鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院檢驗(yàn)科HIV艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)SOP文件

HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況

為了更好發(fā)揮艾滋病檢測(cè)在艾滋病防治工作中的作用，根據(jù)《全

國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》對(duì)于艾滋病的檢測(cè)要求，我院檢驗(yàn)科設(shè)置了

獨(dú)立的HIV篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)。為了使檢測(cè)工作能夠正常進(jìn)行，保證HIV檢

測(cè)結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性，我們不僅對(duì)工作環(huán)境條件和檢測(cè)設(shè)施加以

整改，而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，以確保HIV檢測(cè)結(jié)

果的準(zhǔn)確有效。HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)配備了專用的電腦、冰箱、恒溫培養(yǎng)

箱、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和安全防護(hù)用品等。

根據(jù)HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室工作的需要，我科配備從事HIV檢測(cè)工作人

員2名，中級(jí)衛(wèi)生技術(shù)職稱人員1名，初級(jí)級(jí)衛(wèi)生技術(shù)職稱人員1名

所有人員從業(yè)年限均在5年以上。并積極參加省級(jí)、市級(jí)舉辦的HIV

檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)，不斷提高質(zhì)量意識(shí)、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)能力，保證HIV

檢測(cè)工作的質(zhì)量。

HIV篩查實(shí)驗(yàn)點(diǎn)負(fù)責(zé)人：郭猛

人員：郭猛

梁少鋒

HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序

一、目的

對(duì)HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作全過(guò)程進(jìn)行控制，保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求，提供

可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報(bào)告。

二、范圍

適用于本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展的各類醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個(gè)環(huán)節(jié)。

三、職責(zé)

1、工作人員負(fù)責(zé)門診檢驗(yàn)樣品的采集。

2、工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收。

3、負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督。

4、工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。

5、報(bào)告授權(quán)審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)、發(fā)放。

6、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管（計(jì)算機(jī)）工作。

四、工作程序

（一）、檢驗(yàn)工作分類

本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作，根據(jù)標(biāo)本的來(lái)源不同分為采樣檢驗(yàn)和送樣檢驗(yàn)，根

據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)和檢驗(yàn)質(zhì)量抽檢委托復(fù)檢。

（二）、委托復(fù)檢工作需按下列程序執(zhí)行：

1、當(dāng)面核對(duì)標(biāo)本姓名、性別、年齡及標(biāo)本質(zhì)量等資料；

2、按要求進(jìn)行檢驗(yàn)；

3、必要時(shí)委托方可全程參與檢驗(yàn)過(guò)程；

4、其余程序與常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本相同。

（三）、采樣及樣品管理

采樣執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本采樣管理程序》。

樣品接收、分發(fā)和保管處理，執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本管理程序》和《標(biāo)本

采樣管理程序》。樣品一旦受理即給予受理編號(hào)。

（四）、標(biāo)本檢驗(yàn)

檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件《標(biāo)本檢驗(yàn)管理程序》和《檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。

（五）、檢驗(yàn)依據(jù)

1、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法；

2、部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)規(guī)范；

3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；

4、有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；

5、自編規(guī)程的使用執(zhí)行《檢驗(yàn)方法確認(rèn)程序》。

（六）、檢驗(yàn)實(shí)施

檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書(shū)的要求按時(shí)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并按程序文件

《記錄檔案管理程序》做好原始記錄。

（七）、檢驗(yàn)報(bào)告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件《檢驗(yàn)報(bào)告管理程序》

執(zhí)行。

（八）、檢驗(yàn)方法控制

檢驗(yàn)必須按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行，也

可用經(jīng)本科技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行。其他檢驗(yàn)方法不得采用。

HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖

HIV篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度

一、實(shí)驗(yàn)室工作制度

1、熱愛(ài)黨，熱愛(ài)社會(huì)主義，堅(jiān)持四項(xiàng)基本原則，全心全意為人民服務(wù)。

2、努力學(xué)習(xí)政治，刻苦鉆研業(yè)務(wù)，發(fā)揚(yáng)救死扶傷，實(shí)行革命人道主義，對(duì)

病人如親人，態(tài)度和藹，有問(wèn)必答。

3、熱愛(ài)本職工作，服從分配，遵守勞動(dòng)紀(jì)律，做到不遲到、不早退，不擅

自離開(kāi)工作崗位，不私自干私活。

4、嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)章制度，盡職盡責(zé)，及時(shí)做好各項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果記錄，自覺(jué)抵制

不良之風(fēng)。

5、識(shí)大體，顧大局，關(guān)心集體，團(tuán)結(jié)友愛(ài)，不背后議論，搬弄是非。

6、講究文明禮貌、積極參加愛(ài)國(guó)衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)，美化環(huán)境，保持醫(yī)院科室整潔,

安靜、大方。

7、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，工作人員必須

充分了解各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵照?qǐng)?zhí)行。

二、崗位責(zé)任制

1、崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療安全，提高工作效率的重要環(huán)節(jié)。建

立崗位責(zé)任制，做到人人分工職責(zé)明確，事事有人負(fù)責(zé)，立足本職，團(tuán)結(jié)互助，

相互協(xié)調(diào)，保證各項(xiàng)任務(wù)的勝利完成。

2、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室由有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)。

3、牢固樹(shù)立把質(zhì)量放在第一位的思想，在工作中必須加強(qiáng)檢查和復(fù)查制度,

以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療安全。

4、交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé)，須核對(duì)實(shí)物和記錄，對(duì)工作一般情況、存在問(wèn)

題和注意事項(xiàng)應(yīng)進(jìn)行具體交待，否則，發(fā)生問(wèn)題由交班人負(fù)責(zé)。

5、職工臨時(shí)因故離開(kāi)工作崗位，必須將工作委托給能勝任該項(xiàng)工作的人員，

否則，發(fā)生問(wèn)題由原擔(dān)任該項(xiàng)工作者負(fù)責(zé)。

6、新參加工作的職工，在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位，

在確能掌握經(jīng)考核合格后方可。

7、建立HIV篩查實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制，其他人不

得任意使用。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，不可擅自亂改設(shè)置。

8、凡是一物多人使用的，除共同負(fù)責(zé)外，應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)

人，負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱，定期安全檢查，經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)，保持正常運(yùn)轉(zhuǎn)，該負(fù)責(zé)

人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備安全的行為。

9、人員職責(zé)分工：

每日正班人員負(fù)責(zé)樣品的采集，接收，執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)

檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，簽發(fā)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng)。

副班人員負(fù)責(zé)協(xié)助正班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作，并負(fù)責(zé)對(duì)檢驗(yàn)工作

質(zhì)量的監(jiān)督，檢驗(yàn)報(bào)告的復(fù)核、發(fā)放，結(jié)果的解釋，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)

療廢棄物的消毒處理。

實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管（計(jì)算機(jī)）工作。

三、標(biāo)本管理制度

（一）、樣品的采集和處理

艾滋病檢測(cè)最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)

