甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒與快繁

甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒概述主要內(nèi)容一二為什么要對甘薯進行脫毒三什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)甘薯脫毒技術(shù)是我國甘薯栽培史上的一次重大技術(shù)革命，是生物組織培養(yǎng)技術(shù)、病毒檢測技術(shù)和良種快繁技術(shù)的結(jié)晶。三脫毒甘薯的優(yōu)越性三四1.甘薯采用營養(yǎng)繁殖導(dǎo)致甘薯病毒蔓延，致使產(chǎn)量、質(zhì)量降低。全世界已經(jīng)分離鑒別出20余種甘薯病毒。病毒侵染可造成15％～90％的減產(chǎn)損失。平均減產(chǎn)率達29.4%，病毒病成為我國甘薯生產(chǎn)的最大障礙之一。苗床發(fā)病大田發(fā)病一、為什么要對甘薯進行脫毒2.甘薯病毒往往呈復(fù)合侵染，癥狀為：地上部長勢弱，葉皺卷、花葉、黃化、羽狀斑駁或環(huán)斑；結(jié)薯少，薯塊小，皮色淡，表皮粗糙、龜裂；種性退化，品質(zhì)、產(chǎn)量降低。3.甘薯病毒尚無藥可治，潛在威脅大，莖尖培養(yǎng)是目前防治甘薯病毒病的最有效方法。發(fā)病植株發(fā)病植株一、為什么要對甘薯進行脫毒1.甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)是在無菌條件下，將甘薯苗莖尖長約0.1-0.3mm，不帶或很少帶病毒的分生組織在合適的培養(yǎng)基上經(jīng)過離體培養(yǎng)誘導(dǎo)再生苗。2.莖尖苗經(jīng)病毒檢測確認不帶有某種或某些病毒后在防蟲網(wǎng)棚或空間隔離條件下進行擴繁，得到無病毒薯塊或薯苗進行種植。甘薯脫毒苗二、什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)3.脫毒試管苗培養(yǎng)程序培養(yǎng)初級脫毒試管苗、培養(yǎng)中級脫毒試管苗、培養(yǎng)高級脫毒試管苗。高級脫毒苗初級苗病毒檢測二、什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)莖尖組織培養(yǎng)甘薯脫毒苗二、什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)甘薯脫毒苗擴繁二、什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)4.脫毒種薯生產(chǎn)程序原原種繁育、原種繁育、良種繁育。原種原原種良種二、什么是甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)1.增產(chǎn)效果明顯。2.生長勢增強。3.品質(zhì)提高。4.減少多種病害發(fā)生。三、脫毒甘薯的優(yōu)越性甘薯莖尖苗培育操作流程內(nèi)容提要甘薯莖尖組織培養(yǎng)中，經(jīng)過嚴格選擇并檢測脫毒材料后，就可以進行脫毒培養(yǎng)了。本節(jié)主要介紹甘薯莖尖苗培育操作流程。（一）取材與消毒甘薯莖尖脫毒程序（二）分離與接種甘薯莖尖脫毒程序（二）分離與接種甘薯莖尖脫毒程序（三）病毒檢測甘薯莖尖脫毒程序（四）優(yōu)良株系評選甘薯莖尖脫毒程序（五）脫毒試管苗快繁甘薯莖尖脫毒程序試管快繁（五）脫毒試管苗快繁甘薯莖尖脫毒程序田間快繁甘薯莖尖脫毒技術(shù)目錄CONTENTS一二三外植體選取與消毒莖尖剝離與接種莖尖培養(yǎng)四脫毒苗鑒定1.外植體選取應(yīng)選用生產(chǎn)上主栽的、或具有某種特性優(yōu)良品種塊根上萌發(fā)嫩芽或剛出土幼苗的莖尖、或田間成株上的葉芽作為莖尖剝離材料。一、外植體選取與消毒2.