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文檔簡介

關(guān)于常見免疫學(xué)檢查臨床常用免疫學(xué)檢查血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)測定血清補體測定細胞免疫檢測感染免疫檢測自身免疫檢查肝炎病毒標志物檢測腫瘤標志物檢測第2頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清免疫球蛋白分類Ig通常是指具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。應(yīng)用免疫電泳與超速離心分析可將Ig分5類:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一能夠通過胎盤的Ig。主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細胞合成與分泌。IgA:約占10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由腸系淋巴組織中的漿細胞產(chǎn)生。第3頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清免疫球蛋白IgM:分子量最大,由5個IgM單體通過J鏈連接。是最早出現(xiàn)的Ig,是抗原刺激后最早出現(xiàn)的抗體,其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高500~1000倍。測定方法:單向免疫擴散法(RID)或免疫比濁法。第4頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清免疫球蛋白

測定參考值參考值:

IgG:7.6~16.6g/L

(RID法)IgA:710~3350mg/LIgM:0.48~2.12g/L

第5頁,共69頁,2024年2月25日,星期天.臨床意義免疫球蛋白增高多克隆增高:常見于各種慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。單克隆增高:主要見于免疫增殖性疾病,如多發(fā)性骨隋瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。

第6頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

免疫球蛋白降低:常見于各類先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及長期使用免疫抑制劑的病人。血清IgD測定免疫擴散法:0~62mg/L

已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗“O”抗體等均屬IgD,但活性甚低。

第7頁,共69頁,2024年2月25日,星期天第8頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清M蛋白測定

(Mprotein,monoclonalimmunoglobulins)

是一種單克隆B淋巴細胞異常增殖時產(chǎn)生的IgG分子或片段,一般不具有抗體活性。

參考值:蛋白電泳法,免疫電泳法:陰性

意義:1.多發(fā)性骨髓瘤(MM),占35%~65%,其中IgG型占60%左右;IgA型占20%左右;輕鏈型占15%左右;IgD、IgE型罕見。2.巨球蛋白血癥。3.重鏈?。℉CDs)。4.半分子病。5.惡性淋巴瘤。6.良性M蛋白血癥。第9頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清補體測定補體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白,分3組:9種補體成分(C1~C9);B、D、P、H、I因子;補體調(diào)節(jié)蛋白,如C1抑制物、C4結(jié)合蛋白、促衰變因子等。總補體溶血活性(CH50)測定參考值試管法:50000~100000U/L

意義:增高見于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤及妊娠。降低見于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、嚴重?zé)齻?。?0頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

血清補體測定血清C3:主要由巨噬細胞和肝臟合成,在經(jīng)典激活途徑與旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。

參考值:免疫比濁法0.85~1.70g/L

增高作為急性時相蛋白,在急性炎癥、傳染病早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、抑制物排斥反應(yīng)時增高。降低補體合成能力降低;合成原料不足;消耗或丟失太多;先天性補體缺乏。第11頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

血清補體測定血清C4測定:由肝臟、吞噬細胞合成,參與補體的經(jīng)典激活途徑。參考值:單向免疫擴散法:0.197+/-0.109/L。臨床意義基本與C3相似,降低還見于多發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性C4缺乏癥等。第12頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清補體測定補體C1q測定參考值:0.179±0.04g/L臨床意義:與C3相似,降低還見于活動性混合性結(jié)締組織病、重度營養(yǎng)不良、腎病綜合征、重度聯(lián)合免疫缺陷病等。B因子測定-C3激活劑前體第13頁,共69頁,2024年2月25日,星期天細胞免疫檢查淋巴細胞表面標志物檢測㈠T淋巴細胞表面標志物檢測:E玫瑰花形成試驗、免疫熒光法(IFA)、熒光激活細胞分類法(FACS)、免疫金銀法以及免疫酶染色法等。E玫瑰花形成試驗SRBC+CD2參考值Et64.4%±6.7%免疫熒光法第14頁,共69頁,2024年2月25日,星期天T淋巴細胞表面標志物檢測意義可用于T淋巴細胞計數(shù),T淋巴細胞亞群的分類以及判斷T淋巴細胞的活化程度。CD3