也可作為測(cè)試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下：

1、血清樣品采集和處理

（1）、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量靜脈血，室溫下自然放

置1?2h,待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min,吸出血清備用。

（2）、如用濾紙片采樣，則手指或耳垂局部嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒，在刺破皮

膚后，迅速把濾紙片沾上，切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要

待血樣干燥后再包裝送檢。

2、抗凝血樣品采集和處理

（1）、用加有抗凝劑的真空采血管（或一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加

有抗凝劑的試管），反復(fù)輕搖，分離血漿和血細(xì)胞備用。

（2）、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?，如CD,7CD8T淋巴細(xì)胞測(cè)定可選

用K3EDTA或肝素或枸椽酸鈉，HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用K3EDTA

或枸椽酸鈉。

（3）、用于核酸定性檢測(cè)時(shí)，采集的抗凝全血應(yīng)在4?8h內(nèi)分離PBMC和血

漿，否則應(yīng)在24~48h內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞。

3、采集樣品注意事項(xiàng)

（1）、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。

（2）、采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直

接接觸血液；直接接觸HIV感染者/艾滋?。ˋIDS）病人血液/體液的操作，應(yīng)戴

雙層手套。

（3）、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳

染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。

（4）、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有

傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。

（5）、采血時(shí)一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生

刺傷皮膚和造成外界污染。

（6）、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)

形成氣溶膠。

（二）樣品的保存

1、用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品，應(yīng)存放于-20C以下，短期（1周）內(nèi)

進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于2-8C。

2、用于抗原和核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20C以下，進(jìn)行病毒

RNA檢測(cè)的樣品如需保存3個(gè)月以上應(yīng)置于-80℃。

3、用于CDJ/CD.T淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品不能長(zhǎng)期保存，樣品采集時(shí)間超過(guò)48h

則不可檢測(cè)。

（三）樣品的運(yùn)送

1、實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，除特殊情況外一般不運(yùn)送全血。

2、應(yīng)采用WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)：

第一層容器：裝樣品，要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有

明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號(hào)或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)

墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與樣品分開(kāi)放置。

第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干

個(gè)第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。

第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面

要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。

3、血清和血漿樣品應(yīng)在2?8c條件下由專人運(yùn)送。用于CD,7CD：T淋巴細(xì)胞

測(cè)定的樣品應(yīng)在室溫下18?23c運(yùn)送。每一包裝的體積以不超過(guò)50ml為宜。

4、運(yùn)送感染性材料必須有記錄。

5、如分離血漿仍有困難，可直接將抗凝血-20C以下凍存，采用冰壺冷藏運(yùn)

輸，避免凍融。

6、特殊情況下如需對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè)，可以用特快專遞形式投寄，但必

須按三級(jí)包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保證不會(huì)破碎

和溢漏。

（四）樣品的接收

1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過(guò)培

訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開(kāi)，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。

2、核對(duì)樣品與送檢單，認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床

號(hào)、住院號(hào)是否與申請(qǐng)單符合。檢查樣品管有無(wú)破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即

將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛器消毒，同時(shí)報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。

3、檢查樣品的狀況，觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，

記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過(guò)多以及黃疸等情況，判斷標(biāo)本是否符合

檢驗(yàn)要求。如果污染過(guò)重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要

將樣品情況立即通知送樣人。

4、打開(kāi)標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能

濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡，以防皮膚或

粘膜污染。

5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測(cè)試。

6、接收樣品時(shí)應(yīng)規(guī)范填寫(xiě)樣品接收單。

7、不符要求的標(biāo)本，必須及時(shí)填寫(xiě)退回理由單，及時(shí)通知送樣人，說(shuō)明情

況，重新留取。不符要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗(yàn)后的標(biāo)

本一樣進(jìn)行消毒或無(wú)害化處理后廢棄。

（五）標(biāo)本檢測(cè)

1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成

氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過(guò)程中的每一步驟，在檢測(cè)過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操

作規(guī)程。

2、在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知

傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考

物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒

（六）、標(biāo)本處理

檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒劑浸泡半小時(shí)，再用高壓鍋高壓消毒。

然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃

圾處統(tǒng)一焚化處理。并做好登記。

四、試劑管理制度

（一）、采購(gòu)與審批

科主任根據(jù)需要定期擬定采購(gòu)計(jì)劃，交由院領(lǐng)導(dǎo)審批，批核后由科主任與供

應(yīng)商聯(lián)系進(jìn)貨。

（二）、驗(yàn)收與登記

倉(cāng)管負(fù)責(zé)人根據(jù)供應(yīng)商提供的試劑及清單對(duì)數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行

驗(yàn)收，并將入庫(kù)數(shù)據(jù)登記。

（三）、貯存

冷藏試劑統(tǒng)一存放在HIV實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi)，冷箱保管及溫度控制由倉(cāng)管

負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。HIV試劑一般應(yīng)2?8℃避光保存，在有效期內(nèi)使用。

（四）、出庫(kù)管理

各室提出試劑申領(lǐng)，倉(cāng)管人填寫(xiě)出庫(kù)單據(jù)，認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫(kù)。

（五）、其它

1、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求存放，以保證有效期內(nèi)能有效地使用，杜絕

浪費(fèi)現(xiàn)象。

2、倉(cāng)管人應(yīng)對(duì)試劑庫(kù)存定期檢查，不使用過(guò)期變質(zhì)的試劑。

3、易燃，易爆試劑應(yīng)分開(kāi)存放遠(yuǎn)離火源和電源。

4、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存，放保險(xiǎn)箱內(nèi)，

使用時(shí)應(yīng)有兩人在場(chǎng)，并做好登記。

五、環(huán)境消毒隔離制度

1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)，清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有氣

溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線燈，排氣扇等操作

區(qū)的工作臺(tái)及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染時(shí)隨時(shí)消毒，每周大掃除一次。

2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺(tái)一次，采血結(jié)束用消毒液擦拭操作

臺(tái)、桌子和地面一次，紫外線每日照射消毒二次，每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次，紫外

線強(qiáng)度定期測(cè)定。

3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集，送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取，不得外溢污染。

4、靜脈及末稍采血，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施，靜脈抽血做到一人一針一

筒一巾一帶一消毒，所用止血帶及紙墊每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜絕

交叉污染。

5、一次性醫(yī)用器具包括采血針，注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管，

應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記，注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對(duì)一調(diào)換，統(tǒng)一處理，其

余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。

6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，操作前必須洗手

必須戴好帽子與口罩，操作臺(tái)和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手，必要時(shí)用

消毒液浸泡雙手，酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。

7、溢出試管外的血液，應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈，注意防止玻璃碎片刺

傷手，并注意試管有無(wú)破裂。

8、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí)，用流水沖洗，擠出血水，應(yīng)立即用碘酒消毒局

部。

9、實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本，離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程，防

止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。

10、已檢查標(biāo)本與容器分別浸泡于次氯酸鈉(2000mg/L)中兩小時(shí)后，標(biāo)本傾

棄，一次性容器送焚燒，重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用，均要有記錄。

有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無(wú)害化處理，防止污染環(huán)境。

11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，外來(lái)人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)