外植體消毒將入選材料放入紗布袋，用自來水沖洗1h后，在無菌條件下，放入70％～75％酒精中浸5～30s，再用無菌水漂洗1～2次，再用0.1％升汞（每升加1滴吐溫）液消毒3～8min(或用3％次氯酸鈉液加2～4滴吐溫振蕩消毒15～20min)，取出用無菌水漂洗3～5次，瀝干備用。一、外植體選取與消毒1.莖尖剝離用滅菌濾紙吸干材料表面水分，在體視解剖鏡下用手術(shù)刀等工具輕、準、快速地剝?nèi)ビ兹~，切取帶1～2個葉原基(0.1～0.4mm大小)的生長點。二、莖尖剝離與接種2.接種將切下的生長點迅速接入裝有莖尖分化培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)瓶中，每管（瓶）放1個生長點。注明品種，莖尖號，接種期。二、莖尖剝離與接種1.試管苗培養(yǎng)日溫25℃，夜溫15℃，光照時數(shù)12～14h／d，光照強度2000～3000lx條件下培養(yǎng)。三、莖尖培養(yǎng)2.試管苗繼代培養(yǎng)三、莖尖培養(yǎng)四、脫毒苗鑒定1.用目測法淘汰弱苗禾顯癥苗。2.用血清法或分子生物學(xué)方法進行篩選。3.經(jīng)血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測呈陰性的再進行指示植物嫁接檢測。甘薯脫毒苗室內(nèi)試管快繁目錄CONTENTS一二室內(nèi)試管快繁特點室內(nèi)試管快繁方法三四室內(nèi)試管快繁流程室內(nèi)試管快繁操作步驟1.繁殖速度快，避免病毒再侵染。2.繼代繁殖成活率高。3.不受季節(jié)、氣候及空間限制，可以進行工廠化生產(chǎn)。一、室內(nèi)試管快繁特點1.液體振蕩培養(yǎng)。優(yōu)點：繁殖速度快，15~20天可得到20個左右的薯苗。缺點：需配備搖床，成本較高。2.固體培養(yǎng)。一般多用固體培養(yǎng)。二、脫毒苗室內(nèi)試管快繁方法開口消毒試管苗切段莖段接種封口消毒快繁基礎(chǔ)苗三、脫毒苗室內(nèi)試管快繁流程1.接種室的清潔和消毒。2.超凈工作臺的開機和消毒。超凈工作臺開機消毒四、脫毒苗室內(nèi)試管快繁操作步驟3.操作人員洗手及手消毒。4.使用的鑷子、解剖刀等用95％酒精浸泡，之后放在酒精燈上灼燒滅菌，再放在滅菌后的培養(yǎng)皿中冷卻后使用。培養(yǎng)瓶外壁的消毒。四、脫毒苗室內(nèi)試管快繁操作步驟5.將甘薯試管苗剪為單節(jié)莖段后接種到培養(yǎng)基中，在植入材料的前后，培養(yǎng)瓶的瓶口須在酒精燈火焰上燒烤滅菌。四、脫毒苗室內(nèi)試管快繁操作步驟6.封口、標記，將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)架上，在溫度20~25℃，光照強度2000~3000lx，光照時間12~14小時/天的條件下培養(yǎng)。四、脫毒苗室內(nèi)試管快繁操作步驟甘薯脫毒苗田間快繁目錄CONTENTS一二防蚜塑料大棚快繁防蚜網(wǎng)棚快繁三防蚜冬暖大棚越冬快繁1.覆蓋防蟲網(wǎng)大棚外覆上一層60目防蟲網(wǎng)，四周壓嚴壓實，不留縫隙，防止被風(fēng)掀起，防止害蟲進入。一、防蚜塑料大棚快繁2.將5~7片葉的脫毒試管苗打開瓶口，室溫下加光照煉苗5~7天。一、防蚜塑料大棚快繁3.定植清洗瓶苗：先用晾曬過的清水將瓶苗上的培養(yǎng)基洗掉，粗洗一遍，再用清水洗滌一遍。一、防蚜塑料大棚快繁一、防蚜塑料大棚快繁3.定植按5厘米Ⅹ5厘米株行距栽種在覆蓋防蟲網(wǎng)的塑料大棚內(nèi)。一、防蚜塑料大棚快繁4.管理要點定植后澆足水，加蓋小拱棚，提高溫度，以25℃為宜。生長期間要注意小水勤澆，通風(fēng)透氣，保證溫度既不能低于16℃，也不能高于30℃。待苗長至15~20厘米高時剪下蔓頭斷續(xù)栽種、快繁。二、防蚜網(wǎng)棚快繁1.煉苗。2.栽植：每667平方米栽植10000株。二、防蚜網(wǎng)棚快繁3.管理要