中藥血清藥理學以及實驗設計思路

中藥血清藥理學以及實驗設計思路中藥血清藥理學以及實驗設計思路中藥血清藥理學以及實驗設計思路中藥血清藥理學中藥血清藥理學是將中藥或中藥復方經口服給動物灌服一定時間后采集動物血液、分離血清，用含有藥物成分的血清進行體外實驗的一種半體內實驗方法。中藥血清藥理學以及實驗設計思路人有了知識，就會具備各種分析能力，明辨是非的能力。5/8/20241中藥血清藥理學以及實驗設計思路中藥血清藥理學中藥血清藥理學是將中藥或中藥復方經口服給動物灌服一定時間后采集動物血液、分離血清，用含有藥物成分的血清進行體外實驗的一種半體內實驗方法。5/8/20242中藥血清藥理學以及實驗設計思路血漿是指血液中除血球、血小板之外的部分,是一種無色透明的液體,含有水、無機鹽、營養(yǎng)物、激素、尿酸等。血清是指血漿中除去纖維蛋白后得到的淡黃色液體,在血液凝固后才能分離出來。凝血是指凝血酶與纖維蛋白原相作用生成纖維蛋白,再與血球結合而使血液發(fā)生凝固的現象。血漿血清凝血5/8/20243中藥血清藥理學以及實驗設計思路血漿血清凝血無凝血直接離心的為血漿；有凝血再離心的為血清。5/8/20244中藥血清藥理學以及實驗設計思路優(yōu)點防止中藥粗制劑理化性質對體外試驗的干擾反映藥物的代謝產物和給藥后產生的內源性成分便于從細胞分子水平闡述藥物的作用機制體外實驗條件可控性強、藥物效應易于檢測5/8/20245中藥血清藥理學以及實驗設計思路體外培養(yǎng)體系藥物濃度與血藥濃度不確定藥效最佳的采血時間難以確定

血清藥理學方法增加了分析藥物成分的難度

成分復雜，影響因素太多，結果重復性差

含藥血清滅不滅活，方法不統(tǒng)一無去除血清影響的理想措施無確定的最佳給藥方案

缺點5/8/20246中藥血清藥理學以及實驗設計思路中藥血清藥理學步驟

實驗動物的選擇給藥劑量

含藥血清的處理與保存

給藥方案

采血時間

血清添加量

5/8/20247中藥血清藥理學以及實驗設計思路實驗動物的選擇

動物種類：大鼠、家兔、豚鼠動物數量雌雄是否各半正常生理狀態(tài)與病理狀態(tài)實驗動物的選擇5/8/20248中藥血清藥理學以及實驗設計思路給藥劑量

給藥劑量

臨床常用量

給藥劑量

給藥劑量

5/8/20249中藥血清藥理學以及實驗設計思路給藥方案

灌胃次數和時間間隔：各種給藥方式都是為了使藥物達到穩(wěn)態(tài)血藥濃度，從而便于藥物作用和機理的研究。由于中藥及其復方化學成分復雜，半衰期很難測定，所以采用7～10d給藥法也是權宜之計。當然，若是進行藥物血清時效關系的研究，給藥方法又另當別論。

5/8/202410中藥血清藥理學以及實驗設計思路采血時間

理想的采血時間應落在血藥濃度的高峰期。李儀奎通過對96個藥物達峰時間統(tǒng)計后提出藥后1~2h采血較為合理。最可靠的方法是先通過對少量動物進行預實驗，根據不同的實驗要求，將不同時間的采集的含藥血清進行實驗比較，再確定采血時間。5/8/202411中藥血清藥理學以及實驗設計思路含藥血清的處理與保存

藥物血清處理：滅活與否？①丙酮法；②乙醇法；③加溫法。目前采集動物血清后，多用加溫法，經56℃，30min滅活。含藥血清的保存:

-20℃或更低溫度環(huán)境下保存。5/8/202412中藥血清藥理學以及實驗設計思路血清添加量

藥物血清加入量的逐漸增加，其藥理效應曲線是呈正態(tài)分布狀。研究含藥血清的加入量來評價血清中藥物的真實有效濃度。設立正常血清空白對照組來排除血清本身所含干擾性物質對實驗結果的影響。5/8/202413中藥血清藥理學以及實驗設計思路根據實驗的要求選擇動物，以及必要的藥理造模；優(yōu)選含藥血清的制備方法（采用正交試驗法等）：以藥物和觀察指標不同，需要首先對含藥血清的時效和量效進行研究，以便確定給藥方案、采血時間、血清或血漿、滅活與否、血清添加量。實驗設計思路5/8/202414中藥血清藥理學以及實驗設計思路復方黃連注射劑血清藥理學研究以大白兔為實驗動物，采用肌內注射復方黃連注射劑，2次/d，連續(xù)3d。末次給藥后15、30min，1、2、3h后從兔頸靜脈取血，分離含藥血清。采用反相高效液相色譜法測定含藥血清中小檗堿含量，用微量稀釋法和藥敏紙片法測定復方黃連注射劑含藥血清的抑菌能力。結果復方黃連注射劑含藥血清對耐藥性金葡菌具有明顯的抑制作用。實驗設計思路5/8/202415中藥血清藥理學以及實驗設計思路茵陳蒿湯保肝作用的血清藥理學研究建立CCl4誘導的大鼠肝細胞損傷細胞模型，SD大鼠為含藥血清供體，以含藥血清對損傷肝細胞增殖(WST-8法)的影響為指標，采用正交試驗法優(yōu)選含藥血清的制備方法，并確定體系中血清添加量。以動物是否造模、取血時間、取血成分為考察因素，每個因素設2個水平，選用L4(23)正交表安排試驗。實驗設計思路5/8/202416中藥血清藥理學以及實驗設計思路實驗設計思路5/8/202417中藥血清藥理學以及實驗設計思路黃連解毒湯抗氧化作用的血清藥理學研究采用血清藥理學方法，研究黃連、黃芩、黃連解毒湯含藥血清對氧化應激損傷保護作用的時間-效應關系；并研究黃連、黃芩、黃連解毒湯提取物和小檗堿、黃芩苷純品對氧化損傷保護作用的劑量-效應關系。黃芩的含藥血清滅活與否抗氧化作用有很大差異，兩者的時-效曲線上也有明顯不同。血清添加量過大，會有假陽性結果，造模難以成功。本實驗中以5%濃度血清造模，較為成功。實驗設計思路5/8/202418中藥血清藥理學以及實驗設計思路荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清體外抗病毒的實驗研究荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對MDCK細胞的最大無毒濃度TC0均為5%，即在相應培養(yǎng)基中血清含量為5%。荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清5%、3.5%、2.5%濃度對10TCID50的