入。

六、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施

1、實(shí)驗(yàn)臺(tái)消毒措施必須符合艾滋病實(shí)驗(yàn)室的通用生物安全要求。由專人按

特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。

2、臺(tái)面的清潔消毒，保持清潔、濕式打掃。每天開(kāi)始工作前用濕布抹擦1

次，地面用濕拖把擦1次，禁用干抹干掃。抹布和拖把等清潔用具實(shí)驗(yàn)室專用，

不得混用，用后洗凈晾干，下班前用含氯消毒劑(次氯酸鈉，含有效氯2000mg/L)、

0.2-0.5%過(guò)氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高強(qiáng)度紫外線消毒器近距

離照射消毒。

3、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣進(jìn)行消毒與滅菌，小心存放、拿取和使

用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量控制和參考物質(zhì)，若被上述物品明顯污染，如

具傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)物外溢，濺潑或器皿打破，灑落于臺(tái)面，應(yīng)立即用消毒液

消毒，用5000mg/L有效氯消毒劑、過(guò)氧乙酸或乙醇灑于污染的臺(tái)面，并使消毒

液浸過(guò)污染表面，保持30?60min后再擦，拖把用后浸于上述消毒液內(nèi)lh以上。

4、各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理，所

有廢棄物應(yīng)視為HIV污染物品，按照《傳染病防治法》處理。

七、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒

1、廢棄物處置

廢棄物處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒

技術(shù)規(guī)范（2002年版）》。

從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來(lái)的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物

品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，

并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。

2、HIV常用的物理消毒方法

壓力蒸汽消毒，121C,保持15?20min;

干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140°C,保持2?3h。

3、HIV常用的化學(xué)消毒方法

HIV最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000-

5000mg/L）.75%乙醇和2%戊二醛，保持10?30min。

4、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。

5、生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面：75%乙醇。

6、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。

7、污染的臺(tái)面和器具：2000mg/L次氯酸鈉，也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。

器械可用2%戊二醛浸泡消毒。

八、消毒液的配制及使用措施

KHIV實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯

2000-5000mg/L）＞75%乙醇和2%戊二醛,保持10?30min。

2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行1：20?1：50稀釋

（2000-5000mg/L）或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1：10~1：25（2000-5000mg/L）稀釋

后，用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒。

3、乙醇，俗稱“酒精”，能夠殺滅多種細(xì)菌，對(duì)HIV病毒有一定的殺滅作用，

70?75%的效果最好。因此，使用前新鮮配置足量70?75%的乙醇，用于生物安全

柜、工作臺(tái)面和儀器表面的消毒，可以達(dá)到最佳的消毒效果。

4、過(guò)氧乙酸也是目前使用比較廣泛的一種高效消毒劑，新鮮配置1?3%的過(guò)

氧乙酸熏蒸，用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書(shū)本等物品的

消毒。0.04%的過(guò)氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡1?20分鐘，再用肥皂洗手。

5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，醫(yī)療器械等。

6、HIV實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置，本著多用多配，少用少配，現(xiàn)用現(xiàn)配

的原則，保證消毒劑使用時(shí)的濃度，保證消毒效果。

九、消防安全制度

1、根據(jù)“誰(shuí)主管、誰(shuí)負(fù)責(zé)”的原則，實(shí)行科室負(fù)責(zé)制。

2、主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對(duì)全體職工經(jīng)常進(jìn)行消防安全教育，提高思想認(rèn)識(shí)，

掌握消防知識(shí)和消防器材的使用。

3、嚴(yán)格執(zhí)行《安全防火管理制度》各種火種與易燃易爆物品，必須嚴(yán)格分

區(qū)，保持一定的安全距離。實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度，通道不得亂堆放易燃爆物

品和雜物。

4、嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙。

5、電器的安裝與拆除，必須由電工進(jìn)行，嚴(yán)禁亂接電源，亂后電線。

6、各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施，使用時(shí)必須有專人

負(fù)責(zé)，隨時(shí)檢查，消除隱患，嚴(yán)防事故發(fā)生。

7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備，應(yīng)定期進(jìn)行檢查，維修和更換，隨

時(shí)處于完好狀態(tài)，并不得隨便挪動(dòng)。

8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者，必須及時(shí)向科領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告?？浦魅渭皶r(shí)向

院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告，及時(shí)做好善事處理工作。

十、生物安全防護(hù)制度

1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過(guò)崗前安全與技術(shù)培訓(xùn)，取得合格證，具有獨(dú)立工

作能力的人員。

2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)（如對(duì)篩查陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測(cè)

或檢測(cè)高危標(biāo)本）要戴防護(hù)眼鏡，防止污染暴露的皮膚和衣物。

3、嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。操作過(guò)程中，不得用戴手套的手觸摸暴露的皮

膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。

4、操作時(shí)可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、

傳染性標(biāo)本的污染，有應(yīng)急處理的方法，有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉。

5、操作中手套破損，應(yīng)立即丟棄，洗手后戴上新手套繼續(xù)操作，不慎發(fā)生

瀉漏，應(yīng)立即按照《發(fā)生職業(yè)暴露后的處理措施》，進(jìn)行處理。

6、防止腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。

7、實(shí)驗(yàn)操作完畢后，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序，進(jìn)行善后處理。同時(shí)

記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔。

8、工作結(jié)束后，應(yīng)先洗戴手套的手，然后脫去手套丟棄，再脫去工作衣，

用肥皂和流動(dòng)水洗手后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。

9、注意安全，隨手關(guān)門，做好水，電，門的安全保衛(wèi)工作，防火防盜防水。

十一、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施

HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測(cè)工作過(guò)程中意外

被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被

含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被艾滋

病病毒感染的情況。

（一）、防護(hù)措施：

1.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴手

套，操作完畢，脫去手套后立即洗手，必要時(shí)進(jìn)行手消毒。

2.在診療、護(hù)理操作過(guò)程中，有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面

部時(shí)，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血

液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時(shí)，還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透

性能的隔離衣或者圍裙。

3.醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療

和護(hù)理操作時(shí)必須戴雙層手套。

4.醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療，護(hù)理操作過(guò)程中，要保證充足的光線，并

特別注意防止被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷。

5.使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，也可使用具有安全

性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。

6.禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后

的針頭、刀片等銳器。

（二）、處理措施：

1.用肥皂液和流動(dòng)水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。

2.如有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用

肥皂液和流動(dòng)水進(jìn)行沖洗，禁止進(jìn)行傷口的局部擠壓。

3.受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如75%的酒精或者0.5%的碘伏

等進(jìn)行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應(yīng)當(dāng)反復(fù)用生理鹽水沖洗干凈。

4.在暴露后的0周、第四周、第八周、第十二周及六個(gè)月時(shí)抽血進(jìn)行檢測(cè)

艾滋病病毒抗體。

5.預(yù)防性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開(kāi)始，最好在四小時(shí)

