一原發(fā)性紅斑肢痛癥家系的SCN9A基因突變檢測(cè)與排除定位的開題報(bào)告

一原發(fā)性紅斑肢痛癥家系的SCN9A基因突變檢測(cè)與排除定位的開題報(bào)告【摘要】一原發(fā)性紅斑肢痛癥（Erythromelalgia，EM）是一種罕見的遺傳性疾病，其主要癥狀為手腳肢體疼痛、紅斑、發(fā)熱等現(xiàn)象。研究表明，EM病因與SCN9A基因的突變有關(guān)。為了進(jìn)一步了解該家系中是否存在SCN9A基因突變，并排除其它可能的遺傳基因缺陷，本研究將使用基因測(cè)序技術(shù)對(duì)該家系成員進(jìn)行SCN9A基因突變檢測(cè)，以期為該家系提供準(zhǔn)確的遺傳咨詢?！娟P(guān)鍵詞】一原發(fā)性紅斑肢痛癥；SCN9A基因突變；家系；基因測(cè)序技術(shù)一、研究背景一原發(fā)性紅斑肢痛癥（Erythromelalgia，EM）是一種罕見的遺傳性疾病，其主要表現(xiàn)為手腳肢體疼痛、紅斑、發(fā)熱等癥狀。該疾病患者的痛感閾值降低，接觸熱物質(zhì)、運(yùn)動(dòng)以及其他生理刺激均可引起病癥發(fā)作。研究表明，EM病因與SCN9A基因的突變有關(guān)，這一基因突變導(dǎo)致神經(jīng)元的信號(hào)傳遞異常，從而引起痛感異常。目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了不同的SCN9A基因突變與EM病癥的發(fā)生有關(guān)。其中，最常見的突變是p.Ile848Thr，該突變?cè)谌蚍秶鷥?nèi)被廣泛報(bào)道。此外，還有一些較罕見的突變已經(jīng)被報(bào)道，包括p.Arg225Cys、p.Arg225His等等。在家系遺傳模式方面，EM主要表現(xiàn)為常染色體顯性遺傳，而導(dǎo)致疾病的基因主要位于9號(hào)染色體上。因此，遺傳咨詢?cè)谠摷膊〉牟∫蛟\斷和預(yù)防方面具有重要意義。二、研究?jī)?nèi)容本研究將針對(duì)一原發(fā)性紅斑肢痛癥家系進(jìn)行SCN9A基因突變檢測(cè)。研究中將采用基因測(cè)序技術(shù)，對(duì)該家系成員進(jìn)行SCN9A基因測(cè)序分析，以期發(fā)現(xiàn)SCN9A基因突變，進(jìn)一步了解該基因變異與家系中EM病癥的關(guān)聯(lián)性。具體研究?jī)?nèi)容如下：1.選取家系成員本研究將選擇一原發(fā)性紅斑肢痛癥家系中5名代表性成員作為樣本，包括2名患者和3名正常親屬。這些樣本中將包括最有可能攜帶SCN9A突變的成員，如患者和有親屬患有EM病癥的成員。2.提取DNA樣本提取具體如下：將每個(gè)成員的外周血采樣2ml，使用血液DNA提取試劑盒提取總DNA。3.突變檢測(cè)本研究將使用基因測(cè)序技術(shù)對(duì)SCN9A基因進(jìn)行突變檢測(cè)。具體操作如下：(1)對(duì)SCN9A基因進(jìn)行擴(kuò)增根據(jù)SCN9A基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物，利用PCR擴(kuò)增該基因片段。(2)純化PCR產(chǎn)物將PCR產(chǎn)物利用膠回收試劑進(jìn)行純化。(3)基因測(cè)序?qū)⒓兓蟮腜CR產(chǎn)物進(jìn)行基因測(cè)序，利用Sanger測(cè)序技術(shù)進(jìn)行分析。4.檢驗(yàn)和分析數(shù)據(jù)分析所得的測(cè)序數(shù)據(jù)，用VariantAnalysis軟件進(jìn)行分析，找出是否存在突變信號(hào)，進(jìn)一步確認(rèn)突變類型。三、研究意義本研究將為一原發(fā)性紅斑肢痛癥家系提供準(zhǔn)確的基因診斷，幫助家系成