分子表達于所有成熟T淋巴細胞的表面,是總T淋巴細胞的重要標志,CD3+常見于甲狀腺功能亢進、淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力以及器官移植后排斥反應(yīng)。CD3+主要見于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征以及聯(lián)合免疫缺陷病等。亦可見于惡性腫瘤、SLE、免疫抑制劑治療等。第15頁,共69頁,2024年2月25日,星期天T細胞分化抗原測定白細胞分化抗原(clusterdifferentiation,CD)CD3代表總T淋巴細胞,CD4是輔助、誘導(dǎo)T細胞的標志,CD8是抑制、殺傷性T細胞的標志。應(yīng)用單抗和熒光標記二抗反應(yīng)在熒光顯微鏡下或流式細胞儀中計數(shù)CD的百分率。參考值:免疫熒光法(IFA):CD3為63.1%±10.8%;CD4

為42.8%±9.5%;CD819.6%±5.9%;CD4/CD8為(2.2±0.7)/1。流式細胞術(shù):CD3

61%~85%;CD428%~58%;CD819%~48%;CD4/CD80.9~2.0/1。第16頁,共69頁,2024年2月25日,星期天T細胞分化抗原測定臨床意義CD3CD4+T細胞下降常見于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、嚴重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術(shù)、應(yīng)用免疫抑制劑等;升高見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動期。CD8+T細胞下降

常見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Sjogren綜合征、重癥肌無力、DM(II型)以及膜型腎小球腎炎等;升高見于傳染性單核細胞增多癥急性期、MCV以及慢性乙肝。CD4+/CD8+比值下降,常見于AIDS、瘤型麻風(fēng)病、惡性腫瘤進行期和復(fù)發(fā)時。也見于部分感染性疾病如傳染性單核細胞增多癥、MCV、血吸蟲病等;增高見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動期、SLE、Sjogren綜合征、重癥肌無力、膜型腎小球腎炎以及器官移植后排斥反應(yīng)等。第17頁,共69頁,2024年2月25日,星期天淋巴細胞功能檢測T細胞轉(zhuǎn)化試驗形態(tài)學(xué)法:T細胞轉(zhuǎn)化率60.1%±7.6%3H-TdR摻入法:培養(yǎng)淋巴細胞用液體閃樂爍儀測量,記錄每分鐘脈沖數(shù)(cpm)。SI(刺激指數(shù))=PHA刺激管cpm均值/對照管cpm均值SI>2為有意義,<2為淋巴細胞轉(zhuǎn)化率降低。第18頁,共69頁,2024年2月25日,星期天T細胞轉(zhuǎn)化試驗臨床意義判斷機體細胞免疫功能水平,降低常見于細胞免疫缺陷或細胞免疫功能低下者,如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥結(jié)核、肝硬化等。增高常見于Down綜合征。估計疾病的療效與預(yù)后第19頁,共69頁,2024年2月25日,星期天B淋巴細胞表面標志物檢測

表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等表面受體:B細胞抗原受體(BCR)、細胞因子受體(CKR)、補體受體(CR)與Fc受體等。B細胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B細胞的特征性表面標志。將熒光標記的抗不同類型Ig的單克隆抗體進行檢測,可將B細胞分為SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。第20頁,共69頁,2024年2月25日,星期天B淋巴細胞表面標志物檢測

參考值:免疫熒光法(羊抗人)(以攜帶該標志的細胞百分數(shù)表示)SmIg+細胞總數(shù):均值21%(16%~28%)SmIgG+細胞:均值7.1%(4%~13%)SmIgM+細胞:均值8.9%(7%~13%)SmIgA+細胞:均值2.2%(1%~4%)SmIgD+細胞:均值6.2%(5%~8%)SmIgE+細胞:均值0.9%(0%~1.5%)第21頁,共69頁,2024年2月25日,星期天B淋巴細胞表面標志物檢測