內(nèi)實(shí)施，最遲不得超過(guò)二十四小時(shí)；即使超過(guò)24小時(shí)，也應(yīng)當(dāng)實(shí)施預(yù)防性用藥,

連續(xù)使用28天。

6.發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評(píng)估。

十二、篩查檢驗(yàn)程序

1、篩查試劑

必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試

劑。推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評(píng)估敏感性和特異性高的試劑。

2、篩查方法

（1）、常用的篩查方法是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（ELISA）

目前國(guó)內(nèi)外主要使用第三代（雙抗原夾心法）試劑，少數(shù)使用第二代試劑。

血源篩查仍以第三代ELISA為主，國(guó)際上有些國(guó)家和地區(qū)已將線性免疫酶測(cè)定（第

四代ELISA試劑）用于血源篩查。第四代ELISA試劑是最近發(fā)展起來(lái)的HIV抗原

抗體聯(lián)合測(cè)定試劑，可同時(shí)檢測(cè)P24抗原和抗HIV-1/2抗體。與第三代抗HIV-1/2

試劑相比，檢出時(shí)間提前了4?9d。其優(yōu)點(diǎn)在于能同時(shí)檢測(cè)抗原抗體，降低血源

篩查的殘余危險(xiǎn)度。

（2）、快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)

隨著對(duì)HIV感染者和AIDS病人抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的進(jìn)展，及對(duì)無(wú)癥狀HIV感

染者提供自愿咨詢檢測(cè)（VCT）的迫切需求，簡(jiǎn)便、快速的HIV檢測(cè)方法被廣泛

應(yīng)用。常用的主要有以下幾種：

①、明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)：PA是HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡(jiǎn)便方法，是

將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用，混勻后保溫(一般為室溫)。

當(dāng)待檢樣品含有HIV抗體時(shí)，經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng),

根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種，HIVT和HIV-2抗原

共同致敏的PA試劑(AFDHIV-1/2PA),已經(jīng)我國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)

注冊(cè)批準(zhǔn);HIV-KHIV-2抗原分別致敏的PA試劑(SER0DIA-HIV-1/2)可初步區(qū)

分HIVT型和HIV-2型，目前我國(guó)尚未引進(jìn)。

②、斑點(diǎn)EIA或稱斑點(diǎn)ELISA(dot-EIA)：以硝酸纖維膜為載體，將HIV抗

原滴在膜上成點(diǎn)狀，即為固相抗原。加血清樣品作用，以后步驟同ELISAo陽(yáng)性

結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。反應(yīng)時(shí)間在10min以內(nèi)，使用抗原量少。

③、斑點(diǎn)免疫膠體金(或膠體硒)快速試驗(yàn)：與斑點(diǎn)EIA相似，也是以硝酸

纖維膜為載體。區(qū)別在于不用酶標(biāo)記抗體，而代之以紅色的膠體金(或膠體硒)

A蛋白，用滲濾法作為洗滌方法。試劑穩(wěn)定，可室溫長(zhǎng)期保存。試驗(yàn)時(shí)不需任何

設(shè)備，迅速、簡(jiǎn)便、特異性較好，敏感性約相當(dāng)于中度敏感的ELISA,適用于應(yīng)

急檢測(cè)、門診急診個(gè)體檢測(cè)。目前已有在國(guó)內(nèi)被SFDA批準(zhǔn)注冊(cè)的國(guó)外進(jìn)口試劑

和國(guó)內(nèi)產(chǎn)品。一般可在10?30min內(nèi)判讀結(jié)果。

④、艾滋病唾液檢測(cè)卡：在硝酸纖維膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋

白抗原，可同時(shí)檢測(cè)含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗體，原理為酶免疫間接法。主

要檢測(cè)唾液中的HIVIgA與IgG抗體，敏感性特異性與ELISA相近，可避免靜脈

穿刺。但樣品預(yù)處理時(shí)間長(zhǎng)且售價(jià)較高。以唾液為樣品測(cè)定HIV抗體的ELISA、

免疫印跡法(WB)試劑已經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)。

⑤、其它快速篩查試驗(yàn)方法：家庭HIV檢測(cè)(HomeAccessSystem)等。

3、尿液HIV抗體檢測(cè)

1996年美國(guó)FDA首次批準(zhǔn)HIV-1尿液ELISA試劑，我國(guó)也正在研制尿液HIV

抗體檢測(cè)試劑。主要適用于靜脈注射毒品(IDUs)人群和其它高危人群的大面積

流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)。篩查陽(yáng)性者仍需采血做確認(rèn)試驗(yàn)才能確定。

4、篩查試驗(yàn)

根據(jù)檢測(cè)目的選用符合要求的篩查試劑對(duì)樣品進(jìn)行初篩和重復(fù)檢測(cè)(復(fù)檢)。

5、初篩試驗(yàn)：以第三代ELISA(雙抗原夾心法)為例。

(1)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：試驗(yàn)開(kāi)始前將試劑和樣品放置在室溫(18~23℃),按實(shí)驗(yàn)室

SOP做好試劑準(zhǔn)備。

磷酸鹽緩沖液：若液體內(nèi)有結(jié)晶，應(yīng)放置在37c直至溶解，用蒸儲(chǔ)水1：25

稀釋濃縮液，4°C保存2周。

TMB底物液：使用前配制，TMB液和過(guò)氧化服液等量混勻。

1M硫酸終止液：85ml蒸儲(chǔ)水中加入5ml濃硫酸。

備好試劑盒、待檢樣品和外部對(duì)照質(zhì)控血清后，按試劑盒說(shuō)明書(shū)以及質(zhì)控和

安全防護(hù)要求進(jìn)行篩查檢測(cè)。

（2）實(shí)驗(yàn)操作

①、裝好所需使用數(shù)目的孔條，每孔均加入100口1樣品稀釋液。設(shè)3個(gè)陰性

對(duì)照孔，1個(gè)HIV-1陽(yáng)性對(duì)照孔，若需要可再設(shè)1個(gè)HIV-2陽(yáng)性對(duì)照孔。

②、每孔加入50U1待檢樣品及對(duì)照（對(duì)照要后加），未用孔用樣品稀釋液

加滿以溶解結(jié)合物球，以免堵塞洗板機(jī)孔。可震搖15S,37土2c孵育60±5min。

③、置洗板機(jī)上洗滌6遍（用洗液將反應(yīng)孔完全加滿，靜置30?60S,共洗滌6

遍，洗完后孔上方及底部不應(yīng)殘存液體,禁止在濾紙上拍干）。

④、每孔加入100U1底物液，勿攪動(dòng)，室溫避光孵育30±2min。

⑤、每孔加入100口11M硫酸終止反應(yīng)，充分混勻。

⑥、在2h內(nèi)置于酶標(biāo)儀讀數(shù)，單波長(zhǎng)450nm,或雙波長(zhǎng)450/630nm測(cè)0D值。

（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

①、陰性對(duì)照（NC）,HIV-1陽(yáng)性對(duì)照（PCI）,HIV-2陽(yáng)性對(duì)照（PC2）0

NC必須V0.25方可用，排除NC20.25的值，計(jì)算NC平均值。

NC界限范圍：0.6倍NC均值VNCV1.4倍NC均值。

②、符合以下條件的實(shí)驗(yàn)成立：

兩個(gè)以上的NC可用。

PC1-NC均值20.4,PC2-NC均值20.4。

③、Cutoff值=陰性對(duì)照均值+0.100o

小于Cutoff為陰性,大于或等于Cutoff為陽(yáng)性。

（4）報(bào)告：對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可由實(shí)施檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室出具HIV抗體陰

