2024年-NHS磁珠使用原理及詳細(xì)的操作步驟應(yīng)用范疇文檔

專注于“磁納米，微萃取”NHS磁珠

產(chǎn)品介紹

英芮誠生化科技目錄

CONTENTS產(chǎn)品介紹產(chǎn)品特點(diǎn)應(yīng)用實(shí)例背景知識2背景知識

免疫磁珠，也稱免疫磁性微球，是一種均勻、具有超順磁性及保護(hù)性殼的球形小粒子，基本上由載體微球和免疫配基結(jié)合而成。其核心為順磁性粒子，核心外層包裹聚合物，最外層是免疫配基。

免疫磁珠技術(shù)：是一種以特異的抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的免疫學(xué)檢測和分離技術(shù)。它是以抗體包被的磁珠為載體，通過抗體與反應(yīng)介質(zhì)中特異性抗原結(jié)合，形成抗原—抗體復(fù)合物，此復(fù)合物在外加磁場的作用下發(fā)生定向移動，從而達(dá)到分離抗原的目的。3

產(chǎn)品介紹NHS磁珠|ProtElutNHS【偶聯(lián)容量】：200-300ug生物分子/ml磁珠懸浮液【性狀】：棕黑色均勻懸濁液；【保存】：2℃~8℃保存，請勿凍融使用。分散劑：DMF?！疽?guī)格】：100-120nm，單分散；1mL；【用途】：適用于含伯胺（或者伯胺標(biāo)記）的蛋白、抗體、酶、多肽、核酸等生物分子。4通過獨(dú)特的高分子聚合技術(shù)，在超順磁性Fe3O4納米核外形成結(jié)構(gòu)致密、性能穩(wěn)定的核-殼聚合體，在單分散的磁珠表層鍵合高密度的功能基團(tuán)，形成界限清晰核殼結(jié)構(gòu)的NHS磁珠。與傳統(tǒng)的羧基、氨基磁珠相比，采用ProtElutNHS無需事先采用EDC或戊二醛活化，在偶聯(lián)緩沖液中室溫混合30min，ProtElutNHS即可與帶有伯氨基的生物配體直接偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的C-N共價鍵，實(shí)現(xiàn)生物配體與ProtElutNHS的共價偶聯(lián)。5操作流程磁珠準(zhǔn)備目標(biāo)生物分子的偶聯(lián)封閉未反應(yīng)的活性基團(tuán)偶聯(lián)后磁珠保存IP實(shí)驗(yàn)（可選擇）61.磁珠的準(zhǔn)備（以100uL為例）

100ulNHS磁珠PBS清洗2次棄上清100ul偶聯(lián)緩沖液72.目標(biāo)生物分子的偶聯(lián)500ul偶聯(lián)緩沖液10-15ugIgG孵育1-2h棄上清可用于偶聯(lián)率測定83.封閉未反應(yīng)的活性基團(tuán)混勻15-30min/4℃反應(yīng)1h棄上清棄上清1mlPBS重復(fù)一次500ul封閉劑94.磁珠保存/后續(xù)實(shí)驗(yàn)1ml保存劑4℃保存10

偶聯(lián)量高，每100ul磁珠約偶聯(lián)20~30ug生物分子；1產(chǎn)品特點(diǎn)100ul20~30ug100ul5~10ug11由于SDS加樣緩沖液中含有巰基乙醇從而導(dǎo)致抗體的重鏈與輕鏈之間的二硫鍵被破壞從而使得抗體分子變成重鏈分子(55KD)和輕鏈分子(25KD)。所以當(dāng)目的蛋白的大小接近重鏈或者輕鏈分子時，重鏈或者輕鏈分子的WB信號常常由于信號過強(qiáng)而導(dǎo)致影響對目的蛋白的WB結(jié)果判斷。

與ProteinA/G相比，

免疫反應(yīng)后洗脫可獲得無背景干擾的目標(biāo)蛋白；（輕重鏈影響）212

5操作簡單、條件溫和，可直接與生物配體共價偶聯(lián)，偶聯(lián)生物配體后穩(wěn)定；生物相容性好，非特異性吸附少；3快速分離，效率高，外加磁場10-20s實(shí)現(xiàn)磁珠分離。413應(yīng)用范圍NHS磁珠可與帶有伯氨基的生物配體直接偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的C-N共價鍵，實(shí)現(xiàn)生物配體與NHS磁珠的共價偶聯(lián)。封閉劑抗體14發(fā)光試劑盒15應(yīng)用實(shí)例英芮誠NHS磁珠與A公司磁珠偶聯(lián)甲胎蛋白（AFP）測試對比（Bradford蛋白定量法測定）與A公司磁珠相比，英芮誠NHS磁珠的偶聯(lián)量更高，偶聯(lián)效率達(dá)85%。16NHS磁珠偶聯(lián)黃曲霉毒素單克隆抗體AFM1測試（Bradford蛋白定量法測定）(*)*