臨床意義SmIg+細胞增高

:常與B細胞惡性增殖有關(guān),主要見于慢淋、毛細胞白血病以及巨球蛋白血癥等。SmIg+細胞減低:主要與體液免疫缺陷有關(guān),常見于性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥、嚴重聯(lián)合免疫缺陷病等。第22頁,共69頁,2024年2月25日,星期天B淋巴細胞表面標志物檢測B細胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22測定參考值:FACS:CD19+細胞11.74%±3.73%臨床意義CD19為全部B細胞共有的表面標志,增高見于B細胞系統(tǒng)的惡性種瘤,減低見于體液免疫缺陷病。第23頁,共69頁,2024年2月25日,星期天NK細胞活性測定NK細胞能直接殺傷效應(yīng)細胞,具有抗腫瘤、抗感染和和免疫調(diào)節(jié)等功能,亦參與移植物排斥反應(yīng)、自身免疫病和超敏反應(yīng)的發(fā)生。LDH釋放法

參考值

細胞毒指數(shù):27.5%~52.5%51Cr釋放法參考值NK細胞活性(自然殺傷率):47.6%~76.8%第24頁,共69頁,2024年2月25日,星期天NK細胞活性測定臨床意義活性升高常見于病毒感染的早期,Down綜合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強劑治療患者。活性降低常見于惡性腫瘤、重癥聯(lián)合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制劑治療者等。腫瘤療效觀察及預(yù)后評價免疫調(diào)節(jié)功能

NK細胞可釋放INF-γ、INF-β和GM-CSF等細胞因子。第25頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

病毒性肝炎的實驗診斷

我國屬病毒性肝炎高發(fā)區(qū),全國有肝炎病人2700萬人,每年新發(fā)病例900萬人,HBsAg攜帶者達一億二千萬人。慢性肝炎中有50~70%有活性性病毒復(fù)制,30%發(fā)展為肝硬化,5~10%發(fā)展為肝癌,故我國又是原發(fā)性肝細胞癌的高發(fā)國家,慢性HBV攜帶者患肝癌危險性較非攜帶者高100倍。第26頁,共69頁,2024年2月25日,星期天HBV的形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài):球形顆粒,直徑約42nm外膜:厚約7nm,HBsAg+脂類內(nèi)核(核衣殼):直徑27nm,HBcAg、DNAP、病毒DNA、少量來源于宿主的磷酸激酶第27頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

HBV在血清中的存在形式完整的病毒顆粒(Dane顆粒),如前述,能復(fù)制,有傳染性;②乙肝表面抗原顆粒,為22nm的小球型顆粒,由HBsAg和脂類組成,不含DNA,不能復(fù)制,不具有傳染性*,數(shù)量最多;③管型顆粒,長30-40nm的,由HBsAg和脂類組成,不含DNA,不能復(fù)制,不具有傳染性*,血清中數(shù)量最少。第28頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

HBV的基因結(jié)構(gòu)

HBV基因組由一個雙鏈缺口環(huán)型DNA組成,約有3,200個核苷酸,含有4個開放讀碼框(ORF),分別為ORFS/PreS、ORFC、ORFP、和ORFX,分別編碼外膜蛋白(根據(jù)起始位點不同分別為HBsAg、前S1、前S2)、核殼蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和X蛋白(X抗原,HBxAg)。

第29頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

基因型1979年第一個HBVDNA全序列1988年日本學(xué)者將HBV分為A、B、C、D四個基因型。

(OkamotoH,etal.JGenVirol,1988;69:2575)1992年增加E、F兩型

(NorderH,etal.Virol,1992;73:3141)臨床意義不同的基因型可能致病性不同,我國以B、C型為主,臺灣發(fā)現(xiàn):50歲以上的肝硬化和肝細胞癌的患者C型較多,而50歲以下的肝細胞癌患者B型較多(KaoJH,etal.Gastroenterology,2000;118:554)。第30頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

目前實驗室常用的至少有四對抗原抗體系統(tǒng):

HBsAg和抗-HBs

HBcAg和抗-HBc

HBeAg和抗-HBe

Pre-S2和抗Pre-S2。第31頁,共69頁,2024年2月25日,星期天HBsAg陽性的意義

(1)HBV感染的潛伏期; (2)乙型肝炎急性期; (3)慢性或遷延性乙型肝炎活動期; (4)肝炎后肝硬化或原發(fā)性肝癌; (5)無癥狀HBsAg長期攜帶者。