性報(bào)告；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽(yáng)性報(bào)告。

6、復(fù)檢試驗(yàn)：

對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩

查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性；如均呈

陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，需送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)（見(jiàn)圖1）。

圖1HIV抗體篩查檢測(cè)流程

7、初篩試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告

對(duì)HIV抗體篩查試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)者可出具“HIV抗體陰性”報(bào)告（可用附

表1）;對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)

告（附表1）o

8、初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送

如需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)，需要填寫(xiě)“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表

2）,經(jīng)1名檢驗(yàn)人員和1名具有中級(jí)以上技術(shù)職稱的人員審核簽字。送當(dāng)?shù)匕?/p>

病篩查中心實(shí)驗(yàn)室，再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送確認(rèn)

實(shí)驗(yàn)室。

9、對(duì)篩查陰性和陽(yáng)性者，均需做好檢測(cè)后咨詢。

十三、檢測(cè)結(jié)果的判定方法

1、HIV測(cè)定（膠體金法）結(jié)果的判定方法

（1）、陽(yáng)性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽(yáng)性反應(yīng)。

（2）、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

(3)、無(wú)效：如無(wú)紅線(或只有反應(yīng)線)出現(xiàn)，表明實(shí)驗(yàn)無(wú)效，須重新檢測(cè)。

2、HIV測(cè)定(ELISA法)結(jié)果的判定方法

⑴、計(jì)算臨界值CO(cut-off)值。

(2)、臨界值=陰性對(duì)照A均值+0.12

(3)、正常情況下，陰性對(duì)照孔的0D值W0.10(若1孔陰性對(duì)照的0D值)

0.1應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陰性對(duì)照的0D值＞0.1,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)樣品

0D值〈臨界值者為HIV抗體陰性。

(4)、正常情況下，陽(yáng)性對(duì)照孔的0D值20.80(若1孔陽(yáng)性對(duì)照的0D值V

0.8應(yīng)舍棄，若有2孔或2孔以上陽(yáng)性對(duì)照的0D值＜0.8,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。樣品0D

值2臨界值者為HIV抗體陽(yáng)性。

3、HIV測(cè)定(蛋白印跡法)結(jié)果的判定方法

根據(jù)衛(wèi)生部1990(2)號(hào)文件的規(guī)定，蛋白印跡法的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：

⑴、陽(yáng)性：至少有一條env(gpl60,gpl20,gp41)帶和一條pol(p65,p51,

p32)帶或至少有一條env帶和一條gag(p55,p24,pl8)帶或至少有一條env帶和

一條gag帶，一條pol帶或至少2條env帶。

(2)、陰性:無(wú)病毒特異帶。

(3)、可疑：一條gag帶和一條pol帶或只有g(shù)ag帶或只有pol帶。

十四、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告規(guī)程

1、從事HIV檢測(cè)工作的技術(shù)人員必須接受過(guò)上崗前的培訓(xùn)和定期復(fù)訓(xùn)。

2、HIV檢測(cè)工作必須在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

3、初篩檢測(cè)試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、中國(guó)藥品生

物制品檢定所批批檢合格且在有效期內(nèi)的試劑。

4、按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》的要求建立健全質(zhì)量管理制度、實(shí)驗(yàn)

室安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、安全防護(hù)工作等。

5、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告前應(yīng)填寫(xiě)好原始實(shí)驗(yàn)記錄資料，包括試驗(yàn)日期，試驗(yàn)操作

記錄，檢測(cè)樣品及空白、陰、陽(yáng)對(duì)照結(jié)果，S/CO值、臨界值、試劑廠家、批號(hào)、

效期，檢測(cè)人、復(fù)核人簽名等。

6、將試驗(yàn)結(jié)果存檔保存，處理試驗(yàn)廢物，擦凈實(shí)驗(yàn)臺(tái)，做好實(shí)驗(yàn)室消毒衛(wèi)

生。

7、結(jié)果報(bào)告：對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具“HIV抗體篩查報(bào)告”(見(jiàn)附表

1）陰性報(bào)告；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽(yáng)性報(bào)告。

8、復(fù)檢試驗(yàn)：對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或

不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告“HIV抗

體篩查報(bào)告”（見(jiàn)附表1）陰性；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，則應(yīng)按照《全國(guó)

HIV檢測(cè)管理規(guī)范》的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。

十五、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

HIV抗體檢測(cè)的結(jié)果有三種，分別是陽(yáng)性、陰性和不確定，絕大多數(shù)情況

下都是陽(yáng)性或陰性，出現(xiàn)不確定結(jié)果的情況很少。

（一）、陽(yáng)性結(jié)果的解釋

1、表明一個(gè)人感染了HIV,具有傳播性當(dāng)一個(gè)人HIV抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,

表明這個(gè)人已經(jīng)感染了HIV,具有把HIV傳播給別人的可能。

2、不能判斷發(fā)病與否，不能判斷疾病的進(jìn)展。HIV抗體檢測(cè)結(jié)果只能說(shuō)明

一個(gè)人是否感染了HIV,陽(yáng)性結(jié)果并非就意味著一個(gè)人已經(jīng)得了艾滋病，也不

能說(shuō)明患者處于疾病發(fā)展的哪個(gè)階段。若要判斷疾病的進(jìn)展，則要做另外的實(shí)

驗(yàn)檢測(cè)CD4細(xì)胞記數(shù)和HIV病毒載量檢查。

3、對(duì)于剛出生的嬰兒，情況則不一樣剛出生的嬰兒，不能根據(jù)其HIV抗

體檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)而判斷該嬰兒感染了HIV。因?yàn)槌錾肽暌詢?nèi)的嬰兒，其抗

