第九章腸桿菌科

第二章腸桿菌科

腸桿菌科細菌是一大群生物學(xué)性狀近似的革蘭氏陰性桿菌。多數(shù)是腸道的正常菌群，少數(shù)為病原菌。腸桿菌科細菌種類繁多，如埃希菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬、變形桿菌屬等。（Enterobacteriaceae)第一節(jié)埃希菌屬（Escherichia)

埃希菌屬有5個種，其中最重要的是大腸埃希菌俗稱大腸桿菌（E.coli)，是最常見的臨床分離菌。引起疾?。耗芨腥救撕蛣游铮鸶篂a、化膿或敗血癥。

1.形態(tài)與染色：卵圓形或桿狀，單個或成雙，無芽孢，大多數(shù)具有周身鞭毛，能運動。一般無莢膜，但有些菌株有莢膜。G-。革蘭氏陰性小桿菌，散在或成對，周毛菌，有菌毛。大腸桿菌掃描電鏡下的大腸桿菌（示鞭毛）

2、培養(yǎng)及生化特性屬于需氧和兼性厭氧菌，對營養(yǎng)要求不高，在普通營養(yǎng)瓊脂上生長良好，最適生長溫度為37℃，最適pH為7.2-7.4。

普通培養(yǎng)基上生長良好，光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落；麥康凱瓊脂上形成紅色菌落；伊紅美藍瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落；致病菌株在綿羊血平板上呈β型溶血；麥康凱培養(yǎng)基伊紅美藍瓊脂麥康凱瓊脂：紅色菌落；伊紅美藍瓊脂：黑色帶金屬閃光的菌落；SS瓊脂：一般不生長或生長較差，生長者呈紅色；血平板：一些致病性菌株常β溶血；①能發(fā)酵多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖；約半數(shù)菌株不分解蔗糖；②IMViC：＋＋――③幾乎均不產(chǎn)生硫化氫，H2S陰性。

不分解尿素。生化特性I(吲哚)

M（MR）

Vi（VP)

C（枸櫞酸鹽利用試驗）3.抵抗力抵抗力中等，但各菌株間有差異。一般都能被巴氏消毒所殺死。常用的化學(xué)消毒藥可在數(shù)分鐘之內(nèi)殺死本菌，在潮濕、陰暗而溫暖的環(huán)境中，本菌可生存1個月左右，在寒冷而干燥的環(huán)境中生存較久。4.抗原結(jié)構(gòu)：血清型較多。

O抗原：是光滑型細菌的菌體抗原，對熱穩(wěn)定，抗原性強。

K抗原：熱不穩(wěn)定抗原。多存在于莢膜或類似結(jié)構(gòu)中，個別位于菌毛中。除K88、K99為蛋白質(zhì)菌毛抗原，其余均屬多糖抗原。

H抗原為鞭毛抗原，為蛋白質(zhì)。加熱80℃或以乙醇處理則被破壞。大腸桿菌的抗原式，表示方法：O：K：H，如O111：K58（B）：H12。5、致病性根據(jù)毒力因子與發(fā)病機制不同，將腹瀉大腸桿菌分為5類：（1）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC）（2）腸致病型大腸桿菌（EPEC）（3）腸出血型大腸桿菌（EHEC）（4）腸侵襲型大腸桿菌（EIEC）（5）腸聚集型大腸桿菌（EAEC）

產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC）引起人和動物腹瀉，主要毒力因子有兩類：粘附素（定居因子）：菌毛和非菌毛類蛋白，能粘附宿主的小腸上皮細胞，雖不是直接的致病因子，卻是首要的毒力因子。腸毒素：分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素。

（1）不耐熱腸毒素（heat-labileenterotoxin,LT)

對熱敏感，可轉(zhuǎn)變成類毒素，具有A和B亞單位。

（2）耐熱腸毒素（heat-stableenterotoxin,ST)

耐熱，分子量小，無免疫原性。產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌（STEC）引起豬水腫病，有兩類毒力因子：粘附素

粘附性菌毛F18，有助于細菌在腸粘膜上皮細胞定居和繁殖。志賀毒素，又稱類志賀毒素、Vero毒素。

直接導(dǎo)致該病發(fā)生的主要毒力因子。標(biāo)本采集：根據(jù)臨床疾病類型的不同，采集適當(dāng)?shù)臉?biāo)本。如敗血癥病例采集病變的內(nèi)臟組織，腹瀉病例采集小腸內(nèi)容物。檢查方法：

（一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基（麥康凱或伊紅美藍培養(yǎng)基）（二）生化試驗：糖發(fā)酵、IMViC試驗、H2S陰性。

（三）血清學(xué)試驗：玻片凝集試驗鑒定血清型6.微生物學(xué)診斷目前國內(nèi)外已有多種疫苗預(yù)防大腸桿菌病，如全菌滅活苗、亞單位疫苗、類毒素苗、基因工程疫苗等。

7.免疫防治：由于大腸桿菌極易產(chǎn)生耐藥性，尤其是抗生素的不合理應(yīng)用，使耐藥菌株不斷增加，且通過耐藥質(zhì)粒在細菌間傳遞，廣泛蔓延。為了減少藥物的濫用和細菌耐藥性的產(chǎn)生,在使用藥物治療大腸桿菌病時,有條件的應(yīng)擴大常規(guī)抗生素種類進行藥敏試驗。根據(jù)藥敏試驗結(jié)果,選擇敏感藥物,且應(yīng)注意交替用藥,按療程投藥,這樣才能收到較好的治療效果。