(6)HbsAg陰性不能完全排除慢性乙型肝炎。第32頁,共69頁,2024年2月25日,星期天注意!一、血清分離不佳或用肝素抗凝血常導(dǎo)致HBsAg假陽性;二、HBsAg假陰性常見的原因為:①5%的急性感染者肝炎癥狀出現(xiàn)后仍陰性,極少數(shù)的慢性感染者也為HBsAg陰性,這種情況需要檢測抗HBc-IgM及HBVDNA;②S基因突變導(dǎo)致HBsAg的氨基酸結(jié)構(gòu)改變,由于多數(shù)商用試劑盒檢測系統(tǒng)采用的為多克隆抗體檢測HBsAg的a決定簇,這一區(qū)域的點突變即可導(dǎo)致臨界測定值或陰性結(jié)果;③由于慢性病毒攜帶者(低水平HBsAg攜帶者)或HBV感染潛伏期,HBsAg濃度低于檢測水平的下限。第33頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

血清抗-HBs檢測的意義(1)在乙型肝炎感染率調(diào)查時,HBsAg、抗-HBs和抗-HBc均為感染率的指標。在這三項指標中,只要其中一項陽性,表示受過HBV感染。(2)抗-HBs是對HBV免疫的指標,抗-HBs陽性率和滴度表示人群的免疫狀況。(3)乙型肝炎的診斷和鑒別診斷,在HBV感染后3個月,血清中出現(xiàn)抗-HBs。采集雙份血清(急性期和恢復(fù)期)同時檢測,抗-HBs陽轉(zhuǎn),或恢復(fù)期與急性期比較,抗體滴度有4倍或4倍以上增長,表示這次感染為HBV感染。(4)乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后,采集血清檢測抗-HBs,如抗-HBs陽轉(zhuǎn)或抗體滴度明顯提高,表示疫苗免疫效果良好。否則免疫效果不佳。(5)對乙型肝炎預(yù)后的判斷??梗璈Bs的出現(xiàn)表示疾病處于恢復(fù)期,預(yù)后較佳。第34頁,共69頁,2024年2月25日,星期天同時可檢出抗HBs及HBsAg見于以下幾種情形:急性HBV感染時一過性存在,兩者濃度均很低(以免疫復(fù)合物的形式出現(xiàn)),以后再采血檢測僅有抗HBs;前后或同時感染兩種亞型HBV,HBsAg短暫或持續(xù)存在反映其中一種亞型感染,抗HBs及HBsAg同時檢出通常要持續(xù)很久,且濃度均很高;抗HBs假陽性;編碼HBsAg的基因變異使得HBsAg抗原性改變,原型抗HBs不能將其清除。第35頁,共69頁,2024年2月25日,星期天抗-HBc檢測的意義

(1)

HBcAg是HBV感染和復(fù)制的標志之一,高滴度的抗HBc表示HBV現(xiàn)癥感染,低滴度的抗HBc表示過去感染,常與抗HBs并存。

(2)

高滴度的抗HBc-IgM是診斷急性肝炎的金指標,低度的抗HBc-IgM表示慢性肝炎急性發(fā)作。

(3)

血中HBcIgA的滴度與病毒復(fù)制不相關(guān),與肝組織病變有明顯的相關(guān)性,隨病情恢復(fù),HBcIgA消失,持續(xù)不降提示慢性化和病情進展。

(4)

在獻血員的篩選中是一項輔助指標。從血源血中檢出高滴度的抗-HBc,表示有傳染性,此血源不能作輸血用。

第36頁,共69頁,2024年2月25日,星期天注意!A、臨界陽性一般是假陽性,是由于IgM型引起的交叉反應(yīng)。B、抗HBc陰性而HBsAg陽性一般發(fā)生在免疫缺陷病例,這時存

HBV復(fù)制的其他標志如HBeAg及高滴度的HBVDNA。C、對抗HBc單獨陽性,排除假陽性后,美國CDC有以下解釋:①急性感染后的恢復(fù)早期(窗期)在HBV急性感染消退時,