體主要是由該嬰兒從其母體獲得，不管他（她）感染HIV與否，只要其母親感染

了HIV,母體內(nèi)存在HIV抗體，嬰兒出生后HIV抗體檢測(cè)一般都是陽(yáng)性。如果要

判斷一個(gè)嬰兒是否感染HIV,則應(yīng)該等到一歲半（18個(gè)月）以后再做檢測(cè)，檢

測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí)才能說(shuō)明該嬰兒感染了HIVo

（二）、陰性結(jié)果的解釋

1、檢測(cè)者處于窗口期

HIV從感染到能夠檢測(cè)出來(lái)有一段時(shí)期，這段時(shí)期稱為窗口期，窗口期一

般是2周到2個(gè)月。拿到一個(gè)陰性結(jié)果，首先要確定窗口期是否已過(guò)，如果確

定最后-次危險(xiǎn)行為距抽血作檢測(cè)時(shí)已過(guò)窗口期，這時(shí)基本可以確定檢測(cè)者未

感染HIVo如果窗口期末過(guò)或者抽血化驗(yàn)之后又發(fā)生了危險(xiǎn)行為（如又共用針

具或未采取保護(hù)措施的性行為），同樣也不能確定抽血者沒(méi)有感染HIVo

2、檢測(cè)者未感染HIV

如果檢測(cè)結(jié)果陰性，最后-次危險(xiǎn)行為又過(guò)了窗口期，那可以判定檢測(cè)未

感染HIVo

（三）、不確定結(jié)果

結(jié)果不能確定是指住進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)的確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不是陰性,

又夠陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，界乎于陽(yáng)性與陰性之間的一種結(jié)果。出現(xiàn)不確定結(jié)果一般建議

過(guò)三個(gè)月后再?gòu)?fù)查，出現(xiàn)不確定結(jié)果一般有以下幾種原因：

1、感染處于窗口期，從HIV進(jìn)人體內(nèi)到檢測(cè)這段時(shí)間還不夠長(zhǎng)，因此血清

還沒(méi)有形成典型的抗體反應(yīng)。

2、艾滋病進(jìn)展到終末期，抗體水平下降。

3、有其它原因：如某些惡性疾病，懷孕，輸血或器官移植等情況，身體會(huì)

產(chǎn)生一些抗體，其反應(yīng)與HIV的某些蛋白抗體所引起的反應(yīng)相似。

十六、檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與保存

1、實(shí)驗(yàn)原始記錄表

應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)

照、外部對(duì)照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒廠家、

測(cè)定方法、批號(hào)、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。

2、標(biāo)本的登記

收到標(biāo)本后，及時(shí)登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、

年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗(yàn)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、備注（必

要時(shí)記錄通信地址）等。

3、HIV陽(yáng)性標(biāo)本的保存記錄

包括HIV陽(yáng)性標(biāo)本的類型、貯存量、貯存溫度、貯存起始時(shí)間以及標(biāo)本保管

人姓名。

4、文件存檔

實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀

器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存15年以上。并同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保

存各種文件和記錄。

十七、呈陽(yáng)性反應(yīng)標(biāo)本的處理程序

1、對(duì)HIV抗體初篩試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)的樣品可出具“HIV抗體陰性”報(bào)告

（可用附表1）；對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同

廠家的篩查試劑重復(fù)檢測(cè)。如兩種試劑復(fù)測(cè)均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告“HIV抗體篩

查報(bào)告”（見(jiàn)附表1）陰性；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，則應(yīng)按照《全國(guó)HIV

檢測(cè)管理規(guī)范》的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。對(duì)初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反

應(yīng)者不能出陽(yáng)性報(bào)告，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告（附表1）。

2、初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)，需要填寫(xiě)

“HIV抗體復(fù)測(cè)送檢單”（附表2）,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和1名專業(yè)檢驗(yàn)人員審核簽

字。送縣疾病控制中心艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室，或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送安陽(yáng)

市艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。

3、初篩試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，進(jìn)一步送檢、本室冰凍保存后不在需要的樣

品的處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技術(shù)規(guī)

范（2002年版）》。

4、從HIV實(shí)驗(yàn)室出來(lái)的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它

物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室,

并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。

5、所有廢棄物應(yīng)按照HIV污染物品處理。由專人按本實(shí)驗(yàn)室制定的程序和

方法進(jìn)行清潔和消毒。

6、嚴(yán)格HIV實(shí)驗(yàn)室的廢棄物的消毒處理制度，做好登記。

7、檢驗(yàn)科主任定期負(fù)責(zé)檢查，操作處理不當(dāng)?shù)陌凑湛剖矣嘘P(guān)規(guī)定處罰。

十八、檢測(cè)數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序

1、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)應(yīng)于每季度首月5日前填寫(xiě)“HIV抗體

檢測(cè)數(shù)季報(bào)表"（附表6）,向艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告上季度檢測(cè)情況。沒(méi)有

艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室的地區(qū)可直接向艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。

艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室和艾滋病檢測(cè)點(diǎn)

未設(shè)置每季首月5日前報(bào)告上季檢測(cè)情況

艾滋病

篩查中

艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室

心實(shí)驗(yàn)

室的地

區(qū)

圖2HIV抗體檢測(cè)情況季報(bào)流程

2、艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將本實(shí)驗(yàn)室和本轄區(qū)內(nèi)各

篩查實(shí)驗(yàn)室上季度報(bào)告的檢測(cè)情況（附表6）匯總，報(bào)告艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室。

3、艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)于每季度首月10日前將上季度檢測(cè)情況匯總后（附

表6）,報(bào)告當(dāng)?shù)匕滩〈_認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和同級(jí)衛(wèi)生行政部門。

4、艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)收集、整理和分析轄區(qū)內(nèi)HIV抗體檢測(cè)情

況，于每季首月15日前向省級(jí)衛(wèi)生行政部門和中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋

病預(yù)防控制中心（簡(jiǎn)稱中國(guó)疾控中心性艾中心）參比實(shí)驗(yàn)室報(bào)告。同時(shí)，按艾滋

病疫情報(bào)告的有關(guān)規(guī)定上報(bào)疫情。

5、在非送檢樣品中（如專項(xiàng)調(diào)查與研究等）發(fā)現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性者,

應(yīng)向所在地的省疾病預(yù)防控制中心報(bào)告，并填寫(xiě)“HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)報(bào)告單”（附

表3）,報(bào)中國(guó)疾控中心性艾中心參比實(shí)驗(yàn)室。

6、實(shí)驗(yàn)室上報(bào)檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)，應(yīng)隨時(shí)報(bào)同級(jí)監(jiān)測(cè)人員，以便及時(shí)隨訪調(diào)

查。

十九、感染追蹤處理方案

（-）＞追蹤人群

1、有明確受血或血液制品史，并排除性傳播、母嬰傳播、經(jīng)國(guó)家確證實(shí)驗(yàn)

室確認(rèn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性者；

2、無(wú)償獻(xiàn)血工作中發(fā)現(xiàn)的艾滋病病毒抗體陽(yáng)性獻(xiàn)血人員。

（二）、工作步驟

1、對(duì)供血或受血的追訪，須以健康跟蹤服務(wù)或科研的名義進(jìn)行，系統(tǒng)體檢

并采血預(yù)備有關(guān)的檢驗(yàn)。

2、對(duì)發(fā)現(xiàn)的受血艾滋病病毒感染者制定詳細(xì)的個(gè)人追蹤方案，確定追蹤人

員，應(yīng)有一名近期參與治療的醫(yī)生參加。

3、對(duì)供血者追蹤，由衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)會(huì)同采供血機(jī)構(gòu)的專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行。