第二節(jié)沙門氏菌屬（Salmonella)絕大多數(shù)沙門氏菌對人和動物有致病性，人類食物中毒的主要病原之一，在公共衛(wèi)生上占有重要地位。所致疾病：1.對人類致病的沙門氏菌2.對畜禽致?。喝珉u白痢、雞傷寒、雞副傷寒等感染雛雞后發(fā)生白痢或敗血癥等。也引起牛、羊、馬發(fā)生流產(chǎn)。3.引起食物中毒：如鼠傷寒沙門氏菌。

一、形態(tài)及染色與大腸桿菌相似，除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌無鞭毛不運動外，其余均以周鞭毛運動。G-。兩端鈍圓，細長，中等大桿菌，無芽孢,無莢膜。培養(yǎng)特性：該菌需氧或兼性厭氧；對營養(yǎng)的要求不高。

普通瓊脂平板：無色半透明、光滑、濕潤、邊緣整齊或呈鋸齒狀、直徑2-3mm的中等大菌落。雞白痢、雞沙門氏菌生長貧瘠，形成較小菌落。

S·S瓊脂：由于本菌不分解乳糖，故生長出與培養(yǎng)基顏色一致的淡黃色或無色菌落。產(chǎn)生硫化氫的菌株，菌落中心形成黑色小點。二、培養(yǎng)及生化特性（1）培養(yǎng)特性與埃希氏菌屬相似。（2）雞白痢、雞傷寒、羊流產(chǎn)和甲型副傷寒等沙門氏菌在普通瓊脂上生長貧瘠。培養(yǎng)基中加入血清、葡萄糖、硫代硫酸鈉、胱氨酸、腦心浸液和甘油等均有助于本菌生長。（3）麥康凱上，大多形成無色菌落（不發(fā)酵乳糖）；SS平板上，形成黑色菌落。

麥康凱培養(yǎng)基：發(fā)酵乳糖（大腸桿菌）；不發(fā)酵乳糖（沙門氏菌）在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無色菌落。IMViC試驗：-+-+；多數(shù)菌株H2S陽性。三糖鐵培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂斜面：斜面為紅色，底部變黑并產(chǎn)氣。

三糖鐵培養(yǎng)基陽性：斜面變紅，底面是黃色或是黑色，有時產(chǎn)生氣泡。陰性：是斜面變黃，底面發(fā)黃，有時也有氣泡。三、抗原及血清型（一）抗原

1.菌體抗原（O抗原）：其成分為LPS的多糖側(cè)鏈。58種，耐

熱，1個菌株可含多種，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示。

2.

莢膜抗原（K抗原）：與毒力有關(guān)，又稱Vi抗原。有的菌株有，

有的菌株無。

3.鞭毛抗原（H抗原）：其成分為蛋白質(zhì)，不耐熱，63種,

分為兩相：

（1）第1相（特異相）：小寫英文字母表示

（2）第2相（非特異相）：阿拉伯?dāng)?shù)字表示

表示方法：

O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原

如：1，4，[5]，12：i:1,2有Vi抗原的，則表示為：（二）血清型（抗原式）

O抗原：Vi抗原：第1相H抗原：第2相H抗原沙門氏菌屬在外界的生活力較強，在10℃

～42℃的范圍內(nèi)均能生長。但不耐熱，60℃15～

30min即被殺死。在普通水中可生存2～

3周，在糞便中可存活1～

2個月。在牛乳和肉類食品中存活數(shù)月，在食鹽含量為10％～15％的腌肉中亦可存活2～

3個月。由于沙門氏菌屬不分解蛋白質(zhì)，不產(chǎn)生靛基質(zhì)，污染食物后無感官性狀的變化，易被忽視而引起食物中毒。四、抵抗力沙門氏菌屬包括2000多個血清型，在形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性、生化特性和抗原構(gòu)造方面都非常相似，主要寄居于人和其它溫血動物的腸道中，可引起多種性質(zhì)的疾病。

五、致病性第一類群：專門對人致病。如傷寒沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌，乙型副傷寒傷門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌。第二類群：能引起人類食物中毒，稱之為食物中毒沙門氏菌群，如鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌等。第三類群：專門對動物致病，很少感染人，如馬流產(chǎn)沙門氏菌、雞白痢沙門氏菌。根據(jù)沙門氏菌的致病范圍，可將其分為三大類群：根據(jù)對宿主適應(yīng)性不同，可分為：專嗜性：如雞白痢、雞傷寒沙門氏菌2.偏嗜性：如豬霍亂沙門氏菌3.泛嗜性：如鼠傷寒、腸炎沙門氏菌（一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基

（二）生化試驗：糖發(fā)酵、IMViC試驗、H2S陽性。

（三）血清學(xué)試驗：玻片凝集試驗鑒定血清型

六、微生物學(xué)診斷1、疫苗接種；2、嚴(yán)格實行衛(wèi)生檢驗和檢疫規(guī)程；3、有效的抗生素