HBsAg減少甚至消失,抗HBs尚未出現(xiàn),抗HBc是唯一能檢出的特異性指標,此時抗HBcIgM也為陽性。②被動轉(zhuǎn)移:HBsAg攜帶者母親所生的嬰兒可因母體抗體被動轉(zhuǎn)移(抗HBc可通過胎盤)而呈現(xiàn)抗HBc單獨陽性。③遠期感染伴抗HBs消失,這種情況通常在感染后多年才會發(fā)生,且相當少見(0.5%)。④遠期感染伴有低水平HBsAg。⑤HDV重復(fù)感染繼發(fā)HBsAg產(chǎn)生下降第37頁,共69頁,2024年2月25日,星期天抗HBc始終不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)者占一定比例,可能系1.與抗原復(fù)合2.種族差異3.免疫缺陷,如化療后4.基因變異第38頁,共69頁,2024年2月25日,星期天HBeAg:

A.傳染性:HBeAg是臨床上表示病毒復(fù)制較為實用的指標,因此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg攜帶者中,HBeAg及HBV-DNA檢測可以用來評估其傳染危險性,特別是對醫(yī)務(wù)界的HBsAg攜帶者,非常有必要了解他是否會傳染給他的病人,90%HBeAg陽性HBsAg攜帶者可以傳染給她們的新生兒,而HBeAg陰性或抗HBe陽性的孕婦中只有10%會傳染給嬰兒。

B.預(yù)后:急性期HBeAg的消失通常伴隨ALT的降低,預(yù)示著疾病的好轉(zhuǎn);HBeAg持續(xù)陽性超過12個星期提示HBV感染趨向慢性;HBeAg陽性的無癥狀者很少見;如果在慢性感染期HBeAg陽性,一般為慢性急性化或病人免疫缺陷,這種情況的病人如果又出現(xiàn)HBeAg的消失,則被認為是預(yù)后好的信號。第39頁,共69頁,2024年2月25日,星期天注意!

前C區(qū)基因變異(如1896位gua變?yōu)?arg導(dǎo)致終止密碼子的出現(xiàn)干擾了HBeAg的翻譯)導(dǎo)致不能生成和分泌HBeAg,血清中HBeAg陰性,但這種突變并不影響乙肝病毒的復(fù)制,仍可形成完整的病毒顆粒,該種情況下盡管檢測不到HBeAg,慢性HBV感染炎癥反應(yīng)也相當強。第40頁,共69頁,2024年2月25日,星期天抗-HBe:

A、反映血清感染性:通常情況下HBsAg(+)、抗HBe(+)病例的傳染性較低,但有部分病例盡管抗HBe(+)也具有很高的傳染性,因此,要評價HBeAg陰性血清的傳染性,推薦用檢測HBVDNA,1/3的病例能達到大于106基因組/mL;

B、監(jiān)視急性和慢性HBV感染:血清HBeAg消失、抗HBe出現(xiàn)對監(jiān)視急慢性HBV感染很有診斷價值,特別是抗HBe出現(xiàn)更有預(yù)見價值,在干擾素治療中出現(xiàn)表明疾病狀況的改善;

C、預(yù)后:抗HBe陽轉(zhuǎn)出現(xiàn)在HBeAg陰轉(zhuǎn)后早期(2周內(nèi)),可能預(yù)示急性肝炎恢復(fù)順利;如出現(xiàn)在晚期(HBeAg陰轉(zhuǎn)后6周以上)或不出現(xiàn)抗HBe,則提示病程遷延,可能發(fā)展為慢性遷延性肝炎或慢性活動性肝炎。第41頁,共69頁,2024年2月25日,星期天注意!HBeAg(-)/抗HBe(-)的慢性HBV感染有不同的感染狀態(tài):有的表示復(fù)制病毒已清除,但無抗HBe應(yīng)答;有的復(fù)制病毒一時減少,HBeAg消失后可再現(xiàn);有的由于前C區(qū)變異不能編碼合成HBeAg。第42頁,共69頁,2024年2月25日,星期天前S2抗原及抗體