（三）、善后處理：

對(duì)受血的艾滋病病毒感染者由縣衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)制定專人建立健康檔案，實(shí)施

預(yù)防監(jiān)護(hù)、醫(yī)療照顧和管理。并定期進(jìn)行隨訪和醫(yī)療保健咨詢服務(wù)。特別必要時(shí)

應(yīng)告知受血感染者有關(guān)真實(shí)情況。

（四）、對(duì)HIV抗體陰性者，如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史、

獻(xiàn)血漿史，或有急性流感癥狀等情況，為排除窗口期的可能，建議每3個(gè)月復(fù)查

一次，連續(xù)2次。

二十、保密程序制度

1、HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的所有工作人員要具有高度的保密意識(shí)。不得對(duì)無(wú)關(guān)人

員透漏任何實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的信息。

2、HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存與HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的所有

資料（包括送檢單、各種實(shí)驗(yàn)記錄、感染者檔案、報(bào)告單的發(fā)放），不得擅自修

改和銷毀。未經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門許可，不得向無(wú)關(guān)人員或單位提供任何情況。

嚴(yán)格遵守保密制度，杜絕泄密事件的發(fā)生。

2、我院HIV實(shí)驗(yàn)室屬于篩查實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)的結(jié)果也不是最終結(jié)果，檢測(cè)到

陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)及時(shí)啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，根據(jù)WHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)送到上級(jí)實(shí)驗(yàn)室作

進(jìn)一步確認(rèn)。此時(shí)，不能出具HIV抗體陽(yáng)性的結(jié)果報(bào)告，更不能告知受檢者本人。

3、確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽(yáng)性結(jié)果，以機(jī)密級(jí)向送檢單位出具陽(yáng)性報(bào)告；送檢單

位接到報(bào)告后，由專人負(fù)責(zé)接收，并應(yīng)及時(shí)會(huì)同醫(yī)院感染科上報(bào)縣衛(wèi)生防疫站和

衛(wèi)生局。在對(duì)陽(yáng)性者告知檢測(cè)結(jié)果時(shí)要先做好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢。

4、經(jīng)確認(rèn)的陽(yáng)性標(biāo)本，包括在實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級(jí)HIV抗體確認(rèn)

中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時(shí)間至少5

年。

5、當(dāng)發(fā)生職業(yè)暴露事故后，無(wú)論職業(yè)暴露事故級(jí)別的大小，對(duì)涉及的職業(yè)

暴露者，均應(yīng)注意做好保密工作。任何一個(gè)得到信息的人都要做好保密工作。

保密守則：1、不該說(shuō)的機(jī)密絕對(duì)不說(shuō)；

2、不該問(wèn)的機(jī)密絕對(duì)不問(wèn)；

3、不該看的機(jī)密絕對(duì)不看；

4、不該記錄的機(jī)密絕對(duì)不記錄；

5、不在非保密本上記錄機(jī)密；

6、不在私人通信中涉及機(jī)密；

7、不在公共場(chǎng)所和家屬、子女、親友面前談?wù)摍C(jī)密；

8、不在不利于保密的地方存放機(jī)密文件資料；

9、不在普通電話、明碼電話、普通郵件傳達(dá)機(jī)密事項(xiàng)；

10、不攜帶機(jī)密材料游覽、參觀、探親、訪友和出入公共場(chǎng)所。

二十一、質(zhì)量管理制度

1、根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)的質(zhì)量控制，繪制HIV實(shí)

驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制圖，包括20次0D值、S、靶值、CV%值。對(duì)室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有

記錄，有每月的S、靶值、CV/值。對(duì)失控情況有糾正方法，有預(yù)防性措施。

2、積極參加省臨檢中心組織的室間質(zhì)控活動(dòng)，對(duì)每次質(zhì)控評(píng)價(jià)應(yīng)有記錄。

3、計(jì)量?jī)x器應(yīng)定期校正，每年一次。

4、精密分析儀器由專人負(fù)責(zé)，有使用記錄和維修記錄。

5、商品化的試劑盒的申購(gòu)由專業(yè)組長(zhǎng)負(fù)責(zé)申報(bào)，每月一次報(bào)科主任審批，

不得使用過(guò)期，無(wú)批準(zhǔn)文號(hào)的劣質(zhì)試劑，進(jìn)貨統(tǒng)一由科室管理，自配試劑須嚴(yán)格

校正后方可使用。

6、建立完整的HIV篩查實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，并應(yīng)嚴(yán)格按程序執(zhí)行。

7、當(dāng)日發(fā)出的全部檢驗(yàn)報(bào)告單須經(jīng)當(dāng)日科室總值班人員嚴(yán)格審核后方可發(fā)

出。

8、科室在完成嚴(yán)格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時(shí)，應(yīng)逐步建立全面質(zhì)

量控制體系，對(duì)標(biāo)本的采集，運(yùn)送，保存等納入嚴(yán)格的管理之中。

二十二、室內(nèi)質(zhì)控失控分析管理制度

室內(nèi)質(zhì)控出現(xiàn)失控時(shí)，應(yīng)填寫(xiě)失控報(bào)告單，并上交專業(yè)主管，由專業(yè)主管做

出是否發(fā)出與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告并分析及登記失控原因。

失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種因素的影響，這些因素包括操作上的失誤、試劑、校

準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、質(zhì)控限范圍、一次測(cè)

定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等等。失控信號(hào)一旦出現(xiàn)就意味著與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者

標(biāo)本報(bào)告可能作廢。

此時(shí)，首先要盡量查明導(dǎo)致的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例（例如5-10%）

的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測(cè)定結(jié)果是否可接受，對(duì)

失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛?。?duì)判斷為真失控的情況，應(yīng)該在重做質(zhì)控結(jié)果在控以后，

對(duì)相應(yīng)的所有失控患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定。如失控信號(hào)被判斷為假失控時(shí)，常規(guī)

測(cè)定報(bào)告可以按原先測(cè)定結(jié)果發(fā)出，不必重做。當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘?hào)時(shí)，可以采用如

下步驟去尋找原因：

一、立即重測(cè)定同一質(zhì)控品。此步是主要是用以查明人為誤差，每一步都認(rèn)

真仔細(xì)操作，以查明質(zhì)控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然

誤差，則重測(cè)的結(jié)果應(yīng)控。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則可以進(jìn)行下一步操

作。

二、新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目。如果質(zhì)控品結(jié)果正常，那么原來(lái)那瓶

質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)或者被污染。如果結(jié)果仍不在允

許范圍，則進(jìn)行下一步。

三、進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換,

比色杯是否需要清洗或更換，對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)

可更換試劑以查明原因。如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。

四、重新校準(zhǔn)，重測(cè)失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。

五、請(qǐng)實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員或?qū)＜业膸椭?/p>

如果前五步都未能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑的原因，只有和儀器

或試劑廠家聯(lián)系請(qǐng)求技術(shù)支援。

二十三、外部質(zhì)控血清的制備和保存

1、質(zhì)控血清的制備和保存（以ELISA試驗(yàn)檢測(cè)HIV抗體為例）

在每次實(shí)驗(yàn)中必須包含有內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清和外部對(duì)照質(zhì)控血清。

