β-arrestin1對(duì)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞系中NLRP3炎癥小體的作用

β-arrestin1對(duì)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞系中NLRP3炎癥小體的作用答辯學(xué)生：指導(dǎo)老師：答辯時(shí)間：CONTENTS目錄研究背景1研究目的2研究?jī)?nèi)容3研究結(jié)果41研究背景1.1小膠質(zhì)細(xì)胞背景介紹——生理功能1.2小膠質(zhì)細(xì)胞與炎癥——小膠質(zhì)細(xì)胞活化表型1.3炎癥小體背景介紹——組成和激活1.4NLRP3激活與神經(jīng)退行性疾病1.5β-arrestin1背景介紹——生理功能研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.1小膠質(zhì)細(xì)胞背景介紹——生理功能神經(jīng)發(fā)育免疫監(jiān)測(cè)吞噬死亡神經(jīng)元、凋亡細(xì)胞和髓鞘碎片促進(jìn)血管再生和血管構(gòu)建重構(gòu)突觸：修剪、剝離和重塑神經(jīng)再生和軸突再生MolNeurobiol.2016Nov9研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.2小膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)炎癥——小膠質(zhì)細(xì)胞活化表型ProgNeurobiol.2015Aug;131:65-86研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.3炎癥小體背景介紹——組成和激活炎癥小體的感受器可通過自身蛋白水解作用參與炎癥小體的激活活化并募集caspase-1核苷酸結(jié)合區(qū)域，調(diào)節(jié)炎癥小體寡聚化Annu.Rev.CellDev.Biol.2012研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.3炎癥小體背景介紹——組成和激活naturereview,2014研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.4炎癥小體與神經(jīng)退行性疾病naturereview,2014研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果1.5β-arrestins背景介紹——生理功能InnateImmun.

2014Jul;20(5):451-60GenesImmun.

2015Dec;16(8):5762研究目的應(yīng)用BV2細(xì)胞制備LPS炎癥損傷模型，研究、闡明β-arrestin1對(duì)NLRP3炎癥小體激活過程中的作用。3研究?jī)?nèi)容研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果3.1

LPS模型中β-arr1的表達(dá)情況CON組LPS（100ng/ml,6h）ATP（5mM,30min）LPS+ATP組BV2cells吸棄上清，收集細(xì)胞蛋白Westernblotting檢測(cè)β-arrestin1表達(dá)情況六孔板研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果3.2干擾β-arr1后，炎癥因子分泌情況LPSLPSATPATPNC組Si-β-arr1組NC（LA）組Si-β-arr1（LA）組收集上清qPCR檢測(cè)干擾效率收集細(xì)胞蛋白Westernblotting檢測(cè)炎癥相關(guān)因子：Caspase-1、IL-1β、Pro-Caspase-1、Pro-IL-1β以及β-arrestin1六孔板研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果3.3LDH釋放法檢測(cè)細(xì)胞活性LPSLPSATPATPNC組Si-β-arr1組NC（LA）組Si-β-arr1（LA）組96孔板收集上清LDH釋放法檢測(cè)細(xì)胞死亡率4研究結(jié)果研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果4.1BV2細(xì)胞給予LPS+ATP刺激，β-arrestin1表達(dá)上調(diào)。CONLPS+ATPAβ-arrestin1β-actin—43kD—53KDBn=3，與CON組相比：*P<0.05。研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果4.2BV2細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA48h，β-arrestin1的干擾效率為77%。n=3，與NC組相比：***P<0.001。研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果4.3干擾BV2細(xì)胞β-arrestin1，給予LPS＋ATP刺激后，上清中caspase-1和IL-1β表達(dá)顯著下調(diào)。LPS+ATP—34kD—45kD—43kD—17kD—20kDCaspase-1β-actinPro-IL-1βIL-1βPro-caspase-1SiRNANCNCSiRNAAn=3，pro-IL-1β的統(tǒng)計(jì)圖，與NC組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與NC（LPS+ATP）組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。BCn=3，pro-caspase-1的統(tǒng)計(jì)圖，與NC組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與NC（LPS+ATP）組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。研究背景研究目的研究?jī)?nèi)容研究結(jié)果4.4干擾BV2細(xì)胞β-arrestin1，給予LPS＋ATP刺激后，LDH釋放減少。n=3，與CON組相比：*P<0.0