pre-S2抗原檢測可作為判斷HBV復(fù)制的一項指標,同時可對HBV復(fù)制作出定量的推斷,動態(tài)測定pre-S2抗原的變化,有助于急、慢性乙型肝炎的治療預(yù)后的判斷??筽re-S2在急性乙型肝炎恢復(fù)早期出現(xiàn),并發(fā)揮其保護性抗體的作用,對觀察乙型肝炎病情進展、預(yù)后及疫苗免疫效果均有一定的作用。第43頁,共69頁,2024年2月25日,星期天常規(guī)檢測HBV抗原抗體的基本解釋HBsAg急慢性HBV感染;可能具有傳染性;濃度降低表明感染恢復(fù)HBeAg反映HBV復(fù)制;有傳染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢復(fù)抗-HBs感染后免疫;對疫苗的免疫應(yīng)答抗-HBe表示HBV低復(fù)制或不復(fù)制抗-HBc低滴度表示過去感染,高滴度表示現(xiàn)行感染抗HBc-IgM高滴度是診斷急性HBV感染最好的指標,監(jiān)視慢性HBV感染。第44頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

不同廠家和方法HBV標志物測定的比較

HBsAg抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc

進口 34 9 22 27 42A 34 9 12 18 37B 348 1314 37C 328 33 15 37

n=44PCR:+26-18

前S1:+20-24

抗前S1:+12-32第45頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

國產(chǎn)“兩對半”試劑與進口試劑比較(陽性符合率%)

ABCHBsAg100(34/34)100(34/34)94.1(32/34)抗-HBs100(9/9)88.9(8/9)88.9(8/9)HBeAg54.5(12/22)59.1(13/22)(33/22)抗-HBe66.7(18/27)51.9(14/27)55.6(15/27)抗-HBc88.1(37/42)88.1(37/42)88.1(37/42)第46頁,共69頁,2024年2月25日,星期天乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg,Anti-HBe或抗HbeHBeAg,Anti-HBc或抗Hbc

測定方法:ELASA,RIAHBsAg,Anti-HBs或抗HBs第47頁,共69頁,2024年2月25日,星期天乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBsAg(+)表示肝中有HBV見于:乙型肝炎潛伏期和急性期。慢性遷延性肝炎,慢性活動性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性HBsAg攜帶者。

Anti-HBs或抗HBs:中和抗體第48頁,共69頁,2024年2月25日,星期天乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg:有乙型肝炎,是病毒復(fù)制活躍,傳染性強的指標;持續(xù)陽性易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?;HBeAg+和HBsAg+可垂直傳播。Anti-HBe或抗Hbe:出現(xiàn)于急性感染的恢復(fù)期,持續(xù)時間較長。意味著HBV部分被清除或抑制,復(fù)制減少,傳染性降低。第49頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

乙型肝炎病毒血清標記物Anti-HBc或抗HBc:反映肝細胞受到HBV侵害的一種指標,主要包括IgM、IgG、IgA??笻BcIgM陽性是最早出現(xiàn)的特異性抗體,是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標,并提示病人的血液有強傳染性。也見于慢性活動性肝炎??笻BcIgG其陽性滴度高,表明患有乙型肝炎,指正在感染;低滴度為既往感染指標,體內(nèi)時間長。第50頁,共69頁,2024年2月25日,星期天乙型肝炎病毒血清標記物HBV-DNA定性和定量測定:目前定量測定范圍為102~108

拷貝/ml。與血清免疫學(xué)結(jié)果的綜合評價HBsAg和Anti-HBsHBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc5項標志物的變化和聯(lián)合檢測的臨床意義第51頁,共69頁,2024年2月25日,星期天丙型肝炎病毒標志物檢測抗-HCV(ELISA)抗-HCVIgM陽性常見于急性HCV感染,是診斷丙肝的早期敏感指標;是HCV活動的指標,是判斷HCV傳染性的指標。

抗-HCVIgGHCV-RNA測定測定方法逆轉(zhuǎn)錄巢式PCR法,熒光定量PCR法(第三代試劑抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易發(fā)生變異,抗-HCV陽轉(zhuǎn)時間差異較大)第52頁,共69頁,2024年2月25日,星期天血清抗鏈球菌溶血素“O”測定參考值:乳膠凝集法(LAT):<500U

