，題中以草甘膦抗性基因作為目的基因。（2）依據(jù)圖中信息，農(nóng)桿菌用CaCl2處理后變成感受態(tài)細(xì)胞，將其與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在含有標(biāo)記基因表達(dá)的潮霉素培養(yǎng)基中篩選，從而獲得含目的基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。（3）根據(jù)已知草甘膦抗性基因的部分序列以及雙鏈DNA分子的結(jié)構(gòu)特點（反向平行），再結(jié)合DNA復(fù)制（PCR中）的特點，即子鏈合成的方向是從5’到3’，應(yīng)選擇引物B、D進行PCR擴增。（4）為使基因的兩條反向平行的鏈都做模板，而且其堿基序列不同，所以，PCR擴增時需要根據(jù)草甘膦抗性