（1）、內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清。內(nèi)部對(duì)照

是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測(cè)必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒

中使用。

（2）、外部對(duì)照質(zhì)控血清是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及試劑盒批間

或孔間差異而由實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的一套對(duì)照血清，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性對(duì)照血

清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性對(duì)照，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的2?3倍為

宜。

2、外部對(duì)照質(zhì)控血清的制備

HIV抗體陽(yáng)性和陰性血清，56℃30min滅活，3000r/min,離心15min。弱陽(yáng)

性對(duì)照可以用HIV抗體陰性血清梯度稀釋HIV抗體強(qiáng)陽(yáng)性血清并標(biāo)定后得到。按

一年使用量配制（可加入不影響檢測(cè)結(jié)果的防腐劑）用0.2um濾膜過(guò)濾除菌。

3、外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存

（1）、按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類、標(biāo)記、封口、-20C凍存于非自動(dòng)除霜

冰箱中。

（2）、外部對(duì)照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放2~8℃,供一周內(nèi)

使用。

4、外部對(duì)照質(zhì)控血清的使用

每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。

同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。

5、外部對(duì)照質(zhì)控物的質(zhì)量要求

質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期的變異（CV<20%=,并且

質(zhì)控物的成分應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無(wú)菌，并不含有影響ELISA反應(yīng)的防腐

劑。

二十四、儀器的使用維護(hù)

（一）、設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

1、酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)

每天：核對(duì)濾光片波長(zhǎng)，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。

每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。

每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要

求。

每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有

的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部

件。

2、移液器

1年至少應(yīng)該標(biāo)定1次，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)。

標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配

套校準(zhǔn)盒等。校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加

樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說(shuō)明書(shū)規(guī)定的范圍內(nèi)。

（二）、儀器使用環(huán)境

良好的工作環(huán)境不僅能確保HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器的準(zhǔn)確

性和穩(wěn)定性，還能夠延長(zhǎng)其使用壽命。

1、儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和干擾電壓的位置。

2、儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。

3、為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽(yáng)光直射。

4、操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C-40°C之間，環(huán)境濕度在15即85%之間。

5、操作時(shí)電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。

6、操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽、煙塵。

7、保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面，以及足夠的操作空間。

（三）、儀器操作注意事項(xiàng)

1、使用移液器加液，移液槍頭不能混用

2、洗板要干凈，避免交叉污染。

3、嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。

4、請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成注意做好清潔工作。

5、不要在測(cè)量過(guò)程中關(guān)閉電源。

6、對(duì)于因試劑盒問(wèn)題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參

數(shù)，以達(dá)到最佳效果。

7、使用后蓋好防塵罩。出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸

酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器。

HIV篩查實(shí)驗(yàn)室儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

美國(guó)寶特酶標(biāo)分析儀操作維護(hù)規(guī)程

1.儀器原理和適用范圍

1.1采用垂直光路進(jìn)行光電比色，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)液和待檢物質(zhì)的吸光度，經(jīng)內(nèi)置

微機(jī)進(jìn)行分析計(jì)算，測(cè)出待檢物質(zhì)的含量。

1.2適用于ELISA檢測(cè)、微生物微孔板培養(yǎng)檢測(cè)、化學(xué)或生物化學(xué)微量分析

法檢測(cè)。

1.3儀器工作條件：適宜溫度10℃?30C；相對(duì)濕度＜70%：電源220X

(1±10%)V；50X(1±2%)Hz；100VA；接地良好；

1.4環(huán)境條件——防塵、防磁、防震、避強(qiáng)光、無(wú)腐蝕性氣體。

2.技術(shù)參數(shù)

2.1波長(zhǎng)：100nm-700nm；配置有405nm＞450nm、492nm、630nm；

2.2濾光片特性：正確度±3.0nm；半寬度＜12nm；峰值透射比》35%；

2.3測(cè)量范圍及吸光度誤差：測(cè)量范圍0.1?3.0A；吸光度誤差在0.1?1.0A

時(shí)為1.0%(±0.01A)、1.0?2.0A時(shí)為2.0%(0.02A)、2.0?3.0A時(shí)為10.0%

(0.10A)；

2.4線性誤差：線性誤差0.1?1.0A時(shí)為±1.25%、1.0~2.0A時(shí)為±2.0%、

2.0~3.0A時(shí)為±8.0%；

2.5重復(fù)性：W1.0%；

2.6穩(wěn)定性：＜±0.005A/10min；

2.7工作方式：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)或雙波長(zhǎng)；

2.8顯示：120X100英文觸摸屏幕；

2.9打?。和庵么蛴?；

2.10通訊：RS232串口；

2.11輸出：原始吸光度、定性判定結(jié)果、S/CO值、濃度值及質(zhì)控值；

3.操作步驟

3.1打開(kāi)電源后儀器進(jìn)入自檢程序，自檢正常時(shí)熒屏顯示主菜單，應(yīng)預(yù)熱20

分鐘以上后儀器方能穩(wěn)定，其后進(jìn)行實(shí)際檢測(cè)操作；

3.2根據(jù)儀器《使用說(shuō)明書(shū)》進(jìn)行編程，對(duì)檢測(cè)方式(臨界值檢測(cè)方式、濃

度檢測(cè)方式、吸光度檢測(cè)方式)的項(xiàng)目設(shè)置、孔位設(shè)置、波長(zhǎng)選擇、計(jì)算方式、

陰性對(duì)照值限定、定性方式選擇、振板方式、無(wú)效性判斷、孔位、報(bào)告方式、

標(biāo)準(zhǔn)值設(shè)置等進(jìn)行編程，請(qǐng)記住您設(shè)置的檢測(cè)項(xiàng)目及方式的程序編號(hào)，以便能

直接調(diào)用；

3.3根據(jù)預(yù)先設(shè)置的檢測(cè)項(xiàng)目及方式的程序編號(hào)，或按3.2要求臨時(shí)實(shí)用編

程，按照儀器《使用說(shuō)明書(shū)》進(jìn)行人機(jī)對(duì)話操作。

3.4按樣品測(cè)試鍵，選擇布板方式、振動(dòng)方式、測(cè)定項(xiàng)目，輸入樣品號(hào)，設(shè)

定空白、質(zhì)控、對(duì)照等，按開(kāi)始鍵開(kāi)始檢測(cè)，顯示數(shù)據(jù)后按打印鍵打印。

3.5若使用外接電腦的酶標(biāo)儀軟件接受、顯示、打印、儲(chǔ)存，按其說(shuō)明書(shū)操

作；

3.6檢測(cè)結(jié)束后，按“返回鍵”返回主菜單進(jìn)入關(guān)閉程序，等待儀器提示關(guān)

閉電源，拔下電源插頭，罩上防塵罩。

4.注意事項(xiàng)

4.1ELX-800酶標(biāo)分析儀安全分類