意義:增高常見于A組溶血鏈球菌感染相關(guān)疾病,如扁桃腺炎、感染性心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕熱、鏈球菌感染后腎小球腎炎等。ASO在A組溶血鏈球菌感染后1周開始升高,4~6周達高峰,可持續(xù)幾個月或幾年。假陽性與假陰性第53頁,共69頁,2024年2月25日,星期天傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定肥達(Widal)反應(yīng)參考值O凝集價<1:80傷寒H凝集價<1:160副傷寒A、B、C凝集價<1:80傷寒、副傷寒沙門菌抗體IgM測定參考值ELASA法:陰性或滴度<1:20。第54頁,共69頁,2024年2月25日,星期天傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定臨床意義O升高,H正常H正常,O升高O升高,H升高O升高,A、B、C任何一項升高第55頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

血清C-反應(yīng)蛋白(CRP)測定C-反應(yīng)蛋白是一種由肝臟合成的,能與肺炎雙球菌C多糖體起反應(yīng)的急性時相反應(yīng)蛋白,具有激活補體,促進吞噬和免疫調(diào)理作用。參考值:<8.2mg/L(免疫比濁法)意義組織損傷,如大手術(shù),嚴重創(chuàng)傷,燒傷,心肌梗死等,發(fā)病后數(shù)小時迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降。又復(fù)升高提示繼發(fā)感染或深部靜脈血栓形成。風(fēng)濕熱活動期,可達200mg/L以上。細菌性感染常明顯升高,病毒性感染升高不明顯或輕度升高。惡性腫瘤,器官移植后排斥反應(yīng),妊娠等可見明顯升高可在發(fā)病后數(shù)小時迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降至正常。第56頁,共69頁,2024年2月25日,星期天腎綜合征出血熱病毒抗體檢測參考值IFA,ELASA:陰性特異性IgM-感染后2~3天檢出,7~10天達高峰。特異性IgG感染后兩周出現(xiàn),可持續(xù)多年。第57頁,共69頁,2024年2月25日,星期天艾滋病血清學(xué)檢查檢測抗HIV(I型或II型)是AIDS診斷的一個主要指標。抗原為HIV感染的T細胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可出現(xiàn)假陽性)。方法:初篩試驗ELASA,乳膠凝集法,免疫印跡法,斑點免疫滲透法。確認試驗可選用蛋白印跡試驗(WB),

PCR法檢查HIV病毒DNA。HIV抗原檢測P24抗原(病毒衣殼蛋白,具群特異性)。

HIV核酸檢測DNA-PCR;RNA-PCR第58頁,共69頁,2024年2月25日,星期天

梅毒血清學(xué)檢查是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體抗體檢測:非密螺旋體抗原試驗和密螺旋體抗原試驗,前者為篩選試驗和治療效果監(jiān)測,后者為確診診斷。暗視野顯微鏡檢查梅毒螺旋體PCR檢測第59頁,共69頁,2024年2月25日,星期天甲胎蛋白(AFP)測定參考值

CLIA,RIA,ELASA:血清<25μg/L臨床意義原發(fā)性肝癌明顯升高,AFP>300μg/L病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但常<300μg/L。生殖腺胚胎性腫瘤血清AFP升高妊娠小扁豆凝集素(LCA)結(jié)合型AFP≥25%提示原發(fā)性肝癌。第60頁,共69頁,2024年2月25日,星期天自身抗體檢查自身免疫性疾?。ˋID)AID-器官特異性和非器官特異性(抗原為細胞核或胞漿成分)及中間型??购丝贵w(ANA):是以細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有四種熒光圖譜:均質(zhì)型(抗dsDNA抗體和抗組蛋白抗體);周邊型(抗dsDNA抗體);斑點型或顆粒型(抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-B/La、抗SS-A/Ro等);核仁型(核糖體、U3-RNP、RNA聚合酶)。第61頁,共69頁,2024年2月25日,星期天自身抗體檢查抗核抗體(ANA)檢查:抗各種細胞核成分(脫氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗原-ENA和RNA等)。參考值:IFA法陰性,血清滴度>1:40為陽性見于SLE(80%~100%)、MCTD(100%)、原發(fā)性膽汁性肝硬化95%~100%)、DM(30%~50%)、RA等。第62頁,共69頁,2024年2月25日,星期天自身抗體檢查抗DNA抗體分為

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