標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 17494-1998是一項(xiàng)關(guān)于馬傳染性貧血病（Equine Infectious Anemia, EIA）檢測(cè)的技術(shù)規(guī)范，具體聚焦于間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, iELISA）方法。該標(biāo)準(zhǔn)為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可比性提供了詳細(xì)的指導(dǎo)原則和操作流程。

標(biāo)準(zhǔn)概覽

  1. 范圍：規(guī)定了使用間接ELISA技術(shù)檢測(cè)馬血清或血漿中針對(duì)馬傳染性貧血病毒（EIAV）抗體的方法。適用于馬屬動(dòng)物EIA的診斷篩查及流行病學(xué)調(diào)查。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)參考的其他相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，確保試驗(yàn)所用試劑、設(shè)備及操作符合既定質(zhì)量要求。

  3. 術(shù)語(yǔ)和定義：明確了關(guān)鍵術(shù)語(yǔ)，如間接ELISA、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照等，幫助讀者理解標(biāo)準(zhǔn)中的專業(yè)詞匯。

  4. 試劑與材料：詳細(xì)描述了所需試劑如抗原、酶標(biāo)抗體、底物等的制備、保存條件及來源要求，以及實(shí)驗(yàn)所需的儀器設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)。

  5. 樣本采集與處理：規(guī)定了采樣方法、樣本類型（血清或血漿）、采集后的處理步驟及儲(chǔ)存條件，確保樣本質(zhì)量滿足檢測(cè)要求。

  6. 試驗(yàn)步驟：

    • 包括了從微孔板的準(zhǔn)備、樣本與試劑的加入順序、孵育條件、洗滌步驟到顯色反應(yīng)及終止的全過程，每一步都有具體的操作指導(dǎo)和時(shí)間控制。
    • 強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)控制的變因，如溫度、濕度等，以減少實(shí)驗(yàn)誤差。

  7. 結(jié)果判斷：基于吸光度值（OD值），制定了判斷樣本陽(yáng)性和陰性的臨界值確定方法，包括陰陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置及結(jié)果解釋準(zhǔn)則。

  8. 精密度與準(zhǔn)確性：通過重復(fù)性試驗(yàn)和再現(xiàn)性試驗(yàn)評(píng)估方法的精密度，確保不同實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的一致性，并提供了驗(yàn)證方法準(zhǔn)確性的途徑。

  9. 試驗(yàn)報(bào)告：要求記錄實(shí)驗(yàn)的所有細(xì)節(jié)，包括樣本信息、實(shí)驗(yàn)條件、結(jié)果數(shù)據(jù)及最終結(jié)論，以便追溯和審核。

實(shí)施意義

此標(biāo)準(zhǔn)旨在為獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室提供一套統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)化的iELISA檢測(cè)流程，以提高馬傳染性貧血病診斷的可靠性和效率。通過遵循這些嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，可以有效監(jiān)控并控制EIA的傳播，保護(hù)馬匹健康，同時(shí)為馬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。


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  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替，建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17494-2009
  • 1998-08-31 頒布
  • 1999-01-01 實(shí)施
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GB/T 17494-1998馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程_第3頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS.11.220B41中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17494-1998馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease1998-08-31發(fā)布1999-01-01實(shí)施國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程B/T17494—1998中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復(fù)興門外三里河北街16號(hào)郵政編碼：100045電話：63787337、637874471999年1月第一版2005年1月電子版制作書號(hào)：155066·1-15412版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報(bào)電話：（010）68533533

GB/T17494-1998麗馬傳染性貧血病(簡(jiǎn)稱馬傳貧，下同)的流行，曾給我國(guó)養(yǎng)馬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)過多年的防制,在全國(guó)范圍內(nèi)取得顯著成效,已達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)。為消滅馬傳貧，提供一個(gè)先進(jìn)有效、特異敏感、反應(yīng)快速、操作方便、易于推廣的檢測(cè)方法，是十分必要的。為此制定馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程。馬傳貧間接ELISA技術(shù)自1983年建立以來,已在全國(guó)主要養(yǎng)馬省區(qū)推廣應(yīng)用十余年之久，在馬傳貧防制工作中發(fā)揮了重要作用。特別是研制的試劑實(shí)現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)化、商品化，并以低耗優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量，為該方法推廣應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)，在這方面我們已走在世界前列。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱善醫(yī)研究所負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：戴玉坤。

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程GB/T17494-1998RulesofindirectELISAtechniqueforequineinfectiousanemiadisease范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬傳染性貧血病間接ELISA技術(shù)規(guī)程的測(cè)定原理、儀器設(shè)備、試劑、配制溶液、操作步驃、結(jié)果判定。本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測(cè)馬血清中的馬傳貧疫毒抗體?？捎糜谏a(chǎn)和經(jīng)營(yíng)馬匹者對(duì)未注射馬傳貧疫苗馬匹的檢疫，馬傳貧病馬的定性，也可用于對(duì)注射馬傳貧疫苗馬匹的免疫狀態(tài)進(jìn)行測(cè)定、2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本達(dá)為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。NY127一1987馬傳貧酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA間接法)抗原、酶標(biāo)記抗體制造及檢驗(yàn)試行規(guī)3測(cè)定原理用特制的馬傳貧病毒抗原(NY127),包被聚苯乙烯微量板孔，使免疫反應(yīng)在固相載體上進(jìn)行。當(dāng)被檢血清中有馬傳貧病毒抗體存在時(shí)，則與孔壁上的抗原形成抗原-抗體復(fù)合物，再與酶標(biāo)記的抗體(抗馬免疫球蛋白)反應(yīng)，最后通過測(cè)定酶作用底物催化后的產(chǎn)物，進(jìn)行定性、定量抗體測(cè)定。4儀器設(shè)備吸管：1mL、5mL、10mLi量桶：50mL、100mL、1000mL;燒杯：50mL、100mL;玻璃滴管：每滴體積約20～30kL；血清稀釋板：20孔板每孔容積為1mL;定量加液器：1mL分裝定量;微量吸液器：50KL、100L;分析天平：感量0.001g:托盤天平；

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